治疗糖尿病足的中药外用乳膏及其制备方法与应用与流程

1.本发明属于中药组合物技术领域，具体涉及一种用于治疗糖尿病足的中药外用乳膏及其制备方法与应用。


背景技术：

2.糖尿病足是糖尿病综合并发症，是糖尿病所致的末梢神经感觉障碍及植物神经损害，下肢血管病变——动脉硬化引起周围小动脉闭塞症，或皮肤微血管病变以及细菌感染所导致的足部疼痛、足部溃疡及足坏疽等病变。糖尿病足最终治疗的方案多为截肢，截肢不仅治疗周期长、费用高，造成了患者的残疾，还有可能造成二次感染；糖尿病足患者自身修复、抗菌功能低下，感染及伤口很难修复、自愈，这些问题使得糖尿病足的治疗成为了亟待解决的医学难题。


技术实现要素：

3.为了克服上述现有技术的缺陷，本发明所要解决的技术问题是：提供一种能提高患者抗菌和修复能力的治疗糖尿病足的中药外用乳膏及其制备方法与应用。
4.为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案为：治疗糖尿病足的中药外用乳膏，按重量份计，包括七姊妹叶片汁液20
‑
40份、蒲黄10
‑
20份、杠板归20
‑
30份、海金沙10
‑
20份、刘寄奴10
‑
20份、紫草10
‑
20份、矮脚杨梅皮10
‑
20份、茶籽油10
‑
20份、乳化剂2
‑
5份和防腐剂1
‑
3份。
5.一种上述的治疗糖尿病足的中药外用乳膏在制备治疗糖尿病足的药物中的应用。
6.一种上述的治疗糖尿病足的中药外用乳膏在制备治疗糖尿病足的外用药中的应用。
7.本发明采用的另一种技术方案为：一种治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法，包括以下步骤：
8.将蒲黄、杠板归、海金沙、刘寄奴、紫草和矮脚杨梅皮混合加水，常压下煎制90
‑
120min，过滤取液体，然后加入七姊妹叶片汁液、茶籽油、乳化剂和防腐剂；
9.其中，按重量份计，七姊妹叶片汁液20
‑
40份、蒲黄10
‑
20份、杠板归20
‑
30份、海金沙10
‑
20份、刘寄奴10
‑
20份、紫草10
‑
20份、矮脚杨梅皮10
‑
20份、茶籽油10
‑
20份、乳化剂2
‑
5份、防腐剂1
‑
3份。
10.本发明的有益效果在于：本发明提供的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，施药后能够有效起到抗菌，控制感染的效果，避免创口进一步恶化，同时能有效提高施药处组织自身的修复能力，缓解患者的痛苦，达到治疗的效果。本发明提供的制备方法，制备方法简单，适和产业化大规模生产，同时采用低温乳化技术制备，能有效保留组分中的活性物质，且其原材料易得成本低，有助于减轻患者的经济负担，减少政府医疗的支出。
具体实施方式
11.为详细说明本发明的技术内容、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。
12.本发明提供一种治疗糖尿病足的中药外用乳膏，按重量份计，包括七姊妹叶片汁液20
‑
40份、蒲黄10
‑
20份、杠板归20
‑
30份、海金沙10
‑
20份、刘寄奴10
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20份、紫草10
‑
20份、矮脚杨梅皮10
‑
20份、茶籽油10
‑
20份、乳化剂2
‑
5份和防腐剂1
‑
3份。
13.一种上述的治疗糖尿病足的中药外用乳膏在制备治疗糖尿病足的药物中的应用。
14.一种上述的治疗糖尿病足的中药外用乳膏在制备治疗糖尿病足的外用药中的应用。
15.从上述描述可知，本发明的有益效果在于：本发明提供的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，七姊妹叶片汁液富含表皮生长因子，配合具有活血功效的蒲黄和刘寄奴能够有效提升施用组织的修复能力，加快伤口愈合；添加具有清热解毒功效的杠板归配合海金沙、矮脚杨梅皮和紫草能有效起到抗感染的作用。本发明提供的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，能够有效抗菌，控制感染，避免创口进一步恶化，同时能有效提高施药处组织自身的修复能力，达到治疗的效果。
