用于鱼类肠炎病的中药组合物、其制备方法及应用

本发明涉及水产病害防治及中兽药，具体涉及一种用于防治维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病的中药组合物、其制备方法及应用。

背景技术：

1、维氏气单胞菌（

aeromonas veronii）为水产养殖中常见条件致病菌之一，可引起鱼类肠炎、败血症及多组织损伤。感染鱼常表现为摄食下降、游动异常、肛门红肿、腹腔积液、肠道充血或炎症等症状，严重时可导致养殖群体死亡并造成经济损失。目前，抗菌药物仍是水产细菌性疾病防治的重要手段，但长期或不规范使用易导致耐药性、药物残留及养殖水体污染等问题。

2、开发来源明确、安全性较好、适于经口应用的中药组合物，对减少抗生素依赖和提升水产动物健康具有重要的实际意义。已有中药复方多从清热解毒、抑菌抗炎等角度进行组方，但针对维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病，仍需要组分较少、制备工艺简便、体内外证据相互支撑的中药组合物。

3、罗布麻是新疆具有资源特色的药用植物之一，具有原料来源方面的区域资源优势；其与其他中药配伍用于维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病仍有待进一步研究。

4、有鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、为解决上述技术问题，本发明提供了一种用于防治维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病的中药组合物、其制备方法及应用。

2、具体地，本发明的技术方案如下：

3、第一方面，本发明提供了一种用于防治维氏气单胞菌感染所致肠炎病的中药组合物，所述中药组合物由罗布麻、五味子和黄芩按干燥原药材质量比3~5:1~3:0.5~2共同水提制得。

4、优选地，所述中药组合物由罗布麻、五味子和黄芩按干燥原药材质量比4:2:1共同水提制得。

5、优选地，按原药材总投料量计，所述中药组合物的原药材当量浓度为500~2000mg/ml。

6、进一步优选地，按原药材总投料量计，所述中药组合物的原药材当量浓度为1000mg/ml。

7、第二方面，本发明提供了所述中药组合物的制备方法，包括：按重量份称取各原药材，置于溶媒中提取有效成分，得提取液；所述溶媒为水。

8、优选地，所述方法包括：按干燥原药材质量比3~5:1~3:0.5~2（进一步优选为4:2:1）称取罗布麻、五味子和黄芩，粉碎并混合，加入水进行第一次提取，过滤；向药渣中加水进行第二次提取，过滤；合并两次提取液，经离心、过滤后浓缩并定容，得到所述中药组合物。

9、优选地，以罗布麻、五味子和黄芩的总质量计，每次提取的料液比均为1g:10±2ml，更优选为1:10（g/ml）；第一次提取前室温浸泡30±5min，于95±2℃回流提取2.0±0.5h；第二次于95±2 ℃回流提取1.0±0.5 h。

10、进一步优选地，按原药材总投料量计，将合并后的提取液浓缩并定容至原药材当量浓度500~2000 mg/ml。

11、第三方面，本发明提供了所述中药组合物或所述制备方法制得的中药组合物在制备用于防治维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病的产品中的应用。

12、优选地，所述产品用于降低感染鱼肠道、肝脏和/或肾脏中的维氏气单胞菌载菌量，或用于减轻维氏气单胞菌感染导致的鱼肠道黏膜损伤。

13、此外，体外抑菌试验结果表明，所述中药组合物对本实施例检测的嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、温和气单胞菌和迟缓爱德华氏菌均表现出抑菌活性。

14、进一步优选地，所述用于防治维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病的产品为经口给药制剂。

15、优选地，所述经口给药制剂为口服液。

16、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

17、（1）本发明的中药组合物由罗布麻、五味子和黄芩按特定的干燥原药材质量比共同水提制得，仅含三味原料药，组方及制备步骤明确。

18、（2）体外试验结果表明，本发明中药组合物对本实施例检测的维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、温和气单胞菌和迟缓爱德华氏菌均表现出抑菌活性，并对维氏气单胞菌表现出显著的浓度相关性抑制作用。

19、（3）单味药筛选、mic/mbc测定、fic配伍评价、组方组成删减验证及组分配比筛选结果支持罗布麻、五味子和黄芩三味药共同组成基础组方；进一步的等总原药材当量配比验证结果表明，在本实施例所考察的浓度及配比范围内，罗布麻、五味子和黄芩按4:2:1配伍表现出较优的抑菌效果。

20、（4）经口给药安全性评价结果表明，原药材总当量浓度为500、1000和2000 mg/ml的各组在本实施例给药条件下均未引起实验鱼死亡或明显临床异常；对最高受试浓度2000mg/ml组进行的组织学检查未见主要组织明显病理损伤。采用1000 mg/ml中药组合物进行的感染模型药效评价结果表明，该组观察期死亡率低于感染模型组，且组织载菌量和肠道组织病理损伤均有明显降低。

1.一种用于防治维氏气单胞菌感染所致肠炎病的中药组合物，其特征在于，所述中药组合物由罗布麻、五味子和黄芩按干燥原药材质量比3~5:1~3:0.5~2共同水提制得；

2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，按原药材总投料量计，所述中药组合物的原药材当量浓度为500~2000mg/ml；

3.一种权利要求1或2所述中药组合物的制备方法，其特征在于，包括：按重量份称取各原药材，置于溶媒中提取有效成分，得提取液；所述溶媒为水。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，包括：按干燥原药材质量比3~5:1~3:0.5~2称取罗布麻、五味子和黄芩，粉碎并混合，加入水进行第一次提取，过滤；向药渣中加水进行第二次提取，过滤；合并两次提取液，经离心、过滤后浓缩并定容，得到所述中药组合物。

5. 根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，以罗布麻、五味子和黄芩的总质量计，每次提取的料液比均为1g:10±2ml；第一次提取前室温浸泡30±5 min，于95±2 ℃回流提取2.0±0.5 h；第二次于95±2 ℃回流提取1.0±0.5 h。

6. 根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，按原药材总投料量计，将合并后的提取液浓缩并定容至原药材当量浓度500~2000 mg/ml。

7.权利要求1或2所述中药组合物或权利要求3～6任一项所述制备方法制得的中药组合物在制备用于治疗维氏气单胞菌感染所致鱼类肠炎病的产品中的应用。

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述产品用于降低感染鱼肠道、肝脏和/或肾脏中的维氏气单胞菌载菌量，或用于减轻维氏气单胞菌感染导致的鱼肠道黏膜损伤。

9.权利要求1或2所述的中药组合物或权利要求3～6任一项所述制备方法制得的中药组合物在制备水产致病菌抑菌制剂中的应用，其特征在于，所述水产致病菌选自维氏气单胞菌、嗜水气单胞菌、杀鲑气单胞菌、温和气单胞菌和迟缓爱德华氏菌中的一种或多种。

10.一种用于防治维氏气单胞菌感染所致肠炎病的中药制剂，由中药成分与载体和/或赋形剂结合得到，其特征在于，所述中药成分为权利要求1或2所述中药组合物或权利要求3-6任意一项所述制备方法制得的中药组合物；