一种基于GC-MS的云产野坝子的产地溯源的线性判别方法与流程

一种基于gc-ms的云产野坝子的产地溯源的线性判别方法
技术领域
1.本发明涉及一种野坝子产地溯源的分析方法，具体涉及一种基于gc-ms的云产野坝子的产地溯源的线性判别方法。


背景技术：

2.野坝子属于唇形科的一种药食同源植物，具有一种特殊的香味。它主要分布在中国西南地区，尤其是云南省。在云南省野坝子被广泛用于凉茶、药材和蜂蜜植物。在云南当地，少数民族用它来治疗感冒、发烧、流感和腹泻。除了上述药用功能外，最近的研究表明，从野坝子中分离出的许多化合物具有抗癌作用，甚至可以缓解阿尔茨海默氏症的症状。通过植物化学方法鉴定出多种萜类、多酚类、黄酮类等非挥发性成分。
3.另外，野坝子作为地域性较强的特色天然植物，其提取物在卷烟中具有增香、提质和矫味等应用效果，深具优良天然烟用香料的特质，是中式卷烟添加的天然香料潜在资源。目前市场上云产野坝子主要来源地有大理市、永胜县、丽江市和富民县。由于野坝子作为一种草本植物，其安全性、真实性和药用效果都受到地理来源的影响。因此，有必要进行产地溯源。
4.气相色谱-质谱(gc-ms)具有良好的重现性、高灵敏度以及对挥发性成分的出色分离和鉴定。挥发性成分的gc-ms测定可用于对草药的药效进行初步评价，进一步结合化学计量学方法可实现其来源进行溯源。
5.为了解决以上问题，提出本发明。


