可用作IRAK4抑制剂的三环杂芳基化合物的制作方法

可用作irak4抑制剂的三环杂芳基化合物
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求2020年2月3日提交的美国临时申请序列号62/969,406的权益，将所述临时申请以其整体并入本文。
3.描述
4.本发明总体上涉及可用作激酶抑制剂(包括irak-4的调节)的三环杂芳基化合物。本文提供了三环杂芳基化合物、包含此类化合物的组合物、及其使用方法。本发明进一步涉及可用于治疗与激酶调节有关的病症的含有至少一种根据本发明的化合物的药物组合物，以及抑制激酶(包括哺乳动物中的irak-4)活性的方法。
5.toll/il-1受体家族成员是炎症和宿主抗性的重要调节因子。toll样受体(tlr)家族识别源自包括细菌、真菌、寄生虫和病毒的传染性生物体的分子模式(综述于kawai,t.等人,nature immunol.,11:373-384(2010)中)。结合至受体的配体诱导衔接分子的二聚化并将其募集至受体中称为toll/il-1受体(tir)结构域的保守胞质基序。除tlr3外，所有tlr均募集衔接分子myd88。il-1受体家族还含有胞质tir基序并且在配体结合时募集myd88(综述于sims,j.e.等人,nature rev.immunol.,10:89-102(2010)中)。
6.丝氨酸/苏氨酸激酶irak家族的成员通过与myd88相互作用而被募集到受体中。所述家族由四个成员组成。几条证据表明irak4在经由myd88依赖性tlr和il-1r家族成员开始信号传导中发挥关键且非冗余的作用。结构数据证实，irak4直接与myd88相互作用并且随后将irak1或irak2募集至受体复合物以促进下游信号传导(lin,s.等人,nature,465:885-890(2010))。irak4直接磷酸化irak1以促进下游信号传导至e3泛素连接酶traf6，从而导致激活丝氨酸/苏氨酸激酶tak1并随后激活nfκb通路和mapk级联(flannery,s.等人,biochem.pharmacol.,80:1981-1991(2010))。鉴定了缺乏irak4表达的人患者子集(picard,c.等人,science,299:2076-2079(2003))。来自这些患者的细胞对除tlr3外的所有tlr激动剂和il-1家族成员(包括il-1β和il-18)无反应(ku,c.等人,j.exp.med.,204:2407-2422(2007))。小鼠中irak4的缺失导致il-1、il-18和除tlr3外的所有tlr依赖性反应的重度阻断(suzuki,n.等人,nature,416:750-754(2002))。相反地，irak1(thomas,j.a.等人,j.immunol.,163:978-984(1999)；swantek,j.l.等人,j.immunol.,164:4301-4306(2000))或irak2(wan,y.等人,j.biol.chem.,284:10367-10375(2009))的缺失导致信号传导的部分损失。此外，irak4是irak家族中唯一的已显示其激酶活性是启动信号传导所需的成员。用激酶失活突变体(kdki)替代小鼠基因组中的野生型irak4会损害经由所有myd88依赖性受体的信号传导，所述myd88依赖性受体包括il-1、il-18和除tlr3之外的所有tlr(koziczak-holbro,m.等人,j.biol.chem.,282:13552-13560(2007)；kawagoe,t.等人,j.exp.med.,204:1013-1024(2007)；以及fraczek,j.等人,j.biol.chem.,283:31697-31705(2008))。
7.与野生型动物相比，irak4 kdki小鼠在以下疾病的小鼠模型中显示出大幅降低的疾病严重程度：多发性硬化(staschke,k.a.等人,j.immunol.,183:568-577(2009))、类风湿性关节炎(koziczak-holbro,m.等人,arthritis rheum.,60:1661-1671(2009))、动脉粥
样硬化(kim,t.w.等人,j.immunol.,186:2871-2880(2011)和rekhter,m.等人,biochem.biophys.res.comm.,367:642-648(2008))和心肌梗塞(maekawa,y.等人,circulation,120:1401-1414(2009))。如所描述的，irak4抑制剂将阻断所有myd88依赖性信号传导。已显示myd88依赖性tlr有助于多发性硬化、类风湿性关节炎、心血管疾病、代谢综合征、败血症、系统性红斑狼疮、炎性肠病(包括克罗恩病和溃疡性结肠炎)、自身免疫性葡萄膜炎、哮喘、过敏、i型糖尿病和同种异体移植物排斥的发病机理(keogh,b.等人,trends pharmacol.sci.,32:435-442(2011)；mann,d.l.,circ.res.,108:1133-1145(2011)；horton,c.g.等人,mediators inflamm.,文章id 498980(2010),doi:10.1155/2010/498980；goldstein,d.r.等人,j.heart lung transplant.,24:1721-1729(2005)；和cario,e.,inflamm.bowel dis.,16:1583-1597(2010))。已鉴定出弥漫性大b细胞淋巴瘤中的致癌活性myd88突变，这些突变对irak4抑制是敏感的(ngo,v.n.等人,nature,470:115-121(2011))。全基因组测序还鉴定出与慢性淋巴性白血病相关的myd88突变，表明irak4抑制剂还具有治疗白血病的效用(puente,x.s.等人,nature,475:101-105(2011))。
8.除阻断tlr信号传导外，irak4抑制剂还将阻断通过il-1家族成员的信号传导。已显示中和il-1在多种疾病中是有效的，包括痛风；痛风性关节炎；2型糖尿病；自身炎性疾病，包括隐热蛋白(cryopyrin)相关周期性综合征(caps)、tnf受体相关周期性综合征(traps)、家族性地中海热(fmf)、成人发作性斯蒂尔病；全身性发作性幼年特发性关节炎；中风；移植物抗宿主病(gvhd)；郁积型多发性骨髓瘤；复发性心包炎；骨关节炎；肺气肿(dinarello,c.a.,eur.j.immunol.,41:1203-1217(2011)和couillin,i.等人,j.immunol.,183:8195-8202(2009))。在阿尔茨海默病的小鼠模型中，il-1受体的阻断会改进认知缺陷，减弱蛋白病理学，并且减少淀粉样蛋白-β的寡聚形式(kitazawa,m.等人,j.immunol.,187:6539-6549(2011))。还已显示出，il-1是导致适应性免疫的关键环节，驱动th17效应t细胞亚群的分化(chung,y.等人,immunity,30:576-587(2009))。因此，预测irak4抑制剂在th17相关疾病中具有功效，这些疾病包括多发性硬化、银屑病、炎性肠病、自身免疫性葡萄膜炎和类风湿性关节炎(wilke,c.m.等人,trends immunol.,32:603-661(2011))。
9.鉴于可能通过涉及调节蛋白激酶的治疗而受益的病症，立即清楚的是，能够调节蛋白激酶(如irak-4)的新化合物以及使用这些化合物的方法可以为多种多样患者提供实质性治疗益处。


技术实现要素：

10.本发明涉及一类新的三环杂芳基化合物，其被发现是蛋白激酶(包括irak-4)的有效抑制剂。提供的这些化合物可用作具有对其成药性重要的所希望的稳定性、生物利用度、治疗指数和毒性值的药物。
11.本发明提供了可用作irak-4抑制剂且可用于治疗增殖性疾病、变应性疾病、自身免疫病和炎性疾病的式(i)和式(ii)的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药。
12.本发明还提供了药物组合物，所述药物组合物包含药学上可接受的载体以及本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药中的至少一
种。
13.本发明还提供了一种用于抑制irak-4的方法，所述方法包括向需要此类治疗的宿主施用治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药中的至少一种。
14.本发明还提供了一种用于治疗增殖性、代谢性、过敏性、自身免疫性和炎性疾病的方法，所述方法包括向需要这种治疗的宿主施用治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药中的至少一种。
15.一个实施方案提供了一种用于治疗炎性疾病和自身免疫病的方法。具体的炎性疾病和自身免疫病包括但不限于克罗恩病、溃疡性结肠炎、哮喘、移植物抗宿主病、同种异体移植物排斥、慢性阻塞性肺疾病、格雷夫斯病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、狼疮性肾炎、皮肤狼疮、银屑病、隐热蛋白相关周期性综合征(caps)、tnf受体相关周期性综合征(traps)、家族性地中海热(fmf)、成人发作性斯蒂尔病、全身性发作性幼年特发性关节炎、多发性硬化、神经性疼痛、痛风和痛风性关节炎。
16.一个实施方案提供了治疗痛风和痛风性关节炎的方法。
17.替代性实施方案为治疗代谢性疾病(包括2型糖尿病和动脉粥样硬化)的方法。
18.一个实施方案提供了一种用于治疗癌症的方法，所述方法包括向需要这种治疗的宿主施用治疗有效量的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药中的至少一种。
19.本发明还提供了用于疗法的本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药。
20.本发明还提供了本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药在制造用于治疗癌症的药物中的用途。
21.本发明还提供了在试剂盒中的式(i)或式(ii)的化合物或药物组合物，所述试剂盒具有使用所述化合物或组合物的说明书。
22.本发明还提供了用于制备本发明的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药的方法和中间体。
23.随着本公开文本的继续，本发明的这些和其他特征将以扩展的形式阐述。
具体实施方式
24.本发明的第一方面提供了至少一种式(i)或式(ii)的化合物：
[0025][0026]
或其盐，其中：
[0027]
x是cr
3a
或n；
[0028]
r1是：
[0029]
(i)-c(o)nr
xr1a
；或
[0030]
(ii)吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、或噻二唑基，各自被零
至2个r
1b
取代；
[0031]r1a
是：
[0032]
(i)被零至6个rw取代的c
1-6
烷基；或
[0033]
(ii)-(cr
xrx
)
0-3r1c
；
[0034]
每个rw独立地是f、cl、-cn、-oh、-och3、-nr
xrx
、-nr
x
c(o)(c
1-3
烷基)、-nr
x
c(o)(c
3-6
环烷基)、或c
3-6
环烷基；
[0035]
每个r
1b
独立地是-cr
xrx
(c
3-6
环烷基)、四氢呋喃基、吡咯烷基、四氢吡喃基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、或被零至6个rw取代的c
1-6
烷基；
[0036]r1c
是c
3-6
环烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、四氢吡喃基、二氧化四氢苯硫基、二氧化硫代吗啉基、异噁唑基、噁唑基、噻唑基、噁二唑基、三唑基、或四唑基，各自被零至3个独立地选自以下的取代基取代：f、cl、-cn、-oh、-nr
xrx
、c
1-3
烷基、c
1-3
氟烷基、c
1-3
羟烷基、-nr
x
c(o)(c
1-3
烷基)、-nr
x
c(o)o(c
1-3
烷基)、和-s(o)2(c
1-2
烷基)；
[0037]
r2是：
[0038]
(i)氢；
[0039]
(ii)被零至4个独立地选自以下的取代基取代的c
1-6
烷基：f、cl、-oh、-cn、c
3-6
环烷基、和二甲氧基苯基；或
[0040]
(ii)选自c
3-6
环烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、吡唑基、和噻唑基的环状基团，其中所述环状基团被零至3个独立地选自以下的取代基取代：f、cl、-oh、-cn、c
1-2
烷基、c
1-2
氟烷基、c
1-2
羟烷基、和-s(o)2(c
1-2
烷基)；
[0041]
r3是-cn，-c(o)nr
xrx
，或选自苯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、吡啶基、吡啶酮基和嘧啶基的环状基团，每个环状基团被零至3个选自以下的取代基取代：f、cl、-oh、-cn、c
1-2
烷基、-cf3、和-ch2oh；
[0042]r3a
是氢或r3；
[0043]
每个r
x
是氢或-ch3；并且
[0044]
n是零、1或2。
[0045]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)的化合物或其盐。
[0046]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)化合物或其盐。
[0047]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)的化合物或其盐，其中x是cr
3a
。此实施方案的化合物具有式(ia)的结构：
[0048][0049]
此实施方案包括这样的化合物，其中r
3a
是氢。此实施方案还包括这样的化合物，其中r
3a
是r3。
[0050]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)的化合物或其盐，其中x是n。此实施方案的化合物具有式(ib)的结构：
[0051][0052]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物或其盐，其中x是cr
3a
。此实施方案的化合物具有式(iia)的结构：
[0053][0054]
此实施方案包括这样的化合物，其中r
3a
是氢。此实施方案还包括这样的化合物，其中r
3a
是r3。
[0055]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物或其盐，其中x是n。此实施方案的化合物具有式(iib)的结构：
[0056][0057]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)的化合物或其盐，其具有式(ic)的结构：
[0058][0059]
在一个实施方案中，提供了一种式(ic)的化合物或其盐，其中x是cr
3a
。此实施方案的化合物具有式(id)的结构：
[0060][0061]
在一个实施方案中，提供了一种式(ic)的化合物或其盐，其中x是cr
3a
并且r
3a
是氢。此实施方案的化合物具有式(ie)的结构：
[0062][0063]
在一个实施方案中，提供了一种式(ic)的化合物或其盐，其中x是n。此实施方案的化合物具有式(if)的结构：
[0064][0065]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物或其盐，其具有式(iic)的结构：
