一种稳定的多剂量给药的GLP-1受体激动剂的制剂及其制备方法和应用与流程

一种稳定的多剂量给药的glp-1受体激动剂的制剂及其制备方法和应用
技术领域：
：1.本发明涉及医药领域，具体公开了一种稳定的多剂量给药的glp-1受体激动剂的制剂。
背景技术：
：：2.皮下注射司美格鲁肽注射液是药物减肥的手段之一。司美格鲁肽是glp-1受体激动剂，可以增强饱腹感和促进胰岛素分泌，且减肥效果优于同类型的利拉鲁肽。作为一种glp-1类似物，它对肥胖症的治疗是多种机制的结合。首先，它们在下丘脑水平和胃排空减慢时的联合厌食作用导致在个体内水平有限的底物可用性。另一方面，它们对bat(棕色脂肪组织)能量消耗的影响，以及可能对wat(白色脂肪组织)褐变或肝脂质氧化的影响，将导致内源性脂质存储的耗竭。3.目前诺和诺德公司将司美格鲁肽注射液分为减肥制剂和降糖制剂两种。降糖制剂为多剂量给药制剂，降糖制剂的临床给药方案是按照0.25mg-0.5mg-1mg(每周给药量)的给药梯度递进，降糖制剂的司美格鲁肽浓度为1.34mg/ml；减肥制剂为单剂量给药制剂，减肥制剂的临床给药方案是按照0.25mg-0.5mg-1mg-1.7mg-2.4mg(每周给药量)的给药梯度递进，减肥制剂的司美格鲁肽浓度分为0.5mg/ml、1mg/ml、2mg/ml、2.27mg/ml、3.2mg/ml共5种浓度。但是，减肥制剂为单剂量给药制剂，一次性给药装置在制剂包装上实现难度高，成本过高，而降糖制剂的稳定性仍有提升空间。4.cn112912100a公开了一种稳定的司美鲁肽组合物及其用途，其包含司美鲁肽、等渗剂和组氨酸，采用组氨酸作为稳定剂，但是该含有组氨酸的处方在光照后易变色，且高分子蛋白和有关物质的增长速度仍偏高。5.cn111050750a公开了一种司美鲁肽的液体药物组合物，其包含司美鲁肽和不超过0.01％(w/w)的苯酚，用于肠胃外给药，但是该组合物仅可用于单剂量给药制剂，相比于多剂量给药制剂，增加了患者用药成本；该组合如果用于多剂量给药制剂，其稳定性显著下降。6.因此，本领域中仍然存在开发多剂量给药时、更加稳定的glp-1受体激动剂的制剂如司美格鲁肽注射液、利拉鲁肽注射液的需要。技术实现要素：7.针对以上技术现状，本发明提供了一种稳定性更高且可多剂量给药的glp-1受体激动剂的制剂。8.本发明所述稳定的多剂量给药的glp-1受体激动剂的制剂包含稳定剂，其中所述稳定剂选自还原型谷胱甘肽或麦角硫因，优选还原型谷胱甘肽。9.本发明中，作为实施方案之一，所述glp-1受体激动剂为glp-1或其类似物；优选司美格鲁肽或利拉鲁肽。10.本发明中，作为实施方案之一，所述glp-1受体激动剂为司美格鲁肽时，所述稳定剂的浓度为0.15-18mg/ml，优选0.31-18mg/ml；所述glp-1受体激动剂为利拉鲁肽时，所述稳定剂的浓度为0.15-36mg/ml，优选0.31-36mg/ml；作为示例性说明，所述稳定的浓度可以为0.15mg/ml、0.31mg/ml、1.54mg/ml、3.07mg/ml、4.61mg/ml、18mg/ml、19mg/ml、20mg/ml、21mg/ml、22mg/ml、23mg/ml、24mg/ml、25mg/ml、26mg/ml、27mg/ml、28mg/ml、29mg/ml、30mg/ml，31mg/ml、32mg/ml、33mg/ml、34mg/ml、35mg/ml、或36mg/ml。11.本发明中，作为实施方案之一，稳定的多剂量给药的glp-1受体激动剂的制剂还包含渗透压调节剂、抑菌剂、ph缓冲剂和ph调节剂。12.本发明中，作为实施方案之一，所述抑菌剂为苯酚、间甲酚、或苯甲醇，或它们中两种或两种以上的组合；优选苯酚。13.本发明中，作为实施方案之一，所述抑菌剂为4.4-6.6mg/ml的苯酚，优选5.5mg/ml苯酚。14.本发明中，作为实施方案之一，所述渗透压调节剂为丙二醇。15.本发明中，作为实施方案之一，所述丙二醇的浓度为14mg/ml。16.本发明中，作为实施方案之一，所述ph缓冲剂为磷酸氢二钠，优选无水磷酸氢二钠。17.