技术实现要素：

6.本发明目的通过以下技术方案实现。
7.本发明提供了一种基于gc-ms的云产野坝子的产地溯源的线性判别方法，其包括以下步骤：
8.步骤(1)：用gc-ms分析不同产地的云产野坝子的样品；
9.步骤(2)：基于以下判别函数识别大理市、永胜县、丽江县和富民县的野坝子；
10.y
大理
＝-11687.685x1 75.673x2 2229.3x3 373.426x
4-17.858x5 -5.691x
6-884.701x7 39.451x
8-2831.515x9 106.726x
10-207.288；
11.y
富民
＝767152.88x
1-8061.008x
2-146394.36x
3-6393.556x4 3925.007x5 3399.196x6 34040.447x7 5303.425x8 184467.643x9-7677.192x10-492593.945；
12.y
丽江
＝87783.573x
1-495.56x
2-17738.558x
3-3029.5x
4-30.16x
5-59.017x6 7333.816x
7-652.077x8 22526.668x
9-589.39x
10-9916.409；
13.y
永胜
＝-25471.496x1 368.086x2 4508.273x
3-229.34x
4-242.539x
5-202.27x
6-464.837x
7-440.28x
8-6030.808x9 346.746x
10-810.274
14.其中：x1为3-甲基丁酸2-甲基丙酯含量μg/g，x2为青蒿酮含量μg/g，x3为5-羟基亚氨基戊酸甲酯含量μg/g，x4为2-[2-h3]甲基吡嗪含量μg/g，x5为葎草烯醇-ii含量μg/g，x6为
小茴香酚含量μg/g，x7为6,10,14-三甲基-2-十五烷酮含量μg/g，x8为二十烷基乙烯基碳酸酯含量μg/g，x9为2-甲基-二十烷含量μg/g，x
10
为2-甲基-二十八烷含量μg/g；
[0015]
四者相比，若y
大理
数值更大，则该样品中野坝子为大理市野坝子，若y
富民
数值更大，则该样品中野坝子为富民县野坝子，若y
永胜
数值更大，则该样品中野坝子为永胜县野坝子，若y
丽江
数值更大，则该样品中野坝子为丽江县野坝子。
[0016]
优选地，步骤(1)中可具体包括如下步骤：
[0017]
(11)样品收集
[0018]
采集一定量需检测样品，均匀分成若干份，每份按一定重量取样，装袋待测；
[0019]
(12)样品前处理
[0020]
在10ml离心管中称量0.1g样品，添加1.5ml 1μg/ml氘代甲苯-乙酸乙酯溶液。将混合物超声处理10分钟，在4000rpm下离心8分钟，过滤，取500μl上清液，转移到色谱进样瓶中，准备进行gc-ms分析。
[0021]
(13)gc-ms检测
[0022]
将步骤(12)所得的样品溶液，通过直接进样的方式，进行gc-ms检测。
[0023]
(14)数据处理
[0024]
归一化：使用内标法进行量化。每个挥发性成分的含量计算如下：
[0025][0026]
其中：ci表示测得的挥发性成分的含量；ai是对应化合物的峰面积；a0表示内标物的峰面积；m0表示内标物的质量；m是所取样品的质量。然后将数据用于统计分析。
[0027]
其挥发性成分含量值取其多次检测的算术平均值。
[0028]
当然，步骤(1)也可以用其他取样条件、样品前处理条件或数据处理方法，只要能符合检测原理把各物质的含量检测出来就行。
[0029]
优选地，步骤(1)中所取样品平均分成份数均不小于6份，每份不少于0.1克。
[0030]
优选地，步骤(1)中，仪器分析参数如下：
[0031]
色谱条件：
[0032]
质谱条件：色谱柱为db-35gc色谱柱(30m
×
0.25mm
×
0.25μm)(安捷伦，美国)。进样口温度为280℃。载气为氦气，流速为1ml/min。进样体积1.0μl，分流进样，分流比为10:1。初始温度为80℃，以60℃/min的速率加热至275℃，然后以1℃/min的速率升高至295℃，并保持1分钟。
[0033]
传输线和离子源温度分别为300℃和280℃；扫描模式：全扫模式；电离模式为70ev电子碰撞；溶剂延迟时间为2min。当然，步骤(1)中也可以使用其他仪器分析参数，只要能把本发明关心的特征物质含量测出来就行。
[0034]
相对于现有技术，本发明具有以下有益效果：
[0035]
1、本发明首次通过gc-ms分析实现不同野坝子的药用部位及产品的准确鉴别，同时，可以对产品挥发性药用成分进行初步解析。
[0036]
2、本发明首次通过建立判别函数关系对野坝子不同的产地进行溯源，该方法简便，只需要将3-甲基丁酸2-甲基丙酯、青蒿酮、5-羟基亚氨基戊酸甲酯、2-[2-h3]甲基吡嗪、葎草烯醇-ii、小茴香酚、6,10,14-三甲基-2-十五烷酮、二十烷基乙烯基碳酸酯、2-甲基-二
十烷、2-甲基-二十八烷的含量代入步骤(2)的四个判别方程，分别得到y
大理
、y
富民
、y
永胜
和y
丽江
的数值，通过比较四个函数值大小就能判别出云产野坝子的具体产地是大理市、永胜县、丽江县还是富民县，且结果可靠，能够在实际生活中得到广大应用。
具体实施方式
[0037]
下面结合具体实施例对本发明进行说明，但本发明的实施方式不限于此。实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件以及手册中所述的条件,或按照制造厂商所建议的条件所用的通用设备、材料、试剂等，如无特殊说明,均可从商业途径得到。
[0038]
实施例1
[0039]
按照上述步骤(1)，分别取大理市野坝子、丽江县野坝子、富民野坝子1、永胜野坝子和富民野坝子2样品各6个，按照上述步骤进行分析及处理，得到相应的gc-ms数据如表1所示：
[0040]
表1不同产地的云产野坝子样品的gc-ms数据
[0041]
[0042]
[0043][0044]
将它们对应成分含量值分别代入步骤(2)中的判别方程式，所得结果如表2所示：
[0045]
表2样品判别方程值及判别结果
[0046]
[0047][0048]
实验结果表明，该判定方法判定结果与样品实际产地一致，表明本发明方法具有较好的可靠性。
[0049]
为了进一步验证方法的可靠性，分别选择了4个大理市野坝子，4个丽江县野坝子，4个永胜野坝子和4个富民野坝子样品，样品本身在取样、制样后在直观视觉上没有区别，然后在未告知检测人员具体样品来源的情况下，请检测人员纯粹基于本发明的方法对各样品进行部位判别，判别结果如下表3所示：
[0050]
表3方法的验证结果
[0051][0052]
由表3可知，本发明方法的云产大理市野坝子，丽江县野坝子永胜野坝子和富民野坝子的预测准确度都为100％，可以用于云产野坝子产地的准确预测。