[0066][0067]
在一个实施方案中，提供了一种式(iic)的化合物或其盐，其中x是cr
3a
。此实施方案的化合物具有式(iid)的结构：
[0068][0069]
在一个实施方案中，提供了一种式(iic)的化合物或其盐，其中x是cr
3a
并且r
3a
是氢。此实施方案的化合物具有式(iie)的结构：
[0070][0071]
在一个实施方案中，提供了一种式(iic)的化合物或其盐，其中x是n。此实施方案的化合物具有式(iif)的结构：
[0072][0073]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中x是ch。
[0074]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r1是-c(o)nr
xr1a
。此实施方案包括这样的化合物，其中r1是-c(o)nhr
1a
。
[0075]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r1是-c(o)nr
xr1a
；并且r
1a
是被零至6个rw取代的c
1-6
烷基。此实施方案包括这样的化合物，其中r
1a
是-ch2ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-ch2ch2ch(ch3)2、-ch2ch2chf2、-ch2ch2cf3、-ch2ch2c(ch3)2f、-ch2ch2ch(ch3)oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2oh、-ch2chfch(ch3)oh、-ch2chfc(ch3)2oh、-ch2ch2och3、-ch2ch2c(ch3)2nh2、-ch2cf2ch2nh2、或-ch2ch2c(ch3)2nhc(o)ch3。
[0076]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r1是-c(o)nr
xr1a
；并且r
1a
是-(cr
xrx
)
0-3r1c
。此实施方案包括这样的化合物，其中r
1a
是-(ch2)
0-3r1c
。此实
施方案还包括这样的化合物，其中r
1a
是-ch(环丙基)ch2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2nhc(o)(环丙基)、r
1c
、-ch2r
1c
、或-ch2ch2r
1c
。此外，此实施方案包括这样的化合物，其中r
1c
是环丙基、环丁基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、四氢吡喃基、二氧化四氢苯硫基、二氧化硫代吗啉基、异噁唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、或四唑基，各自被零至3个独立地选自以下的取代基取代：f、-oh、-nh2、-ch3、-ch2oh、-c(ch3)2oh、-nhc(o)ch3、-nhc(o)och3、和-s(o)2ch3。
[0077]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r1是吡唑基、咪唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、三唑基、或噻二唑基，各自被零至2个r
1b
取代。此实施方案包括这样的化合物，其中r1是异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、或三唑基，各自被零至1个r
1b
取代。此实施方案还包括这样的化合物，其中r1是异噁唑基、噁二唑基、或三唑基，各自被r
1b
取代。
[0078]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r2是：(i)氢；或(ii)被零至4个独立地选自以下的取代基取代的c
1-6
烷基：f、cl、-oh、-cn、c
3-6
环烷基、和二甲氧基苯基。此实施方案包括这样的化合物，其中r2是氢、-ch2ch
3-ch(ch3)2、-ch(ch3)ch2ch3、-ch2chf2、-ch2cf3、-ch(ch3)ch2oh、-ch2(环丙基)、-ch(ch3)(环丙基)、或-ch2(二甲氧基苯基)。
[0079]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r2是选自c
3-6
环烷基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、哌啶基、吡唑基、和噻唑基的环状基团，其中所述环状基团被零至3个独立地选自以下的取代基取代：f、cl、-oh、-cn、c
1-2
烷基、c
1-2
氟烷基、c
1-2
羟烷基、和-s(o)2(c
1-2
烷基)。此实施方案包括这样的化合物，其中r2是环丙基、环丁基、二氟环丁基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、(甲基磺酰基)哌啶基、噻唑基、或(二氟乙基)吡唑基。
[0080]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r3是-cn，-c(o)nr
xrx
，或选自苯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮基和嘧啶基的环状基团，每个环状基团被零至3个选自以下的取代基取代：f、cl、-oh、-cn、c
1-2
烷基、-cf3和-ch2oh。此实施方案包括这样的化合物，其中r3是-cn、-c(o)nh2、吡唑基、或吡啶酮基。
[0081]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r3是-cn或-c(o)nr
xrx
。此实施方案包括这样的化合物，其中r3是-cn或-c(o)nhr
x
。此实施方案还包括这样的化合物，其中r3是-cn或-c(o)nh2。此外，此实施方案包括这样的化合物，其中r3是-cn。
[0082]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r3是选自苯基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮基和嘧啶基的环状基团，每个环状基团被零至3个选自以下的取代基取代：f、cl、-oh、-cn、c
1-2
烷基、-cf3和-ch2oh。此实施方案包括这样的化合物，其中环状基团选自吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮基和嘧啶基，每个环状基团被零至2个选自以下的取代基取代：f、cl、-oh、-cn、c
1-2
烷基、-cf3和-ch2oh。此实施方案包括这样的化合物，其中r3是吡唑基或吡啶酮基。
[0083]
在一个实施方案中，提供了一种式(ic)或式(iie)的化合物或其盐，其中：x是ch或n；r1是：(i)-c(o)nr
xr1a
；或(ii)异噁唑基、噁二唑基、或三唑基，各自被r
1b
取代；r
1a
是-ch2ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-ch2ch2ch(ch3)2、-ch2ch2chf2、-ch2ch2cf3、-ch2ch2c(ch3)2f、-ch2ch2ch(ch3)oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2oh、-ch2chfch(ch3)oh、-ch2chfc(ch3)2oh、-ch2ch2och3、-ch2ch2c(ch3)2nh2、-ch2cf2ch2nh2、-ch2ch2c(ch3)2nhc(o)ch3、-ch(环丙基)
ch2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2nhc(o)(环丙基)、r
1c
、-ch2r
1c
、或-ch2ch2r
1c
；r
1b
是-ch2ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-ch2ch2ch(ch3)2、-ch2(环丙基)、四氢吡喃基、哌啶基、或吗啉基；r
1c
是环丙基、环丁基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、吗啉基、四氢吡喃基、二氧化四氢苯硫基、二氧化硫代吗啉基、异噁唑基、噁唑基、噻唑基、三唑基、或四唑基，各自被零至3个独立地选自以下的取代基取代：f、-oh、-nh2、-ch3、-ch2oh、-c(ch3)2oh、-nhc(o)ch3、-nhc(o)och3、和-s(o)2ch3；r2是氢、-ch2ch
3-ch(ch3)2、-ch(ch3)ch2ch3、-ch2chf2、-ch2cf3、-ch(ch3)ch2oh、-ch2(环丙基)、-ch(ch3)(环丙基)、-ch2(二甲氧基苯基)、环丙基、环丁基、二氟环丁基、氧杂环丁烷基、四氢呋喃基、(甲基磺酰基)哌啶基、噻唑基、或(二氟乙基)吡唑基；并且r3是-cn、-c(o)nh2、吡唑基、或吡啶酮基。
[0084]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0085]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中x是ch；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0086]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)的化合物或其盐，其中x是ch；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0087]
在一个实施方案中，提供了一种式(ii)的化合物或其盐，其中x是ch；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0088]
在一个实施方案中，提供了一种式(ic)的化合物或其盐，其中x是ch；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0089]
在一个实施方案中，提供了一种式(iic)的化合物或其盐，其中x是ch；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0090]
在一个实施方案中，提供了一种式(ie)的化合物或其盐，其中r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0091]
在一个实施方案中，提供了一种式(iie)的化合物或其盐，其中r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。
[0092]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r1是-c(o)nhr
1a
；并且r
1a
是-ch2ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-ch2ch2ch(ch3)2、-ch2ch2chf2、-ch2ch2cf3、-ch2ch2c(ch3)2f、-ch2ch2ch(ch3)oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2oh、-ch2chfch(ch3)oh、-ch2chfc(ch3)2oh、或-ch2ch2och3。此实施方案包括这样的化合物，其中r
1a
是-ch2ch2c(ch3)2f、-ch2ch2ch(ch3)oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2oh、-ch2chfch(ch3)oh、或-ch2chfc(ch3)2oh。
[0093]
在一个实施方案中，提供了一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐，其中r1是-c(o)nhr
1a
；r
1a
是-ch2ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-ch2ch2ch(ch3)2、-ch2ch2chf2、-ch2ch2cf3、-ch2ch2c(ch3)2f、-ch2ch2ch(ch3)oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2oh、-ch2chfch(ch3)oh、-ch2chfc(ch3)2oh、或-ch2ch2och3；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。此实施方案包括这样的化合物，其中x是ch。
[0094]
在一个实施方案中，提供了一种式(ic)或式(iic)的化合物或其盐，其中r1是-c(o)nhr
1a
；r
1a
是-ch2ch2ch3、-ch2ch(ch3)2、-ch2ch2ch(ch3)2、-ch2ch2chf2、-ch2ch2cf3、-ch2ch2c(ch3)2f、-ch2ch2ch(ch3)oh、-ch2c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2c(ch3)2oh、-ch2chfch(ch3)
oh、-ch2chfc(ch3)2oh、或-ch2ch2och3；r2是-ch(ch3)2；并且r3是-cn。此实施方案包括这样的化合物，其中x是ch。
[0095]
