一种快速鉴别多种有机酸盐的薄层检测方法与流程

1.本发明属于化学分析领域，具体地说是一种快速鉴别7种有机酸盐的薄层检测方法。


背景技术：

2.草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠等有机酸盐常用作食品稳定剂、卷烟纸添加剂、工业洗涤剂助剂等，目前在控制和检测样品中的有机酸盐的方法有很多，主要有氧化还原滴定法、分光光度法、离子色谱法、高效液相色谱法等。氧化还原滴定法测定有机酸盐，对有机酸盐的总含量测定，无法准确区分出有机酸盐的种类，且测定误差大；分光光度法是以有机酸和一些特定物质反应能生成有色物质为机理测定有机酸含量，该方法易受干扰，前处理复杂，步骤繁冗；离子色谱法测定有机酸盐，对有机酸根离子进行分析测定，该分析方法过程复杂，分离效果差，高浓度的无机离子可能会干扰有机酸根的测定；高效液相色谱测定有机酸盐，对有机酸根离子进行分析测定，该分析方法淋洗液试剂多为有机溶剂，且试剂用量大、不环保，对操作者健康的有害。公开号为cn102721781b的中国专利用反相hplc梯度洗脱法测定乳酸菌发酵产物中有机酸的种类与含量，该分析方法为梯度淋洗，过程复杂，耗时较长。公开号为cn101566607a的中国专利利用高效液相色谱对有机酸根离子分析测定，该分析方法淋洗液试剂为甲醇、乙腈等有机溶剂，试剂用量大，耗时长。


技术实现要素：

3.本发明的目的就是要解决上述的不足，而提供一种快速鉴别7种有机酸盐的薄层检测方法，采用此种薄层检测方法显色斑点清晰，而且测试方法所需实验设备简单，测试过程快速、方便，成本低廉，对7种有机酸盐的对比明显，结果直观，为确保区分草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠提供了可靠的鉴别方法。
4.本发明所提供的技术解决方案是：一种快速鉴别多种有机酸盐的薄层检测方法，其特殊之处在于，包括以下步骤：1.1制备标准溶液、样品溶液和混合标准溶液1.1.1取适量的有机酸盐，加入蒸馏水溶解制成浓度为0.1～0.5g/l的标准溶液；1.1.2称取被检测样品，加入蒸馏水超声提取30min，取上清液制成的样品溶液；1.1.3分别取等量的不同有机酸盐，混合后加入蒸馏水溶解制成浓度为0.1～0.5g/l的混合标准溶液；1.2薄层点样将步骤1.1中制备好的标准溶液、样品溶液和混合标准溶液依次分别点于同一纤维素薄层板上同一高度的不同位置上形成点样原点；1.3制备展开剂1.3.1将水、有机醇、有机酸经混合后配制成展开剂，并将其置于展开缸中，密封展
开缸，预饱和15～20min；1.4展开将步骤1.3预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤1.2点样后的纤维素薄层板放入展开缸中，且展开缸中的展开剂不能没过点样原点，当展开剂的前沿上行至纤维素薄层板上边缘，距离点样原点6～15cm时，将纤维素薄层板取出；1.5显色与检视冷空气吹干步骤1.4展开好的纤维素薄层板上的试剂后，喷以质量浓度0.5%～1.5%的溴甲酚绿乙醇溶液，用冷空气吹干，在白光下检视纤维素薄层板上的显色斑点，以显色斑点在纤维素薄层板的比移值定性，以显色斑点的大小和颜色深浅进行半定量。
5.上述测定方法中，多种有机酸盐包括草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠中的一种或多种。
6.上述测定方法中，为了得到较好的展开图，所述标准溶液的浓度为0.3g/l。
7.上述测定方法中，所述混合对照品溶液浓度为 0.3g/l。所述的展开剂中水、有机醇、有机酸的体积比为15:8
‑
12:8
‑
12；所述的有机醇为甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇；所述的有机酸为甲酸、乙酸、丙酸中的任意一种。
8.作为优选方案，展开剂中水、有机醇、有机酸的体积比为15:10:10；所述的有机醇为正丁醇；所述的有机酸为甲酸。
9.上述测定方法中，所述样品溶液、标准溶液和混合标准溶液的点样位置距离纤维素薄层板下边缘的距离为1.0～1.5cm。
10.上述测定方法中，所述展开缸采用单槽展开缸，单槽展开缸的大小为10
×
20cm，且单槽展开缸的展开剂要预饱和15分钟。
11.上述测定方法中，当展开剂的前沿上行至纤维素薄层板上边缘，距离点样原点8～10cm时，将纤维素薄层板取出。
12.上述测定方法中，所述溴甲酚绿乙醇溶液的质量浓度为1%。
13.上述测定方法中，采用吹风机将纤维素薄层板上的试剂吹干。
14.本发明中样品溶液、标准溶液、混合标准溶液、展开剂的配制顺序可根据实际检测情况进行调整。
15.本发明的优点是：1，采用此种薄层检测方法简单、快速、灵敏度高、专属性强，对7种有机酸盐的对比明显，易于辨认和区分，为确保区分草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠提供了可靠的鉴别方法。
16.2，本发明选用蒸馏水直接对原料进行溶液的配制、样品前处理非常简单。
17.3，本发明采用展开剂：水：正丁醇：甲酸=15:10:10，斑点分离效果好，各样品特征斑点突出，且没有斑点拖尾与斑点扩散现象，结果对比明显，容易判定。
