基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台及其制备方法、应用与流程

技术特征：
1.一种基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台，其特征在于，包括：复合物，所述复合物包括：cas9蛋白内核，吸附在所述cas9蛋白内核的褶皱间隙中的光敏剂以及吸附在所述cas9蛋白内核表面的用于靶向pd-l1的sgrna质粒；阳离子聚合物膜，所述阳离子聚合物膜覆盖在所述复合物的表面；阴离子聚合物膜，所述阴离子聚合物膜覆盖所述阳离子聚合物膜的表面。2.根据权利要求1所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台，其特征在于，所述光敏剂为带正电荷的聚集诱导发光小分子有机物。3.根据权利要求1所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台，其特征在于，所述阳离子聚合物膜的材质为聚乙烯亚胺或其改性物。4.根据权利要求1所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台，其特征在于，所述阴离子聚合物膜的材质为透明质酸、聚谷氨酸或聚丙烯酸。5.根据权利要求2所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台，其特征在于，所述聚集诱导发光小分子有机物选自：中的任一种。6.一种权利要求1所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台的制备方法，其特征在于，包括：将光敏剂溶液加入到cas9蛋白溶液中，得到混合物；对所述混合物进行涡旋处理，得到透明溶液；向所述透明溶液中加入用于靶向pd-l1的sgrna质粒，预定时间后，依次加入阳离子聚合物水溶液、阴离子聚合物水溶液，经超滤处理，得到基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台。7.根据权利要求6所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台的制备方法，其特征在于，所述光敏剂溶液的浓度为0.5-2mg/ml；所述cas9蛋白溶液的浓度为800-900μg/ml；所述阳离子聚合物水溶液的浓度为0.8-1.5mg/ml，阴离子聚合物水溶液的浓度为0.8-1.5mg/ml。8.根据权利要求6所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台的制备方
法，其特征在于，所述用于靶向pd-l1的sgrna质粒的浓度为0.5-1.5mg/ml；所述阳离子聚合物水溶液的浓度为0.8-1.5mg/ml，阴离子聚合物水溶液的浓度为0.8-1.5mg/ml。9.根据权利要求6所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台的制备方法，其特征在于，所述预定时间为8-15min。10.一种如权利要求1所述的基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台在制备肿瘤免疫治疗药物中的应用。

技术总结
本发明公开的一种基于聚集诱导发光和基因编辑的多功能纳米平台及其制备方法、应用。纳米平台包括：复合物，所述复合物包括：Cas9蛋白内核，吸附在所述Cas9蛋白内核的褶皱间隙中的光敏剂以及吸附在所述Cas9蛋白内核表面的用于靶向PD-L1的sgRNA质粒；阳离子聚合物膜，所述阳离子聚合物膜覆盖在所述复合物的表面；阴离子聚合物膜，所述阴离子聚合物膜覆盖所述阳离子聚合物膜的表面。通过Cas9蛋白的核定位序列(NLS)促进随后的核转运。阴离子聚合物，可以为血液循环提供带负电荷的表面，并靶向细胞表面分化簇44(CD44)受体，在各种肿瘤细胞中高度表达，以提高肿瘤靶向效率。在近红外激光照射下提供足够的ROS/热量和优异的成像性能。实现了有效的癌症光疗。现了有效的癌症光疗。现了有效的癌症光疗。


技术研发人员：王媛玮 谭回 王东 麻晓鹏 唐本忠
受保护的技术使用者：深圳市儿童医院
技术研发日：2023.07.28
技术公布日：2023/10/24