一个实施方案提供了一种式(i)的化合物或其盐，其中所述化合物是：(r)-7-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(1)；(r)-7-氰基-4-(乙基氨基)-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(2)；(r)-7-氰基-4-((3,3-二氟环丁基)氨基)-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(3)；(r)-7-氰基-4-(环丁基氨基)-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(4)；7-氰基-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(5)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(四氢-2h-吡喃-3-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(6)；7-氰基-n-((3-(羟基甲基)氧杂环丁烷-3-基)甲基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(7)；7-氰基-n-((1-(羟基甲基)环丙基)甲基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(8)；7-氰基-n-(3-羟基-2,2-二甲基丙基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(9)；7-氰基-n-((1r,4r)-4-羟基环己基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(10)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(四氢-2h-吡喃-4-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(11)；n-((1r,4r)-4-氨基环己基)-7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(12)；n-((1r,4r)-4-乙酰胺基环己基)-7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(13)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(噁唑-4-基甲基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(14)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-((3-甲基异噁唑-5-基)甲基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(15)；7-氰基-n-(1-环丙基-3-羟基丙基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(16)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(2-甲氧基乙基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(17)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(噻唑-2-基甲基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(18)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(哌啶-4-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(19)；n-((1h-1,2,4-三唑-5-基)甲基)-7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(20)；7-氰基-n-异戊基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(21)；(r)-7-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(22)；(r)-7-氰基-4-((1-(2,2-二氟乙基)-1h-吡唑-4-基)氨基)-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(23)；7-氰基-n-((1s,3s)-3-羟基环丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(24)；7-氰基-n-(3-羟基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(25)；(r)-7-氰基-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(26)；7-氰基-4-(异丙基氨基)-n-(3,3,3-三氟丙基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(27)；(s)-7-氰基-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-4-((四氢呋喃-3-基)氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(28)；(s)-7-氰基-4-((1-环丙基乙基)氨基)-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(29)；(s)-7-氰基-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-4-((1-羟基丙烷-2-基)氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(30)；7-氰基-n-(3,3-二氟丙基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(31)；(r)-4-(仲丁基氨基)-7-氰基-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(32)；7-氰基-4-((环丙基甲基)氨基)-n-(3-羟基-3-甲基丁基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(33)；7-氰基-n-(2-环
甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酰胺(69)；3-(5-异丁基-1h-1,2,4-三唑-3-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈，tfa(70)；4-(异丙基氨基)-3-(5-丙基-1h-1,2,4-三唑-3-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(71)；4-(异丙基氨基)-3-(3-丙基-1,2,4-噁二唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(72)；3-(1-异戊基-1h-1,2,3-三唑-4-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(73)；3-(1-(环丙基甲基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(74)；4-(异丙基氨基)-3-(1-(哌啶-4-基)-1h-1,2,3-三唑-4-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(75)；4-(异丙基氨基)-3-(3-(哌啶-4-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(76)；4-(异丙基氨基)-3-(3-(四氢-2h-吡喃-4-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(77)；4-(异丙基氨基)-3-(3-(吗啉-2-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(78)；4-(异丙基氨基)-3-(3-(哌啶-3-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(79)；4-(异丙基氨基)-3-(3-(哌啶-2-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(80)；(r)-6-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酰胺(81)；或6-氰基-n-(2-环丙基乙基)-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酰胺(82)。
[0096]
一个实施方案提供了式(i)的化合物，其具有≤0.6μm的irak4 ic
50
值。
[0097]
一个实施方案提供了式(i)的化合物，其具有≤0.1μm的irak4 ic
50
值。
[0098]
一个实施方案提供了式(i)的化合物，其具有≤0.05μm的irak4 ic
50
值。
[0099]
一个实施方案提供了式(i)的化合物，其具有≤0.025μm的irak4 ic
50
值。
[0100]
一个实施方案提供了式(i)的化合物，其具有≤0.015μm的irak4 ic
50
值。
[0101]
一个实施方案提供了式(i)的化合物，其具有≤0.01μm的irak4 ic
50
值。
[0102]
一个实施方案提供了式(ii)的化合物，其具有≤0.6μm的irak4 ic
50
值。
[0103]
一个实施方案提供了式(ii)的化合物，其具有≤0.1μm的irak4 ic
50
值。
[0104]
一个实施方案提供了式(ii)的化合物，其具有≤0.05μm的irak4 ic
50
值。
[0105]
一个实施方案提供了式(ii)的化合物，其具有≤0.025μm的irak4 ic
50
值。
[0106]
一个实施方案提供了式(ii)的化合物，其具有≤0.015μm的irak4 ic
50
值。
[0107]
一个实施方案提供了式(ii)的化合物，其具有≤0.01μm的irak4 ic
50
值。
[0108]
定义
[0109]
在阅读以下详细描述后，本领域普通技术人员可以更容易地理解本发明的特征和优点。应理解的是，出于清楚原因而在前后单独实施方案的情境下描述的本发明某些特征也可组合成单个实施方案。相反，出于简洁的原因而在单个实施方案的情境下描述的本发明的各种特征也可组合成其子组合。在本文中标识为示例性或优选的实施方案旨在是说明性的而非限制性的。
[0110]
除非本文另有明确说明，否则以单数形式提及的提及项也可以包括复数形式。例如，“一个/一种(a)”和“一个/一种(an)”可以指代一个/一种或者一个/一种或多个/多种。
[0111]
如本文所用，短语“化合物”是指至少一种化合物。例如，式(i)的化合物包括一种式(i)的化合物以及两种或更多种式(i)的化合物。
[0112]
除非另有指示，否则具有不饱和化合价的任何杂原子被假定为具有足以满足所述化合价的氢原子。
[0113]
本文所阐述的定义优先于在通过引用并入本文的任何专利、专利申请和/或专利申请公开物中所阐述的定义。
[0114]
下文列出了用于描述本发明的各种术语的定义。这些定义适用于如它们在整个说明书中单独地或作为更大基团的一部分使用的术语(除非它们在特定情况下另有限制)。
[0115]
在整个说明书中，本领域技术人员可以选择其基团和取代基以提供稳定的部分和化合物。
[0116]
根据本领域使用的惯例，在本文的结构式中使用
[0117][0118]
来描绘作为部分或取代基与核心或骨架结构的附接点的键。
[0119]
如本文所用，术语“卤基”和“卤素”是指f、cl、br和i。
[0120]
术语“氰基”是指基团-cn。
[0121]
术语“氨基”是指基团-nh2。
[0122]
术语“氧代基”是指基团＝o。
[0123]
如本文所用，术语“烷基”是指含有例如从1至12个碳原子、从1至6个碳原子和从1至4个碳原子的支链和直链饱和脂族烃基两者。烷基的例子包括但不限于甲基(me)、乙基(et)、丙基(例如，正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基)、和戊基(例如，正戊基、异戊基、新戊基)、正己基、2-甲基戊基、2-乙基丁基、3-甲基戊基和4-甲基戊基。当数字出现在符号“c”之后的下标中时，所述下标更具体地定义了特定基团可能含有的碳原子的数目。例如，“c
1-6
烷基”表示具有一至六个碳原子的直链和支链烷基。
[0124]
如本文所用的术语“氟烷基”旨在包括被一个或多个氟原子取代的支链和直链饱和脂族烃基两者。例如，“c
1-4
氟烷基”旨在包括被一个或多个氟原子取代的c1、c2、c3和c4烷基。氟烷基的代表性例子包括但不限于-cf3和-ch2cf3。
[0125]
术语“羟烷基”包括被一个或多个羟基取代的支链和直链饱和烷基两者。例如，“羟烷基”包括-ch2oh、-ch2ch2oh和c
1-4
羟烷基。
[0126]
如本文所用，术语“环烷基”是指通过从饱和环碳原子上去除一个氢原子而由非芳族单环或多环烃分子衍生的基团。环烷基的代表性例子包括但不限于环丙基、环戊基和环己基。当数字出现在符号“c”之后的下标中时，下标更具体地定义了特定环烷基可能含有的碳原子的数目。例如，“c
3-6
环烷基”表示具有三至六个碳原子的环烷基。
[0127]
短语“药学上可接受的”在本文中用于指在合理的医学判断的范围内，适用于与人和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的效益/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
[0128]
式(i)和式(ii)的化合物可以作为无定形固体或结晶固体来提供。可以采用冻干来提供作为无定形固体的式(i)和式(ii)的化合物。
[0129]
应当进一步理解，式(i)和式(ii)的化合物的溶剂化物(例如，水合物)也在本发明的范围内。术语“溶剂化物”意指式(i)的化合物或式(ii)的化合物与一个或多个溶剂分子(无论是有机的还是无机的)的物理缔合物。此物理缔合包括氢键合。在某些情况下，溶剂化物将是能够分离的，例如当一个或多个溶剂分子被掺入结晶固体的晶格中时。“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离溶剂化物两者。示例性溶剂化物包括水合物、乙醇化物、甲醇化物、异
丙醇化物、乙腈溶剂化物和乙酸乙酯溶剂化物。溶剂化方法是本领域已知的。
[0130]
各种形式的前药是本领域熟知的，并且描述于rautio,j.等人,nature review drug discovery,17,559-587(2018)中。
[0131]
另外，可以在式(i)和式(ii)的化合物制备之后将其分离并且纯化以获得分别含有按重量计等于或大于99％的量的式(i)和式(ii)的化合物(“基本上纯的”)的组合物，然后如本文所描述的使用或配制所述组合物。此类“基本上纯的”式(i)的化合物和“基本上纯的”式(ii)的化合物在本文中也被考虑作为本发明的一部分。
[0132]“稳定的化合物”和“稳定的结构”意在指示化合物足够稳健以经受住从反应混合物中分离至有用程度的纯度并且配制成有效的治疗剂。本发明旨在体现稳定的化合物。
[0133]“治疗有效量”旨在包括单独的本发明化合物的量，或所要求保护的多种化合物的组合的量，或与其他活性成分组合的本发明化合物的量，这些活性成分有效充当irak4的抑制剂；或有效治疗或预防自身免疫和/或炎性疾病状态，如多发性硬化和类风湿性关节炎；或有效治疗癌症。
[0134]
如本文所用的，“治疗”(“treating”或“treatment”)涵盖哺乳动物(特别是人)的疾病状态的治疗，并且包括：(a)预防所述疾病状态在哺乳动物中发生，特别是当这种哺乳动物易患所述疾病状态，但尚未被诊断为患有所述疾病状态时；(b)抑制所述疾病状态，即阻止其发展；和/或(c)缓解所述疾病状态，即引起所述疾病状态的消退。
[0135]
本发明的化合物旨在包括本发明的化合物中存在的原子的所有同位素。同位素包括那些原子数相同但质量数不同的那些原子。通过一般举例而非限制的方式，氢的同位素包括氘(d)和氚(t)。碳的同位素包括
13
c和
14
c。本发明的同位素标记的化合物通常可以通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本文所述那些类似的方法，使用适当的同位素标记的试剂代替原本采用的未经标记的试剂来制备。例如，甲基(-ch3)还包括氘代甲基，如-cd3。
[0136]
效用
[0137]
本发明的化合物调节激酶活性，包括调节irak-4。可以通过本发明的化合物调节的其他类型的激酶活性包括但不限于pelle/irak家族及其突变体。
[0138]
因此，式(i)和式(ii)的化合物可在治疗与调节激酶活性且具体为选择性抑制irak-4活性或抑制irak和其他pelle家族激酶相关的病症中具有效用。此类病症包括因细胞内信号传导而调节细胞因子水平的tlr/il-1家族受体相关疾病。此外，式(i)和式(ii)的化合物对irak-4活性具有有利的选择性，优选高至少20倍至超过1,000倍的选择性。
