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一种CHO细胞培养方法与流程

2023-03-14 19:28:02 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种cho细胞培养方法,其特征在于,所述方法包括:(a)将cho细胞在基础培养基中放大培养;(b)进行高密度培养,从细胞处于对数生长期时开始每天流加补料培养基,所述补料培养基的流加量为初始培养物体积的1~3%。2.根据权利要求1所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述补料培养基流加量为初始培养物体积的2%。3.根据权利要求1或2所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述基础培养基选自cho细胞无血清培养基。4.根据权利要求1或2所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述对数生长期是指细胞密度达到0.8~1
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106cells/ml时即为对数生长期。5.根据权利要求1或2所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述流加补料培养过程中,温度为32~37℃,搅拌转速为120~220rpm,溶氧含量为40~60%。6.根据权利要求5所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述流加补料培养过程中,温度为37℃,搅拌转速为150rpm,溶氧含量为50%。7.根据权利要求1或2所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述流加补料培养过程中,当细胞密度达到6~8
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106cells/ml时,调整培养温度为34
±
2℃,ph为6.90
±
0.2。8.根据权利要求7所述的cho细胞培养方法,其特征在于,所述流加补料培养过程中,当细胞密度达到6~8
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106cells/ml时,调整培养温度为34
±
1℃,ph为6.90
±
0.05。9.根据权利要求1-8任一项权利要求所述的cho细胞培养方法,其特征在于,该方法用于生产单克隆抗体。

技术总结
本发明提供一种可以稳定生长的CHO细胞培养方法,通过在细胞处于对数生长期时流加补料培养基,控制培养温度和pH,有效解决了蛋白产量低、产品质量不稳定等问题。本发明培养方法可用于CHO细胞工业化大规模悬浮培养,维持CHO细胞体外培养后期活率,获得更高的目标蛋白表达产量。达产量。达产量。


技术研发人员:朱亚楠 姜晓玲 陈俊 丁亮亮 肖哲媛
受保护的技术使用者:盛禾(中国)生物制药有限公司
技术研发日:2021.05.28
技术公布日:2022/11/29
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