一株青春双歧杆菌MS-YLOHAS18及其菌剂和在制备预防或改善皮肤光老化产品中的应用的制作方法

本发明涉及微生物的，具体涉及一株青春双歧杆菌ms-ylohas18及其菌剂和在制备预防或改善皮肤光老化产品中的应用。

背景技术：

1、皮肤衰老是由遗传因素、代谢变化及外界环境共同作用形成的复杂过程，其中紫外线长期照射引起的光老化是外源性皮肤衰老的主要形式。紫外线照射可诱导皮肤产生过量活性氧，降低超氧化物歧化酶等抗氧化酶的活性，造成脂质、蛋白质及核酸损伤；同时可促进基质金属蛋白酶表达，加速胶原蛋白降解，最终表现为皮肤皱纹增加、弹性降低、色泽暗沉及屏障功能减弱。

2、近年来，益生菌及其衍生物逐渐被应用于皮肤护理。二裂酵母发酵产物溶胞物具有一定的抗氧化、皮肤修护及抗衰老作用，但其活性成分通常为一次性释放，难以持续产生代谢产物。现有技术还公开了多株青春双歧杆菌及其发酵滤液、溶胞物、提取物在抗氧化、促进成纤维细胞增殖、抑制基质金属蛋白酶表达和改善皮肤状态方面的应用。

3、然而，微生物的护肤功效具有明显的菌株特异性，现有技术仍缺少对同一青春双歧杆菌活菌、完整灭活菌和溶胞物在相同菌体当量及相同实验条件下的系统比较，难以确定不同菌体形态对皮肤光老化的作用差异。同时，现有功效评价多停留在体外细胞水平或单一指标检测，未能从宏观表型、氧化应激、胶原代谢及细胞衰老等多维度系统评估抗衰效果，亦缺乏对停药后功效持续性的追踪，使得益生菌抗衰护肤产品的科学评价体系尚不完善。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明提供一株青春双歧杆菌ms-ylohas18及其菌剂和在制备预防或改善皮肤光老化产品中的应用。

2、本发明技术方案如下：

3、第一方面，本发明提供一株青春双歧杆菌ms-ylohas18，所述青春双歧杆菌（

bifidobacterium adolescentis）ms-ylohas18保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.39539，保藏日期为2026年06月30日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

4、进一步的，所述青春双歧杆菌ms-ylohas18的16s rdna序列如seq id no.3所示。

5、第二方面，本发明提供一种菌剂，所述菌剂中含有青春双歧杆菌ms-ylohas18。

6、进一步的，所述菌剂中活菌数≥1.0×109cfu/g。

7、进一步的，所述菌剂的制备方法为：取存储的青春双歧杆菌ms-ylohas18在mrs固体培养基上活化，将活化后的菌按照质量百分比为1%的接种量接种于mrs液体培养基中，然后在37℃条件下培养24h，获得菌液；将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于质量百分比为15%的复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度为1.0~2.0×109cfu/ml，获得菌悬液；将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；将菌粉与麦芽糊精混合，制得含青春双歧杆菌ms-ylohas18的菌剂。

8、第三方面，本发明提供一种菌剂，所述菌剂中含有青春双歧杆菌ms-ylohas18的后生元；所述后生元包括灭活的青春双歧杆菌ms-ylohas18或青春双歧杆菌ms-ylohas18的溶胞物。

9、进一步的，所述菌剂的制备方法为：取青春双歧杆菌ms-ylohas18菌悬液，进行100℃水浴加热30分钟灭活处理；取灭活处理后样品涂布于mrs固体培养基，37℃厌氧培养48小时，验证无活菌生长后，将灭活菌体经离心收集、无菌生理盐水洗涤，重悬于质量百分比为15%的复原脱脂乳中，菌体浓度为1.0×109cfu/ml，冷冻干燥后与麦芽糊精混合，制得含青春双歧杆菌ms-ylohas18后生元的菌剂。

10、进一步的，所述菌剂的制备方法为：取青春双歧杆菌ms-ylohas18菌悬液，进行100℃水浴加热30分钟灭活处理；将灭活菌体重悬于缓冲液中，按质量体积百分比为0.1%的比例加入溶菌酶，于37℃水浴振荡酶解4h；酶解液循环均质3次，使菌体充分破碎；将均质液离心，收集上清液，经0.22μm微孔滤膜过滤；得青春双歧杆菌ms-ylohas18溶胞物，将所得溶胞物与化妆品基质按体积比1：9混合，即得溶胞物制剂。