[0139]
如本文所用，术语“治疗”(“treating”或“treatment”)涵盖对哺乳动物、特别是人中的疾病状态的治疗，并且包括：(a)预防或延迟哺乳动物中疾病状态的发生，特别是当这个哺乳动物易患所述疾病状态但尚未被诊断为患有所述疾病状态时；(b)抑制疾病状态，即，阻止其发展；和/或(c)实现症状或疾病状态的完全或部分减少和/或缓解、改善、减轻或治愈疾病或障碍和/或其症状。
[0140]
鉴于其作为irak-4选择性抑制剂的活性，式(i)和式(ii)的化合物可用于治疗tlr/il-1家族受体相关疾病，但不限于炎性疾病，如克罗恩病、溃疡性结肠炎、哮喘、移植物抗宿主病、同种异体移植物排斥、慢性阻塞性肺疾病；自身免疫病，如格雷夫斯病、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、银屑病；自身炎性疾病，包括caps、traps、fmf、成人发作性斯蒂尔
病、全身性发作性幼年特发性关节炎、痛风、痛风性关节炎；代谢性疾病，包括2型糖尿病、动脉粥样硬化、心肌梗塞；破坏性骨障碍，如骨吸收疾病、骨关节炎、骨质疏松症、多发性骨髓瘤相关骨障碍；增殖性障碍，如急性髓细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病；血管生成障碍，如包括实体肿瘤、眼部新生血管和婴儿血管瘤的血管生成障碍；感染性疾病，如脓毒症、脓毒症休克和志贺氏菌病；神经变性疾病，如阿尔茨海默病、帕金森病、由创伤性损伤引起的脑缺血或神经变性疾病；肿瘤性和病毒性疾病，分别如转移性黑色素瘤、卡波西肉瘤、多发性骨髓瘤以及hiv感染和cmv视网膜炎、aids。
[0141]
更具体地，可用本发明的化合物治疗的具体病症或疾病包括但不限于胰腺炎(急性或慢性)、哮喘、变态反应、成人型呼吸窘迫综合征、慢性阻塞性肺疾病、肾小球肾炎、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、硬皮病、慢性甲状腺炎、格雷夫斯病、自身免疫性胃炎、糖尿病、自身免疫性溶血性贫血、自身免疫性嗜中性粒细胞减少症、血小板减少症、特应性皮炎、慢性活动性肝炎、重症肌无力、多发性硬化、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩病、银屑病、移植物抗宿主病、由内毒素引起的炎性反应、结核病、动脉粥样硬化、肌肉变性、恶病质、银屑病关节炎、莱特尔综合征、痛风、创伤性关节炎、风疹性关节炎、急性滑膜炎、胰脏β-细胞疾病、以大量嗜中性粒细胞浸润为特征的疾病；类风湿性脊柱炎、痛风性关节炎及其他关节炎性病症、脑型疟疾、慢性肺部炎性疾病、矽肺、肺部肉瘤、骨吸收疾病、同种异体移植物排斥、因感染导致的发热和肌痛、继发于感染的恶病质、瘢痕疙瘩形成、瘢痕组织形成、溃疡性结肠炎、热病、流行性感冒、骨质疏松症、骨关节炎、急性髓细胞性白血病、慢性髓细胞性白血病、转移性黑色素瘤、卡波西肉瘤、多发性骨髓瘤、脓毒症、脓毒症休克和志贺菌病；阿尔茨海默病、帕金森病、由创伤性损伤引起的脑缺血或神经变性疾病；血管生成性障碍，包括实体肿瘤、眼部血管新生和婴儿血管瘤；病毒性疾病，包括急性肝炎感染(包括甲型肝炎、乙型肝炎和丙型肝炎)、hiv感染和cmv视网膜炎、aids、arc或恶性肿瘤和疱疹；中风、心肌缺血、中风心脏病发作中的缺血、器官缺氧、血管增生、心脏和肾脏再灌注损伤、血栓形成、心脏肥大、由凝血酶诱导的血小板聚集、内毒素血症和/或中毒性休克综合征、与前列腺素内过氧化物酶合酶-2相关的病症和寻常型天疱疮。优选的治疗方法为其中病症选自克罗恩病、溃疡性结肠炎、同种异体移植物排斥、类风湿性关节炎、银屑病、强直性脊柱炎、银屑病关节炎和寻常型天疱疮的那些。可替代地，优选的治疗方法是其中病症选自缺血再灌注损伤的那些，所述缺血再灌注损伤包括由中风引起的脑缺血再灌注损伤和由心肌梗塞引起的心肌缺血再灌注损伤。另一种优选的治疗方法是其中病症是多发性骨髓瘤的治疗方法。
[0142]
在一个实施方案中，式(i)和式(ii)的化合物可用于治疗癌症，包括瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(wm)、弥漫性大b细胞淋巴瘤(dlbcl)、慢性淋巴细胞白血病(cll)、皮肤弥漫性大b细胞淋巴瘤和原发性cns淋巴瘤。
[0143]
此外，本发明的激酶抑制剂会抑制诱导型促炎蛋白(如前列腺素内过氧化物合酶-2(pghs-2)-也称为环氧合酶-2(cox-2)，il-1，il-6，il-18，趋化因子)的表达。因此，另外的irak-4相关病症包括水肿、痛觉缺失、发热和疼痛(如神经肌肉疼痛、头痛、由癌症引起的疼痛、牙痛和关节炎疼痛)。本发明的化合物还可以用于治疗兽用病毒感染，如慢病毒感染，包括但不限于马传染性贫血病毒；或逆转录病毒感染，包括猫免疫缺陷病毒、牛免疫缺陷病毒和犬免疫缺陷病毒。
[0144]
当在本文使用术语“irak-4相关病症”或“irak-4相关疾病或障碍”时，每个术语旨
在如同详尽地重复一般涵盖所有上文所鉴定的病症和任何其他受irak-4激酶活性影响的病症。
[0145]
因此，本发明提供了用于治疗此类病症的方法，所述方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的至少一种式(i)或式(ii)的化合物或其盐。“治疗有效量”旨在包括当单独或组合施用时有效抑制irak-4和/或治疗疾病的本发明的化合物的量。
[0146]
治疗irak-4激酶相关病症的方法可以包括施用单独的式(i)的化合物、单独的式(ii)的化合物或与彼此的组合和/或与可用于治疗此类病症的其他合适治疗剂的组合。因此，“治疗有效量”还旨在包括有效抑制irak-4和/或治疗与irak-4相关的疾病的所要求保护的化合物的组合的量。
[0147]
此类其他治疗剂的例子包括皮质类固醇、咯利普兰、卡弗他丁、细胞因子抑制性抗炎药(csaid)、白细胞介素-10、糖皮质激素、水杨酸盐、一氧化氮和其他免疫抑制剂；核转位抑制剂，如脱氧精胍菌素(dsg)；非甾体抗炎药(nsaid)，如布洛芬、塞来昔布和罗非昔布；类固醇，如泼尼松或地塞米松；抗病毒剂，如阿巴卡韦；抗增殖剂，如甲氨蝶呤、来氟米特、fk506(他克莫司，)；抗疟药，如羟氯喹；细胞毒性药物，如硫唑嘌呤和环磷酰胺；tnf-α抑制剂，如替尼达普、抗tnf抗体或可溶性tnf受体和雷帕霉素(西罗莫司或)或其衍生物。
[0148]
当与本发明的化合物组合采用时，上文其他治疗剂可以例如以physicians'desk reference(pdr)中指示的或者如本领域普通技术人员以其他方式确定的那些量来使用。在本发明的方法中，此类一种或多种其他治疗剂可以在施用本发明的化合物之前、同时或之后施用。本发明还提供了能够治疗irak-4激酶相关病症的药物组合物，这些病症包括如上所描述的tlr和il-1家族受体介导的疾病。
[0149]
本发明的组合物可以含有如上文所描述的其他治疗剂，并且可以例如通过采用常规的固体或液体媒介物或稀释剂以及适合于所需的施用方式的类型的药物添加剂(例如，赋形剂、粘合剂、防腐剂、稳定剂、调味剂等)根据诸如药物配制领域熟知的那些等技术来配制。
[0150]
因此，本发明进一步包括包含一种或多种式(i)和/或式(ii)的化合物和药学上可接受的载体的组合物。
[0151]“药学上可接受的载体”是指本领域通常接受的用于将生物活性剂递送至动物、特别是哺乳动物的介质。根据完全在本领域普通技术人员的范围内的许多因素来配制药学上可接受的载体。这些因素包括而不限于所配制的活性剂的类型和性质；待被施用含有药剂的组合物的受试者；组合物的预期施用途径；以及所靶向的治疗适应证。药学上可接受的载体包括水性和非水性液体介质两者、以及多种固体和半固体剂型。此类载体还可以包括除活性剂之外的许多不同的成分和添加剂，此类另外的成分出于本领域普通技术人员熟知的多种原因(例如，活性剂、粘合剂等的稳定化)被包括在配制品中。合适的药学上可接受的载体及其选择中涉及的因素的描述在多种可容易获得的来源(例如像remington's pharmaceutical sciences,第17版(1985)，将其通过引用以其整体并入本文)中找到。
[0152]
根据式(i)的化合物可以通过适合于待治疗的病症的任何手段来施用，这可以取决于位点特异性治疗或待递送的式(i)的化合物的量的需要。
[0153]
根据式(ii)的化合物可以通过适合于待治疗病症的任何方式施用，这可以取决于
对位点特异性治疗或待递送的式(ii)化合物的量的需要。
[0154]
本发明还包括一类药物组合物，所述药物组合物包含式(ii)的化合物和/或式(ii)的化合物和一种或多种无毒的药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或佐剂(在本文中统称为“载体”材料)以及(如果需要)其他活性成分。可以将式(i)和式(ii)的化合物通过任何合适的途径，优选地以适于这种途径的药物组合物的形式，并且以对预期治疗有效的剂量施用。本发明的化合物和组合物可以例如在含有常规药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的剂量单位配制品中口服、粘膜、或肠胃外(包括血管内、静脉内、腹膜内、皮下、肌内、和胸骨内)施用。例如，药物载体可以含有甘露醇或乳糖和微晶纤维素的混合物。所述混合物可以含有另外的组分，如润滑剂(例如，硬脂酸镁)和崩解剂(如交聚维酮)。载体混合物可以填充到明胶胶囊中或压缩成片剂。例如，药物组合物可以作为口服剂型或输注剂施用。
[0155]
对于口服施用，药物组合物可以是例如片剂、胶囊剂、液体胶囊剂、混悬剂或液体的形式。所述药物组合物优选地以含有特定量活性成分的剂量单位的形式制造。例如，所述药物组合物可以以片剂或胶囊剂提供，所述片剂或胶囊剂包含在从约0.1至1000mg、优选从约0.25至250mg、更优选从约0.5至100mg范围内的量的活性成分。根据患者的状况和其他因素，对于人或其他哺乳动物的合适的日剂量可能有很大差异，但是可以使用常规方法确定。
[0156]
本文中考虑的任何药物组合物可以例如经由任何可接受且合适的口服制剂口服递送。示例性的口服制剂包括但不限于例如片剂、锭剂、糖锭剂、水性和油性混悬剂、可分散散剂或颗粒剂、乳剂、硬和软胶囊剂、液体胶囊剂、糖浆和酏剂。旨在用于口服施用的药物组合物可以根据本领域已知的用于制造旨在用于口服施用的药物组合物的任何方法来制备。为了提供药学上可口的制剂，根据本发明的药物组合物可以含有至少一种选自甜味剂、调味剂、着色剂、缓和剂、抗氧化剂和防腐剂的试剂。
[0157]
片剂可以例如通过将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物与适合于制造片剂的至少一种无毒的药学上可接受的赋形剂混合来制备。示例性的赋形剂包括但不限于例如惰性稀释剂，例如像碳酸钙、碳酸钠、乳糖、磷酸钙和磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如像微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、玉米淀粉和海藻酸；粘合剂，例如像淀粉、明胶、聚乙烯吡咯烷酮和阿拉伯胶；以及润滑剂，例如像硬脂酸镁、硬脂酸和滑石粉。另外，片剂可以是未包衣的，或通过已知技术包衣，以掩蔽尝起来令人不快的药物的不良味道，或延迟胃肠道中活性成分的崩解和吸收，从而维持活性成分的作用持续更长时间。示例性的水溶性味道掩蔽材料包括但不限于羟丙基甲基纤维素和羟丙基纤维素。示例性的延时材料包括但不限于乙基纤维素和乙酸丁酸纤维素。
[0158]
硬明胶胶囊剂可以例如通过将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物与至少一种惰性固体稀释剂(例如像碳酸钙、磷酸钙和高岭土)混合来制备。
[0159]
软明胶胶囊剂可以例如通过将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物与至少一种水溶性载体(例如像聚乙二醇)和至少一种油介质(例如像花生油、液体石蜡和橄榄油)混合来制备。
[0160]
水性混悬剂可以例如通过将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物与至少一种适合于制造水性混悬剂的赋形剂混合来制备。适合于制造水性混悬剂的示例性赋形剂包括但不限于例如助悬剂，例如像羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、海藻酸、聚乙烯吡咯烷酮、黄芪胶和阿拉伯树胶；分散剂或润湿剂，例如像天然存在的磷脂，例
如卵磷脂；环氧烷与脂肪酸的缩合产物，例如像聚氧乙烯硬脂酸酯；环氧乙烷与长链脂族醇的缩合产物，例如像十七烷乙烯-氧基鲸蜡醇；环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物，例如像聚氧乙烯山梨糖醇单油酸酯；以及环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的缩合产物，例如像聚乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。水性混悬剂还可以含有至少一种防腐剂，例如像对羟基苯甲酸乙酯和对羟基苯甲酸正丙酯；至少一种着色剂；至少一种调味剂；和/或至少一种甜味剂，包括但不限于例如蔗糖、糖精和阿斯巴甜。
[0161]
油性混悬剂可以例如通过将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物悬浮在植物油(例如像花生油；橄榄油；芝麻油；和椰子油)或矿物油(例如，液体石蜡)中来制备。油性混悬剂还可以含有至少一种增稠剂，例如像蜂蜡、硬石蜡和鲸蜡醇。为了提供可口的油性混悬剂，可以将以上已经描述的至少一种甜味剂和/或至少一种调味剂添加到油性混悬剂中。油性混悬剂可以进一步含有至少一种防腐剂，包括但不限于例如抗氧化剂，例如像丁基化羟基茴香醚和α-生育酚。
[0162]
可分散散剂和颗粒剂可以例如通过将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物与至少一种分散剂和/或润湿剂、至少一种助悬剂和/或至少一种防腐剂混合来制备。合适的分散剂、润湿剂和助悬剂已如上文所述。示例性防腐剂包括但不限于例如抗氧化剂，例如抗坏血酸。此外，可分散散剂和颗粒剂还可以含有至少一种赋形剂，包括但不限于例如甜味剂、调味剂和着色剂。
[0163]
至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物的乳剂可以例如制备为水包油乳剂。包含式(i)和/或式(ii)的化合物的乳剂的油相可以以已知方式由已知成分构成。油相可以通过但不限于例如植物油(例如像橄榄油和花生油)、矿物油(例如像液体石蜡)及其混合物来提供。虽然所述相可以仅包含乳化剂，但是它可以包含至少一种乳化剂与脂肪或油或与脂肪和油两者的混合物。合适的乳化剂包括但不限于例如天然存在的磷脂，例如大豆卵磷脂；衍生自脂肪酸和己糖醇酐的酯或偏酯，例如像脱水山梨糖醇单油酸酯；以及偏酯与环氧乙烷的缩合产物，例如像聚氧乙烯脱水山梨糖醇单油酸酯。优选地，亲水性乳化剂与亲脂性乳化剂一起被包括，所述亲脂性乳化剂用作稳定剂。还优选的是包含油和脂肪两者。一种或多种乳化剂与或不与一种或多种稳定剂一起构成所谓的乳化蜡，并且蜡与油和脂肪一起构成所谓的乳化软膏基质，其形成乳膏配制品的油性分散相。乳剂还可以含有甜味剂、调味剂、防腐剂和/或抗氧化剂。适合于在本发明的配制品中使用的乳化剂和乳剂稳定剂包括tween 60、span 80、鲸蜡硬脂醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯、十二烷基硫酸钠、单独或与蜡一起的二硬脂酸甘油酯或本领域熟知的其他材料。
