一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法

1.本发明涉及茶叶分析技术领域，具体涉及一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法。


背景技术：

2.凤凰单丛茶属于六大茶类中的乌龙茶，也叫青茶，产自于广东省潮州市潮安县凤凰山，是从凤凰水仙品种中选育出来的优异单株及培育出来的品系、品种和株系，其加工工艺一般包括采摘，晒青，凉青(晾青)，做青(摇青)，杀青，揉捻，烘培，贮藏。目前，市面上对凤凰单丛的分类及其繁多及随意，可分出上百种品系或品种。但目前最受人接受的是十大香型的分类法，即当地茶农按照传统感官品评将其分为蜜兰香、杏仁香、八仙、通天香、姜花香、玉兰香、夜来香、桂花香、肉桂香、茉莉花香十大香型。而在这十大香型的凤凰单丛茶中，又以蜜兰香、杏仁香、八仙、鸭屎香、通天香为主要热销品种，尤其是鸭屎香更是闻名海内外。
3.作为世界三大无酒精饮料之一的茶，在如此巨大的消费量下，其品质的优次已经成为影响茶叶消费量一个很重要的因素。而对于凤凰单丛茶品种的鉴定通常是采用感观评价，感观评价对于评价者的要求比较高，要求评价者具有对凤凰单丛茶的饮茶经验十分丰富，而且伴有主观印象带来的误差。因此，建立科学的、可量化的品种判定手段，对凤凰单丛茶的品种进行客观鉴定，对于茶叶的采购及销售都具有重要的指导意义。


