一种莪术油纳米乳剂及其制备方法和应用

本发明属于药物制剂，具体涉及一种莪术油纳米乳剂及其制备方法和应用。

背景技术：

1、溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，uc)是一种累及直肠和结肠黏膜及黏膜下层的慢性、非特异性炎症性肠病。其临床表现为持续或反复发作的腹泻、黏液脓血便且存在不同程度的全身症状，严重降低患者的生活质量。根据lancet发布的2023年最新数据显示，全球溃疡性结肠炎患病量约为500万例，并且全球发病率正逐年上升。

2、uc的发病机制极其复杂，具体机制尚不明确。目前普遍认为与遗传因素、环境因素、免疫反应失调和肠道微生物紊乱等有关。随着uc研究的逐步深入，临床上对于uc的治疗已步入多元化的时代。对于轻、中度结肠炎患者，临床上多采用药物进行治疗，如氨基水杨酸类、糖皮质激素类、生物制剂等，但这些药物存在副作用大、耐药性强、耐受性差等问题。而对于急性重度溃疡性结肠炎患者，药物缓解效果甚微，则需要进行手术治疗，但术后出现并发症概率极高。这些治疗困境严重加剧患者生理-心理双重负担。因此，开发安全性和有效性俱佳的新型uc治疗策略具有重要临床意义。

3、莪术油(zedoary turmeric oil，zto)是从姜科姜黄属植物温郁金、蓬莪术或广西莪术的干燥根茎中经水蒸气蒸馏法获取的挥发油，室温下为淡黄色油状液体，其含有莪术醇、莪术二酮、莪术烯、吉马酮等四十余种化学成分，具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、抗菌等多种药理活性。然而，莪术油存在水溶性差、生物利用度低、易挥发等问题，严重限制其临床应用。临床上，莪术油多采用吐温-80进行增溶，但具有较强的溶血作用和刺激性。因此，研究开发一种安全低毒的莪术油制剂已成为突破其临床应用瓶颈的关键。

4、纳米乳剂作为一种由油相、水相和乳化剂组成的动力学稳定体系，其分散相粒径通常在20～200nm范围内，表现为透明或半透明状。纳米乳剂的油相和水相之间存在基于乳化剂的界面，使其对亲水和疏水的活性物质都显示出较高的溶解能力。此外，纳米乳剂进入体内后可通过跨细胞旁路渗透，改善药物在黏膜组织的滞留与吸收效率，从而发挥更好的疗效。到目前为止，将莪术油包裹在纳米乳剂中制备莪术油纳米乳剂并将其用于制备治疗溃疡性结肠炎的药物的相关研究还未见报道。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明旨在提供一种莪术油纳米乳剂及其制备方法和应用，采用高能-超声法将莪术油进行包封得到水包油(o/w)型纳米乳剂，具有制备工艺简单、性质稳定等优势。以溃疡性结肠炎小鼠模型为例，灌肠给予莪术油纳米乳剂，可以有效减少结肠缩短，此外，通过增加肠道紧密连接蛋白的表达、促进粘液分泌、修复肠道黏液层和上皮细胞层，建立稳固的肠道屏障。同时，莪术油纳米乳剂可以有效减少炎性细胞如中性粒细胞、m1型巨噬细胞、成熟树突细胞(dcs)的比例，从而缓解炎症性免疫微环境，有效治疗溃疡性结肠炎，具有良好的临床应用前景。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、第一方面，本发明提供一种莪术油纳米乳剂的制备方法，包括如下步骤：

4、(1)分别制备油相和水相：称取莪术油、乳化剂、稳定剂，加热搅拌使其混匀，得油相；称取去离子水、乳化剂、渗透压调节剂、防腐剂，加热搅拌使其混匀，得水相；

5、(2)将步骤(1)中的水相和油相混合均匀，高速剪切分散形成初乳；

6、(3)将步骤(2)得到的初乳进行超声处理，得到莪术油纳米乳剂。

7、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)～(2)中的加热温度为50～80℃。

8、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)中所述莪术油为采用水蒸气蒸馏法从姜科姜黄属植物温郁金、蓬莪术或广西莪术的干燥根茎中经水蒸气蒸馏法获取的挥发油。