[0164]
例如，式(i)和/或式(ii)的化合物还可以经由任何药学上可接受且合适的可注射形式静脉内、皮下和/或肌内递送。示例性的可注射形式包括但不限于例如无菌水溶液，其包含可接受的媒介物和溶剂，例如像水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液；无菌水包油微乳剂；以及水性或油性混悬剂。
[0165]
用于肠胃外施用的配制品可以呈水性或非水性等渗无菌注射溶液或混悬剂的形式。这些溶液和混悬剂可以使用提及用于在供口服施用的配制品中使用的一种或多种载体或稀释剂或者通过使用其他合适的分散剂或润湿剂和助悬剂由无菌散剂或颗粒剂制备。可以将化合物溶解在水、聚乙二醇、丙二醇、乙醇、玉米油、棉籽油、花生油、芝麻油、苯甲醇、氯化钠、黄芪胶和/或各种缓冲液中。其他佐剂和施用方式是制药领域中熟知且众所周知的。
活性成分也可以通过作为与合适的载体(包括盐水、右旋糖或水)或与环糊精(即captisol)、共溶剂增溶物(即丙二醇)或胶束增溶物(即tween 80)的组合物注射来施用。
[0166]
无菌可注射制剂还可以是在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌可注射溶液或混悬剂，例如作为在1,3-丁二醇中的溶液。可以采用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。另外，常规地将无菌的非挥发性油用作溶剂或助悬介质。为此目的，可以采用任何温和的非挥发性油，包括合成的单甘油酯或二甘油酯。此外，脂肪酸(如油酸)可用于制备注射剂。
[0167]
无菌可注射水包油微乳剂可以例如通过以下方式来制备：1)将至少一种式(i)和/或式(ii)的化合物溶解在油相(例如像大豆油和卵磷脂的混合物)中；2)将含式(i)和/或式(ii)的油相与水和甘油混合物合并；并且3)加工所述组合以形成微乳剂。
[0168]
可以根据本领域已知的方法制备无菌水性或油性混悬剂。例如，可以用无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如像1,3-丁二醇)制备无菌水溶液或混悬剂；并且可以用无菌无毒可接受溶剂或助悬介质(例如像无菌非挥发性油，例如合成的甘油单酯或甘油二酯；和脂肪酸，例如像油酸)制备无菌油性混悬剂。
[0169]
可以在本发明的药物组合物中使用的药学上可接受的载体、佐剂和媒介物包括但不限于离子交换剂、氧化铝、硬脂酸铝、卵磷脂、自乳化药物递送系统(sedds)(如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)、在药物剂型中使用的表面活性剂(如tween、聚乙氧基化蓖麻油如cremophor表面活性剂(basf)或其他类似的聚合物递送基质)、血清蛋白(如人血清白蛋白)、缓冲物质(如磷酸盐、甘氨酸)、山梨酸、山梨酸钾、饱和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、盐或电解质(如硫酸鱼精蛋白、磷酸氢二钠、磷酸氢钾、氯化钠、锌盐)、胶体二氧化硅、三硅酸镁、聚乙烯吡咯烷酮、基于纤维素的物质、聚乙二醇、羧甲基纤维素钠、聚丙烯酸酯、蜡、聚乙烯-聚氧丙烯嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。诸如α-、β-和γ-环糊精等环糊精或诸如羟烷基环糊精(包括2-和3-羟丙基-环糊精)等化学改性的衍生物或其他溶解的衍生物也可以有利地用于增强本文所述的式的化合物的递送。
[0170]
可以根据常规药学方法加工本发明的药物活性化合物，以产生用于施用于患者(包括人和其他哺乳动物)的医学药剂。所述药物组合物可以经受诸如灭菌等常规制药操作和/或可以含有常规佐剂，如防腐剂、稳定剂、润湿剂、乳化剂、缓冲液等。此类组合物还可以包含佐剂，如润湿剂、甜味剂、调味剂和芳香剂。
[0171]
所施用的化合物的量和用于用本发明的化合物和/或组合物治疗病状的剂量方案取决于多种因素，包括受试者的年龄、体重、性别、医学状况、疾病类型、疾病的严重程度、施用途径和频率以及所采用的具体化合物。因此，剂量方案可以广泛变化，但是可以使用标准方法常规确定。约0.001至100mg/kg体重、优选约0.0025与约50mg/kg体重之间、并且最优选约0.005至10mg/kg体重之间的日剂量可能是适当的。日剂量可以以一至四剂/天施用。其他给药方案包括一剂/周和一剂/两天周期。
[0172]
出于治疗目的，本发明的活性化合物通常与一种或多种适合于所指示的施用途径的佐剂组合。如果口服施用，可以将化合物与乳糖、蔗糖、淀粉、烷酸的纤维素酯、纤维素烷基酯、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、氧化镁、磷酸和硫酸的钠盐和钙盐、明胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮和/或聚乙烯醇混合，并且然后压片或胶囊化以方便施用。此类胶囊剂或片剂可以含有控释配制品，其可以在活性化合物于羟丙基甲基纤维素中的分散体中提
供。
[0173]
本发明的药物组合物包含至少一种式(i)的化合物和任选的选自任何药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的另外药剂。本发明的替代组合物包含本文所描述的式(i)的化合物或其前药和药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。
[0174]
本发明的药物组合物包含至少一种式(ii)的化合物和任选地选自任何药学上可接受的载体、佐剂和媒介物的另外药剂。本发明的替代组合物包含本文所描述的式(ii)的化合物或其前药和药学上可接受的载体、佐剂或媒介物。
[0175]
本发明还涵盖制品。如本文所用，制品旨在包括但不限于试剂盒和包装。本发明的制品包含：(a)第一容器；(b)位于第一容器内的药物组合物，其中所述组合物包含：第一治疗剂，其包含本发明的化合物或其药学上可接受的盐形式；以及(c)药品说明书，其说明所述药物组合物可以用于治疗心血管障碍、多尿和/或尿钠增多。在另一个实施方案中，所述药品说明书指出所述药物组合物可以与用于治疗心血管障碍、多尿和/或尿钠增多的第二治疗剂组合(如前所定义的)使用。制品可以进一步包含：(d)第二容器，其中组分(a)和(b)位于第二容器内，并且组分(c)位于第二容器内或外。位于第一和第二容器内意指相应的容器将物品保持在其边界内。
[0176]
第一容器是用于保持药物组合物的接收容器。此容器可以用于制造、储存、运输和/或单独/批量销售。第一容器旨在涵盖瓶、罐、小瓶、烧瓶、注射器、管(例如，用于乳膏制剂)或用于制造、保持、储存或分配药物产品的任何其他容器。
[0177]
第二容器是用于保持第一容器和任选的药品说明书的容器。第二容器的例子包括但不限于盒(例如，纸板或塑料)、板条箱、纸箱、袋(例如，纸或塑料袋)、小袋和大袋。药品说明书可以经由胶带、胶水、订书钉或另一种附接方法物理地附接到第一容器的外侧，或者它可以静置在第二容器的内侧而无需与第一容器附接的任何物理装置。可替代地，药品说明书位于第二容器的外侧。当位于第二容器的外侧时，优选的是，药品说明书经由胶带、胶水、订书钉或另一种附接方法物理地附接。可替代地，它可以与第二容器的外侧相邻或接触，而不是物理地附接。
[0178]
所述药品说明书是标签、签条、标记或其他书面表格，其列举了与位于第一容器内的药物组合物相关的信息。所列举的信息将通常由管理待销售制品的地区的管理机构(例如，美国食品和药物管理局)来确定。优选地，药品说明书特别记载药物组合物己获批准的适应证。药品说明书可以由人可以阅读其中或其上所含信息的任何材料制成。优选地，所述药品说明书是可印刷材料(例如，纸、塑料、纸板、箔、粘合剂背衬的纸或塑料)，其上已形成(例如，印刷或施加)所希望的信息。
[0179]
制备方法
[0180]
本发明的化合物可以以有机合成领域的技术人员熟知的多种方式来制备。本发明的化合物可以使用下文所描述的方法连同合成有机化学领域已知的合成方法或如本领域技术人员所理解的其变型来合成。优选的方法包括但不限于下文所描述的那些。
[0181]
本部分中描述的反应和技术在适合于所用试剂和材料的溶剂中进行，并且适用于所进行的转化。此外，在下文所描述的合成方法的描述中，应理解，所有提出的反应条件(包括溶剂的选择、反应气氛、反应温度、实验的持续时间和后处理程序)都被选择为对于所述反应为标准的条件，本领域技术人员应当容易认识到这一点。有机合成领域的技术人员应
理解，分子的各部分上存在的官能团必须与所提出的试剂和反应相容。对于与反应条件相容的取代基的此类限制对于本领域技术人员而言将是容易清楚的，并且于是必须使用替代方法。有时，这将需要判断以修改合成步骤的顺序或选择一种而不是另一种特定的工艺方案，以便获得所需的本发明的化合物。还将认识到，在此领域的任何合成途径的规划中的另一个主要考虑因素是明智地选择用于保护本发明中所描述的化合物中存在的反应性官能团的保护基团。为受过培训的从业者描述许多替代方案的权威解释是greene等人(protective groups in organic synthesis,第三版,wiley and sons(1999))。
[0182]
方案1概述了从适当取代的二氯吡啶2a-1开始制备通式1的化合物的另一个潜在途径。吡啶2a-1可以与多种胺反应以得到中间体2a-2。2a-1使用标准交叉偶联方法的进一步反应可以提供2-芳基取代的中间体2a-3。可以将2a-3的硝基在钯催化剂的存在下用合适的试剂(如氢)还原为胺，以提供胺2a-4。可以通过将2a-4在合适的溶剂(如nmp或dma)中加热至可影响环化的温度(通常》120℃)来制备最终化合物。
[0183]
方案1
[0184][0185]
可以根据方案2中概述的方法制备所述通式的另外的化合物。可以将boc-氨基溴化物2b-1用合适的碱和烷基化试剂烷基化以提供2b-2。2b-2至2b-3的环化可以在适当的溶剂(如thf)中与强碱(如叔丁醇钾)反应后启动。强酸(如tfa)的存在可影响2b-4的脱羧。与2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯的进一步反应可以得到2b-5，其可以在高温下处理后环化以得到三环2b-6。三环溴化物可以与氰化物转移试剂反应以得到2b-7，并且然后与氯化试剂(如pocl3)进一步反应，以得到2b-8。用多种亲核性胺处理可以提供诸如2b-9的中间体并且可以将酯官能团使用标准皂化条件水解以得到2b-10。在酰胺键偶联试剂(如hatu)的存在下将这种酸中间体用多种胺处理可以提供通式i的化合物。
[0186]
方案2
[0187][0188][0189]
可替代地，如方案3所概述的，中间体2b-6可以在用氯化试剂(如pocl3)处理后转化为氯化物3-1，并且然后与胺进一步反应以得到中间体，如3-2。在交叉偶联催化剂的存在下3-2与多种芳基交叉偶联试剂(如吡唑-3-硼酸)的反应可以得到中间体，如3-3。沿如前所述路线水解为3-4并且与胺偶联以形成酰胺键可以提供通式i的另外的化合物。
[0190]
方案3
[0191][0192]
方案4概述了用于制备通式i的化合物的另外的描述。可以使硝基氮杂吲哚4-1与还原剂(如zn和nh4cl)反应以提供胺4-2。可以将胺用2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯处理以得到4-3，可以将其在强酸(如ppa)的存在下加热后进一步环化为4-4。顺序氯化和胺置换可以得到中间体如4-5，可以将其与氰化物转移试剂进一步反应以得到中间体4-6。水解为4-7并且与多种胺的酰胺键形成反应可以得到通式(i)的另外的化合物。
[0193]
方案4
[0194][0195]
方案5强调了从先前描述于上文方案中的酸中间体5-1合成1,2,4三唑类似物。简言之，可以使5-1与多种经取代的烷基亚胺酸酯反应，然后与肼反应，以得到通式(i)的三唑。
[0196]
方案5
[0197][0198]
通用中间体结构6-1的酯可以用适当的还原剂(如dibal-h)转化为醛6-2，并且然后使用文献中可用的标准方法进一步反应得到炔6-3。在铜催化剂的存在下将6-3用适当取代的叠氮化合物(如环丙基甲基叠氮化物)处理可以提供通式(i)的化合物。
[0199]
方案6
[0200][0201]
可替代地，在胺(如tea)的存在下如方案7中的中间体6-3可以与烷基氯肟反应，以得到通式i的另外的化合物。
[0202]
方案7
[0203][0204]
可以根据方案8中所概述的方法制备另外系列的化合物。芳基溴化物8-1可以与适当取代的吡啶硼酸酯反应以得到中间体8-2。在dppe的存在下将在溶剂(如二氯苯)中的8-2加热，可以得到环化的中间体8-3。将8-3用氧化剂(如过氧化氢)处理可以得到n-氧化物8-4，将其在升高的温度下用胺处理可以得到8-5。水解为8-6并且与标准胺形成酰胺键可以得到通式(i)的另外的化合物。
[0205]
方案8
[0206][0207]
实施例
[0208]
本发明的化合物以及用于制备本发明的化合物的中间体可使用以下实施例中所示的程序和相关程序制备。用于这些实施例中的方法和条件以及这些实施例中制备的实际化合物并不意在具有限制性，而是意在展现可如何制备本发明的化合物。当不通过本文所描述的程序制备时，在这些实施例中使用的起始材料和试剂通常是可商购的，或者报道于化学文献中，或者可以通过使用化学文献中所描述的程序来制备。在以下实施例中进一步定义了本发明。应该理解的是，实施例仅以说明的方式给出。从以上讨论和实施例看出，本领域技术人员可以确定本发明的本质特征，并且在不偏离其精神和范围的情况下，可以进行各种改变和修改以使本发明适应各种用途和条件。因此，本发明不受下文所述的说明性实施例的限制，而是由所附权利要求限定。
[0209]
在给出的实施例中，短语“进行干燥和浓缩”通常是指将在有机溶剂中的溶液经硫酸钠或硫酸镁干燥，随后过滤并且从滤液中除去溶剂(通常在减压下并且在适用于材料的稳定性的温度下
[0210]
使用isco中压色谱仪器(teledyne corporation)用预填充的硅胶柱筒进行柱色谱，用所指示的溶剂或溶剂混合物洗脱。使用反相柱(waters sunfire c
18
，waters xbridge c
18
，axia c
18
，ymc s5ods等)进行制备型高效液相色谱(hplc)，所述反相柱的尺寸适用于分离的材料的量，通常用在水中渐增浓度的甲醇或乙腈(还含有0.05％或0.1％三氟乙酸或10mm乙酸铵)梯度以适合于柱尺寸和待实现的分离的洗脱速度进行洗脱。使用chemdraw ultra，版本9.0.5(cambridgesoft)确定化学名称。使用以下缩写：
[0211]
aq.
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
水性
[0212]
boc2o
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二碳酸二叔丁酯
[0213]
bop
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三-(二甲基氨基)-鏻
[0214]
盐水
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
饱和氯化钠水溶液
[0215]
dce
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯乙烷
[0216]
dcm
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二氯甲烷
[0217]
