荆防组合物在制备预防或改善慢性疲劳综合征药物或保健品中的用途的制作方法

1.本发明涉及一种组合物及其用途，具体涉及一种具有抗疲劳作用的组合物及其用途，属于中药技术领域。


背景技术：

2.疲劳是一个涉及多方面因素的综合性生理过程，是人体机能活动达到一定程度或者到了一定阶段必然出现的一种现象。随着社会的不断进步，工作和生活节奏的加快，人体始终处在一种高负荷的运转状态而得不到充分的休息，使得我们始终处于一种疲劳的状态，长期得不到改善，导致我们很容易受到外部病菌的感染而出现机体的损伤。1988年美国疾病控制中心已经以慢性疲劳为主要特征的症候群命名为慢性疲劳综合征(cfs)，目前病因尚不明确，可能是多种因素综合作用造成的，治疗的重点就是缓解疲劳。疲劳影响人们的生活质量和工作效率，增加工作安全风险。
3.疲劳是多种疾病的外在表现之一，如在帕金森病患者中疲劳的发生率较高，其生理上的躯体疲劳主要与疾病的严重程度相关，而心理上的精神疲劳主要与情绪的变化相关；慢性心衰患者评定预后的重要指标为6分钟步距；在慢性阻塞性肺病症状管理中，疲劳被认为是除呼吸困难以外的第二大症状，这充分说明疲劳在临床上是常见的并发症。疲劳作为患者非运动症状之一，明显困扰着患者并降低患者的生活质量。改善患者疲劳状态，对于患者疾病的改善具有重要的意义，受到临床医师的重视。
4.长期以来，科研工作者于一直在寻找一种安全、有效的的方剂来改善患者的疲劳状态。中药在改善患者疲劳状态、恢复机体正常机能方面表现出显著的优势，并且没有毒副作用，受到科研工作者的重视。荆防颗粒来源于荆防败毒散，是由荆芥、防风、甘草等11味中药组成，具有发汗解表、祛风除湿的功效，用于风寒感冒，头痛身痛，恶寒无汗，鼻塞清涕，咳嗽白痰。荆防败毒散应用历史悠久，安全、无毒副作用，现在研究发现具有治疗上呼吸道感染、过敏性皮肤病、小儿髋关节滑膜炎、风寒性面瘫、病毒性肝炎、湿疹等，未见有抗疲劳相关研究报道。


技术实现要素：

5.本发明的主要目的在于提供一种具有抗疲劳的中药组合物，所述的中药组合物，即荆防组合物主要由羌活、独活、茯苓、防风、荆芥、川芎、桔梗、柴胡、前胡、枳壳、甘草制备而成，其组成比例为市售荆防颗粒或荆防合剂的处方比例，上下波动在20％范围内；进一步地，上下波动在10％以内；有些产品中上下波动在5％范围内。如羌活与独活的重量之比为1：1，上下波动在20％范围内，则其实际重量之比范围可以为(0.8-1.2)：(0.8-1.2)。
6.本发明是在现有产品“荆防颗粒”的基础上对其用途所做的进一步开发，荆防颗粒能改善患者的疲劳感，基于这一临床使用反馈，发明人对荆防组合物及其制剂进行了抗疲劳用途的进一步研究与开发。
7.本发明目的在于提供荆防组合物的医药用途，具体为：
8.上述荆防组合物在制备抗疲劳药物或保健品中的用途。
9.所述疲劳为生理性疲劳或病理性疲劳。
10.优选的，所述生理性疲劳为运动性疲劳。
11.优选的，所述病理性疲劳为疾病伴发慢性疲劳、慢性疲劳综合征或术后疲劳综合征。
12.疲劳是一种复杂的生理现象，长时间运动或长期精神负荷过大后可导致肌肉力量降低以及身体一系列疲劳相关信号的活化，从而使机体产生疲劳感，行动力降低意味着身体及精神上的工作能力的质或量降低。
13.运动性疲劳指运动引起的肌肉最大收缩或者最大输出功率暂时性下降的生理现象，即机体的生理过程不能持续其机能在一特定水平或不能维持预定的运动强度。
14.此外，本发明的“疲劳”还包括疾病伴发慢性疲劳、慢性疲劳综合征或术后疲劳综合征这些病理性的疲劳。