16.进一步的，上述的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，按重量份计，包括七姊妹叶片汁液20
‑
40份、蒲黄10
‑
20份、杠板归20
‑
30份、海金沙10
‑
20份、刘寄奴10
‑
20份、紫草10
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20份、矮脚杨梅皮10
‑
20份、茶籽油10
‑
20份、乳化剂2
‑
5份和防腐剂1
‑
3份。
17.进一步的，所述乳化剂为聚丙烯酰胺、异链烷基脂肪醇、脂肪醇聚氧乙烯醚中的一种或多种。
18.进一步的，所述防腐剂为对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸甲酯、杰马、脱氢乙酸钠、二氧化钛中的一种或多种。
19.本发明提供一种治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法，包括以下步骤：
20.将蒲黄、杠板归、海金沙、刘寄奴、紫草和矮脚杨梅皮混合加水，常压下煎制90
‑
120min，过滤取液体，然后加入七姊妹叶片汁液、茶籽油、乳化剂和防腐剂；
21.其中，按重量份计，七姊妹叶片汁液20
‑
40份、蒲黄10
‑
20份、杠板归20
‑
30份、海金沙10
‑
20份、刘寄奴10
‑
20份、紫草10
‑
20份、矮脚杨梅皮10
‑
20份、茶籽油10
‑
20份、乳化剂2
‑
5份、防腐剂1
‑
3份。
22.从上述描述可知，本发明的有益效果在于：本发明提供的制备方法，适和产业化大规模生产，同时采用低温乳化技术制备，能有效保留组分中的活性物质，且该治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法简单成本低，原材料易得成本低，有助于减轻患者的经济负担，减少政府医疗的支出。
23.本发明的实施例一为：
24.治疗糖尿病足的中药外用乳膏，包括七姊妹叶片汁液35kg、蒲黄15kg、杠板归26kg、海金沙18kg、刘寄奴20kg、紫草15kg、矮脚杨梅皮20kg、茶籽油18kg、乳化剂(聚丙烯酰胺)3kg和防腐剂(羟基苯甲酸乙酯)1kg。
25.上述治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法为：将蒲黄、杠板归、海金沙、刘寄奴、紫草和矮脚杨梅皮混合，然后加120kg水，常压下煎制90min，过滤取液体，然后加入七姊妹叶片汁液、茶籽油、乳化剂和防腐剂，混合均匀后得到治疗糖尿病足的中药外用乳膏。
26.本发明的实施例二为：
27.治疗糖尿病足的中药外用乳膏，包括七姊妹叶片汁液20kg、蒲黄10kg、杠板归20kg、海金沙12kg、刘寄奴10kg、紫草12kg、矮脚杨梅皮18kg、茶籽油10kg、乳化剂(脂肪醇聚氧乙烯醚)2kg和防腐剂(对羟基苯甲酸甲酯)1kg。
28.上述治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法为：将蒲黄、杠板归、海金沙、刘寄奴、紫草和矮脚杨梅皮混合，然后加120kg水，常压下煎制120min，过滤取液体，然后加入七姊妹叶片汁液、茶籽油、乳化剂和防腐剂，混合均匀后得到治疗糖尿病足的中药外用乳膏。
29.本发明的实施例三为：
30.治疗糖尿病足的中药外用乳膏，包括七姊妹叶片汁液40kg、蒲黄18kg、杠板归25kg、海金沙20kg、刘寄奴15kg、紫草10kg、矮脚杨梅皮15kg、茶籽油15kg、乳化剂(c13
‑
14异链烷基脂肪醇)3kg和防腐剂(二氧化钛)2kg。
31.上述治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法为：将蒲黄、杠板归、海金沙、刘寄奴、紫草和矮脚杨梅皮混合，然后加120kg水，常压下煎制110min，过滤取液体，然后加入七姊妹叶片汁液、茶籽油、乳化剂和防腐剂，混合均匀后得到治疗糖尿病足的中药外用乳膏。
32.本发明的实施例四为：
33.治疗糖尿病足的中药外用乳膏，包括七姊妹叶片汁液30kg、蒲黄20kg、杠板归30kg、海金沙10kg、刘寄奴18kg、紫草20kg、矮脚杨梅皮10kg、茶籽油20kg、乳化剂(脂肪醇聚氧乙烯醚)5kg和防腐剂(脱氢乙酸钠)3kg。