dibal-h
ꢀꢀꢀꢀꢀ
二异丁基氢化铝
[0218]
dma
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n,n-二甲基乙酰胺
[0219]
dmap
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲基氨基吡啶
[0220]
dmf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
n,n-二甲基甲酰胺
[0221]
dmso
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二甲基亚砜
[0222]
dppf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
1,1
’‑
双(二苯基膦基)二茂铁
[0223]
etoac
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乙酸乙酯
[0224]
etoh
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乙醇
[0225]gꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
克
[0226]hꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
小时
[0227]
hatu
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o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-n,n,n',n'-四甲基脲鎓
[0228]
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
六氟磷酸盐
[0229]
hplc
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
高效液相色谱法
[0230]
lcms
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
液相色谱-质谱法
[0231]
lda
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
二异丙基氨基锂
[0232]
mecn
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
乙腈
[0233]
meoh
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甲醇
[0234]
nh4oac
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乙酸铵
[0235]
nmp
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n-甲基吡咯烷酮
[0236]
pd2(dba)3ꢀꢀꢀ
三-(二亚苄基丙酮)二钯
[0237]
pdcl2(dppf) [1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)
[0238]
pd(pph3)4ꢀꢀꢀꢀ
四(三苯基膦)钯
[0239]
pet ether
ꢀꢀꢀ
石油醚
[0240]
ppa
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
多聚磷酸
[0241]
t-buoh
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
叔丁醇
[0242]
tea
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三乙胺
[0243]
tfa
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三氟乙酸
[0244]
thf
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
四氢呋喃
[0245]
实施例1
[0246]
(r)-7-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并
[0247]
[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺
[0248][0249]
方法1：
[0250]
中间体1a：6-氯-4-(异丙基氨基)-5-硝基烟酸乙酯
[0251][0252]
将4,6-二氯-5-硝基烟酸乙酯(0.28g，1.06mmol)、丙烷-2-胺(0.066g，1.11mmol)和三乙胺(0.294ml，2.11mmol)在乙腈(5ml)中的溶液在室温下搅拌2h。将反应混合物用etoac稀释，用水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗材料使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化，以得到呈黄色油状物的6-氯-4-(异丙基氨基)-5-硝基烟酸乙酯(0.297g，98％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.92(d,j＝7.7hz,1h),8.73(s,1h),4.39(q,j＝7.1hz,2h),3.65-3.50(m,1h),1.45-1.38(m,3h),1.25(d,j＝6.2hz,6h)。lcms m/z 288.2(m 1)。
[0253]
中间体1b：6-(4-氰基-2-氟苯基)-4-(异丙基氨基)-5-硝基烟酸乙酯
[0254][0255]
将6-氯-4-(异丙基氨基)-5-硝基烟酸乙酯(67mg，0.23mmol)、(4-氰基-2-氟苯基)硼酸(42.2mg，0.26mmol)、碳酸钠(49.4mg，0.47mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(16.4mg，0.023mmol)在etoh(1.5ml)和甲苯(2ml)中的混合物用氮气脱气并且在80℃下搅拌过夜。将反应混合物浓缩，用etoac稀释，用水洗涤，并且将有机层干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至50:50梯度)纯化，以得到呈黄棕色固体的6-(4-氰基-2-氟苯基)-4-(异丙基氨基)-5-硝基烟酸乙酯(50.7mg，59％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ9.03-8.95(m,2h),7.57-7.43(m,3h),4.43(q,j＝7.1hz,2h),3.54(dt,j＝8.8,6.3hz,1h),1.47-1.41(m,3h),1.28-1.22(m,6h)。lcms m/z373.1(m 1)。
[0256]
中间体1c：5-氨基-6-(4-氰基-2-氟苯基)-4-(异丙基氨基)烟酸乙酯
[0257][0258]
将6-(4-氰基-2-氟苯基)-4-(异丙基氨基)-5-硝基烟酸乙酯(50mg，0.134mmol)和铁(30mg，0.537mmol)在乙酸(4ml)中的混合物在80℃下搅拌1h。将混合物冷却至室温，通过硅藻土垫过滤并且浓缩。将浓缩的滤液用etoac稀释，用饱和nahco3、水洗涤，并且将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色胶状物的5-氨基-6-(4-氰基-2-氟苯基)-4-(异丙基氨基)烟酸乙酯(40.6mg，88％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ8.65(s,1h),7.75-7.67(m,1h),7.60(dd,j＝7.9,1.5hz,1h),7.51(dd,j＝9.2,1.3hz,1h),7.05-6.93(m,1h),4.40(q,j＝7.2hz,2h),4.06-3.88(m,1h),1.42(t,j＝7.1hz,3h),1.21(d,j＝6.4hz,6h)。lcms m/z 343.2(m 1)。
[0259]
中间体1d：7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0260][0261]
将5-氨基-6-(4-氰基-2-氟苯基)-4-(异丙基氨基)烟酸乙酯(40mg，0.117mmol)和碳酸钾(64.6mg，0.467mmol)在dma(0.5ml)中的混合物在140℃下搅拌过夜。将混合物冷却至室温并且用etoac稀释。将有机组分用饱和nahco3和水洗涤，然后将有机层干燥(mgso4)并且浓缩。将粗产物使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；30x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从20％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持5min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈灰白色固体的7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯，tfa(9.6mg，19％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.99(br s,1h),8.97(s,1h),8.43(d,j＝8.6hz,1h),8.19(s,1h),7.70(d,j＝8.3hz,1h),4.62(br s,1h),4.41(q,j＝7.0hz,2h),1.49-1.32(m,9h)。lcms m/z 323.2(m 1)。
[0262]
方法2：
[0263]
中间体1e：(5-溴-2-氰基苯基)氨基甲酸叔丁酯
[0264][0265]
将2-氨基-4-溴苯甲腈(5g，25.4mmol)、二碳酸二叔丁酯(6.65g，30.5mmol)、dmap(3.10g，25.4mmol)和三乙胺(3.54ml，25.4mmol)在dcm(100ml)中的混合物在室温下搅拌过夜。通过lcms观察单和双-boc产物以及起始材料。添加另外0.5当量boc2o(3g)并且继续搅
拌另外的18h。然后将反应混合物用水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗材料使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/dcm 100:0至0:100梯度)纯化，以得到呈白色固体的(5-溴-2-氰基苯基)氨基甲酸叔丁酯(4.5g，54％产率)。
[0266]
中间体1f：n-(5-溴-2-氰基苯基)-n-(叔丁氧羰基)甘氨酸叔丁酯
[0267][0268]
向60％nah(0.727g，18.2mmol)在dmf(80ml)中的悬浮液中添加(5-溴-2-氰基苯基)氨基甲酸叔丁酯(4.5g，15.1mmol)在dmf(20ml)中的溶液，然后添加2-溴乙酸叔丁酯(2.407ml，16.7mmol)。将反应混合物在室温下搅拌20min。将反应用水淬灭。将混合物用etoac萃取，并且将有机层用饱和nahco3和水进一步洗涤。将有机层干燥(mgso4)，并且浓缩，并且将粗材料使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至50:50梯度)纯化，以得到呈黄色油状物的n-(5-溴-2-氰基苯基)-n-(叔丁氧羰基)甘氨酸叔丁酯(6.05g，78％产率)。产物静止时固化。
[0269]
中间体1g：3-氨基-6-溴-1h-吲哚-1,2-二甲酸二叔丁酯
[0270][0271]
向2-((5-溴-2-氰基苯基)(叔丁氧羰基)氨基)乙酸叔丁酯(6g，14.6mmol)在thf(100ml)中的溶液中分两部分添加叔丁醇钾(1.80g，16.1mmol)。将反应混合物在室温下搅拌30min。lcms显示反应完成。将混合物倒入水中，用etoac萃取，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品溶解于dcm中并且超声，此后形成白色沉淀。收集固体以得到呈白色固体的3-氨基-6-溴-1h-吲哚-1,2-二甲酸二叔丁酯(2.06g，34％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.98(d,j＝1.6hz,1h),7.88(d,j＝8.4hz,1h),7.44(dd,j＝8.4,1.7hz,1h),6.28-6.23(m,2h),1.54(d,j＝5.6hz,18h)。
[0272]
中间体1h：6-溴-1h-吲哚-3-胺
[0273][0274]
将3-氨基-6-溴-1h-吲哚-1,2-二甲酸二叔丁酯(2.06g，5.0mmol)和tfa(5ml，65mmol)在dcm(10ml)中的溶液在室温下搅拌3h。将反应混合物浓缩，用etoac稀释并且用饱和nahco3洗涤然后用水洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈黄色固体的6-溴-1h-吲哚-3-胺(1.06g，100％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.49-7.38(m,2h),7.06(dd,j＝
8.4,1.7hz,1h),6.80(s,1h).lcms m/z 211(m 2)。
[0275]
中间体1i：2-(((6-溴-1h-吲哚-3-基)氨基)亚甲基)丙二酸二乙酯
[0276][0277]
将6-溴-1h-吲哚-3-胺(1g，4.74mmol)和2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯(1.025g，4.74mmol)在dmf(20ml)中的溶液在80℃下搅拌45min。将反应混合物冷却至室温，用etoac稀释并且用水洗涤(3x)。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色固体的粗2-(((6-溴-1h-吲哚-3-基)氨基)亚甲基)丙二酸二乙酯(1.18g，65％产率)。lcms m/z383(m 2)。
[0278]
中间体1j：7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0279][0280]
将在二苯基醚(10ml)中的2-(((6-溴-1h-吲哚-3-基)氨基)亚甲基)丙二酸二乙酯(1.18g，3.1mmol)在250℃-255℃下搅拌15min并且然后冷却至室温。将混合物用1:1醚/己烷稀释并且搅拌10min。将固体通过过滤收集并且用己烷洗涤以得到呈深棕色固体的7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.17g，113％产率)。lcms m/z 335(m 2)。
[0281]
中间体1k：7-氰基-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0282][0283]