本发明中，作为实施方案之一，所述无水磷酸氢二钠的浓度为1.13mg/ml。18.本发明中，作为实施方案之一，所述ph调节剂包括调酸物料和/或调碱物料，所述调酸物料为稀盐酸，所述调碱物料为氢氧化钠。19.本发明中，作为实施方案之一，所述制剂为注射剂；作为实施方案之一，优选所述注射剂的ph值为6.9～8.4。20.本发明中，作为实施方案之一，所述制剂包括注射用水作为溶剂。21.本发明中，作为实施方案之一，所述glp-1受体激动剂为司美格鲁肽，其浓度为0.5-4mg/ml，优选1.34-3.2mg/ml，更优选1.34或3.2mg/ml；作为实施方案之一，所述稳定剂为还原型谷胱甘肽，其浓度为0.15-18mg/ml，优选0.31-18mg/ml。22.本发明中，作为实施方案之一，当glp-1受体激动剂为司美格鲁肽时，所述制剂的ph范围为6.9-7.65，优选范围是7.15-7.65，更优选ph为7.4。23.本发明中，作为实施方案之一，所述制剂进一步包括：24.1.34mg/ml或3.2mg/ml的司美格鲁肽、14mg/ml的丙二醇、1.13mg/ml的无水磷酸氢二钠、5.5mg/ml的苯酚、和0.15～18mg/ml的还原型谷胱甘肽；25.优选1.34mg/ml或3.2mg/ml的司美格鲁肽、14mg/ml的丙二醇、1.13mg/ml的无水磷酸氢二钠、5.5mg/ml的苯酚、和0.31-18mg/ml的还原型谷胱甘肽。26.本发明中，作为实施方案之一，所述制剂进一步由27.[0028][0029]稀盐酸和/或氢氧化钠调ph至7.40，和注射用水；[0030]或[0031][0032]稀盐酸和/或氢氧化钠调ph至7.40，和注射用水；[0033]组成。[0034]本发明中，作为实施方案之一，所述glp-1受体激动剂为利拉鲁肽，其浓度为6mg/ml；所述稳定剂为还原型谷胱甘肽，其浓度为0.15～36mg/ml，优选0.31～36mg/ml。[0035]本发明中，作为实施方案之一，当所述glp-1受体激动剂为利拉鲁肽时，所述制剂的ph范围为7.9-8.4，优选ph为8.15。[0036]本发明中，作为实施方案之一，所述制剂进一步包括：[0037]6mg/ml的利拉鲁肽、14mg/ml的丙二醇、1.13mg/ml的无水磷酸氢二钠、5.5mg/ml的苯酚、和0.15-36mg/ml的还原型谷胱甘肽。[0038]制备前述任一所述制剂的方法，所述方法包括：[0039](1)将处方量的ph缓冲剂、渗透压调节剂、抑菌剂和稳定剂溶解于水中；[0040](2)将处方量的glp-1受体激动剂溶解于步骤(1)所得溶液中，使用氢氧化钠和/或稀盐酸调节ph；[0041](3)最终经0.22μm无菌过滤器过滤来对步骤(2)所得制剂进行除菌。[0042]本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括：步骤(2)中，当所述glp-1受体激动剂为司美格鲁肽时，将ph调节至7.4；当所述glp-1受体激动剂为利拉鲁肽时，将ph调节至8.15。[0043]本发明方法中，作为实施方案之一，所述方法进一步包括：将步骤(3)所得制剂灌装到卡式瓶中，形成笔芯。[0044]本发明还提供一种前述任一制剂或前述任一方法制备的制剂在制备治疗减肥、降糖、治疗非酒精性脂肪肝、治疗神经系统疾病或治疗心血管疾病药物中的应用。作为实施方案之一，所述神经系统疾病包括老年痴呆。[0045]本发明中，“司美格鲁肽”与“司美鲁肽”是同一种化合物不同时期翻译，现用通用名是司美格鲁肽。[0046]技术效果：[0047]1.本发明筛选确定的稳定剂还原型谷胱甘肽或麦角硫因对司美格鲁肽的稳定效果显著优于现有技术中的稳定剂组氨酸，也能提高利拉鲁肽注射液的稳定性。[0048]2.本发明制剂在稳定性上有显著改善，尤其是与临床安全性和临床免疫原性相关的高分子蛋白大幅降低，本制剂的临床安全性更高。[0049]3.本发明制剂光照后不会变色，而现有技术专利申请“cn112912100a-稳定的司美鲁肽组合物及其用途”中的处方会变色。[0050]4.