技术实现要素：

4.本发明的目的在于克服上述现有技术中对凤凰单丛茶品种的鉴定为主观鉴定无法科学地指导采购及销售的技术缺陷，提供一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶的方法，该方法能够对凤凰单丛茶的品种进行客观鉴定评价。
5.为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
6.一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法，包括以下步骤：
7.1)制备待鉴定样品：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取定量的粉末添加到离心管中，加入沸水，保温，过滤后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，离心，取上清液，过滤，保存待测，每组重复3次；所述待鉴定茶叶为蜜兰香凤凰单丛茶、杏仁香凤凰单丛叶、八仙凤凰单丛茶、鸭屎香凤凰单丛茶或者通天香凤凰单丛茶；
8.2)采用液相色谱-质谱联用仪进行定性分析；
9.3)数据处理：通过安捷伦msdg1701eae.02.00.493化学工作站数据处理系统，将gc-ms分析得到的质谱数据在nist08.l标准谱库进行检索，同时采用峰面积归一化法进行定量，得到各组分的相对含量；
10.4)结果分析：根据定性分析得到的成分鉴定品种。
11.进一步地，制备待鉴定样品的具体过程如下：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取0.30g添加到50ml离心管中，加入100℃的沸水至50ml刻度线，在100℃下保温5min，过滤
后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，5000r离心10min，取上清液2ml，过0.22um滤膜，置于-20℃保存待测，每组重复3次。
12.进一步地，采用液相色谱-质谱联用仪进行分析的具体条件如下：色谱柱为agilent technologies c18、2.00x100mm，1.8um，流动相a为乙腈，流动相b为超纯水，柱温40℃，流速0.40ml/min，进样量100.00ul/min，梯度洗脱。
13.进一步地，结果分析步骤中，若成分含有2，5，7，3’，4
’‑
五羟基黄烷酮5-o-葡糖苷、异牡荆素2
”‑
o-(6
”‑
(e)-p-香豆酰基)葡萄糖苷4
’‑
o-葡萄糖苷、槲皮素3-(2
”‑
没食子酰-α-l-阿拉伯吡喃糖苷)，则为蜜兰香。
14.进一步地，结果分析步骤中，若成分含有6-羟基甾醇5-鼠李糖苷、异牡荆素7-o-鼠李糖苷、杨梅素3
’‑
o-(6
’‑
对香豆酰)葡萄糖苷、槲皮素7-(6
”‑
没食子酰葡萄糖苷)，则为杏仁香。
15.进一步地，结果分析步骤中，若成分含有山萘酚3-(4
”‑
(e)-p-coumarylrobinobioside)-7-鼠李糖苷、表儿茶素3-o-(2-反式肉桂酰-β-d-吡喃葡萄糖苷)，则为八仙。
16.进一步地，结果分析步骤中，若成分含有l-β-天冬氨酸-l-亮氨酸、甘油酸、对水杨酸，则为鸭屎香。
17.进一步地，结果分析步骤中，若成分含有2-氨基庚二酸、l-精氨酸、n-乙酰基丙氨酸，则为通天香。
18.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
19.本发明中，对凤凰单丛茶的滋味成分的提取方法、色谱-质谱联用分析及分析条件保证了对滋味成分的提取完全且分析的重复性好，为研究凤凰单丛茶的各品种特有滋味成分提供了基础。
20.发明人经过研究发现了凤凰单丛茶中蜜兰香、杏仁香、八仙、鸭屎香、通天香五种品种的特有滋味成分，提供了一种科学的鉴定蜜兰香、杏仁香、八仙、鸭屎香、通天香这五种凤凰单丛种品种的方法，对于茶叶的采购及销售都具有重要的指导意义。
具体实施方式
21.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本领域普通人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，均属于本发明的保护范围。
22.实施例1：
23.一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法，包括以下步骤：
24.1)制备待鉴定样品：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取0.30g添加到50ml离心管中，加入100℃的沸水至50ml刻度线，在100℃下保温5min，过滤后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，5000r离心10min，取上清液2ml，过0.22um滤膜，置于-20℃保存待测，每组重复3次；所述待鉴定茶叶为蜜兰香凤凰单丛茶、杏仁香凤凰单丛叶、八仙凤凰单丛茶、鸭屎香凤凰单丛茶或者通天香凤凰单丛茶；
25.2)采用液相色谱-质谱联用仪进行定性分析；具体条件如下：色谱柱为agilent technologies c18、2.00x100mm，1.8um，流动相a为乙腈，流动相b为超纯水，柱温40℃，流速
0.40ml/min，进样量100.00ul/min，梯度洗脱如表1、表2；
26.表1neg模式梯度参数
[0027][0028]
表2pos模式梯度参数
[0029][0030][0031]
3)数据处理：通过安捷伦msdg1701eae.02.00.493化学工作站数据处理系统，将gc-ms分析得到的质谱数据在nist08.l标准谱库进行检索，同时采用峰面积归一化法进行定量，得到各组分的相对含量(组分峰面积占总峰面积的百分比，即萃取头上此种香气成分含量占萃取头上所吸附的化合物总量的百分比)。
[0032]
4)结果分析：样品成分含有2，5，7，3’，4
’‑
五羟基黄烷酮5-o-葡糖苷、异牡荆素2
”‑
o-(6
”‑
(e)-p-香豆酰基)葡萄糖苷4
’‑
o-葡萄糖苷、槲皮素3-(2
”‑
没食子酰-α-l-阿拉伯吡喃糖苷)，鉴定为蜜兰香，鉴定结果与样品实际品种一致。
[0033]
实施例2：
[0034]
一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法，包括以下步骤：
[0035]
