一种携带碳青霉烯酶IMP基因的转座子Tn7554及其应用的制作方法

摘要: 本发明属于生物,具体涉及一种携带碳青霉烯酶imp基因的转座子tn7554及其应用。背景技术:1、碳青霉烯类抗生素是临床治疗严重革兰氏阴性菌感染,尤其是产超广谱β...
一种携带碳青霉烯酶IMP基因的转座子Tn7554及其应用的制作方法

本发明属于生物,具体涉及一种携带碳青霉烯酶imp基因的转座子tn

7554及其应用。

背景技术:

1、碳青霉烯类抗生素是临床治疗严重革兰氏阴性菌感染,尤其是产超广谱β-内酰胺酶(esbls)肠杆菌目细菌感染的关键药物。然而,随着碳青霉烯耐药肠杆菌目细菌(cre)在全球范围内的广泛流行与播散,此类“最后防线”药物的疗效正面临严峻挑战。碳青霉烯耐药性主要由碳青霉烯酶介导,其编码基因常位于可移动遗传元件上,通过质粒、转座子等在菌株间水平转移,导致耐药性快速扩散,给临床感染防控带来极大困难。

2、碳青霉烯酶主要包括a类(如kpc)、b类(金属β-内酰胺酶,如ndm、vim、imp)和d类(oxa-48型)。其中,b类金属β-内酰胺酶能水解碳青霉烯类药物,且其活性不易被常见的β-内酰胺酶抑制剂所阻断。编码这些酶的基因常嵌入于整合子、转座子等复合结构中,并进一步由质粒或染色体携带,构成了复杂的耐药传播网络。转座子作为重要的可移动元件,能够介导耐药基因在不同dna分子间的跳跃与重排,是加速多重耐药基因共聚集和水平转移的关键驱动因素。

3、imp型碳青霉烯酶是较早发现的金属酶之一,已在全球多地出现。imp基因通常位于i类整合子的基因盒阵列中,其上游往往与特定的转座子结构相连。明确携带imp基因的转座子的精确结构、边界及其侧翼序列,对于追踪耐药基因的起源、进化路径和传播动力学至关重要。然而,目前对新型的、结构特异的携带imp的转座子元件的认知仍不完全,特别是其在临床菌株中的具体遗传背景和传播潜力有待进一步揭示。

4、因此,鉴定和阐明新型的携带碳青霉烯酶基因的转座子,不仅有助于深入理解耐药基因的捕获、装配与播散机制,而且能为临床监测耐药菌的进化与传播提供精确的分子靶标,对指导感染防控和抗菌药物研发具有重要的科学价值与应用前景。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对以上要解决的技术问题,提供一种携带碳青霉烯酶imp基因的转座子tn

7554及其应用。

2、为实现上述发明目的,本发明提供了如下技术方案:

3、本发明提供了一种携带碳青霉烯酶imp基因的转座子tn

7554,所述转座子tn

7554的核苷酸序列如seq id no. 1所示。

4、优选地,所述转座子tn

7554两端为42bp的正向重复序列,包括骨架区和外源插入区,所述外源插入区内部具有整合子in73,所述整合子in73中含有

blaimp-8基因和基因盒

aaca4’-3。本发明还提供了一种微生物,所述微生物含有本发明所述的转座子tn

7554。

5、优选地,所述微生物为蒙氏假单胞菌。

6、本发明还提供了所述的转座子tn

7554、所述的微生物在制备检测生物耐药性的产品中的应用。

7、本发明还提供了所述的转座子tn

7554、所述的微生物在构建耐药性检测模型中的应用。

8、优选地,所述耐药性所针对的药物为头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星或替卡西林/克拉维酸。

9、本发明首次发现并鉴定了一种新型多重耐药转座子tn

7554,其独特的结构特征为解析蒙氏假单胞菌等多重耐药菌株的耐药机制提供了新的遗传学证据,为开发针对该型耐药菌的分子诊断试剂提供了特异性靶点,有助于临床快速识别和防控耐药菌的传播,为研究细菌多重耐药区的进化与传播提供了重要的分子模型。

1.一种携带碳青霉烯酶imp基因的转座子tn7554,其特征在于,所述转座子tn7554的核苷酸序列如seq id no. 1所示。

2.根据权利要求1所述的转座子tn7554,其特征在于,所述转座子tn7554两端为42bp的正向重复序列,包括骨架区和外源插入区,所述外源插入区内部具有整合子in73,所述整合子in73中含有blaimp-8基因和基因盒aaca4’-3。

3.一种微生物,其特征在于,所述微生物含有如权利要求1或2所述的转座子tn7554。

4.根据权利要求3所述的微生物,其特征在于,所述微生物为蒙氏假单胞菌。

5.如权利要求1或2所述的转座子tn7554、如权利要求3至4中任一项所述的微生物在制备检测生物耐药性的产品中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述耐药性所针对的药物为头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星或替卡西林/克拉维酸。

7.如权利要求1或2所述的转座子tn7554、如权利要求3至4中任一项所述的微生物在构建耐药性检测模型中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述耐药性所针对的药物为头孢他啶、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢吡肟、氨曲南、亚胺培南、美罗培南、妥布霉素、环丙沙星、左氧氟沙星或替卡西林/克拉维酸。