一种用于3D细胞培养的孔板的制作方法

一种用于3d细胞培养的孔板
技术领域
1.本实用新型涉及3d细胞培养技术领域，尤其涉及一种用于3d细胞培养的孔板。


背景技术：

2.类器官(organoids)指利用成体干细胞或多能干细胞进行体外三维(3d)培养而形成的具有一定空间结构的组织类似物，其能在结构和功能上模拟真实器官，能够最大程度地模拟体内组织结构及功能并能够长期稳定传代培养。相比传统的二维培养模型，类器官代表着一种能够概括整个生物体生理过程的创新技术，具有更接近生理细胞的组成和行为、更稳定的基因组、更适合于生物转染和高通量筛选等优势。而与动物模型相比，类器官模型的操作更简单，还能用于研究疾病发生和发展等机理。因而在器官发育、精准医疗、再生医学、药物筛选、基因编辑、疾病建模等领域都有广泛的应用前景。2013年，类器官被《科学》杂志评为年度十大技术。2018年初，类器官被评《自然
·
方法》评为2017年度方法。
3.尽管类器官在基础研究及药物筛选中有极为广阔的应用前景，但缺乏相应的类器官技术相关标准，特别是类器官培养及传代过程中仍存在诸多问题亟待解决。类器官在培养过程中涉及在培养孔板中吸弃培养基和加入培养基，与常规的二维细胞培养不同，由于类器官培养在三维基质胶滴中，吸弃培养基和加入培养基的常规操作，无论是人工还是机械自动化操作，都容易对胶滴造成冲击等机械作用，干扰胶滴的稳定培养,甚至破坏胶滴结构。为解决操作过程中的干扰问题，本实用新型对常规使用的96孔板进行了改造。