15.本发明所述的抗疲劳，是指具有减轻上述疲劳的作用或使疲劳恢复的作用。具体来说，本发明的中药组合物有如下效果：延长运动、作用的部位(包括脑)的工作持续时间以及促进运动、作用部位的疲劳状态恢复至正常状态的效果。
16.本发明目的之二在于提供含有上述中药组合物的中药制剂，所述的中药组合物直接采用现有技术制备成制剂，或与至少一种药学上可接受的辅料制备成液体制剂或固体制剂。
17.优选的，所述临床上可接受的口服制剂为丸剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂或液体口服制剂中的一种或多种；
18.更优选的，所述制剂为荆防颗粒或荆防合剂。
19.荆防颗粒的制备方法如下：
20.步骤a：将荆芥、防风、羌活、独活、前胡、川芎、枳壳，分别蒸馏提取挥发油备用，蒸馏后的药渣、蒸馏后的川芎、枳壳水溶液备用；
21.步骤b：将步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳水溶液配制成25％的乙醇溶液，备用；
22.步骤c：将茯苓、步骤a所得蒸馏后的川芎、枳壳药渣混合，以步骤b所得乙醇溶液渗漉提取，渗漉液备用；
23.步骤d：将柴胡、桔梗、甘草、步骤a所得蒸馏后的荆芥、防风、羌活、独活、前胡药渣，加水煎煮两次，每次1.5小时，合并两次的煎煮液，过滤后浓缩成稠膏，备用；
24.步骤e：将步骤c所得渗漉液、步骤d所得稠膏混合，静置，过滤后浓缩成荆防颗粒浸膏，加入步骤a所得挥发油，混匀；
25.步骤f：将步骤e中荆防颗粒浸膏和挥发油的混合物加适量辅料蔗糖，混匀，制成颗粒，干燥，即得。
26.与现有技术相比，本发明取得了显著的技术效果：
27.本发明中药组合物具有抗疲劳的作用。在荆防制剂对强迫游泳小鼠的抗疲劳活性的实验中可以看出本发明组合物可以有效提高小鼠游泳时间，降低血清中乳酸的含量，表明该组合物有显著的提升体力、提高运动耐力、抗疲劳的效果。在荆防制剂对慢性疲劳综合征小鼠疲劳作用的实验研究中，荆防制剂可改善小鼠的精神状态，对血乳酸含量、血清尿素
氮有明显的降低作用，对肝糖原有提高作用，表明其抗疲劳、缓解慢性疲劳综合征的效果良好。
附图说明
28.图1是荆防制剂对小鼠游泳时间的影响，正常组标记为c、低剂量组标记为l、中剂量组标记为m、高剂量组标记为h；
29.图2是荆防制剂对游泳小鼠血清中乳酸水平的影响，正常组标记为c、低剂量组标记为l、中剂量组标记为m、高剂量组标记为h。
具体实施例
30.动物实验
31.为验证本发明中药组合物抗疲劳的功效，发明人开展了相关的药效学试验研究。需要说明的是，下述药效学试验所选取的药品为本发明具有代表性的配方及其制备方法所得的药品；本发明所包含的其它配方及制备方法所得药品，发明人同样进行了药效学实验，实验结果显示其他配方及制备方法所得药品具有相同或类似的效果，但由于篇幅限制，在此不一一穷举；此外，下述药效学实验仅以部分代表性的动物模型为例验证本发明的功效。
32.发明人要说明的是，以下实验研究均是在急性毒性试验、长期毒性试验证明药物安全性基础之上开展，实验研究中的给药剂量均在安全剂量范围之内。
33.实验例1荆防颗粒抗疲劳作用研究
34.本发明的抗疲劳作用是通过在强迫游泳试验中测定游泳时间和血乳酸含量来确认。强迫游泳试验是最常用的力竭动物模型之一，已被广泛用于评估药物的抗疲劳特性。
35.1.1动物