将7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.1g，3.28mmol)、锌(0.150g，2.3mmol)、氰化锌(0.347g，2.95mmol)和pd2(dba)3(0.150g，0.164mmol)在dmf(12ml)中的混合物用氮气脱气，并且然后添加三叔丁基膦(0.088ml，0.328mmol)。将反应混合物在120℃下搅拌2h然后冷却至室温。将混合物通过硅藻土垫过滤并且用dmf洗涤。将滤液用水(80ml)稀释，并且将固体通过过滤收集，用水洗涤然后用醚洗涤以得到呈深棕色固体的粗7-氰基-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.11g，84％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.42(s,1h),8.54(s,1h),8.28(d,j＝8.3hz,1h),7.96-7.90(m,1h),7.56(dd,j＝8.4,1.4hz,1h),4.26(q,j＝7.1hz,2h),1.31(t,j＝7.1hz,3h)。lcms m/z 282(m 1)。
[0284]
替代性制备：将7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(2.35g，7.01mmol)和氰化铜(i)(0.942g，10.52mmol)在nmp(15ml)中的悬浮液用氮气吹扫
并且在170℃下搅拌过夜。将混合物冷却至室温并且倒入冰冷的水中并且搅拌15min。将固体通过过滤收集，用水和醚洗涤以得到呈棕色固体的粗7-氰基-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.8g，5.12mmol，73％产率)。lcms m/z 282(m 1)。
[0285]
中间体1l：4-氯-7-氰基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0286][0287]
将7-氰基-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.11g，3.95mmol)、n,n-二甲基苯胺(0.335g，2.76mmol)和pocl3(0.368ml，3.95mmol)的悬浮液在70℃下加热过夜。反应完全浓缩，添加pocl3(0.368ml，3.95mmol)，并且将反应混合物在90℃下加热5h。冷却后，将混合物浓缩，用etoac稀释，并且用饱和nahco3洗涤然后用水洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化，以得到呈浅棕色固体的4-氯-7-氰基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(0.386g，33％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.68(s,1h),8.95(s,1h),8.43(d,j＝8.2hz,1h),8.12-8.08(m,1h),7.71(dd,j＝8.2,1.3hz,1h),4.43(q,j＝7.1hz,2h),1.39(t,j＝7.1hz,3h)。lcms m/z 300(m 1)。
[0288]
中间体1m：7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0289][0290]
将4-氯-7-氰基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(0.230g，0.77mmol)、丙烷-2-胺(0.136g，2.3mmol)和三乙胺(0.535ml，3.84mmol)在dma(3ml)中的溶液在100℃下搅拌6h。然后将混合物冷却至室温，用etoac稀释然后用水和饱和nahco3洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色固体的粗7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(0.244g，99％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ11.47(s,1h),8.84(s,1h),8.61(br d,j＝8.9hz,1h),8.27(d,j＝8.6hz,1h),8.06(dd,j＝1.3,0.7hz,1h),7.57(dd,j＝8.2,1.3hz,1h),4.60-4.44(m,1h),4.35(q,j＝7.2hz,2h),1.41-1.28(m,9h)。lcms m/z 323.2(m 1)。
[0291]
中间体1n：7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸
[0292][0293]
将7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(92mg，0.29mmol)和1n naoh(0.86ml，0.86mmol)在二噁烷(2ml)中的溶液在80℃下搅拌过夜。将混合物冷却至室温并且酸化至ph约6。将混合物过滤并且浓缩以得到被1当量的氯化钠污染的
呈棕色固体的粗产物。lcms m/z 295.1(m 1)。
[0294]
实施例1：
[0295]
将7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸(6mg，0.020mmol)(来自方法1)、bop(9.0mg，0.02mmol)、(r)-4-氨基-3-氟-2-甲基丁-2-醇(2.47mg，0.02mmol)和三乙胺(0.014ml，0.102mmol)在dmf(0.5ml)中的溶液在室温下搅拌1h。将粗品直接使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；21.2x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从20％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持5min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈灰白色固体的(r)-7-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺，tfa(1.9mg，18％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ11.36(br.s.,1h),10.21(br.s.,1h),8.45(s,1h),8.14(d,j＝8.3hz,2h),7.87(s,1h),7.39-7.34(m,1h),4.70-4.52(m,1h),4.43-4.31(m,1h),4.12-3.95(m,1h),3.78-3.62(m,1h),1.48(dd,j＝10.9,6.2hz,6h),1.44-1.37(m,6h)。lcms m/z 398.2(m 1)。
[0296]
表2
[0297]
[0298]
[0299]
[0300]
[0301]
[0302]
[0303]
[0304]
[0305][0306]
实施例66
[0307]
(r)-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-7-(噻唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺
[0308][0309]
中间体66a：7-溴-4-氯-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0310][0311]
将7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.7g，5.07mmol)
和pocl3(5ml，53.6mmol)在甲苯(15ml)中的悬浮液在110℃下搅拌10h。将反应混合物冷却至室温并且浓缩。将混合物用etoac稀释，用1.5m磷酸钾洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗产物使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯(含10％氢氧化铵)100:0至0:100梯度)纯化，以得到呈深棕色固体的7-溴-4-氯-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(1.11g，62％产率)。lcms m/z 355.0(m 2)。
[0312]
中间体66b：7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯
[0313][0314]
将7-溴-4-氯-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(0.4g，1.13mmol)、丙烷-2-胺(0.134g，2.26mmol)和三乙胺(0.47ml，3.4mmol)在dma(4ml)中的溶液在110℃下搅拌过夜。将混合物冷却至室温，用etoac稀释，并且用饱和nh4cl和水洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色固体的粗7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(0.412g，97％产率)。lcms m/z 378.0(m 2)。
[0315]
中间体66c：4-(异丙基氨基)-7-(噻唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯，tfa
[0316][0317]
将7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(50mg，0.133mmol)、碳酸钠(42.3mg，0.4mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(ii)(9.33mg，0.013mmol)和噻唑-5-硼酸频哪醇酯(33.7mg，0.16mmol)在thf(1.5ml)和水(0.2ml)中的混合物用氮气吹扫并且在70℃下搅拌3天。将混合物用etoac稀释，用水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μ；30x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从40％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持5min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈浅棕色固体的4-(异丙基氨基)-7-(噻唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯，tfa(11.8mg，17.96％产率)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ11.48(br s,1h),9.66(d,j＝8.2hz,1h),8.89-8.82(m,1h),8.43(s,1h),8.10(s,1h),7.90(d,j＝8.4hz,1h),7.52(s,1h),7.22(dd,j＝8.5,1.4hz,1h),4.63-4.50(m,1h),4.18(q,j＝7.1hz,2h),1.50(d,j＝6.2hz,6h),1.41-1.33(m,3h)。lcms m/z 381.1(m 1)。
[0318]
中间体66d：4-(异丙基氨基)-7-(噻唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯，tfa
[0319][0320]
将4-(异丙基氨基)-7-(噻唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯，tfa(11.8mg，0.024mmol)和1n naoh(0.119ml，0.119mmol)在二噁烷(1ml)中的溶液在75℃下搅拌过夜。添加另外的0.1ml 1n naoh并且继续加热1h。将混合物冷却至室温并且使用1n hcl酸化并且浓缩(被1当量nacl污染)。将粗品溶解于dmf中并且添加(r)-4-氨基-3-氟-2-甲基丁-2-醇(2.89mg，0.024mmol)、bop(10.55mg，0.024mmol)和三乙胺(9.98μl，0.072mmol)。将反应混合物搅拌45min，过滤并且浓缩。将滤液用etoac稀释，用水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗材料用以下条件经由制备型lc/ms纯化：柱：xbridge c18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b：95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度：经20分钟10％-60％b，然后在100％b下保持5分钟；流速：20ml/min。将含有产物的级分合并并且经由离心蒸发干燥以得到(r)-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-7-(噻唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酰胺(2.0mg，18％产率)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ11.12(br s,1h),9.28-9.08(m,1h),8.73(br s,1h),8.46(br d,j＝8.7hz,2h),8.19(br d,j＝6.6hz,1h),7.86(s,1h),7.60(br s,1h),4.49-4.30(m,2h),3.83-3.65(m,1h),1.27(dd,j＝5.9,2.1hz,6h),1.19(br d,j＝6.5hz,6h)。一个质子被掩藏在水峰下。lcms m/z 456.1(m 1)。
[0321]
表3
[0322][0323]
实施例69
[0324]
(r)-7-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酰胺
[0325][0326]
中间体69a：6-溴-3-硝基-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶
[0327][0328]
在0℃下将发烟硝酸(0.25ml，5.58mmol)在0℃下添加到6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶(1g，5.08mmol)在硫酸(15ml)中的悬浮液中。将反应混合物在0℃下搅拌1.5h。添加冰冷的水(20ml)并且使用5n naoh将ph调节至约ph 7-8。将固体通过过滤收集并且用水洗涤。将产物从meoh中共沸以得到呈橙黄色固体的粗6-溴-3-硝基-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶(1.21g，99％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.48(s,1h),8.34(d,j＝2.0hz,1h),7.96(d,j＝2.0hz,1h)。lcms m/z 242.0(m 2)。
[0329]
中间体69b：6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶-3-胺
