多效耦合破壁小分子灵芝原浆制备方法及其吸收强化应用与流程

本发明涉及保健品，具体为一种多效耦合破壁小分子灵芝原浆制备方法及其吸收强化应用。

背景技术：

1、灵芝的核心功效成分为灵芝多糖和灵芝三萜，同时甾醇类、核苷类、蛋白质等也具备相应活性，各类成分协同构成了灵芝的药用价值基础。灵芝三萜是灵芝最主要的标志性活性成分，目前已从灵芝中分离出超过200种，包括灵芝酸、灵芝烯酸等结构类型，具备抗炎、保肝、调节血脂、抗肿瘤、镇静安神等药理活性。灵芝多糖是由葡萄糖等单糖组成的生物大分子，是灵芝另一核心功效成分，具备免疫调节、抗氧化、调节血糖以及辅助抗肿瘤等功效。

2、此外，灵芝中的甾醇类物质以麦角甾醇为代表，可抑制肠道胆固醇吸收，调节血脂，同时也是维生素d的前体，可促进钙质吸收；核苷类以腺苷为代表，可扩张冠状动脉、改善微循环，增加心肌供血，保护心血管系统；灵芝免疫调节蛋白可刺激淋巴细胞增殖，部分蛋白还具备抗病毒活性；硒、有机锗等微量元素可增强抗氧化能力，提升血液携氧能力。

3、灵芝原浆是用于提取灵芝功效成分的中间产物，是以赤芝或紫芝为原料，经清洗、浸泡、粉碎等工艺制成的浆料，促进活性成分释放，以利于后续的提取工艺。灵芝细胞壁富含几丁质和纤维素，常规的碎浆工艺只能实现粉碎和均质化，而无法达到细胞级别的破碎，因此胞内活性成分释放仍不充分。灵芝破壁技术是一种通过低温物理碾压等方法打破几丁质外壳，以释放内部磷脂、多糖、三萜等有效成分并大幅提升人体吸收率的工艺。它在特定低温下操作，能避免破坏营养成分，确保营养保留完整。

4、目前灵芝破壁方法主要包括物理法和生化法，其中物理法以低温气流粉碎和超微机械研磨为主流，前者在超低温环境下用气流撞击孢子壁，最能保护灵芝酸等热敏营养，后者用球磨机物理撞击，成本低适合大规模生产，但可能因高温损失部分活性成分。生化法主要包括生物酶解法和化学处理法，前者用特定的酶分解细胞壁，条件温和不伤营养，但酶制剂成本高且耗时较长，用酸碱溶解细胞壁，虽破壁效果好但易有试剂残留，影响安全性，目前已很少使用。综合来看，目前常规的灵芝破壁方法在破壁效率和安全性方面仍不理想，而且，常规破壁方法只能实现细胞壁的破碎和胞内产物的释放，而功效成分仍以大分子形式存在，不利于提高产品的吸收性。

技术实现思路

1、本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种多效耦合破壁小分子灵芝原浆制备方法及其吸收强化应用，以解决常规破壁方法在破壁效率和安全性方面仍不理想的技术问题。

2、本发明要解决的另一技术问题是，如何进一步提高灵芝提取物产品的吸收性。

3、为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：

4、多效耦合破壁小分子灵芝原浆制备方法，包括以下步骤：

5、1）将灵芝全株清洗后粉碎、均质化处理，对所得匀浆进行酸处理，而后进行周期性的冷-热循环处理，得到初级处理产物；

6、2）将步骤1）所得的初级处理产物与酸溶液混合置于耐压反应器中，并密闭反应釜；向所述反应釜中通入惰性气体，使体系压力升高至预设值；随后将反应体系加热至预设温度，并进行搅拌；而后对将反应体系卸压至常压，得到二级处理产物；

7、3）将步骤2）所得的二级处理产物转移至有超临界co2流体的差压破壁仓内，进行超声处理；启动所述破壁仓内的电磁脉冲装置，进行三级脉冲处理；第一级脉冲的频率为50hz，电场强度为20kv/cm，作用时间为0.5s；第二级脉冲的频率为100hz，电场强度为15kv/cm，作用时间为0.3s；第三极脉冲的频率为200hz，电场强度为10kv/cm，作用时间为0.2s；而后，泄压至0.01mpa；得到三级处理产物；