1)制备待鉴定样品：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取0.30g添加到50ml离心管中，加入100℃的沸水至50ml刻度线，在100℃下保温5min，过滤后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，5000r离心10min，取上清液2ml，过0.22um滤膜，置于-20℃保存待测，每组重复3次；所述待鉴定茶叶为蜜兰香凤凰单丛茶、杏仁香凤凰单丛叶、八仙凤凰单丛茶、鸭屎香凤凰单丛茶或者通天香凤凰单丛茶；
[0036]
2)采用液相色谱-质谱联用仪进行定性分析；具体条件如下：色谱柱为agilent technologies c18、2.00x100mm，1.8um，流动相a为乙腈，流动相b为超纯水，柱温40℃，流速0.40ml/min，进样量100.00ul/min，梯度洗脱见实施例1；
[0037]
3)数据处理：通过安捷伦msdg1701eae.02.00.493化学工作站数据处理系统，将gc-ms分析得到的质谱数据在nist08.l标准谱库进行检索，同时采用峰面积归一化法进行定量，得到各组分的相对含量(组分峰面积占总峰面积的百分比，即萃取头上此种香气成分含量占萃取头上所吸附的化合物总量的百分比)。
[0038]
4)结果分析：样品成分含有6-羟基甾醇5-鼠李糖苷、异牡荆素7-o-鼠李糖苷、杨梅素3
’‑
o-(6
’‑
对香豆酰)葡萄糖苷、槲皮素7-(6
”‑
没食子酰葡萄糖苷)，鉴定为杏仁香，鉴定结果与样品实际品种一致。
[0039]
实施例3：
[0040]
一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法，包括以下步骤：
[0041]
1)制备待鉴定样品：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取0.30g添加到50ml离心管中，加入100℃的沸水至50ml刻度线，在100℃下保温5min，过滤后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，5000r离心10min，取上清液2ml，过0.22um滤膜，置于-20℃保存待测，每组重复3次；所述待鉴定茶叶为蜜兰香凤凰单丛茶、杏仁香凤凰单丛叶、八仙凤凰单丛茶、鸭屎香凤凰单丛茶或者通天香凤凰单丛茶；
[0042]
2)采用液相色谱-质谱联用仪进行定性分析；具体条件如下：色谱柱为agilent technologies c18、2.00x100mm，1.8um，流动相a为乙腈，流动相b为超纯水，柱温40℃，流速0.40ml/min，进样量100.00ul/min，梯度洗脱见表1；
[0043]
3)数据处理：通过安捷伦msdg1701eae.02.00.493化学工作站数据处理系统，将gc-ms分析得到的质谱数据在nist08.l标准谱库进行检索，同时采用峰面积归一化法进行定量，得到各组分的相对含量(组分峰面积占总峰面积的百分比，即萃取头上此种香气成分含量占萃取头上所吸附的化合物总量的百分比)。
[0044]
4)结果分析：样品成分含有山萘酚3-(4
”‑
(e)-p-coumarylrobinobioside)-7-鼠李糖苷、表儿茶素3-o-(2-反式肉桂酰-β-d-吡喃葡萄糖苷)，鉴定为八仙，鉴定结果与样品实际品种一致。
[0045]
实施例4：
[0046]
一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法，包括以下步骤：
[0047]
1)制备待鉴定样品：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取0.30g添加到50ml离心管中，加入100℃的沸水至50ml刻度线，在100℃下保温5min，过滤后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，5000r离心10min，取上清液2ml，过0.22um滤膜，置于-20℃保存待测，每组重复3次；所述待鉴定茶叶为蜜兰香凤凰单丛茶、杏仁香凤凰单丛叶、八仙凤凰单丛茶、鸭屎香凤凰单丛茶或者通天香凤凰单丛茶；
[0048]
2)采用液相色谱-质谱联用仪进行定性分析；具体条件如下：色谱柱为agilent technologies c18、2.00x100mm，1.8um，流动相a为乙腈，流动相b为超纯水，柱温40℃，流速0.40ml/min，进样量100.00ul/min，梯度洗脱见表1；
[0049]
3)数据处理：通过安捷伦msdg1701eae.02.00.493化学工作站数据处理系统，将gc-ms分析得到的质谱数据在nist08.l标准谱库进行检索，同时采用峰面积归一化法进行定量，得到各组分的相对含量(组分峰面积占总峰面积的百分比，即萃取头上此种香气成分含量占萃取头上所吸附的化合物总量的百分比)。
[0050]
4)结果分析：样品成分含有l-β-天冬氨酸-l-亮氨酸、甘油酸、对水杨酸，鉴定为鸭屎香，鉴定结果与样品实际品种一致。
[0051]
实施例5：
[0052]
一种从滋味成分鉴定凤凰单丛茶品种的方法，包括以下步骤：
[0053]
1)制备待鉴定样品：将微波固定后的样品研磨成粉末，称取0.30g添加到50ml离心
管中，加入100℃的沸水至50ml刻度线，在100℃下保温5min，过滤后弃茶渣，将滤液放入高速离心机，5000r离心10min，取上清液2ml，过0.22um滤膜，置于-20℃保存待测，每组重复3次；所述待鉴定茶叶为蜜兰香凤凰单丛茶、杏仁香凤凰单丛叶、八仙凤凰单丛茶、鸭屎香凤凰单丛茶或者通天香凤凰单丛茶；
[0054]
2)采用液相色谱-质谱联用仪进行定性分析；具体条件如下：色谱柱为agilent technologies c18、2.00x100mm，1.8um，流动相a为乙腈，流动相b为超纯水，柱温40℃，流速0.40ml/min，进样量100.00ul/min，梯度洗脱见表1；
[0055]
3)数据处理：通过安捷伦msdg1701eae.02.00.493化学工作站数据处理系统，将gc-ms分析得到的质谱数据在nist08.l标准谱库进行检索，同时采用峰面积归一化法进行定量，得到各组分的相对含量(组分峰面积占总峰面积的百分比，即萃取头上此种香气成分含量占萃取头上所吸附的化合物总量的百分比)。
[0056]
4)结果分析：样品成分含有2-氨基庚二酸、l-精氨酸、n-乙酰基丙氨酸，鉴定为通天香，鉴定结果与样品实际品种一致。
[0057]
以上所述为本发明的较佳实施例而已，但本发明不应局限于该实施例所公开的内容，所以凡是不脱离本发明所公开的精神下完成的等效或修改，都落入本发明保护的范围。