一种盐酸右美托咪定中苄氯类基因毒性杂质的检测方法与流程

1.本发明属于药物分析技术领域。


背景技术：

2.盐酸右美托咪定，化学名：( )-4-(s)-[1-(2，3-二甲基苯基)乙基]-1h-咪唑盐酸盐，是一种相对选择性α
2-肾上腺素受体激动剂，具有镇静作用。右美托咪定是美托咪定的活性右旋异构体，为咪唑类衍生物。商业制剂为注射剂型。其α2受体的选择性高，使之鲜有可乐定所具有的不良反应。镇静止痛作用兼备，镇静的同时保持可唤醒能力。该药不诱发临床意义的呼吸抑制，使拔管更加安全，而且可能使病人尽早拔管和撤机而缩短在icu内停留的时间，在临床上具有广泛的应用。
[0003]
基因毒性杂质是一类具有遗传毒性的亲电物质，可与dna发生作用对人体产生不可逆的影响，甚至诱发癌变。因此，对药物中可能产生的基因毒性杂质进行全面分析和评估对用药安全极为重要。
[0004]
1-(1-氯乙基)-2,3-二甲基苯是盐酸右美托咪定合成的关键中间体，其结构式如下：1-(1-氯乙基)-2,3-二甲基苯的同分异构体或同系物杂质2、杂质3、杂质4、杂质5、杂质6（结构式如下）可能在1-(1-氯乙基)-2,3-二甲基苯中存在并带入到产品中，该类化合物含苄氯亲电基团，属于卤代烃类基因毒性杂质，查无动物实验数据和致突变数据，属于3类基因毒性杂质。经查询，其类似物氯化苄为1类基因毒性杂质，动物致癌td
50
为61.5mg/kg/day。因此，作为含相同官能团的类似物，杂质2~6也可能具有动物致癌性。
[0005]
因此，开发适当的方法对盐酸右美托咪定中杂质2~杂质6进行分析和评估是盐酸右美托咪定药物的质量控制中不可或缺的一环，但现有的文献缺乏对盐酸右美托咪定中相关杂质的报道。