36.icr小鼠，雌性，6-8周龄，20-22g。动物来源：济南朋悦实验动物繁育有限公司，使用许可证编号：syxk(鲁)2018 0008。
37.1.2供试品
38.名称：荆防颗粒浸膏和挥发油的混合物：按照荆防颗粒的生产工艺，不加辅料的产物，1kg混合物换算成生药量为2kg。
39.来源：山东新时代药业有限公司
40.批号：8022009004
41.保存：4℃冷藏
42.1.3方法
43.小鼠检疫7天后，随机分为正常组(c)、低剂量组(l)、中剂量组(m)、高剂量组(h)，每组8只。正常组灌胃给予纯化水10ml/kg，低剂量组、中剂量组、高剂量组分别灌胃给予荆防颗粒浸膏和挥发油的混合物0.8、1.6、3.2g/kg，给药体积为10ml/kg，连续给药14天，末次给药30min后，小鼠进行强迫游泳(水深40cm水温20-25℃)，记录小鼠从入水到沉入水中8s不能浮出水面的时间。强迫游泳试验完成后小鼠休息24h后，游泳30min，休息10min后，麻醉，取血，用于血乳酸的检测。检测方法按照试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书进行。
44.1.4统计学处理
45.采用spss17.0软件进行统计学处理，计量资料以表示，组间比较采用单因素方差分析。
46.1.5结果
47.1.5.1小鼠游泳时间结果
48.运动耐力的提高是抗疲劳能力加强的宏观表现，游泳时间的长短可以反映动物运动疲劳的程度。由图1可知，与正常组比较，低剂量组(l)、高剂量组(h)游泳时间显著的升高(p《0.05)。
49.1.5.2血乳酸结果
50.长时间运动将导致机体的相对缺氧，糖酵解加快，进而产生大量的乳酸，使得肌肉组织内的ph值下降，最终导致疲劳。由图2可知，各给药组与正常组比较，血清乳酸的含量显著的降低(p《0.01，p《0.05)。
51.综上所述，荆防颗粒具有显著的抗疲劳的作用。
52.实验例2荆防合剂对慢性疲劳综合征小鼠疲劳作用的实验研究
53.疲劳综合征是在是在现代节奏紧张的生活方式下出现的一组以长期疲劳为突出表现的全身性症候群。目前，国内外对于疲劳综合征(cfs)的动物模型建立多采用单因素造模、复合因素造模或药物诱发型模型，基于目前中西医对于cfs的发病机制和临床表现的认识，参考文件(余曦明，陈思源，余望贻.中医慢性疲劳综合征动物模型的建立与评价[j].中国医药科学，2014，4(2):3.)进行实验研究。
[0054]
该模型采用中医的房劳、形劳、神劳等复合因素刺激，构建cfs动物模型。冷水游泳可以消耗小鼠体力，形成躯体的疲劳；合笼次数增加可使小鼠耗竭肾中精气，造成房劳；夹尾可使小鼠躯体活动受限，产生暴躁、愤怒甚至绝望等心理变化，造成神劳。此种方法，基本涵盖了导致cfs发病的各种因素，是一种比较可靠且操作性较强的造模方法。
[0055]
1.1动物
[0056]
icr小鼠，雌性，6-8周龄，20-22g。动物来源：济南朋悦实验动物繁育有限公司。
[0057]
1.2供试品
[0058]
荆防合剂，鲁南厚普制药有限公司。
[0059]
1.3方法
[0060]