34.上述治疗糖尿病足的中药外用乳膏的制备方法为：将蒲黄、杠板归、海金沙、刘寄奴、紫草和矮脚杨梅皮混合，然后加110kg水，常压下煎制95min，过滤取液体，然后加入七姊妹叶片汁液、茶籽油、乳化剂和防腐剂，混合均匀后得到治疗糖尿病足的中药外用乳膏。
35.对比例一：
36.对比例一的中药外用乳膏与实施例一的治疗糖尿病足的中药外用乳膏的区别仅在于未添加七姊妹叶片汁液。
37.对比例二：
38.对比例二的中药外用乳膏与实施例一的治疗糖尿病足的中药外用乳膏的区别仅在于未添加蒲黄。
39.对比例三：
40.对比例三的中药外用乳膏与实施例一的治疗糖尿病足的中药外用乳膏的区别仅在于未添加刘寄奴。
41.测试例1(皮肤刺激试验)：
42.取3只体重为2.0
‑
2.5kg的雄性新西兰兔(山东艾莱克生物科技有限公司)，试验开始前，进行3天适应性饲养。检测依据gb/t 16886.10
‑
2017和gb/t 16886.12
‑
2017。
43.试验期间条件：
44.饮水：每天给予充足的清洁饮用水。
45.污染：饲料和饮水中的污染预计不会对试验结果有潜在的影响。
46.笼舍：每只动物饲养在不锈钢笼舍内，每笼的标牌标明试验编号、动物名称、动物标识、动物性别、试验起止日期、实验负责人、动物编号、动物管理人员等信息。
47.环境：温度控制在16
‑
26℃范围。相对湿度控制在40
‑
70％范围。光照应采用12h明，12h暗。
48.试验前4
‑
24h将新西兰兔背部脊柱两侧被毛除去(约10cm
×
15cm)，作为试验和观察部位，将实施例1的中药外用乳膏和0.9％氯化钠注射液各0.5g涂抹于新西兰兔脊柱两侧裸露的皮肤上，每只新西兰兔中药外用乳膏和0.9％氯化钠注射液各涂覆2个区域，脊椎两侧各1个，然后用纱布敷贴片覆盖，然后用绷带固定4h。接触期结束后取下敷贴片，用记号笔对接触部位进行标记，用温水出去残留的试验材料。分别于去除敷贴后1h、24h、48h和72h，记录各接触部位的情况，根据表1计算评分。
49.表1
[0050][0051][0052]
仅使用24h、48h和72h的观察数据进行计算。在72h评分后，分别将每只动物试验样品和阴性对照在24h、48h和72h引起的全部红斑和水肿记分相加，再将所有记分之和除以6(2个观察部位，3个时间点)计算出一只动物的原发刺激指数。将每只动物全部原发性刺激记分相加后再除以动物总数得出试验样品原发性刺激指数。应计算出对照原发性刺激记分，将试验样品原发性刺激记分减去阴性对照侧原发性刺激记分即得出原发性刺激记分。
[0053]
根据计分，平均计分0
‑
0.4的为极轻微，0.5
‑
1.9的为轻度，2
‑
4.9的为中度，5
‑
8的为重度。
[0054]
实验结果见表2所示，结果显示3只新西兰兔1h、24h、48h和72h的红斑红肿评分均为0份，计算后得出，实施例1的中药外用乳膏对新西兰兔皮肤单次接触的皮肤刺激反应类型为极轻微刺激性。
[0055]
表2
[0056][0057][0058]
测试例2(豚鼠皮肤致敏检验法(gpmt))：
[0059]
采用豚鼠最大剂量法(gpmt)开展试验，评价试验样品在试验条件下潜在的皮肤致敏反应。
[0060]
取25只体重为300
‑
400g的雄性豚鼠(济南西岭角养殖繁育中心)，随机取10只为试验组，10只为阳性对照组，剩余5只为阴性对照组。试验开始前，进行6天适应性饲养。检测依据gb/t 16886.10
‑
2017和gb/t 16886.12
‑
2017。
[0061]
试验期间条件：
[0062]
饲料：每天供给适宜的商品动物饲料。
[0063]
饮水：每天给予充足的清洁饮用水。
[0064]
污染：饲料和饮水中的污染预计不会对试验结果有潜在的影响。
[0065]
笼舍：每只动物饲养在不锈钢笼舍内，每笼的标牌标明试验编号、动物名称、动物标识、动物性别、试验起止日期、实验负责人、动物编号、动物管理人员等信息。
[0066]
环境：温度控制在18
‑
29℃范围，相对湿度控制在40
‑
70％范围，光照采用12h明，12h暗。
[0067]
试验样品：采用0.9％氯化钠注射液(极性)浸提实施例1的中药外用乳膏。浸提比例为0.2g/ml，浸提体积10ml，浸提条件37℃72h，透明澄清的浸提液即为试验样品。