8、4）将步骤3）所得的三级处理产物加入到密闭容器中，向其中加入纤维素酶、几丁质酶、果胶酶，调节ph至4.5~5.5，将体系升温至40℃~50℃，再对容器进行抽真空处理1.5h~2h，且真空压力为1000pa~1500pa；而后将体系温度升温至55℃~70℃，再使密闭容器在20s~60s内抽真空至3000pa~3500pa，而后恢复至常压，得到四级处理产物；

9、5）对步骤4）所得的四级处理产物调节ph和温度，向其中加入胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和β-葡萄糖苷酶，经酶解后升温灭酶，得到灵芝原浆。

10、作为优选，步骤1）所述的粉碎是由匀浆机实现的，处理转速为10000~20000rpm；均质化处理压力为15~25 mpa，温度为50~70℃。

11、作为优选，步骤1）中所述酸处理为醋酸，醋酸的终质量浓度为3.5%~5.0%。

12、作为优选，步骤1）中所述周期性的冷-热循环处理条件为：先降温至-4~-8℃，保持15~20min，再升温至70~75℃，保持10~12min，以此为一个周期，共处理3~4个周期。

13、作为优选，步骤2）中，体系压力升高至预设值为1.5~2个大气压，加热至预设温度为80~110℃，搅拌转速为200~400rpm。

14、作为优选，步骤2）中，所述卸压的速度是在20~40s内将体系压力降至常压。

15、作为优选，步骤3）中，所述超声处理的条件为：40khz变频超声波，功率密度100w/l。

16、作为优选，步骤5）中，调节ph的终点为5.5~6.5，调节温度的终点为40℃~45℃。

17、作为优选，步骤5）中，胰蛋白酶的终浓度为160u/g~240u/g，木瓜蛋白酶的终浓度为100u/g~160u/g，β-葡萄糖苷酶的终浓度为90u/g~130u/g，酶解时长为2~4h。

18、在以上技术方案的基础上，本发明进一步提供了上述灵芝原浆用于制备保健食品的应用。

19、本发明提供了一种多效耦合破壁小分子灵芝原浆制备方法及其吸收强化应用。该技术方案首先对灵芝原料进行粉碎和均质化处理，实现充分匀浆化，再执行酸-冻融循环，产生细胞级别的微裂隙、膨胀、再裂隙效应，达到一定程度的破壁目的；在此基础上，以惰性气体为介质，先升压再快速泄压，利用溶解气体的急剧膨胀增进破壁效果；而后，利用超声波使空化微射流在壁表制造微缺陷，再通过三级电磁脉冲加压处理，而后瞬间泄压，在破壁仓中利用超临界co2流体提升等离子体密度；经以上处理后，引入纤维素酶、几丁质酶和果胶酶，在动态压力下实现酶解破壁与物理破壁相结合。

20、最后，本发明采用胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和β-葡萄糖苷酶进行复合酶解。其中，胰蛋白酶能够水解灵芝中的多糖蛋白复合物，在释放多糖的同时并将蛋白质水解为小分子肽。木瓜蛋白酶可将大分子蛋白水解为小分子，而且能降解灵芝细胞壁中的蛋白质结构，削弱其完整性，从而辅助破壁过程，提升胞内多糖、蛋白与三萜的溶出率。β-葡萄糖苷酶能水解纤维二糖、纤维寡糖及糖苷键，协助破坏细胞壁结构，提高β-葡聚糖的溶出率，同时β-葡萄糖苷酶能转化多糖结构，降低分子量。

21、本发明提供了一种多效耦合破壁小分子灵芝原浆制备方法及其吸收强化应用。该技术方案将超声空化、气体膨胀、冻融循环以及酶解处理相结合，有效提升了破壁效率，而且本发明基于酶解工艺将功效成分充分小分子化，不仅增加了溶出率，而且显著提高了吸收性。