质谱对照的制作方法

技术特征：
1.免疫纯化和表征来自样品的分析物的方法，其包括：(i)提供预先确定量的通过酸性ph和/或还原剂可切割的键与基底结合的对照物质和任选的与基底结合的另外的分析物特异性抗体或其片段，其中所述对照物质对所述分析物是特异性的或对所述分析物不是特异性的；(ii)当分析物存在于样品中时，允许分析物与对照物质或所述任选的另外的分析物特异性抗体或片段结合，其中结合到基底的对照物质(i)可以在将所述分析物与任选的另外的分析物特异性抗体(ii)接触之后提供；(iii)将未结合的材料从所述基底上洗去；(iv)从至少一种基底上酸洗脱与其结合的分析物；(v)进行质谱分析以鉴定两个或更多个峰，其中的至少一个峰与所述分析物的存在相关联，并且其中的至少第二个峰与对照物质的至少一部分相关联；和(vi)将所述第二个峰的大小或强度与预先确定的校准值进行比较，以允许校准与所述分析物相关联的第一个峰。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述对照物质是杂聚物，所述杂聚物是包含两个或更多个可分离蛋白亚基的蛋白，并且在所述第二个峰中检测到的所述杂聚物的部分是所述蛋白亚基之一的至少一部分。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述蛋白是包含至少一条重链或其片段以及至少一条轻链或其片段的抗体或其片段，并且在所述第二个峰中检测到的亚基是所述轻链的至少一部分。4.根据权利要求4所述的方法，其中所述抗体对所述分析物是特异性的。5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述对照物质对所述分析物不是特异性的，并且所述基底包含所述另外的分析物特异性抗体。6.产生前述权利要求中任一项所述的预先确定的校准值的方法，包括在不存在所述分析物的情况下进行步骤(i)至(v)，并定量所述对照物质的至少一部分以产生预先确定的校准值。7.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述对照物质的至少一部分通过液相色谱-质谱校准。8.根据权利要求1至7所述的方法，其中在所述第二个峰中检测到的对照物质的一部分是免疫球蛋白轻链或轻链片段。9.根据权利要求1至8所述的方法，其中，当进行质谱步骤(vi)时，预先选择所述对照物质的一部分的大小，例如抗体或其片段的大小，以产生与分析物相关的一个或多个峰分离的一个或多个峰。10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述至少一个峰和所述至少第二个峰通过maldi-tof质谱测定，并且所述峰是m/z强度。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗体或其片段是单克隆抗体或多克隆抗体。12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述分析物是血清蛋白，例如免疫球蛋白或其片段。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述免疫球蛋白或其片段是人igg、iga、igm、igd
或igeλ轻链或κ轻链。14.根据权利要求12或13所述的方法，其中所述抗体或其片段是单克隆抗体或其片段。15.根据权利要求14所述的方法，其中选择单克隆抗体或其片段，使其在通过质谱分析时，与所述免疫球蛋白分析物具有不同的质量和/或电荷。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述单克隆抗体或其片段的质量被修饰为具有与所述免疫球蛋白分析物不同的质量。17.根据权利要求11至16所述的方法，其中所述抗体或其片段是重链类特异性的、轻链型特异性的、游离轻链型特异性的或重链类轻链型特异性的。18.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述基底包含预先确定量的对照物质和多种另外的分析物特异性抗体或其片段，所述另外的分析物特异性抗体或其片段优选是多克隆抗体或其片段。19.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述基底包括多个珠粒。20.通过检测权利要求1至19所述的分析物的存在来检测、监测或预测疾病的方法。21.根据权利要求20所述的方法，其中所述疾病是b细胞相关疾病或其它免疫相关疾病。22.用于根据前述权利要求中任一项所述的方法中的试剂盒，其包含至少一种基底，所述基底包含预先确定量的通过酸可切割的连接附着于所述基底的对照物质以及任选地多种分析物特异性抗体或其片段，所述试剂盒还包含用于校准待校准的分析物的预先确定的校准值。23.试剂盒，其包含至少一种基底，所述基底包含与其结合的多种多克隆分析物特异性抗体或其片段以及另外的预先确定量的对照物质。24.根据权利要求22或23所述的试剂盒，其中所述分析物是免疫球蛋白或其片段。25.根据权利要求22至24所述的试剂盒，其中所述抗体或其片段是重链类特异性的、轻链型特异性的、游离轻链型特异性的或重链类-轻链型特异性的。26.质谱仪，具有执行权利要求1至11的步骤(vi)和(vii)的装置。27.计算机程序，包括使质谱仪执行权利要求1至22的步骤(vi)和(vii)的指令。28.包括指令的计算机可读介质，所述指令在一个或多个处理器上执行时将通过权利要求1至21所述的方法获得的第二个峰值的大小或强度与预先确定的校准值进行比较。

技术总结
本发明提供了免疫纯化和表征来自样品的分析物的方法，其包括：(i)提供预先确定量的通过酸性pH和/或还原剂可切割的键与基底结合的对照物质和任选的与基底结合的另外的分析物特异性抗体或其片段，其中所述对照物质对所述分析物是特异性的或对所述分析物不是特异性的；(ii)当分析物存在于样品中时，允许分析物与对照物质或所述任选的另外的分析物特异性抗体或片段结合，其中结合到基底的对照物质(i)可以在将所述分析物与任选的另外的分析物特异性抗体(ii)接触之后提供；(iii)将未结合的材料从所述基底上洗去；(iv)从至少一种基底上酸洗脱与其结合的分析物；(v)进行质谱分析以鉴定两个或更多个峰，其中的至少一个峰与所述分析物的存在相关联，并且其中的至少第二个峰与对照物质的至少一部分相关联；和(vi)将所述第二个峰的大小或强度与预先确定的校准值进行比较，以允许校准与所述分析物相关联的第一个峰。一个峰。一个峰。


技术研发人员：斯蒂芬
受保护的技术使用者：结合点集团有限公司
技术研发日：2021.05.12
技术公布日：2023/2/3