一种迷你启动子pAPP及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种在神经元细胞特异性高效表达的迷你启动子papp，其特征在于，所述启动子papp长度为120bp，核苷酸序列如seq id no：1所示。2.一种含有权利要求1所述启动子的重组腺相关病毒载体。3.根据权利要求2所述重组腺相关病毒载体，其特征在于，所述重组腺相关病毒载体采用paav
‑
hsyn
‑
x作为骨架载体，将该载体中hsyn替换为papp启动子，得到重组腺相关病毒载体paav
‑
papp
‑
x，x是需要表达的蛋白序列。4.根据权利要求2所述重组腺相关病毒载体，其特征在于，所述重组腺相关病毒载体为paav
‑
papp
‑
荧光蛋白、paav
‑
papp
‑
功能性蛋白或paav
‑
papp
‑
治疗性蛋白中的一种；所述荧光蛋白为eyfp或tdtomato；所述功能性蛋白为光遗传相关蛋白或化学遗传相关蛋白。5.根据权利要求2所述的重组腺相关病毒载体paav
‑
papp
‑
x的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将启动子papp基因片段两端分别加上限制性内切酶mlui
‑
hf和bamhi
‑
hf识别位点后人工合成；(2)采用限制性内切酶mlui
‑
hf和bamhi
‑
hf处理paav
‑
hsyn
‑
x载体，同时用限制性内切酶mlui
‑
hf和bamhi
‑
hf处理papp片段；(3)对两种酶切产物进行回收、纯化、连接，得到重组腺相关病毒载体paav
‑
papp
‑
x。6.一种含有权利要求1所述启动子或权利要求2～5任意一项所述重组腺相关病毒载体的重组腺相关病毒。7.一种含有权利要求1所述启动子或权利要求2～5任意一项所述重组腺相关病毒载体或权利6所述的重组腺相关病毒的试剂盒。8.根据权利要求1所述启动子或权利要求2～5任意一项所述重组腺相关病毒载体或权利要求6所述的重组腺相关病毒或权利要求7所述的重组腺相关病毒的试剂盒在制备操控神经细胞、基因编辑和/或基因治疗试剂中的应用。

技术总结
本发明属于神经工程技术领域，具体涉及一种在神经元细胞特异性高效表达的迷你启动子pAPP。本发明提供了一种迷你启动子pAPP及其应用，所述启动子pAPP的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。本发明另一方面提供了应用该启动子pAPP在重组腺相关病毒载体、重组腺相关病毒、重组腺相关病毒的试剂盒、基因治疗载体中，以及在制备操控神经细胞、基因编辑和/或基因治疗试剂中的应用。本发明提供的迷你启动子pAPP使外源基因得以在全脑范围内的神经元中高效表达，在基因编辑和基因治疗领域具有广泛的应用前景。用前景。用前景。


技术研发人员：路中华 陈晔菲 李田
受保护的技术使用者：深圳市恩辑生物科技有限公司
技术研发日：2021.08.20
技术公布日：2021/11/2