[0068]
在试验开始之前除去豚鼠全部试验部位的被毛。在豚鼠背部的脊椎两侧从的肩胛骨内侧，由头至尾的顺序，分别依次设置a、b、c三个试验点。
[0069]
试验组和阴性对照组的动物均在a点皮内注射弗氏完全佐剂与0.9％氯化钠注射
液以50:50(v/v)比例混合的稳定性乳化剂0.1ml；
[0070]
试验组的动物在b点皮内注射试验样品0.1ml，阴性对照组的动物在b点皮内注射0.9％氯化钠注射液；
[0071]
试验组的动物在c点皮内注射试验样品以50:50的体积比例与弗氏完全佐剂与0.9％氯化钠注射液(50％)配制成的乳化剂混合后进行皮内注射0.1ml；阴性对照组的动物在c点皮内注射0.9％氯化钠注射液与弗氏完全佐剂配制成的乳化剂；
[0072]
所有阳性对照组给予0.1％的1
‑
氯
‑
2,4
‑
二硝基苯处理。
[0073]
试验组和阴性对照组，皮内诱导阶段未出现刺激反应，6天后在试验区用10％十二烷基硫酸钠预处理，按摩导入皮肤，24h后，按皮内诱导阶段部位b中选定的浓度，采用面积约8cm2的敷贴片局部贴敷于每只动物的肩胛骨内侧部位，覆盖诱导注射点。用封闭式包扎带固定敷贴片，并于48h后除去包扎带和敷贴片。
[0074]
局部诱导后14天，对试验部位除毛后，对全部动物进行激发刺激。按皮内诱导阶段部位c中选定的浓度，将适宜的敷贴片浸透，局部贴敷于诱导阶段未试验部位，用封闭式包扎带固定，并于24h后除去包扎带和纱布块。
[0075]
除去敷贴片后24h和48h，分别观察试验组和阴性对照组动物激发部位的皮肤反应。按表3的magnusson和kligman分级标准对每一激发部位和每一观察时间皮肤红斑和水肿反应进行描述并分级。
[0076]
表3
[0077]
敷贴试验反应等级无明显改变0散发性或斑点状红斑1中度融合性红斑2重度红斑和水肿3
[0078]
评价标准：阴性对照组动物等级小于1，而试验组中等级大于或等于1时一般提示致敏。阴性对照组动物等级大于或等于1时，试验组动物反应超过阴性对照组中最严重的反应则认为致敏。
[0079]
本次试验对豚鼠的皮肤反应结果与本次试验中豚鼠的临床观察见表4所示。
[0080]
表4
[0081][0082][0083]
从表4中可以看出试验样品的极性浸提液未引起皮肤致敏反应，阳性激发结果的发生率为0。
[0084]
测试例3(细胞毒性试验)：
[0085]
试验品：实施例1的中药外用乳膏。
[0086]
阴性对照品：高密度聚乙烯树脂。
[0087]
阳性对照品：二乙基二硫代氨基甲酸锌。
[0088]
样品制备：将滤纸片剪成直径为3.5mm的圆片，于立式电热蒸汽灭菌器内121℃，灭菌20min，取3片滤纸片蘸取样品(试验品)，备用。
[0089]
阴性对照制备：取适量的高密度聚乙烯树脂，灭菌后，挑选大小合适、形状规则的3颗用于试验。
[0090]
阳性对照制备：称取0.01g二乙基二硫代氨基甲酸锌于烧杯中，向烧杯中加入含10％胎牛血清的dmem培养基10ml，放入恒温摇床，37℃浸提24h，备用。将滤纸剪成直径为3.5mm的圆片，于立式电热蒸汽灭菌器内121℃，灭菌20min，取3片滤纸放入浸提液内浸湿，备用。
[0091]
空白对照制备：取3片高压完成的直径为3.5mm的滤纸圆片，放入含10％胎牛血清的培养基内浸湿，备用。
[0092]
检测依据：gb/t16886.5
‑
2017和gb/t16886.12
‑
2017。
[0093]
试验用小鼠成纤维细胞l
‑
929，来源于bfb细胞库。
[0094]
将培养好的l
‑
929细胞用0.25％胰酶(含edta)消化，制成细胞悬液，调整细胞浓度为1
×
105个/ml。
[0095]
将制好的细胞悬液接种于35mm的6孔板，设置空白对照、阴性对照、阳性对照、样品组，每组设3个平行，每孔接种2ml细胞悬液。
[0096]
将6孔板置于浓度为5％的co2培养箱中37℃培养，24h后弃去培养液，分别加入2ml新鲜培养基，将试验组样品片、空白对照组、阴性对照物和阳性对照组滤纸片分别放于6孔板的中央，置于浓度为5％的co2培养箱中37℃培养。在显微镜下观察细胞的形态并打分。细胞分级越大，潜在的细胞毒性越大；细胞分级大于2级，说明样品具有潜在的细胞毒性。结果见表5所示。
[0097]
表5
[0098][0099]