18.4，本发明提供的薄层色谱法测定有机酸盐的方法所需实验设备简单，简化了测定步骤，测定过程快速、方便，且成本低廉。
附图说明
19.图1为本发明实施例1中使用展开剂1展开得到的薄层色谱示意图。
20.图2为本发明实施例1中使用展开剂2展开得到的薄层色谱示意图。
21.图3为本发明实施例1中使用展开剂3展开得到的薄层色谱示意图。
22.图4为本发明实施例1中使用展开剂4展开得到的薄层色谱示意图。
23.图5为本发明实施例2中使用展开剂5展开得到的薄层色谱示意图。
24.图6为本发明实施例2中使用展开剂6展开得到的薄层色谱示意图。
25.图7为本发明实施例2中使用展开剂7展开得到的薄层色谱示意图。
26.图8为本发明实施例2中使用展开剂8展开得到的薄层色谱示意图。
27.图9为本发明实施例2中使用展开剂9展开得到的薄层色谱示意图。
28.图10为本发明实施例2中使用展开剂10展开得到的薄层色谱示意图。
29.图11为本发明实施例3中使用展开剂11展开得到的薄层色谱示意图。
30.图12为本发明实施例3中使用展开剂12展开得到的薄层色谱示意图。
31.图13为本发明实施例3中使用展开剂13展开得到的薄层色谱示意图。
32.图14为本发明实施例3中使用展开剂14展开得到的薄层色谱示意图。
33.图15为本发明实施例3中使用展开剂15展开得到的薄层色谱示意图。
34.图16为本发明实施例3中使用展开剂16展开得到的薄层色谱示意图。
35.图17为本发明实施例3中使用展开剂17展开得到的薄层色谱示意图。
36.图18为本发明实施例3中使用展开剂18展开得到的薄层色谱示意图。
37.图19为本发明实施例3中使用展开剂19展开得到的薄层色谱示意图。
38.图20中a为本发明实施例4中7种有机酸盐的薄层色谱示意图，b为本发明实施例5中食品稳定剂样品的薄层色谱定性示意图，c为本发明实施例6中除油清洗剂样品的薄层色谱定性示意图。
39.图21为本发明实施例5中食品稳定剂样品的薄层色谱半定量示意图。
40.图22为本发明实施例6中除油清洗剂样品的薄层色谱半定量示意图。
具体实施方式
41.以下结合附图和具体实施例对本发明的内容作进一步的详细描述：实施例1：薄层色谱法检测中展开剂的影响1、一种快速鉴别7种有机酸盐的薄层检测方法，包括以下步骤：1.1制备混合标准溶液分别取等量草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠混合，加入蒸馏水溶解制成浓度为1g/l的混合标准溶液；1.2薄层点样将步骤1.1中制备好的标准溶液取10ul在纤维素薄层板上点样，且点样原点距离纤维素薄层板下边缘的距离为1cm；1.3制备展开剂1.3.1展开剂1：水：正丁醇：甲酸=10:15:10，制备35ml的展开剂；1.3.2展开剂2：水：正丁醇：甲酸=17:10:8，制备35ml的展开剂；1.3.3展开剂3：水：正丁醇：甲酸=13:10:12，制备35ml的展开剂；1.3.4展开剂4：水：正丁醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；
1.3.5将展开剂1、展开剂2、展开剂3、展开剂4分别置于10
×
20cm规格的单槽展开缸中，依次编号为1号、2号、3号、4号，密封展开缸，预饱和15min；1.4展开将步骤1.3预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤1.2点样后的纤维素薄层板分别放入1号、2号、3号、4号展开缸中，放入的纤维素薄层板应斜靠在展开缸中，且展开缸中的展开剂不能没过点样原点，当展开剂的前沿上行至纤维素薄层板上边缘，距离点样原点10cm时，将纤维素薄层板取出；1.5显色与检视冷空气吹干步骤1.4展开好的纤维素薄层板上的试剂后，喷以质量浓度1%的溴甲酚绿乙醇溶液，用冷空气吹干，在白光下可见有机酸盐的显色斑点呈蓝色。如附图1、2、3、4中所示分别为7种有机酸盐混合标准样品在展开剂1、展开剂2、展开剂3、展开剂4的薄层色谱示意图。
42.1.6对比鉴别如附图1所示，为7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂1展开得到的薄层色谱图出现5个斑点，未能得到全部分离，得到的薄层色谱图较差；如附图2所示，为7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂2展开得到的薄层色谱图出现斑点拖尾现象，得到的薄层色谱图较差；如附图3所示，为7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂3展开得到的薄层色谱图出现斑点重叠分离不全，得到的薄层色谱图较差；如附图4所示，为7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂4展开得到的薄层色谱图斑点分离效果好，各样品特征斑点突出，且没有斑点拖尾与斑点扩散现象，结果对比明显，容易判定。
