从工业大麻中获取高纯度大麻二酚的方法与流程

1.本发明属于医药技术领域，尤其是涉及一种从工业大麻中获取高纯度大麻二酚的方法。


背景技术：

2.工业大麻中四氢大麻酚（thc）含量小于0.3%，不具备提取thc的价值，目前在我国云南和黑龙江等地可依法种植、加工。工业大麻中含有的大麻二酚（cbd）不具有精神活性和成瘾性，而且具有较好的抗炎、抗抑郁、抗癫痫、镇静、抗肿瘤等药理活性。目前，已在临床上使用的含cbd的药物有sativex、epidiolex等。此外，处于临床实验阶段的cbd类药物达数十种之多。因此，从工业大麻中高效获取cbd具有非常重要的意义。
3.由于cbd和thc总是以伴生的形式存在，因此从工业大麻中提取cbd的同时也意味着thc在不断富集、其含量在不断提高。如何在提高cbd含量的同时，确保产品中thc含量不超标（小于0.3%）非常关键。另一方面，由于cbd的熔点较低、脂溶性很强、结晶性较差，因此，从工业大麻粗提物中直接将cbd结晶出来，存在极高难度。
4.现有的一些技术提到了从工业大麻中获取cbd晶体的方法。通过有机溶剂（如乙醇或烷烃类溶剂）或二氧化碳超临界或亚临界萃取，得到大麻粗油（cbd含量一般在20~70%不等）之后，还需再做进一步的提纯，以提高cbd的含量、从而将之结晶出来。如申请号为201811468947.x的专利申请将萃取物浓缩后依次用正相柱和反相柱进行分离纯化，然后再结晶，最终获得纯度为92~98%的cbd；申请号为201810950247.8的专利申请采用层析柱进行梯度洗脱，浓缩液再结晶得到cbd；申请号为201810111141.9的专利申请采用醇提取后，采用碱性溶液增强cbd的水溶性，用有机溶剂萃取富集cbd，经聚酰胺树脂柱、中性氧化铝和键合硅胶柱纯化富集，然后再结晶获得cbd；申请号为201610674119.6的专利申请将粗提物水沉醇提后，再浓缩柱层析，然后再结晶得到cbd晶体。
5.分析现有技术可以发现，为达到使cbd晶体析出的目的，均需要对大麻粗油做进一步的处理，以提高cbd含量（同时降低thc含量），使之容易从油中析晶。而这些方法，无一例外都采用了柱层析技术。在工业生产上，柱层析的重现性和经济性都比较差，因而造成cbd生产成本较高。


