一种液相色谱-串联质谱法同时测定电子烟烟液中有机酸和烟碱含量的方法与流程

技术特征：
1.一种液相色谱-串联质谱法同时测定电子烟烟液中有机酸和烟碱含量的方法，该方法包括如下步骤：(1)称取电子烟烟液于离心管中，加入内标溶液和甲醇，涡旋振荡，备用；(2)将步骤(1)得到的萃取液进行液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)分析；(3)采用内标标准曲线法定量计算样品中目标物的含量。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述内标溶液为苯甲酸-d5和烟碱-d3的甲醇溶液，浓度为500μg/ml和400μg/ml；优选地，在步骤(1)中，所述甲醇的体积为5～20ml，优选为10ml。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，在步骤(1)中，所述涡旋振荡的时间为5～30分钟，优选为5分钟。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述色谱柱为phenomenex kinetex hilic(4.6
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150mm，2.6μm)、phenomenex luna c18(2)(4.6
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150mm，3μm)、waters xbridge beh amide(2.1
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100mm，2.5μm)或thermo scientific acclaim trinity p1(3
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100mm，3μm)色谱柱，优选为waters xbridge beh amide(2.1
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100mm，2.5μm)色谱柱。5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)分析中使用的流动相流动相为水及乙腈、5mmol/l乙酸铵溶液及浓度为5mmol/l乙酸铵的乙腈/水(v:v＝95/5)或者5mmol/l乙酸铵溶液(ph 9.0)及浓度为5mmol/l乙酸铵的乙腈/水(v:v＝95/5，ph 9.0)，优选为5mmol/l乙酸铵溶液(ph 9.0)及浓度为5mmol/l乙酸铵的乙腈/水(v:v＝95/5，ph 9.0)。6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述液相色谱-串联质谱分析的色谱条件还包括：柱温为40℃；梯度洗脱程序为：初始流速0.6ml/min，0.5min时流速降至0.4ml/min，7.2min时流速升至0.6ml/min，保持1.8min，运行总时间为9min；进样体积为1μl。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(2)中，所述液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)分析中使用的质谱条件：离子源：电喷雾离子源；离子化方式：esi( )；检测模式：mrm模式；锥孔温度(cone temperature)：130℃；电喷雾电压(spray voltage)：4000v( )，3500v(-)；锥孔气流速(cone gas flow)：20psi；加热探针温度(heated probe temperature)：350℃；探针气流速(probe gas flow)：50psi；雾化器气流速(nebulizer gas flow)：55psi；优选地，在步骤(2)中，目标化合物和内标的mrm质谱检测参数如下：
8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中，所述内标标准曲线法为：配制含有目标物的系列标准工作溶液，加入内标(苯甲酸-d5及烟碱-d3)，以各标准工作溶液中目标物与内标物的定量离子峰面积比为纵坐标，以各标准工作溶液中目标物的含量为横坐标制作标准工作曲线；将步骤(2)的分析结果代入标准曲线中，得到待测溶液中的目标物含量，再进一步计算得到样品中各目标物的含量；优选地，在步骤(3)中，所述系列标准工作溶液中各目标物的浓度范围为：烟碱为0.10～100μg/ml，柠檬酸为10-100μg/ml，酒石酸为5-100μg/ml，丙酮酸和乳酸为1-100μg/ml，乙酰丙酸为0.5-100μg/ml，其他有机酸为0.1-400 100μg/ml。9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其特征在于，所述有机酸包括苯甲酸、水杨酸、丙酮酸、乳酸、丁二酸、乙酰丙酸、山梨酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸与烟碱形成的烟碱盐。
10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)称取电子烟烟液于离心管中，加入内标溶液和甲醇，涡旋振荡，备用；(2)将步骤(1)得到的萃取液进行液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)分析；其中，液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)分析使用的色谱条件：色谱柱为waters xbridge beh amide色谱柱(2.1
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100mm，2.5μm)，柱温为40℃；流动相为5mmol/l乙酸铵溶液(ph 9.0)及浓度为5mmol/l乙酸铵的乙腈/水(v:v＝95/5，ph 9.0)，梯度洗脱程序为：初始流速0.6ml/min，0.5min时流速降至0.4ml/min，7.2min时流速升至0.6ml/min，保持1.8min，运行总时间为9min；进样体积为1μl；液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)分析使用的质谱条件：离子源：电喷雾离子源；离子化方式：esi( )；检测模式：mrm模式；锥孔温度(cone temperature)：130℃；电喷雾电压(spray voltage)：4000v( )，3500v(-)；锥孔气流速(cone gas flow)：20psi；加热探针温度(heated probe temperature)：350℃；探针气流速(probe gas flow)：50psi；雾化器气流速(nebulizer gas flow)：55psi；目标化合物和内标的mrm质谱检测参数如下：
注：“*”表示定量离子(3)采用内标标准曲线法定量计算样品中目标物的含量；内标标准曲线法为：配制含有目标物的系列标准工作溶液，加入内标(苯甲酸-d5及烟碱-d3)，以各标准工作溶液中目标物与内标物的定量离子峰面积比为纵坐标，以各标准工作溶液中目标物的含量为横坐标制作标准工作曲线；将步骤(2)的分析结果代入标准曲线中，得到待测溶液中的目标物含量，再进一步计算得到样品中各目标物的含量；在步骤(3)中，所述系列标准工作溶液中各目标物的浓度范围为：烟碱为0.10～100μg/ml，柠檬酸为10-100μg/ml，酒石酸为5-100μg/ml，丙酮酸和乳酸为1-100μg/ml，乙酰丙酸为0.5-100μg/ml，其他有机酸为0.1-100μg/ml。

技术总结
本发明涉及一种液相色谱-串联质谱法同时测定电子烟烟液中有机酸和烟碱含量的方法，该方法包括如下步骤：(1)称取电子烟烟液于离心管中，加入内标溶液和甲醇，涡旋振荡，备用；(2)将步骤(1)得到的萃取液进行液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)分析；(3)采用内标标准曲线法定量计算样品中目标物的含量。本发明的方法具有通量高、分离度好、操作简便、回收率及重复性好等优点，适合电子烟烟液中非挥发性有机酸和烟碱的分析。碱的分析。


技术研发人员：韩书磊 陈欢 苏悦 王红娟 付亚宁 刘彤 田雨闪 侯宏卫 胡清源
受保护的技术使用者：国家烟草质量监督检验中心
技术研发日：2022.10.21
技术公布日：2023/1/31