43.实施例2：薄层色谱法检测中展开剂的影响方法、步骤同实施例1，与实施例1的区别在于：展开剂5：水：仲丁醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂6：水：环己醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂7：水：仲丁醇：乙酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂8：水：环己醇：乙酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂9：水：仲丁醇：丙酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂10：水：环己醇：丙酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；附图5、6、7、8、9、10为7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂5、展开剂6、展开剂7、展开剂8、展开剂9、展开剂10展开得到的薄层色谱图，如附图5、6、7、8、9、10所示，7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂5、展开剂6、展开剂7、展开剂8、展开剂9、展开剂10展开得到的薄层色谱的各个斑点的分离效果好，不冲突、无重叠与拖尾等不良现象，结果对比清晰明显。
44.实施例3：薄层色谱法检测中展开剂的影响方法、步骤同实施例1，与实施例1的区别在于：展开剂11：水：甲醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂12：水：乙醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂13：水：丙醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂14：水：甲醇：丁酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；
展开剂15：水：乙醇：丁酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂16：水：丙醇：丁酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂17：水：甲醇：盐酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂18：水：乙醇：盐酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；展开剂19：水：丙醇：盐酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；附图11、12、13、14、15、16、17、18、19为7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂11、展开剂12、展开剂13、展开剂14、展开剂15、展开剂16、展开剂17、展开剂18、展开剂19展开得到的薄层色谱图，如附图11、12、13、14、15、16、17、18、19所示，7种有机酸盐的混合标准样品在展开剂11、展开剂12、展开剂13、展开剂14、展开剂15、展开剂16、展开剂17、展开剂18、展开剂19展开得到的薄层色谱的各个斑点的未能完全分离，斑点出现拖尾现象，斑点出现重叠、得到的薄层色谱图差，无法准确区分有机酸盐的结果判定。
45.实施例4：薄层色谱法检测中7种有机酸盐的比移值1、一种快速鉴别7种有机酸盐的薄层检测方法，包括以下步骤：1.1制备标准溶液和混合标准溶液分别取适量草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠和7种有机酸盐的混合样品，并分别加入蒸馏水溶解制成浓度为0.3g/l的标准溶液，依次编号为1号、2号、3号、4号、5号、6号、7号、8号。
46.1.2薄层点样将步骤1.1中制备好的标准溶液取10ul按编号依次点于同一纤维素薄层板同一高度的不同位置上形成8个点样原点，且点样原点距离纤维素薄层板下边缘的距离为1cm；1.3制备展开剂1.3.1展开剂：水：正丁醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；1.3.2将展开剂置于10
×
20cm规格的单槽展开缸中，密封展开缸，预饱和15min；1.4展开将步骤1.3预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤1.2点样后的纤维素薄层板放入展开缸中，放入的纤维素薄层板应斜靠在展开缸中，且展开缸中的展开剂不能没过点样原点，当展开剂的前沿上行至纤维素薄层板上边缘，距离点样原点10cm时，将纤维素薄层板取出；1.5显色与检视冷空气吹干步骤1.4展开好的纤维素薄层板上的试剂后，喷以质量浓度1%的溴甲酚绿乙醇溶液，用冷空气吹干，在白光下可见有机酸盐的显色斑点呈蓝色，并计算各有机酸盐的比移值。
47.1.6对比鉴别如附图20中a所示，为7种有机酸盐的薄层色谱示意图，1号、2号、3号、4号、5号、6号、7号、8号分别为草酸钠、酒石酸钠、柠檬酸钠、苹果酸钠、丙酮酸钠、琥珀酸钠、乳酸钠和7种有机酸盐的混合标准样品。经测定，该7种有机酸盐的比移值rf分别为：草酸钠rf=0.07、酒石酸钠rf=0.25、柠檬酸钠rf=0.39、苹果酸钠rf=0.46、丙酮酸钠rf=0.65、琥珀酸钠rf=0.74、乳酸钠rf=0.80实施例5：玻璃清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