本发明制剂适用于多剂量给药，制剂的稳定性显著优于现有处方组合。具体实施方式[0051]以下实施例用于进一步阐述本发明，但不以任何的方式限制本发明的有效范围。[0052]以下实施例或实验例中如果没有特别说明，其具体条件如下：[0053]通用方法和表征[0054]司美格鲁肽注射液的制备(降糖制剂工艺)：[0055]除非另有说明，否则司美格鲁肽的制剂组合物如下制备：将ph缓冲剂(无水磷酸氢二钠)、渗透压调节剂(丙二醇或氯化钠)、抑菌剂(苯酚、苯甲醇或间甲酚)和稳定剂(还原型谷胱甘肽等)等所有辅料溶解于水中。将司美格鲁肽溶解于其中，使用氢氧化钠和/或稀盐酸将ph调节至7.4，并且最终通过经0.22μm无菌过滤器过滤来对制剂组合物进行除菌。将司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中，形成笔芯。[0056]测定(i)：司美格鲁肽注射液的高分子蛋白(hmwp)含量的测定[0057]hmwp含量的测定使用大小排阻色谱法(se-hplc)进行，其中使用watersinsulinhmwp柱，药液除过滤外无需前处理，进样量为5μl，流动相为氯化钠、磷酸钠、磷酸和异丙醇，等度洗脱，并在280nm处检测，在0-40min内洗脱出峰。hmwp的含量以早于司美格鲁肽单体峰洗脱下来的色谱峰(即hmwp峰)的合并面积相对于hmwp和司美格鲁肽单体峰的总面积的百分比给出。结果呈现为绝对值和/或每日增加百分比。(具体参考wo2020/084126a1)[0058]测定(ii)：司美格鲁肽制剂组合物中的有关物质(总杂质、亲水杂质、疏水杂质1、疏水杂质2)的测定[0059]司美格鲁肽制剂组合物的有关物质的测定使用反相高效液相色谱法(rp-hplc)来进行。rp-hplc方法在kinetexc18柱上进行，药液除过滤外无需前处理，进样量为5μl，其开始于等度洗脱，随后是使用洗脱液a(90％0.09m磷酸盐缓冲液，ph3.6，和10％乙腈)和洗脱液b(60％乙腈和20％异丙醇)从约50：50至10：90，然后回到约50：50的a：b的梯度洗脱。在210nm处进行检测，在0-50min内洗脱出峰。(具体参考wo2020/084126a1)[0060]亲水杂质被计算为色谱图中早于司美格鲁肽峰洗脱下来的所有峰的面积相对于所有峰的总面积；疏水性杂质1被计算为色谱图中司美格鲁肽与开始最终梯度之间洗脱下来的所有峰的面积相对于所有峰的总面积；疏水性杂质2被计算为色谱图中开始最终梯度后洗脱下来的所有峰的面积相对于所有峰的总面积；总杂质被计算为亲水杂质与疏水杂质1、疏水杂质2的总和。[0061]测定(iii)：司美格鲁肽注射液的含量的测定[0062]司美格鲁肽注射液的含量的测定使用反相高效液相色谱法(rp-hplc)来进行。rp-hplc方法在kinetexc18柱上进行，药液除过滤外无需前处理，进样量为5μl，其开始于等度洗脱，随后是使用洗脱液a(90％0.09m磷酸盐缓冲液，ph3.6，和10％乙腈)和洗脱液b(60％乙腈和20％异丙醇)从约50∶50至10∶90，然后回到约50∶50的a∶b的梯度洗脱。在210nm处进行检测，在0-50min内洗脱出峰。按外标法以司美格鲁肽的峰面积计算其含量。(具体参考wo2020/084126a1)[0063]利拉鲁肽注射液的制备：[0064]除非另有说明，否则利拉鲁肽的制剂组合物如下制备：将ph缓冲剂(无水磷酸氢二钠)、渗透压调节剂(丙二醇)、抑菌剂(苯酚)和稳定剂(还原型谷胱甘肽等)等所有辅料溶解于水中。将利拉鲁肽溶解于其中，使用氢氧化钠和/或稀盐酸将ph调节至8.15，并且最终通过经0.22μm无菌过滤器过滤来对制剂组合物进行除菌。将利拉鲁肽注射液灌装到卡式瓶中，形成笔芯。[0065]测定(i)：利拉鲁肽注射液的高分子蛋白(hmwp)含量的测定[0066]hmwp含量的测定使用大小排阻色谱法(se-hplc)进行，其中使用watersinsulinhmwp柱，药液除过滤外无需前处理，进样量为5μl，流动相为氯化钠、磷酸钠、磷酸和异丙醇，等度洗脱，并在280nm处检测，在0-40min内洗脱出峰。