技术实现要素：

[0006]
本发明提供了一种盐酸右美托咪定中基因毒性杂质2~6气相色谱检测方法，该方法专属性强、灵敏度高，可准确测定盐酸右美托咪定中基因毒性杂质2~6的含量。
[0007]
本发明是通过以下技术方案实现的：（1）色谱条件采用以50%苯基-50%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱；进样口温度为240℃，检测口温度为250℃（fid），恒流模式，流速为2.5ml/min，程序升温：初始温度为40℃，维持2分钟，以20℃/min升温至160℃，维持9分钟，以50℃/min升温至240℃，维持20分钟（2）溶液配制溶剂：n,n-二甲基乙酰胺。
[0008]
基毒杂质2~6储备液(1.0mg/ml)：分别取基毒杂质2~6对照品各约10mg，精密称定，置不同的10ml量瓶中，分别加溶剂溶解并定量稀释至刻度，摇匀，即得。
[0009]
对照品储备液：分别精密量取上述基毒杂质2~6储备液各2ml，置同一25ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0010]
对照品溶液：取上述对照品储备液5ml，置10ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得。
[0011]
供试品溶液：取本品约0.5g，精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每ml中含50mg的溶液，即得。
[0012]
（3）测定：精密量取溶剂2
µ
l注入气相色谱仪，记录色谱图，溶剂应无干扰；分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各2
µ
l注入气相色谱仪，记录色谱图；按外标法以峰面积计算，基毒杂质2、杂质3、杂质4、杂质5和杂质6含量的总和不得过0.4%。
附图说明
[0013]
图1：实施例1（专属性试验）gc图谱；图2：实施例2（检测限试验）gc图谱。
具体实施方式
[0014]
实施例1专属性试验：取本品约0.5g，精密称定，置10ml量瓶中，精密加入对照品储备液5ml，再加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，得加杂供试品溶液。精密量取加杂供试品溶液2μl，注入气相色谱仪，记录色谱图。结果见图1，各基毒杂质峰与相邻峰间可有效分离，且分离度不小于1.5。本法专属性良好。
[0015]
实施例2检测限试验：照发明内容溶液配制描述配制基毒杂质2~6储备液，用溶剂多次稀释，精密量取2μl注入气相色谱仪，直至测定主峰峰高为基线噪音的3倍左右。若约3%限度浓度水平溶液的色谱图中，基毒杂质2~6主峰s/n不小于3，则以此浓度作为最低检测限浓度。测定1次，记录色谱图。结果见图2，基毒杂质2的检测限浓度为1.182μg/ml，相当于供试液浓度的23.64ppm；基毒杂质3的检测限浓度为1.198μg/ml，相当于供试液浓度的23.96ppm；基毒杂质4的检测限浓度为1.146μg/ml，相当于供试液浓度的22.92ppm；基毒杂质5的检测限浓度为1.078μg/ml，相当于供试液浓度的21.56ppm；基毒杂质6的检测限浓度为1.130μg/ml，相
当于供试液浓度的22.61ppm。
[0016]
实施例3线性试验：精密称取基毒杂质2~6对照品适量，加溶剂溶解并定量稀释制成基毒杂质2~6的浓度分别为loq、10μg/ml（25%）、20μg/ml（50%）、32μg/ml(80%)、40μg/ml（100%）、80μg/ml（200%）的混合溶液。分别精密量取上述各浓度水平的溶液2μl注入气相色谱仪，记录峰面积。以浓度c(μg/ml)对峰面积(a)作标准曲线，计算相关系数。结果见下表。基毒杂质2在3.939~78.79μg/ml浓度范围内线性关系良好，回归方程为y=0.0586x 0.01，y轴的截距在100%响应值的25%以内，r=0.9998；基毒杂质3在3.994~79.88μg/ml浓度范围内线性关系良好，回归方程为y=0.0648x 0.0193，y轴的截距在100%响应值的25%以内，r=0.9998；基毒杂质4在3.821~76.42μg/ml浓度范围内线性关系良好，回归方程为y=0.0575x-0.0013，y轴的截距在100%响应值的25%以内，r=0.9999；基毒杂质5在3.592~71.84μg/ml浓度范围内线性关系良好，回归方程为y=0.0648x 0.0225，y轴的截距在100%响应值的25%以内，r=0.9997；基毒杂质6在3.768~75.35μg/ml浓度范围内线性关系良好，回归方程为y = 0.0651x 0.0073，y轴的截距在100%响应值的25%以内，r=0.9998。
[0017]
。


技术特征：
1.一种盐酸右美托咪定中苄氯类基因毒性杂质的气相检测方法，其特征在于，色谱条件为：采用以50%苯基-50%二甲基聚硅氧烷为固定液的毛细管柱；进样口温度为240℃，检测口温度为250℃，恒流模式，流速为2.5ml/min，程序升温：初始温度为40℃，维持2分钟，以20℃/min升温至160℃，维持9分钟，以50℃/min升温至240℃，维持20分钟。2.一种盐酸右美托咪定中苄氯类基因毒性杂质的气相检测方法，其特征在于，溶液配制方法为，溶剂：n,n-二甲基乙酰胺；基毒杂质2~6储备液：分别取基毒杂质2~6对照品各约10mg，精密称定，置不同的10ml量瓶中，分别加溶剂溶解并定量稀释至刻度，摇匀，即得；对照品储备液：分别精密量取上述基毒杂质2~6储备液各2ml，置同一25ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；对照品溶液：取上述对照品储备液5ml，置10ml量瓶中，加溶剂稀释至刻度，摇匀，即得；供试品溶液：取本品约0.5g，精密称定，置10ml量瓶中，加溶剂溶解并稀释至刻度，摇匀，制成每ml中含50mg的溶液，即得。

技术总结
本发明提供了一种盐酸右美托咪定中苄氯类基因毒性杂质的气相色谱检测方法，针对现已经报导的盐酸右美托咪定的基因毒杂质，通过优化气相检测升温程序及筛选合适的毛细管柱，大大提高了方法专属性强、灵敏度高，可准确测定盐酸右美托咪定中苄氯类基因毒性杂质的含量，大大提高了药品质量和用药的安全性。大大提高了药品质量和用药的安全性。


技术研发人员：杨鹏辉 张婷 张彦娥
受保护的技术使用者：南京亿华药业有限公司
技术研发日：2022.07.21
技术公布日：2022/11/22