1281）中7种有机酸盐的测定
1、一种快速鉴别7种有机酸盐的薄层检测方法，包括以下步骤：1.1制备样品溶液称取玻璃清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
1281）样品1.00g，加入10ml体积的蒸馏水超声提取30min；取上清液浓缩至干，加入蒸馏水25ml，制成样品溶液。
48.1.2薄层点样将步骤1.1中制备好的样品溶液取10ul在纤维素薄层板上点样，且点样原点距离纤维素薄层板下边缘的距离为1cm；1.3制备展开剂1.3.1展开剂：水：正丁醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；1.3.2将展开剂置于10
×
20cm规格的单槽展开缸中，密封展开缸，预饱和15min；1.4展开将步骤1.3预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤1.2点样后的纤维素薄层板放入展开缸中，放入的纤维素薄层板应斜靠在展开缸中，且展开缸中的展开剂不能没过点样原点，当展开剂的前沿上行至纤维素薄层板上边缘，距离点样原点10cm时，将纤维素薄层板取出；1.5显色与检视冷空气吹干步骤1.4展开好的纤维素薄层板上的试剂后，喷以质量浓度1%的溴甲酚绿乙醇溶液，用冷空气吹干，在白光下可见有机酸盐的显色斑点呈蓝色；1.6对比鉴定如附图20中b所示，和有机酸盐对照品的显色斑点比较，以显色斑点在薄层色谱板上的比移值定性，经比对，玻璃清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
1281）样品中含有酒石酸盐，再分别取浓度为0.1g/l，0.2g/l，0.3g/l，0.4g/l，0.5g/l的酒石酸钠标准溶液和样品溶液同时点样，比较样品中酒石酸盐和酒石酸钠标准品斑点，根据斑点大小和颜色深浅进行半定量，样品液中酒石酸盐的含量为0.2g/l，样品中酒石酸盐含量为5g/kg如附图20中b所示，为玻璃清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
1281）样品的薄层示意图（定性），附图21为玻璃清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
1281）的薄层示意图（半定量）。
49.实施例6：除油清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
208）样品中7种有机酸盐的测定1、一种快速鉴别7种有机酸盐的薄层检测方法，包括以下步骤：1.1制备样品溶液称取除油清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
208）样品1.00g，加入10ml体积的蒸馏水超声提取30min；取上清液浓缩至干，加入蒸馏水10ml，制成样品溶液。
50.1.2薄层点样将步骤1.1中制备好的样品溶液取10ul在纤维素薄层板上点样，且点样原点距离纤维素薄层板下边缘的距离为1cm；1.3制备展开剂1.3.1展开剂：水：正丁醇：甲酸=15:10:10，制备35ml的展开剂；
1.3.2将展开剂置于10
×
20cm规格的单槽展开缸中，密封展开缸，预饱和15min；1.4展开将步骤1.3预饱和后的展开缸打开，迅速将步骤1.2点样后的纤维素薄层板放入展开缸中，放入的纤维素薄层板应斜靠在展开缸中，且展开缸中的展开剂不能没过点样原点，当展开剂的前沿上行至纤维素薄层板上边缘，距离点样原点10cm时，将纤维素薄层板取出；1.5显色与检视冷空气吹干步骤1.4展开好的纤维素薄层板上的试剂后，喷以质量浓度1%的溴甲酚绿乙醇溶液，用冷空气吹干，在白光下可见有机酸盐的显色斑点呈蓝色；1.6对比鉴定如附图20中c所示，和有机酸盐对照品的显色斑点比较，以显色斑点在薄层色谱板上的比移值定性，经比对，除油清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
208）样品中含有柠檬酸盐，再分别取浓度为0.1gl，0.2g/l，0.3g/l，0.4g/l，0.5g/l的柠檬酸钠标准溶液和样品溶液同时点样，比较样品中柠檬酸盐和柠檬酸钠标准品斑点，根据斑点大小和颜色深浅进行半定量，样品液中酒石酸盐的含量为0.3g/l，样品中酒石酸盐含量为3g/kg。
51.如附图20中b所示，为除油清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
208）样品的薄层示意图（定性），附图22为除油清洗剂（厂家：深圳市科玺化工有限公司；型号：kesh
‑
208）的薄层示意图（半定量）。
52.本发明并不受上述实施方式的限定，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的修饰、替代、改变、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。