hmwp的含量以早于利拉鲁肽单体峰洗脱下来的色谱峰(即hmwp峰)的合并面积相对于hmwp和利拉鲁肽单体峰的总面积的百分比给出。结果呈现为绝对值和/或每日增加百分比。(具体参考wo2020/084126a1)[0067]实施例1抑菌剂种类的影响[0068]本发明对预选抑菌剂的种类进行了筛选研究，组合1包括0.15mg/ml苯酚 2.7mg/ml间甲酚(1.6mm苯酚 25mm间甲酚)；组合2包括0.15mg/ml苯酚 10mg/ml苯甲醇(1.6mm苯酚 92.5mm苯甲醇)；组合3为5.5mg/ml苯酚。本次实验样品的处方表如表1所示。[0069]表1含不同抑菌剂的司美格鲁肽注射液处方表[0070][0071]采用通用方法和表征中司美格鲁肽降糖制剂相同的工艺，将表1中司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下或“25℃、45001x±5001x光照”(光照)条件下，并随时间推移观察化学稳定性。结果在表2中提供，表中的化学稳定性通过相关质量项的平均日增长速率(％/天)表示，数值越大代表制剂稳定性越差。[0072]表2不同抑菌剂对司美格鲁肽注射液稳定性的影响[0073][0074][0075]由表2中的数据可知，抑菌剂的种类对注射液的稳定性存在影响。在高温条件下，抑菌剂的选择顺序是苯酚优先于间甲酚优先于苯甲醇；在光照条件下，抑菌剂的选择顺序是苯甲醇优先于苯酚优先于间甲酚。因此，本发明后期的研究中抑菌剂选用苯酚。[0076]实施例2苯酚浓度对制剂稳定性的影响[0077]本实施例的目的在于确定苯酚的用量范围。本次实验通过6组添加不同浓度的苯酚制剂的对比，选择达到抑菌效果和稳定效果的合适的苯酚浓度。本次实验样品的处方表如表3所示。[0078]表3含不同浓度苯酚的司美格鲁肽注射液处方表[0079][0080]实验组采用通用方法和表征中司美格鲁肽降糖制剂相同的工艺，将表3中司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下，测量0天抑菌效力，并随时间推移观察化学稳定性变化。结果在表4及表5中提供，表中的化学稳定性通过相关质量项的平均日增长速率(％/天)表示，数值越大代表制剂稳定性越差。(具体参考《中国药典》四部通则1121抑菌效力检查法)[0081]表4含不同浓度苯酚的司美格鲁肽注射液抑菌效力结果-1[0082][0083][0084]表5不同浓度苯酚对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-2[0085][0086]由表4中的结果可知，苯酚的浓度为4.4mg/ml-6.6mg/ml时，在高浓度及低浓度司美格鲁肽注射液的抑菌效力至少能达到b级，苯酚均能达到抑菌效果。由表5中的数据可知，制剂中加入还原型谷胱甘肽做稳定剂，苯酚的浓度变化对制剂的化学稳定性无影响。因此，苯酚的浓度范围为4.4mg/ml-6.6mg/ml，为与原研处方中苯酚浓度一致，优选5.5mg/ml。[0087]实施例3渗透压调节剂种类的影响[0088]氯化钠和丙二醇已经作为渗透压调节剂应用于司美格鲁肽注射液，证明氯化钠、丙二醇与司美格鲁肽的相容性良好，可以作为渗透压调节剂备选。但是本发明相比于原研减肥制剂，增加了抑菌剂和稳定剂，因此仍需考虑渗透压调节剂与本发明处方的相容性是否合适。本次实验通过2组实验(氯化钠组和丙二醇组各3批次样品)对比，选择合适的渗透压调节剂。本次实验样品的处方表如表6所示。[0089]表6含不同渗透压调节剂的司美格鲁肽注射液处方表[0090][0091]采用通用方法和表征中司美格鲁肽降糖制剂相同的工艺，将表6中司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下或“25℃、4500lx±5001x光照”(光照)条件下，测量渗透压并随时间推移观察性状、含量及化学稳定性变化。