11、第四方面，本发明提供一种青春双歧杆菌ms-ylohas18在制备预防或改善皮肤光老化的产品中的应用。

12、进一步的，所述预防或改善皮肤光老化包括以下至少一种：减少皮肤皱纹、提高皮肤弹性、提高皮肤亮度、提高皮肤抗氧化酶活性、降低皮肤氧化损伤、增加皮肤i型胶原和/或iii型胶原含量、抑制基质金属蛋白酶表达、提高timp-1表达以及降低皮肤细胞衰老标志物。

13、进一步的，所述应用的施用方式为皮肤外用。

14、本发明的有益效果在于：

15、（1）本发明提供了一株青春双歧杆菌ms-ylohas18，经过实验发现，该菌株的活菌制剂、灭活菌制剂及溶胞物均具有良好的抗衰功效。

16、（2）本发明提供的青春双歧杆菌ms-ylohas18菌株发酵工艺稳定（活菌数≥1×109cfu/g），制备方法简单、可控，为抗衰护肤品产品的开发提供了安全高效、作用持久的全新解决方案。

17、（3）本发明通过uvb诱导的光老化小鼠模型，从宏观表型（皱纹面积、皮肤弹性、肤色亮度）、氧化应激（sod、gsh-px、cat、mda、ros）、胶原代谢（i/iii型胶原、mmp-1/mmp-3、timp-1）及细胞衰老（sa-β-gal、p16、p53）等多维度进行了系统评价，覆盖了皮肤衰老的主要通路。实验结果表明，青春双歧杆菌ms-ylohas18三种形态制剂均具有抗光老化功效，功效排序为活菌＞灭活菌＞溶胞物，这一结论为益生菌抗衰护肤产品的开发指明了方向。

18、（4）本发明青春双歧杆菌ms-ylohas18的活菌菌剂停药28天后综合功效指数仍达98%，优于溶胞物组（75%）和灭活菌组（88%）证明活菌制剂因具有代谢活性和定植能力，可实现边涂抹边作用、停用后仍持续的长效抗衰效果。

1. 一株青春双歧杆菌ms-ylohas18，其特征在于，所述青春双歧杆菌（bifidobacterium adolescentis）ms-ylohas18保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no.39539，保藏日期为2026年06月30日，保藏机构地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2. 如权利要求1所述的青春双歧杆菌ms-ylohas18，其特征在于，所述青春双歧杆菌ms-ylohas18的16s rdna序列如seq id no.3所示。

3.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂中包含如权利要求1所述的青春双歧杆菌ms-ylohas18。

4.如权利要求3所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂中活菌数≥1.0×109cfu/g。

5.如权利要求3或4所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的制备方法为：取存储的青春双歧杆菌ms-ylohas18在mrs固体培养基上活化，将活化后的菌按照质量百分比为1%的接种量接种于mrs液体培养基中，然后在37℃条件下培养24h，获得菌液；将菌液离心后，收集菌体，使用无菌生理盐水洗涤后，重悬于质量百分比为15%的复原脱脂乳中，获得悬浊液；调整悬浊液的浓度为1.0×109~2.0×109cfu/ml，获得菌悬液；将菌悬液冷冻干燥后，获得菌粉；将菌粉与麦芽糊精混合，制得含青春双歧杆菌ms-ylohas18的菌剂。

6.一种菌剂，其特征在于，所述菌剂中包含如权利要求1所述的青春双歧杆菌ms-ylohas18的后生元；所述后生元包括灭活的青春双歧杆菌ms-ylohas18或青春双歧杆菌ms-ylohas18的溶胞物。

7.如权利要求6所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的制备方法为：

8.如权利要求6所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂的制备方法为：

9.一种如权利要求1所述的青春双歧杆菌ms-ylohas18在制备预防或改善皮肤光老化的产品中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述预防或改善皮肤光老化包括以下至少一种：减少皮肤皱纹、提高皮肤弹性、提高皮肤亮度、提高皮肤抗氧化酶活性、降低皮肤氧化损伤、增加皮肤i型胶原和/或iii型胶原含量、抑制基质金属蛋白酶表达、提高timp-1表达。