分析物测定方法、试剂盒和装置与流程

本发明涉及生物，尤其是涉及一种分析物测定方法、试剂盒和装置。

背景技术：

1、如下陈述仅提供与本发明有关的背景信息，而不必然地构成现有技术。

2、现有的免疫诊断技术中标记抗体的信号物信号生成效果不断提高，配合信号增强系统可产生越来越强的信号，特别是在单分子检测中，非特异性结合的标记抗体信号在总本底信号中的权重变得超高，使仪器背景信号显得微不足道，导致非特异性结合的标记抗体信号在阻碍检出限进一步降低中愈发关键。

3、对于一个基于固相载体（例如磁珠）的夹心法免疫诊断，在试剂与样本孵育形成三元复合物后，通常温和清洗，然后激发信号进行检测。然而温和清洗操作本身只能有限去除非特异性结合的标记抗体，还会残留很多非特异性结合的标记抗体在反应体系中形成假阳性信号事件。而一旦采取更强力的清洗操作，会导致结合不牢固的免疫复合物大量解离，丢失真阳性信号。为此在免疫检测中，为保证样本中的分析物充分被结合会加入过量的标记抗体（或者适配体、亲和肽、印迹分子等亲和探针），但这样操作会导致大量的游离标记抗体非特异结合于磁珠（或者elisa板等其它第一固相载体表面），会带来非特异结合噪声干扰。但是很多常见的去除非特异结合噪声的操作都会导致免疫复合物的过多解离，例如强清洗操作，包括强物理清洗（例如振荡、超声）和强化学清洗（例如强酸、强碱、高浓度表面活性剂等）；或者虽然在单次清洗中采用了较为温和的方式，但是在整个测定过程中涉及了多次清洗，以及对免疫复合物在固相和液相之间的反复转移，极大挑战了免疫复合物的内部牢固性，也会造成一些免疫复合物的解离，例如免疫复合物转移测定法（参考journal ofimmunological methods,volume 459,2018,pages 76-80的表2），经过释放-捕获后，最终真阳性信号普遍丢失约47~71%。因此，如何在基于通过形成复合物进行分析物测定的方法中，避免强力清洗、多次清洗和/或转移过程中真阳性信号的损失是目前有待解决的问题。

4、有鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种分析物测定方法，以缓解现有技术中在分析物测定过程中真阳性信号容易损失的问题。

2、为解决上述技术问题，本发明特采用如下技术方案：

3、第一方面，提供了一种分析物测定方法，所述测定方法包括将第一组分和第二组分与分析物接触，使第一组分和第二组分分别与分析物连接，形成第一复合物；

4、所述第一复合物中的第一组分和所述第一复合物中的第二组分通过第三组分连接，形成第二复合物；将所述第二复合物与游离的第一组分和/或游离的第二组分分离，并检测反应体系中第二复合物的信号强度。

5、第二方面，提供了一种用于分析物测定的试剂盒，所述试剂盒包含第一方面所述的第一组分、所述的第二组分和所述的第三组分。

6、第三方面，提供了一种分析物测定装置，所述分析物测定装置包括：存储模块和处理模块；所述存储模块用于存储程序；所述处理模块用于通过执行所述存储模块存储的程序以实现如第一方面所述的分析物测定方法。

1.一种分析物测定方法，其特征在于，包括将第一组分和第二组分与分析物接触，使第一组分和第二组分分别与分析物连接，形成第一复合物；

2.根据权利要求1所述的分析物测定方法，其特征在于，第一组分连接信号物，第二组分连接第一固相载体；

3.根据权利要求1~2任一项所述的分析物测定方法，其特征在于，第一组分和第三组分共价或非共价连接；和/或，第二组分和第三组分共价或非共价连接；

4.根据权利要求3所述的分析物测定方法，其特征在于，第一组分含有基团a1，第二组分含有基团b1，第三组分含有基团a2和基团b2；基团a1和基团a2特异性结合，基团b1和基团b2特异性结合；

5.根据权利要求1~4任一项所述的分析物测定方法，其特征在于，将所述第二复合物与游离的第一组分和/或游离的第二组分分离包括清洗反应体系；和/或，包括将所述第二复合物与原反应体系分离；

6.根据权利要求1~5任一项所述的分析物测定方法，其特征在于，第二组分连接第一固相载体，所述测定方法包括将所述第二复合物中的第二组分与第一固相载体分离后执行如下（ⅰ）~（ⅳ）至少一项，然后检测反应体系中第二复合物的信号强度：

7.根据权利要求1~6任一项所述的分析物测定方法，其特征在于，信号物与第二复合物通过第一可切割模块连接；

8.根据权利要求1~7任一项所述的分析物测定方法，其特征在于，所述测定方法包括非均相的测定方法，进一步为非均相的免疫测定方法，更进一步为化学发光测定方法；

9.用于分析物测定的试剂盒，其特征在于，包含权利要求1~8任一项中所述的第一组分、所述的第二组分和所述的第三组分。

10.一种分析物测定装置，其特征在于，包括：存储模块和处理模块；