结果在表7及表8中提供，含量有明显的降低的实验组是由于不相容组分产生了司美格鲁肽的沉淀，在进样前通过过滤去除沉淀部分而导致；表中的化学稳定性通过相关质量项的平均日增长速率(％/天)表示，数值越大代表制剂稳定性越差；由于氯化钠组高温条件下的高分子蛋白和有关物质是过滤后进样，检测结果不能体现样品高温后的真实质量，因此仅对比光照条件下的化学稳定性。[0092]表7不同渗透压调节剂对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-1[0093][0094][0095]表8不同渗透压调节剂对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-2[0096][0097]由表7中的结果可知，在抑菌剂苯酚和稳定剂同时存在的处方中，选用氯化钠会出现沉淀和含量显著降低，并且目前处方中8.25mg/ml的氯化钠作为渗透压调节剂会导致渗透压偏高，而14mg/ml的丙二醇作为渗透压调节剂则渗透压合适。由表8中的数据可知，丙二醇组的化学稳定性明显高于氯化钠组。因此，本发明的渗透压调节剂可选丙二醇。[0098]实施例4稳定剂种类的影响[0099]本发明的稳定剂选择的是具有被氧化性的6种辅料：组氨酸、甲硫氨酸、肌肽、还原型谷胱甘肽、麦角硫因、过氧化氢，并在实验中分别验证了其对司美格鲁肽注射液稳定性的影响。所选择的稳定剂均在食品、药品、化妆品或保健品领域均有广泛应用，甚至其中除肌肽和麦角硫因外全部被药典收录。本发明制剂采用皮下注射方式给药。专利wo2020084126(a1)stablesemaglutidecompositionsandusesthereof中组氨酸的用量为10mm，本次预实验稳定剂的用量暂定为12.5mm。[0100]稳定剂种类的选择研究按照渗透压调节剂的种类分为2组试验进行。实验组1中的渗透压调节剂为氯化钠，由于高温条件下司美格鲁肽析出，高温下的检测结果无法反映样品实际杂质变化情况，因此该组稳定剂的筛选仅通过光照条件下制剂化学稳定性确定。实验组2中的渗透压调节剂改为丙二醇，稳定剂的筛选通过高温条件下和光照条件下制剂化学稳定性综合确定。本次实验的对照组为4组，分别对照药组(低浓度组)、对照药组(高浓度组)、降糖制剂组及专利组氨酸组，分别与目前公开的司美格鲁肽处方组合(包括降糖制剂处方和减肥制剂处方)做对比，并且与现有专利申请中的组氨酸作稳定剂的处方组合(专利申请中的组氨酸浓度为10mm)对比。本次研究的处方表如表9所示。[0101]表9不同稳定剂对司美格鲁肽注射液稳定性的影响研究处方表[0102][0103][0104]实验组和对照组均采用通用方法和表征中司美格鲁肽降糖制剂相同的工艺，将表9中司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下或“25℃、45001x±500lx光照”(光照)条件下，随时间推移观察性状、含量及化学稳定性变化。结果在表10和表11中提供，含量有明显的降低的实验组是由于不相容组分产生了司美格鲁肽的沉淀，在进样前通过过滤去除沉淀部分而导致；表中的化学稳定性通过相关质量项的平均日增长速率(％/天)表示，数值越大代表制剂稳定性越差；由于实验组1高温条件下的高分子蛋白和有关物质是过滤后进样，检测结果不能体现样品高温后的真实质量，因此实验组1仅对比光照条件下的化学稳定性。[0105]表10不同稳定剂对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-1[0106][0107]表11不同稳定剂对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-2[0108][0109][0110]对比表10中各组样品的性状可知，司美格鲁肽注射液中加入除还原型谷胱甘肽外的稳定剂，均会导致制剂在光照条件下变色。[0111]分别对比表11中实验组与对照组的化学稳定性。本次对比中，若实验组的日增长速率与对照组的日增长速率的差值大于降糖原研制剂的3批平行样品的日增长速率的3sd，则表明日增长速率较小的组有显著优势。