一种参芪醒脑颗粒多组分含量测定方法与流程

本发明涉及一种参芪醒脑颗粒的多组分含量测定方法，尤其涉及一种基于hplc同时测定参芪醒脑颗粒中5种成分的方法，属于中药制剂分析领域。

背景技术：

1、参芪醒脑颗粒是总结医院长期临床用药经验基础上提炼而得的治疗老年痴呆常用方剂，由黄芪、人参、丹参、泽泻、黄芩等药味组成，具有显著的临床治疗效果。本方中黄芪、人参为君药，以遵循《黄帝内经》中“精不足者，补之以味，皆上行至脑，以为生化之源”。黄芪补诸虚不足，壮脾胃，使脾气化功能得复，则水谷精微濡养脑窍，气血津精上荣髓海，则脑得所养、神机得用。臣以丹参等，活血祛瘀、凉血消痈、除烦安神、泄热渗湿、化浊降脂。佐以黄芩等，清热燥湿、泻火解毒，苦寒可直折君火，以去除体内内生之痰毒、瘀毒、热毒。诸药合用，益气生髓、活血祛瘀通络，化湿祛浊，清热解毒，瘀血、痰浊、湿热、邪毒得消而邪去正安，既可补肾精之不足而填充脑髓，又可使气血运行通畅，杜绝痰浊、血瘀等病理因素的产生，又可使产生之痰浊、瘀血消散，并使内生之痰浊瘀血等蕴积日久转化成热毒消解。

2、参芪醒脑颗粒是中药复方制剂，含多味中药且化学成分复杂，对其进行有效的质量控制是保证其临床疗效的重要基础。目前，尚未见有专利公开及文献报道参芪醒脑颗粒含量测定方法，本发明公开了一种以hplc同时进行参芪醒脑颗粒中5种成分的含量测定方法，可实现制剂中5种成分的精准定量及制剂质量的全面评价和控制，保证产品质量的稳定性及临床用药的安全性和有效性，为参芪醒脑颗粒质量标准提升提供重要数据参考。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题，是在现有技术的基础上，进一步优化检测方法，实现单次进样同时测定参芪醒脑颗粒中黄芩苷、丹酚酸b、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素5种成分的hplc含量测定合而为一，提出一种更加全面、准确的参芪醒脑颗粒检测新方法。

2、本发明技术目的是提供一种参芪醒脑颗粒液的多组分含量测定方法，所述参芪醒脑颗粒由黄芪、人参、丹参、泽泻、黄芩五味中药，经提取、纯化制成。其中，黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素是黄芩中的成分，丹酚酸b是丹参中的成分。

3、本发明采用高效液相色谱法同时测定制剂中黄芩苷、丹酚酸b、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量，实现对参芪醒脑颗粒质量的全面评价和控制，从而为参芪醒脑颗粒的真伪鉴别和内在质量优劣检测提供准确的依据。具体包括以下步骤：

4、a、供试品溶液的制备：取参芪醒脑颗粒，加入30%-70%甲醇，超声提取，放冷，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；

5、b、对照品溶液的制备：取黄芩苷、丹酚酸b、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素对照品适量，加入30%-70%甲醇溶解后定容，即得；

6、c、hplc色谱条件：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，以0.05%-0.2%磷酸溶液为流动相a，以为乙腈流动相b，采用梯度洗脱；检测波长：200-280nm；流速：0.6-1.0ml/min；柱温：20-30℃，进样量5-10μl；

7、d、测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，按照步骤c所述色谱条件测定，即得。

8、优选地，步骤a、步骤b所述甲醇溶液为50％甲醇。

9、优选地，步骤a所述超声功率为200-400w，超声频率为30-50khz，超声时间为15-40min。

10、进一步优选，步骤a所述超声功率为250w，超声频率为40khz，超声时间为30min。

11、优选地，步骤c所述梯度洗脱条件为：0-10min，100%-88%a；10-12min，88%-82%a；12-40min，82%-60%a；40-43min，60%-50%a；43%-46min，50%-30%a；46-47min，30%-10%a；47-55min，10%a。

12、优选地，步骤c所述的色谱柱为agilent infinity lab poroshell 120 sb aq色谱柱，规格为4.6×250mm，4.0μm。

13、优选地，步骤c所述流动相a为0.1%磷酸溶液。

14、优选地，步骤c所述流速为1.0ml/min。

15、优选地，步骤c所述检测波长254nm，柱温30℃，进样量5μl。

16、与现有技术相比，本发明的技术方案取得了以下有益技术效果：

17、1）本发明建立一种基于高效液相色谱法的参芪醒脑颗粒质量检测方法，实现一测多评，既提高检测效率，又节省试剂耗材和人工，降本增效、节能环保。

18、2）本发明用一种方法同时定量测定参芪醒脑颗粒中5种有效成分含量，实现对制剂质量的全面、精准评价，有利产品质量稳定。

19、3）本发明建立了参芪醒脑颗粒多成分含量测定的检测方法，参芪醒脑颗粒中5种有效成分的分离度较好，峰形对称，方法简单可靠，易于操作，可为参芪醒脑颗粒的质量评价提供参考。

1.一种参芪醒脑颗粒多组分含量测定方法，其特征在于，该方法采用高效液相色谱法同时测定制剂中黄芩苷、丹酚酸b、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括下列步骤：

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a、步骤b所述甲醇溶液为50％甲醇。

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤a所述超声功率为200-400w，超声频率为30-50khz，超声时间为15-40min。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，步骤a所述中超声功率为250w，超声频率为40khz，超声时间为30min。

6.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤c所述梯度洗脱条件为：0-10min，100%-88%a；10-12min，88%-82%a；12-40min，82%-60%a；40-43min，60%-50%a；43%-46min，50%-30%a；46-47min，30%-10%a；47-55min，10%a。

7.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤c所述的色谱柱为agilent infinitylab poroshell 120 sb aq色谱柱，规格为4.6×250mm，4.0μm。

8.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤c所述流动相a为0.1%磷酸溶液。

9.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤c所述流速为1.0ml/min。

10.如权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤c所述检测波长254nm，柱温30℃，进样量5μl。