结果显示，本次试验采用直接接触法测定样品的潜在细胞毒性，试验样品与生长旺盛的l
‑
929细胞培养(37℃，5％co2)24h后，观察细胞形态，细胞裂解情况。结果显示试样周围和试样下面未观察到反应区域，反应级别为0级，空白对照组和阴性对照组的试样周围和试样下面未观察到反应区域，反应级别为0级，阳性对照组的反应区域超出试样尺寸至
1.0cm，反应级别为3级，显示本次试验结果有效。说明本次测试条件下，该样品对l
‑
929细胞无潜在细胞毒性。
[0100]
测试例4：
[0101]
取26只体重为200
‑
230g的sd雄性大鼠，试验开始前，进行6天适应性饲养。每组5只，随机分为4组(试验组1、对照组1、对照组2和对照组3)，剩余6只平均分为为空白组1和空白组2。
[0102]
饲料：每天供给适宜的商品动物饲料。
[0103]
饮水：每天给予充足的清洁饮用水。
[0104]
污染：饲料和饮水中的污染预计不会对试验结果有潜在的影响。
[0105]
笼舍：每只动物饲养在不锈钢笼舍内，每笼的标牌标明试验编号、动物名称、动物标识、动物性别、试验起止日期、实验负责人、动物编号、动物管理人员等信息。
[0106]
环境：温度控制在20
‑
28℃范围，相对湿度控制在40
‑
70％范围，光照采用12h明，12h暗。
[0107]
适应性饲养结束后，空白组1提供适应性饲养的饲料，剩余试验动物则采用75mg/kg的脲佐菌素构建糖尿病足大鼠模型。糖尿病足大鼠模型的空腹血糖＞16.7mmol/l，同时伴随有体重减轻、多食、饮的情况。将所有试验动物麻醉，在大鼠右足背部去除2*4mm的全层皮肤，产生创面。空白组1和空白组2每日用0.5％的碘伏消毒创面，不做其他处理，试验组1、对照组1、对照组2和对照组3每日用0.5％的碘伏消毒创面，再分别每日两次施用实施例1、对比例1、对比例2和对比例3的中药外用乳膏0.1g。观察并计算伤口愈合率，结果见表6所示。
[0108]
创面愈合率＝(第x天创面面积
‑
第0天创面面积)/第0天伤口面积x100％；x＝7，14，21，28。
[0109]
表6
[0110][0111][0112]
其中，创面愈合率为负值的代表创面不但未愈合，面积反而增大，创面恶化。其中空白组2，第19天和第24天时分别有一只小鼠死亡。
[0113]
测试例5：
[0114]
具体记录3名痊愈患者使用实施例1的治疗糖尿病足的中药外用乳膏的详细效果如下：
[0115]
患者1：刘x，男，75岁莆田市荔城区，糖尿病史25年，2016年2月开始脚面红肿至3月多处溃烂。8月到中莆田市人民医院治疗，住院65天病情加重，医生建议截肢，病人人恐惧截
肢出院。12月患者同意使用本发明乳膏(实施例1的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，下同)，5天排除大量脓液，30天脓尽痊愈。
[0116]
患者2：黄x花，女，83岁，温州市乐清市虹桥镇，糖尿病史28年，2016年5月受伤入院温州市第一医院，创口感染，住院42天未好转。7月患者同意用本发明乳膏，6天排除大量脓液，25天脓尽痊愈。
[0117]
患者3：张x花，女，75岁，南平市延平区镇，糖尿病史28年，2017年8月入院92医院，左腿脚指除大拇指其余4指严重溃烂，膝关节以下重度肿大，脚面暗黑，病人恐惧截肢出院。10月患者同意用本发明乳膏，7天排除大量脓液，35天脓尽痊愈。
[0118]
综上所述，本发明提供的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，七姊妹叶片汁液富含表皮生长因子，配合具有活血功效的蒲黄和刘寄奴能够有效提升施用组织的修复能力，加快伤口愈合，能够显著提升伤口的愈合效果；同时，通过添加具有清热解毒功效的杠板归配合海金沙、矮脚杨梅皮和紫草能有效起到抗感染的作用，避免伤口恶化、感染。本发明提供的治疗糖尿病足的中药外用乳膏，能够有效抗菌，控制感染，避免创口进一步恶化，同时能有效提高施药处组织自身的修复能力，达到治疗的效果。且其制备方法简单、原料易得采购成本低，能够有效减轻糖尿病足患者的治疗时医药费用产生的经济负担。
[0119]
以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。