标准如下：高温条件下，高分子蛋白日增长速率小于降糖原研3批的误差范围0.02％/天(3sd)，总杂质日增长速率小于降糖原研3批的误差范围0.01％/天(3sd)；光照条件下，高分子蛋白日增长速率小于降糖原研3批的误差范围0.07％/天(3sd)，总杂质日增长速率小于降糖原研3批的误差范围0.20％/天(3sd)。[0112]由表11中的数据可知，对比12.5mm的组氨酸组和10mm的组氨酸组：在高温条件下，组氨酸的浓度对制剂的高温稳定性无影响；在光照条件下，组氨酸的浓度对制剂的光照稳定性无影响。在本次研究范围内(10mm-12.5mm)，组氨酸浓度对司美格鲁肽的稳定效果无影响。[0113]由表11中的数据可知，对比添加稳定剂的各实验组和降糖制剂组：在高温条件下，实验组2中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽、组氨酸(按功能由强至弱排序)；在光照条件下，实验组1中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽、肌肽(按功能由强至弱排序)，实验组2中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽、麦角硫因、组氨酸、甲硫氨酸(按功能由强至弱排序)。因此，选择还原型谷胱甘肽作稳定剂可使司美格鲁肽注射液的高温稳定性显著优于降糖制剂；选择还原型谷胱甘肽、麦角硫因、组氨酸、甲硫氨酸、肌肽、作稳定剂可使司美格鲁肽注射液的光照稳定性显著优于降糖制剂；过氧化氢则会导致制剂的稳定性变差。[0114]由表11中的数据可知，对比添加稳定剂的各实验组和对照药组：在高温条件下，实验组2中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽；在光照条件下，实验组1中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽、肌肽(按功能由强至弱排序)，实验组2中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽、麦角硫因、组氨酸、甲硫氨酸(按功能由强至弱排序)。因此，选择还原型谷胱甘肽作稳定剂可使司美格鲁肽注射液的高温稳定性显著优于原研减肥制剂；选择还原型谷胱甘肽、麦角硫因、组氨酸、甲硫氨酸、肌肽作稳定剂可使司美格鲁肽注射液的光照稳定性显著优于原研减肥制剂。[0115]由表11中的数据可知，对比添加稳定剂的各实验组和专利组氨酸组：在高温条件下，实验组2中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽；在光照条件下，实验组1中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽，实验组2中对制剂化学稳定性有显著优势的稳定剂是还原型谷胱甘肽、麦角硫因(按功能由强至弱排序)。因此，选择还原型谷胱甘肽作稳定剂可使司美格鲁肽注射液的高温稳定性显著优于含组氨酸组；选择还原型谷胱甘肽、麦角硫因作稳定剂可使司美格鲁肽注射液的光照稳定性显著优于含组氨酸组。[0116]实施例5还原型谷胱甘肽浓度对制剂稳定性的影响[0117]本实施例的目的在于确定还原型谷胱甘肽的用量范围。本次实验通过7组添加不同浓度的还原型谷胱甘肽制剂与不添加还原型谷胱甘肽制剂的对比，选择达到稳定效果的合适的还原型谷胱甘肽浓度。本次实验样品的处方表如表12所示。[0118]表12含不同浓度还原型谷胱甘肽的司美格鲁肽注射液处方表[0119][0120]实验组和对照组采用通用方法和表征中司美格鲁肽降糖制剂相同的工艺，将表12中司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下或“25℃、4500lx±5001x光照”(光照)条件下，测量渗透压并随时间推移观察性状、含量及化学稳定性变化。