9、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)中所述莪术油的提取方法为：将姜科姜黄属植物温郁金、蓬莪术或广西莪术的干燥根茎的药材干粉和水置于烧瓶中，并使水没过干粉，在烧瓶上连接挥发油提取器，向提取器中加水至刚好流入烧瓶中，安装冷凝装置，加热烧瓶至沸腾，回流至提取器中，无油珠流出时，停止加热，放出提取器中的水，接取的物质即为莪术油。

10、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)中所述乳化剂包括卵磷脂、泊洛沙姆188中的一种或两种的组合；所述稳定剂包括油酸、油酸钠中的一种或两种；所述渗透压调节剂包括甘油、葡萄糖、氯化钠、甘露醇、山梨醇、丙二醇中的一种或两种以上的组合；所述防腐剂包括苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸、山梨酸钾、山梨酸钙、苯扎溴铵、对羟基苯甲酸甲酯/乙酯/丙酯/丁酯、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的一种或两种以上的组合。

11、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)中所述的莪术油、乳化剂、稳定剂、渗透压调节剂、防腐剂、去离子水的重量比为：(1～10):(5～15):(0～5):(1～5):(0～0.3):(65～93)。

12、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)中所述的莪术油、乳化剂、稳定剂、渗透压调节剂、防腐剂、去离子水的重量比为(2～8):(6～12):(0.1～3):(2～4):(0～0.3):(73～90)。

13、基于上述技术方案，进一步地，步骤(1)中油相中的乳化剂和水相中的乳化剂相同或不同，质量比为1:(1～5)。

14、基于上述技术方案，进一步地，步骤(2)中的剪切转速为1～3×104r/min，剪切时间为5～40min。

15、基于上述技术方案，进一步地，步骤(3)中的超声功率为50～400w，超声时间为5～30min。

16、第二方面，本发明提供上述制备方法制得的莪术油纳米乳剂。

17、基于上述技术方案，进一步地，所述的纳米乳剂的直径为20～400nm。

18、基于上述技术方案，进一步地，所述的纳米乳剂的直径为30～200nm。

19、基于上述技术方案，进一步地，所述的纳米乳剂的直径为40～100nm。

20、第三方面，本发明提供上述的莪术油纳米乳剂在制备抗炎药物中的应用。

21、基于上述技术方案，进一步地，炎症包括溃疡性结肠炎、克罗恩病、阴道炎、子宫内膜炎、宫颈炎、盆腔炎、口腔溃疡、咽炎、鼻炎、尿道炎、膀胱炎、结膜炎、中耳炎黏膜炎症。

22、基于上述技术方案，进一步地，所述的炎症为溃疡性结肠炎。

23、基于上述技术方案，进一步地，所述的莪术油纳米乳剂通过修复肠道屏障、缓解氧化应激、控制炎症反应、维持免疫稳态来减缓溃疡性结肠炎。

24、本发明的有益效果：

25、1、本发明提供的莪术油纳米乳剂具有合适的尺寸与良好的稳定性与安全性。

26、2、本发明提供的莪术油纳米乳剂的制备方法具有制备工艺简单、性质稳定等优点。

27、3、本发明基于dss诱导的小鼠溃疡性结肠炎模型，证实莪术油纳米乳剂可以有效缓解疾病引起的结肠缩短、体重降低，同时降低疾病活动指数(disease activity index，dai)。通过结肠组织进行病理学分析，莪术油纳米乳剂可以有效降低炎性细胞浸润，修复隐窝，恢复肠道黏液分泌，从而修复肠道屏障。通过流式细胞术分析小鼠结肠组织中的免疫细胞，发现莪术油纳米乳剂可以有效降低炎性细胞如中性粒细胞、m1型巨噬细胞、成熟dcs的比例，从而改善炎症免疫微环境。

28、4、本发明采用小鼠单核巨噬细胞系(raw 264.7)和人结直肠腺癌细胞系(caco-2)作为体外评价模型，证实莪术油纳米乳剂可有效缓解氧化应激，降低巨噬细胞的炎症反应，促进caco-2细胞的增殖和迁移，从而促进伤口愈合。