技术实现要素：

6.发明目的：为了解决上述问题，本发明方法提供了一种具有生产成本低、重现性好的从工业大麻中获取高纯度大麻二酚的方法。
7.本发明的技术方案：一种从工业大麻中获取高纯度大麻二酚的方法，向工业大麻粗提油中，加入酰化试剂进行酰化反应（此步可将工业大麻粗提油中的大麻二酚转化成容易析晶的大麻二酚双酯），反应完成后过滤，将过滤所得固体重结晶，然后再将重结晶所得固体进行水解反应（此步可将大麻二酚双酯再转化为大麻二酚），即得到高纯度的大麻二酚。进一步地，所述酰化
1h), 2.65 (m, 1h), 2.46 (m, 2h), 1.55-1.46 (m, 9h), 1.24 (m, 4h), 1.04 (s, 3h), 0.81 (t, j = 6.8 hz, 3h); 13
c nmr (151 mhz, dmso-d6) δ 164.52, 149.59, 147.24, 141.95, 134.13, 133.05, 129.81, 129.01, 126.24, 123.62, 111.29, 45.46, 38.05, 34.29, 30.86, 30.02, 29.47, 28.01, 22.79, 21.95, 19.41, 13.95.取上述大麻二酚双苯甲酸酯52g，溶于250 ml水和250 ml乙醇的混合溶剂。加入20 g氢氧化钠，并在氮气保护下将反应液加热至50℃。10小时后，将反应液冷却至室温，并以稀盐酸调节ph值至3-5。以200 ml正庚烷进行萃取并浓缩后，降温至-5℃，析出大量浅黄色固体；以正庚烷重结晶，得27 g白色固体；hplc内标法检测大麻二酚含量为98.7%、纯度99.9%，未检出四氢大麻酚。mp 67~68
ꢀ°
c; [α]
d25
＝-131.9 (c＝0.1，etoh)；1h nmr(400 mhz, dmso-d6): δ 8.68 (s, 2h), 6.01 (s, 2h), 5.08 (s, 1h), 4.48 (s, 1h), 4.40 (s, 1h), 3.81 (d, j = 8.9 hz, 1h), 2.99 (m, 1h), 2.29 (t, j = 7.6 hz, 2h), 2.13 (m, 1h), 1.94 (m, 1h), 1.69-1.50 (m, 8h), 1.42 (m, 2h), 1.18 (m, 4h), 0.85 (t, j = 6.9 hz, 3h); 13
c nmr (151 mhz, dmso-d6) δ 156.25, 149.12, 140.16, 130.02, 126.86, 114.11, 109.65, 106.58, 43.64, 35.52, 34.89, 31.00, 30.28, 29.47, 23.28, 21.99, 19.22, 13.92。
[0020]
实施例2取粉碎的工业大麻干花叶，按已知方法加入乙醇浸提并浓缩、减压蒸馏，得到工业大麻粗提油。经hplc检测，cbd含量为50%。取100g粗油，溶解于1l无水二氯甲烷中，向其中加入50g无水吡啶、6.5g n,n-二甲基-4-氨基吡啶、91g对甲苯磺酰氯，然后在室温下搅拌24h。降温到-20℃并保温10h。低温抽滤，并以冷却的石油醚淋洗，得到黄褐色固体。以乙酸乙酯－石油醚（体积比为1：5）的混合溶液进行重结晶，得到大麻二酚双对甲苯磺酸酯白色固体75g，hplc检测其纯度为97.9%。mp 80~82
ꢀ°
c; [α]
d25
＝-98.2 (c＝0.1，etoh)；1h nmr (400 mhz, dmso-d6): δ 7.73 (m, 4h), 7.50 (m, 4h), 6.84 (m, 2h), 4.40 (s, 1h), 4.37 (s, 1h), 4.24 (s, 1h), 3.45 (d, j = 9.6hz, 1h), 2.42 (m, 9h), 1.70 (m, 1h), 1.47-1.14 (m, 15h), 0.84 (t, j = 6.8 hz, 3h); 13
c nmr (151 mhz, dmso-d6) δ 148.61, 146.86, 145.95, 142.49, 132.06, 130.28, 128.03, 126.93, 122.29, 111.29, 45.23, 37.36, 34.03, 30.40, 29.63, 29.19, 28.08, 23.15, 21.82, 21.17, 18.28, 13.85。
[0021]
取上述大麻二酚双对甲苯磺酸酯62 g，溶于300 ml水和300 ml乙醇的混合溶剂。加入20 g氢氧化钠，并在氮气保护下将反应液加热至50℃。10小时后，将反应液冷却至室温，并以稀盐酸调节ph值至3-5。以200 ml正庚烷进行萃取并浓缩后，降温至-5℃，析出大量浅黄色固体；以正庚烷重结晶，得25 g白色固体。hplc内标法检测大麻二酚含量为98.2%、纯度99.7%，未检出四氢大麻酚。
[0022]
实施例3取粉碎的工业大麻干花叶，按已知方法加入乙醇浸提并浓缩、减压蒸馏，得到工业大麻粗提油。经hplc检测，cbd含量为48%。取100g粗油，溶解于1l无水二氯甲烷中，向其中加入50g无水吡啶、6.5g n,n-二甲基-4-氨基吡啶、85g对硝基苯甲酰氯，然后在室温下搅拌24h。降温到-15℃并保温10h。低温抽滤，并以冷却的石油醚淋洗，得到黄褐色固体。以乙酸乙酯－石油醚（体积比为1：5）的混合溶液进行重结晶，得到大麻二酚双对硝基苯甲酸酯白
色固体81g，hplc检测其纯度为99.2%。mp 57~59
ꢀ°
c; [α]
d25
＝-68.9 (c＝0.1，etoh)；1h nmr (400 mhz, dmso-d6): δ 8.44 (d, j = 8.2 hz, 4h), 8.34 (d, j = 8.6 hz, 4h), 7.10 (s, 2h), 5.03 (s, 1h), 4.57 (s, 1h), 4.47 (s, 1h), 3.49 (d, j = 9.0 hz, 1h), 2.69-2.59 (m, 3h), 1.62 (m, 2h), 1.59 (m, 2h), 1.49 (s, 3h), 1.29 (m, 4h), 1.05 (s, 3h), 0.86 (t, j = 6.6 hz, 3h); 13
c nmr (151 mhz, dmso-d6) δ 170.40, 163.17, 150.68, 149.34, 147.23, 142.24, 134.05, 133.24, 131.33, 125.99, 124.10, 123.70, 111.40, 59.81, 45.55, 38.17, 34.28, 30.81, 29.96, 29.44, 27.85, 22.87, 21.94, 19.67, 13.94。
[0023]
取上述大麻二酚双硝基苯甲酸酯62 g，溶于300 ml水和300 ml乙醇的混合溶剂。加入20 g氢氧化钠，并在氮气保护下将反应液加热至50℃。10小时后，将反应液冷却至室温，并以稀盐酸调节ph值至3-5。以200 ml正庚烷进行萃取并浓缩后，降温至-5℃，析出大量浅黄色固体；以正庚烷重结晶，得29 g白色固体。hplc内标法检测大麻二酚含量为98.0%、纯度99.9%，未检出四氢大麻酚。
[0024]
由上述实施例可知，本发明不需要对提取的粗油做柱层析纯化，而是通过加入酰化试剂将之转化为更容易析晶的大麻二酚双酯，使大麻二酚双酯从粗油中析出后，经过重结晶，然后再水解，得到高纯度的大麻二酚。该方法避免了重现性和经济性都比较差的柱层析操作，而且对设备要求低，具有良好的应用前景。
[0025]
上述的对实施例的描述是为便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用发明。熟悉本领域技术的人员显然可以容易地对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例，本领域技术人员根据本发明的揭示，不脱离本发明范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。