小鼠检疫7天后，随机分为正常组、模型组、低剂量组、高剂量组，每组6只。所有实验动物在spf级实验室适应性喂养3天后，正常组灌胃给予纯化水10ml/kg，低剂量组、高剂量组分别灌胃给予荆防合剂3.2ml/kg、6.4ml/kg，给药体积为10ml/kg，不足以纯化水补足10ml/kg，连续给药14天，末次给药30min后，对游泳组、模型组、低剂量组和高剂量组动物进行3天的适应性游泳训练，每天1次，每次30min。随后开始正式实验。模型组、低剂量组、高剂量组单日让发情期雌鼠与之合笼(且每次合笼都新换一批雌鼠)；双日让其在常温下游泳，每次30min；每日用夹尾激怒法刺激小鼠，开始刺激的时间不固定，每次30min，连续14天。在游泳过程中，当小鼠运动协调性明显下降，出现反复下沉时，将动物取出游泳缸休息3min后，再放入池中继续进行游泳。当小鼠浮在水面不运动时用木棒驱赶，使其维持运动状态。正常组小鼠相同条件下常规饲养，不参与游泳运动。
[0061]
1.4指标检测
[0062]
1.4.1一般状态观察
[0063]
于实验前和实验后分别测量一次体重，每日观察小鼠精神状态、活动情况、饮食及睡眠、粪便等情况，并记录。
[0064]
1.4.2实验室指标检测
[0065]
实验结束后，处死小鼠，摘眼球取血1ml，装入10ml离心管中，室温静置2h，用离心机3000r/min离心10min取血清，装入1.5ml离心管中，于-20℃冰箱保存，按照试剂盒(长沙市佳和生物科技有限责任公司)方法检测乳酸及尿素氮浓度；另取肝脏迅速以滤纸吸去附着的血液，称取约50g，按照试剂盒(长沙市佳和生物科技有限责任公司)方法检测组织中糖原的含量。
[0066]
1.5统计学处理
[0067]
采用spss17.0软件进行统计学处理，计量资料以表示，采用单因素方差分析。
[0068]
1.6结果
[0069]
1.6.1一般状态
[0070]
实验结束后，正常组小鼠行为表现正常，体重较实验前明显增加。模型组小鼠出现反应迟钝、饮用水用尽后易怒、皮毛干枯光泽度减退、便软不成型、采食量和饮水量减少。低剂量组和高剂量组精神尚可，行为表现正常，体重较实验前有明显增加。
[0071]
1.6.2体重
[0072]
由表1数据看，实验前各组组间小鼠体重无明显差异。实验前后各组小鼠组内体重都有明显差异。实验后，模型组体重低于正常组，差异有统计学意义(p＜0.01)，高剂量组、低剂量组与模型组相比都具有统计学意义，且高剂量组与正常组相比没有统计学意义。
[0073]
表1各组小鼠体重的变化(n＝6)
[0074][0075][0076]
注：实验后体重，与正常组相比，
#
p＜0.05，
##
p＜0.01；
[0077]
实验后体重，与模型组对比，
@
p＜0.05，
@@
p＜0.01。
[0078]
1.6.3实验室指标
[0079]
从表2可以看出以下各实验室指标有如下变化：
[0080]
表2各组小鼠实验室指标结果比较(n＝6)
[0081][0082]
注：与正常组相比，
&
p＜0.05，
&&
p＜0.01；
[0083]
与模型组对比，
*
p＜0.05，
**
p＜0.01。
[0084]
肝糖原：与正常组相比，模型组的肝糖原水平呈现下降趋势。低剂量组和高剂量组与模型组相比有显著性差异。
[0085]
血清乳酸：与正常组相比，模型组的血清乳酸水平呈上升趋势，与正常组比较差异有统计学意义(p＜0.01)；低剂量组和高剂量组的血清乳酸与模型组相比水平下降，且有统计学差异。
[0086]
血清尿素氮：与正常组相比，模型组血清尿素氮水平均上升，且差异均有统计学意义(p＜0.01)。低剂量组和高剂量组的血清乳酸与模型组相比水平下降，且有统计学差异。
[0087]
由此可见，荆防合剂具有显著的改善慢性疲劳综合征的作用。