技术实现要素：

4.本实用新型的目的在于提供一种用于3d细胞培养的孔板，旨在降低实验人员在换液和加入处理试剂等操作时对培养胶滴的机械扰动。
5.为实现以上实用新型目的，本实用新型公开了一种用于3d细胞培养的孔板，包括培养基板，所述培养基板上开设有多个常规样孔，多个所述常规样孔的一侧均设有辅助小孔，所述辅助小孔开设在所述培养基板上并与所述常规样孔连通。
6.本实用新型进一步设置为：多个所述常规样孔的底部均呈圆台状结构设置。
7.本实用新型进一步设置为：多个所述常规样孔呈矩阵式分布在所述培养基板上。
8.本实用新型进一步设置为：所述辅助小孔呈圆柱状结构设置。
9.本实用新型进一步设置为：所述辅助小孔呈矩阵式分布在所述培养基板上。
10.本实用新型进一步设置为：所述培养基板的长度和宽度分别为125.72mm-129.72mm和83.48mm-87.48mm。
11.本实用新型进一步设置为：所述常规样孔的上直径、下直径和深度分别为8.64mm-9.04mm、2.5mm-6mm和9.17mm-11.17mm。
12.本实用新型进一步设置为：所述辅助小孔的直径和深度分别为1.5mm-4mm和7.08mm-7.68mm。
13.本实用新型进一步设置为：所述常规样孔之间的中心距离为8.00mm-10.00mm。
14.本实用新型进一步设置为：所述培养基板由纯聚苯乙烯材料制成。
15.综上所述，与现有技术相比，本实用新型公开了一种用于3d细胞培养的孔板，本实用新型可以让实验人员在换液和加入处理试剂等操作时最大限度地降低对培养胶滴的机械扰动，从而维持胶滴稳定培养，将整个培养基板上各常规样孔中培养的类器官在操作时因干扰所造成的差异降到最低，以利于后续对常规样孔中类器官批量进行标准化检测等操作，使结果尽量避免因操作上的差异而导致的失真。
附图说明
16.为了更清楚地说明本实用新型具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本实用新型的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
17.图1是本实施例提供的一种用于3d细胞培养的孔板的整体结构示意图；
18.图2是本实施例提供的一种用于3d细胞培养的孔板的部分结构示意图；
19.图3是本实施例提供的一种用于3d细胞培养的孔板的部分结构俯视图。
20.附图标记：1、培养基板；2、常规样孔；3、辅助小孔。
具体实施方式
21.为了使本实用新型的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本实用新型进行进一步详细说明，应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本实用新型，并不用于限定本实用新型。
22.在本实用新型的描述中，需要说明的是，术语“前”、“后”、“中心”、“上”、“下”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
23.在本实用新型的描述中，需要说明的是，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或一体地连接；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，还可以是两个元件内部的连通，可以是无线连接，也可以是有线连接。对于本领域的普通技术人员而言，可以具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
24.此外，上面所描述的本实用新型不同实施方式中所涉及的技术特征只要彼此之间未构成冲突就可以相互结合。
25.一种用于3d细胞培养的孔板，如图1、图2和图3所示，包括培养基板1，培养基板1上开设有多个常规样孔2，多个常规样孔2的一侧均设有辅助小孔3，辅助小孔3开设在培养基板1上并与常规样孔2连通，在本实施例中常规样孔2的数量优选为96个，每个常规样孔2对应连通设置有一个辅助小孔3。
26.在具体实施过程中，实验人员一方面采用200ul吸头吸取150ul的培养基插入辅助小孔3，从而通过辅助小孔3将培养液注入常规样孔2中，另一方面同样是通过辅助小孔3对
常规样孔2中的培养基进行吸弃操作，即通过此辅助小孔3的设置，本实施例可以让实验人员在换液和加入处理试剂等操作时最大限度地降低对培养胶滴的机械扰动，从而将整个培养基板1上各常规样孔2中培养的类器官在操作时因干扰所造成的差异降到最低，以利于后续对常规样孔2中类器官批量进行标准化检测等操作，使结果尽量避免因操作上的差异而导致的失真。
27.需要说明的是，本实施例以膀胱癌类器官换液为优选，在膀胱癌类器官培养3天后，其培养液变黄，细胞球体和密度适宜，此时，实验人员以200ul吸头插入辅助小孔3中吸弃培养基。
28.进一步的，96个常规样孔2的底部均呈圆台状结构设置，在具体实施过程中，需要说明的是，将常规样孔2的底部设置成圆台状结构，可以使其底面积相对减小，从而当培养胶滴滴入其中时，可以提高培养胶滴培养的稳定性，并且，锥型斜面的内壁也有利于培养胶滴从辅助小孔3平缓地流入常规样孔2的底部，减少了机械力的作用，从而也进一步地降低了对培养胶滴的机械扰动。
29.进一步的，96个常规样孔2和96个辅助小孔3均呈矩阵式分布在培养基板1上，辅助小孔3呈圆柱状结构设置，在具体实施过程中，呈矩阵式分布的96个常规样孔2和96个辅助小孔3具有美观、便于实验人员操作等有益效果。
30.进一步的，培养基板1的长度和宽度分别为125.72mm-129.72mm和83.48mm-87.48mm,常规样孔2的上直径、下直径和深度分别为8.64mm-9.04mm、2.5mm-6mm和9.17mm-11.17mm,辅助小孔3的直径和深度分别为1.5mm-4mm和7.08mm-7.68mm,常规样孔之间的中心距离为8.00mm-10.00mm，在本实施例中，培养基板1的长度和宽度分别优选为127.72mm和85.48mm，常规样孔2的上直径、下直径和深度分别优选为8.84mm、5.00mm和10.17mm，辅助小孔3的直径和深度分别优选为3.00mm和7.38mm，常规样孔2之间的中心距离优选为9.00mm，在具体实施过程，将常规样孔2之间设置一定的中心距离，可以降低试验人员在进行各类操作时的失误频率。
31.进一步的，培养基板1由纯聚苯乙烯材料制成，在具体实施过程中，由纯聚苯乙烯材料制成的培养基板1呈光学透明的物理结构，有助于试验人员对培养基进行实时观察，同时也便于实验人员进行各类操作。
32.综上，本实用新型具有以下有益效果：公开了一种用于3d细胞培养的孔板，包括培养基板1，培养基板1上开设有多个常规样孔2，多个常规样孔2的一侧均设有辅助小孔3，辅助小孔3开设在培养基板1上并与常规样孔2连通，即通过此设置，本实用新型降低了实验人员在换液和加入处理试剂等操作时对培养胶滴的机械扰动，与此同时，本实用新型具有培养结果失真度低、操作便捷等有益效果。
33.显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本实用新型创造的保护范围之中。