一种冬虫夏草及其制品中虫草素和虫草腺苷含量的检测方法与流程

技术特征：
1.一种冬虫夏草及其制品中虫草素和虫草腺苷含量的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）虫草素和虫草腺苷提取：取冬虫夏草或冬虫夏草制品于耐压玻璃管中，加入体积分数为20 %的甲醇溶液，涡旋混匀30 s后，放入耐压腔体中，密封腔体，充入氮气使腔体内压力达到 400 kpa后关闭氮气，加热腔体，使其在10 min内由室温升至120 ℃，再以4 ℃/min的速率升至200 ℃并保持10 min，结束后腔体自然冷却至室温，取出提取液；（2）虫草素和虫草腺苷含量检测：取步骤（1）的提取液，用体积分数为20 %的甲醇溶液转移至100 ml容量瓶中并定容至刻度，摇匀，取10 ml定容后的提取液于50 ml离心管，加入300 mg四氧化三铁负载的磁性纳米吸附材料，涡旋混匀30 s后外加磁场分离，得到净化液，然后进行超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱检测。2.根据权利要求1所述的冬虫夏草及其制品中虫草素和虫草腺苷含量的检测方法，其特征在于，步骤（2）中四氧化三铁负载的磁性纳米吸附材料的制备方法为：将纳米四氧化三铁与乙二胺-n-丙基硅烷按质量比为2：1充分混合后，置于50 ml离心管中，加入无水乙醇，涡旋2 min混匀，以1000~2000 w功率超声1h，室温下静置1 h后，3000~5000 r/min离心3~5 min，弃去上清液，将产物置于60 ℃下真空干燥4 h，取出过150 μm筛网，得到四氧化三铁负载的磁性纳米吸附材料。3.根据权利要求1所述的冬虫夏草及其制品中虫草素和虫草腺苷含量的检测方法，其特征在于，步骤（2）中液相色谱条件：色谱柱：inert sustain-c18、100mm
×
2.1 mm
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m；柱温：35 ℃；流动相为水和甲醇；流速0.2 ml/min；采用体积分数为15%甲醇洗脱；进样量10μl。4.根据权利要求1所述的冬虫夏草及其制品中虫草素和虫草腺苷含量的检测方法，其特征在于，步骤（2）中高分辨质谱条件：可加热点喷雾离子源hesi，阳离子检测模式；鞘气流速：28 l/min；辅助气流速：8 l/min；吹扫气流速：0 l/min；喷雾电压：3200 v；毛细管温度：275℃；辅助气加热温度：300 ℃；扫描模式：一级全扫描 数据依赖的二级扫描full scan ddms2，母粒子扫描分辨率：70000，最大注入时间：100ms，扫描范围100 m/z～300 m/z，子粒子扫描分辨率：17500，触发阈值：1
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105，最大注入时间：50 ms。

技术总结
本发明公开了一种冬虫夏草及其制品中虫草素和虫草腺苷含量的检测方法，包括以下步骤：（1）提取：取冬虫夏草于耐压玻璃管中，加入甲醇溶液，涡旋混匀后放入耐压腔体中，充入氮气使压力达到400 kPa后，加热使其由室温升至120℃，再升至200℃保持10 min，自然冷却至室温，取出提取液；（2）含量检测：取提取液，用甲醇溶液转移至100 mL容量瓶中并定容至刻度，摇匀，取10mL定容后的提取液于50 mL离心管，加入四氧化三铁负载的磁性纳米吸附材料，涡旋混匀后外加磁场分离得净化液，然后进行液相色谱-高分辨质谱检测；本发明的方法配合超高效液相色谱-四级杆/静电场轨道阱高分辨质谱，可以将检测限达到1μg/kg。检测限达到1μg/kg。检测限达到1μg/kg。


技术研发人员：王君 曹晓钢 唐庆强 杨方
受保护的技术使用者：福州海关技术中心
技术研发日：2022.09.07
技术公布日：2022/12/5