结果在表13及表14中提供，含量有明显的降低的实验组是由于不相容组分产生了司美格鲁肽的沉淀，在进样前通过过滤去除沉淀部分而导致；表中的化学稳定性通过相关质量项的平均日增长速率(％/天)表示，数值越大代表制剂稳定性越差；由于含谷胱甘肽浓度过高组的制剂在高温或光照下出现沉淀，稳定性检测中为过滤后进样，因此去除过滤后进样样品的检测结果。[0121]表13不同浓度还原型谷胱甘肽对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-1[0122][0123]表14不同浓度还原型谷胱甘肽对司美格鲁肽注射液稳定性的影响-2[0124][0125]注：“na”代表影响因素实验后注射液中产生沉淀，无结果。[0126]由表13中的结果可知，在还原型谷胱甘肽的浓度达到36mg/ml时，注射液经影响因素实验后会产生沉淀和含量显著降低；在还原型谷胱甘肽的浓度小于0.15mg/ml时，注射液在光照后变色。由表14中的数据可知，还原型谷胱甘肽的用量在0.31-18mg/ml范围内时，还原型谷胱甘肽对注射液的稳定效果显著。因此，本发明的还原型谷胱甘肽的用量范围为0.15-18mg/ml，优选0.31-18mg/ml。[0127]实施例6还原型谷胱甘肽在利拉鲁肽中的应用[0128]利拉鲁肽和司美格鲁肽同为一种天然物质——人类胰高血糖素肽-1(glp-1(1-37))的类似物。司美格鲁肽与人glp-1的序列同源性为94％，而利拉鲁肽与人glp-1的序列同源性达到97％，两者在结构上相似性较大。利拉鲁肽目前的适应症也是降糖和减肥，但是在作用时间与效果上与司美格鲁肽稍有差异。本次实验将还原型谷胱甘肽作为稳定剂应用于利拉鲁肽注射液，探究稳定剂的适用范围是否可以扩展至glp-1系列物质。本次实验样品的处方表如表15所示。[0129]表15含不同浓度还原型谷胱甘肽的利拉鲁肽注射液处方表[0130][0131]注：利拉鲁肽注射液的制剂终ph为8.15。[0132]采用通用方法和表征中利拉鲁肽注射液的制备方法，将表15中利拉鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下或“25℃、4500lx±500lx光照”(光照)条件下，观察性状变化，测量高分子蛋白稳定性变化。结果在表16及表17中提供。[0133]表16不同浓度还原型谷胱甘肽对利拉鲁肽注射液稳定性的影响-1[0134][0135]表17不同浓度还原型谷胱甘肽对利拉鲁肽注射液高分子蛋白的影响[0136][0137]注：“na”代表影响因素实验后注射液中产生沉淀，无结果。[0138]由表16中的结果可知，在还原型谷胱甘肽的浓度达到72mg/ml时，注射液经影响因素实验后会产生沉淀。由表17中的数据可知，还原型谷胱甘肽的用量在0.31-36mg/ml范围内时，还原型谷胱甘肽对注射液的稳定效果显著。因此，本发明的还原型谷胱甘肽的用量范围为0.15-36mg/ml，优选0.31-36mg/ml。[0139]实施例7含还原型谷胱甘肽的司美格鲁肽注射液稳定性研究[0140]稳定剂还原型谷胱甘肽的浓度为0.31mg/ml，按照处方表18，采用通用方法和表征中司美格鲁肽降糖制剂相同的工艺，将司美格鲁肽注射液灌装到卡式瓶中形成笔芯。将笔芯保存在“40℃避光”(高温)条件下或“25℃、4500lx±500lx光照”(光照)条件下，随时间推移测量渗透压并观察性状、含量及化学稳定性变化。结果在表19及表20中提供。表中的化学稳定性通过相关质量项的平均日增长速率(％/天)表示，数值越大代表制剂稳定性越差；表中高浓度制剂的光照稳定性数据偏大有一部分原因是由于实验中叠加了部分时间高温的结果。[0141]表18含还原型谷胱甘肽的司美格鲁肽注射液处方表[0142][0143]表19含还原型谷胱甘肽的司美格鲁肽注射液的稳定性-1[0144][0145][0146]表20含还原型谷胱甘肽的司美格鲁肽注射液的稳定性-2[0147][0148]由表19和表20中的数据可知，不论司美格鲁肽的浓度为3.2mg/ml还是1.34mg/ml，加入0.31mg/ml的还原型谷胱甘肽均可有效提高司美格鲁肽注射液的稳定性。当前第1页12当前第1页12