前处理试剂及制备方法和细胞染色方法及前处理方法与流程

技术特征：
1.一种前处理试剂，其特征在于，用于细胞在悬浮液中染色前的待染色样本前处理，其组分，以体积百分比计，包括0.5%-5%稳定剂，95%-99.5%缓冲液。2.根据权利要求1所述的前处理试剂，其特征在于，其组分，以体积百分比计，包括1%-3%稳定剂，97%-99%缓冲液。3.根据权利要求1或2所述的前处理试剂，其特征在于，所述前处理试剂的ph值范围为6.5-8.1;或所述前处理试剂的ph值范围为6.8-7.6。4.根据权利要求1或2所述的前处理试剂，其特征在于，所述稳定剂的组分，以体积百分比计，包括33.3%-50%戊二醛溶液，50%-66.7%醛类溶液；或所述稳定剂的组分，以体积百分比计，包括40%-50%戊二醛溶液，50%-60%醛类溶液。5.根据权利要求4所述的前处理试剂，其特征在于，所述醛类溶液中的醛类物质包括甲醛、乙醛、丙醛、多聚甲醛中的任意一种或多种。6.根据权利要求1或2所述的前处理试剂，其特征在于，所述稳定剂的组分，以体积百分比计，包括21.1%-48.3%戊二醛溶液，51.7%-88.9%醇类溶液。7.根据权利要求6所述的前处理试剂，其特征在于，所述醇类溶液中的醇类物质包括无水甲醇或无水乙醇。8.根据权利要求4所述的前处理试剂，其特征在于，所述戊二醛溶液是戊二醛的质量百分比为50%的戊二醛溶液；所述醛类溶液是醛类物质的质量百分比为37%的醛类溶液。9.根据权利要求1或2所述的前处理试剂，其特征在于，所述缓冲液的组分，以体积百分比计，包括10%-50%磷酸缓冲液，50%-90%纯化水;或所述缓冲液的组分，以体积百分比计，包括20%-40%磷酸缓冲液，60%-80%纯化水。10.根据权利要求9所述的前处理试剂，其特征在于，所述前处理试剂中，磷酸盐浓度0.02m(摩尔/升)至0.1m(摩尔/升)。11.根据权利要求9所述的前处理试剂，其特征在于，所述磷酸缓冲液的组分，以体积百分比计，包括5.3%-73.5%磷酸二氢盐溶液和26.5%-94.7%磷酸氢二盐溶液。12.根据权利要求11所述的前处理试剂，其特征在于，所述磷酸缓冲液的组分，以体积百分比计，包括13%-51%磷酸二氢盐溶液和49%-87%磷酸氢二盐溶液。13.一种前处理试剂制备方法，其特征在于，用于制备权利要求4所述的前处理试剂，包括以下步骤，步骤d：取戊二醛溶液和醛类溶液以33.3%：66.7%至50%:50%的体积比进行混合，制得稳定剂；步骤e：将步骤d制得的稳定剂和缓冲液以0.5：99.5至5：95的体积比混合制得前处理试剂。
14.根据权利要求13所述的前处理试剂制备方法，其特征在于，在步骤d之前还包括以下步骤：步骤a：配制0.2m(摩尔/升)磷酸二氢盐溶液的步骤；称取定量无水磷酸二氢盐，溶于相应容积的纯化水中，定容制得0.2m(摩尔/升)磷酸二氢盐溶液；步骤b：配制0.2m(摩尔/升)磷酸氢二盐溶液的步骤；称取定量无水磷酸氢二盐，溶于相应容积的纯化水中，定容制得0.2m(摩尔/升)磷酸氢二盐溶液；步骤c：利用步骤a制得的磷酸二氢盐溶液和步骤b制得的磷酸氢二盐溶液混合配制成ph值为6.4-8.0的磷酸缓冲液；步骤e中所用的缓冲液是步骤c制得的磷酸缓冲液;磷酸缓冲液的用量配比使制得的前处理试剂中，磷酸盐浓度0.02m(摩尔/升)至0.1m(摩尔/升)；前处理试剂ph值范围为6.5-8.1。15.一种前处理方法，其特征在于，使用了权利要求1至12中任意一项所述的前处理试剂对待染色样本进行细胞染色之前的前处理；包括以下步骤：步骤1：将待染色样本和前处理试剂以1:49至1:399的体积比混合均匀，完成待染色样本的前处理。16.一种细胞染色方法，其特征在于，用于在悬浮液中对细胞进行染色；在加入染色液之前采用了权利要求14中的前处理方法对待染色样本进行了前处理。17.根据权利要求16所述的细胞染色方法，其特征在于，在悬浮液中加入的染色液包括：瑞吉氏染色液、瑞氏染色液、吉姆萨染色液、新亚甲蓝染色液、煌焦油蓝染色液、迪夫快速染色液中的任意一种或多种。

技术总结
一种前处理试剂，用于细胞在悬浮液中染色的前处理，其组分，以体积百分比计，包括0.5%-5%稳定剂，95%-99.5%缓冲液。所述稳定剂的组分，以体积百分比计，包括33.3%-50%戊二醛溶液，50%-66.7%甲醛溶液；前处理试剂的pH值范围为6.5-8.1。本方案中的稳定剂，一方面使细胞膜表面膜蛋白发生交联，使在细胞膜表面形成网状结构，保持细胞形态；另一方面破坏细胞膜的磷脂双分子层，增加细胞膜的透过性，使后续染料进入细胞的效率一致，且快速；使细胞染色的时间变短，染色均一性变高。能适用于多种应用场景，如即时检验、急救、床边，战地等多种缺乏专业人员、大型设备和复杂检验环境的条件下。大型设备和复杂检验环境的条件下。大型设备和复杂检验环境的条件下。


技术研发人员：王志平 刘亚慧
受保护的技术使用者：深圳安侣医学科技有限公司
技术研发日：2021.05.21
技术公布日：2022/11/22