[0330][0331]
将6-溴-3-硝基-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶(1.2g，4.96mmol)、锌(1.62g，24.8mmol)和氯化铵(1.33g，24.8mmol)在meoh(9ml)和水(1ml)中的混合物加热至回流持续1min，并且然后在室温下搅拌30min。将混合物过滤并且浓缩，并且用etoac稀释，并且再次过滤以去除黑色不溶性固体。然后将滤液用饱和nahco3洗涤，并且将水层用etoac萃取(3x)。将合并的有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈深棕色固体的粗6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶-3-胺(1.12g，100％产率)。lcms m/z 211.9(m 1)。
[0332]
中间体69c：2-(((6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶-3-基)氨基)亚甲基)丙二酸二乙酯
[0333][0334]
将6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶-3-胺(1.1g，5.2mmol)和2-(乙氧基亚甲基)丙二酸二乙酯(1.12g，5.2mmol)的悬浮液在120℃下加热1h。将反应混合物冷却至室温并且用10％醚/己烷稀释并且搅拌过夜。将所得固体通过过滤收集以得到粗2-(((6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶-3-基)氨基)亚甲基)丙二酸二乙酯。
[0335]
中间体69d：7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯，tfa
[0336][0337]
将2-(((6-溴-1h-吡咯并[3,2-b]吡啶-3-基)氨基)亚甲基)丙二酸二乙酯和ppa(0.485ml)的混合物在110℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，使用2m naoh中和并且用etoac萃取(3x)。将有机萃取物干燥(mgso4)并且浓缩。将粗材料使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯/meoh 100:0至0:90:10梯度)纯化。将产物使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；30x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从20％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持5min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)再次纯化，以得到呈棕色固体的7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯，tfa(20.5mg)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.32(s,1h),8.65(d,j＝2.0hz,1h),8.38(s,1h),8.12(d,j＝2.0hz,1h),4.25(d,j＝7.1hz,2h),1.31(t,j＝7.1hz,3h)。lcms m/z 338.0(m 2)。
[0338]
中间体69e：7-溴-4-氯-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯
[0339][0340]
将7-溴-4-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯(0.103g，0.306mmol)和pocl3(1.5ml，16.1mmol)的溶液在90℃下搅拌过夜。将混合物浓缩，用etoac稀释，并且用饱和nahco3和水洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色固体的粗7-溴-4-氯-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯(0.106g，98％产率)。
[0341]
中间体69f：7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯
[0342][0343]
将7-溴-4-氯-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯(0.1g，0.28mmol)、丙烷-2-胺(0.050g，0.85mmol)和三乙胺(0.2ml，1.41mmol)在dma(1ml)中的溶液在120℃下搅拌4h。将反应混合物冷却至室温，用etoac稀释并且用水和10％licl洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色固体的粗7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯。
[0344]
中间体69g：7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯，tfa
[0345][0346]
将7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯(80mg，0.212mmol)、氰化锌(50mg，0.42mmol)和pd(ph3p)4(24.5mg，0.021mmol)在dma(1.5ml)中的混合物用氮气吹扫并且在120℃下搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，用etoac稀释并且用饱和nh4cl和水洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；30x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从20％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持2min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈棕色固体的7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯，tfa(16.4mg，18％产率)。lcms m/z 324.1(m 1)。
[0347]
中间体69h：7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸
[0348][0349]
将7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸乙酯，tfa(16.4mg，0.037mmol)和lioh(0.19ml，0.19mmol)在1,4-二噁烷(1.2ml)中的混合物在90℃下搅拌5h。将反应混合物冷却至室温并且用1n hcl酸化并且浓缩。将粗品使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；30x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从10％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持2min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈黄色固体的酸。lcms m/z 296.1(m 1)。
[0350]
实施例69：
[0351]
将7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡咯并[3,2-b:4,5-b']联吡啶-3-甲酸，tfa(8mg，0.020mmol)、(r)-4-氨基-3-氟-2-甲基丁-2-醇(2.4mg，0.020mmol)和bop(8.64mg，0.020mmol)和三乙胺(0.014ml，0.1mmol)在dmf(0.5ml)中的溶液在室温下搅拌30min。将粗材料使用以下条件经由制备型lc/ms纯化：柱：xbridge c18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b：95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度：经20分钟10％-50％b，然后在100％b下保持4分钟；流速：20ml/min。将含有产物的级分合并，并且经由离心蒸发干燥。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ8.84-8.74(m,2h),8.57(s,1h),8.46(d,j＝1.2hz,1h),8.41(br d,j＝9.2hz,1h),4.49(br d,j＝4.0hz,1h),4.46-4.30(m,1h),3.79-3.38(m,2h),1.29-1.22(m,6h),1.17(br d,j＝5.5hz,6h)。lcms m/z 399.2(m 1)。
[0352]
实施例70
[0353]
3-(5-异丁基-1h-1,2,4-三唑-3-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈，tfa
[0354][0355]
将7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸，hcl(20mg，0.06mmol)、3-甲基丁亚胺酸乙酯盐酸盐(15mg，0.091mmol)、bop(29.4mg，0.067mmol)和n-甲基吗啉(0.033ml，0.30mmol)在dmf(1ml)中的溶液在室温下搅拌过夜。然后添加肼(5.7μl，0.18mmol)并且反应变混浊。将混合物在室温下搅拌1h并且然后在50℃下搅拌2h。将混合物冷却至室温并且使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；30x100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从10％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持5min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈无色胶状物的3-(5-异丁基-1h-1,2,4-三唑-3-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈，tfa(1.2mg，4％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ9.09(s,1h),8.35(dd,j＝8.4,0.7hz,1h),8.18(t,j＝1.0hz,1h),7.68(dd,j＝8.3,1.3hz,1h),4.79-4.70(m,1h),2.83-2.76(m,2h),2.21(dt,j＝13.6,6.8hz,1h),1.57(d,j＝6.4hz,6h),1.08-1.02(m,6h)。lcms m/z 374.1(m 1)。
[0356]
表4
[0357][0358]
实施例72
[0359]
4-(异丙基氨基)-3-(3-丙基-1,2,4-噁二唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈
[0360][0361]
将7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸，tfa(16mg，0.04mmol)、n-羟基丁脒(4.80mg，0.047mmol)、bop(18.20mg，0.041mmol)和n-甲基吗啉(0.013ml，0.118mmol)在dmf(0.8ml)中的溶液在室温下搅拌2.5h。将混合物用etoac稀释，用水稀释(2x)然后干燥(mgso4)并且浓缩。将粗残余物吸收在甲苯(0.8ml)中并且在100℃下加热1h。将反应混合物浓缩并且将粗品使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；30x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从10％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持5min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得
到呈浅黄色固体的4-(异丙基氨基)-3-(3-丙基-1,2,4-噁二唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈，tfa(1.3mg，6％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ9.09(s,1h),8.39(dd,j＝8.4,0.7hz,1h),8.22-8.15(m,1h),7.68(dd,j＝8.4,1.3hz,1h),4.75(dt,j＝12.6,6.3hz,1h),2.95-2.83(m,2h),1.90(sxt,j＝7.4hz,2h),1.58(d,j＝6.2hz,6h),1.09(t,j＝7.4hz,3h)。lcms m/z 361.1(m 1)。
[0362]
实施例73
[0363]
3-(1-异戊基-1h-1,2,3-三唑-4-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈
[0364][0365]
中间体73a：7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲醛
[0366][0367]
将7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲酸乙酯(0.264g，0.70mmol)在dcm(8ml)中的溶液冷却-78℃，并且逐滴添加dibal-h(1m于甲苯中)(1.368ml，1.368mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌2h。添加另外等分式样的dibal-h(0.702ml，0.702mmol)，并且将反应混合物在-78℃下搅拌30min并且温热直至0℃保持30min。将反应用meoh淬灭。将反应混合物用dcm和饱和nh4cl稀释并且搅拌15min。将淬灭的混合物用dcm(2x)萃取，干燥(mgso4)并且浓缩。将残余物溶解于dce(10ml)中，并且添加二氧化锰(0.305g，3.51mmol)，并且在40℃下搅拌过夜。将混合物冷却，并且通过硅藻土垫过滤，并且浓缩。将粗品使用isco快速色谱法(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化，以得到呈浅黄色固体的7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲醛(125mg，54％产率)。lcms m/z 333.7(m 2)。
[0368]
中间体73b：7-溴-3-乙炔基-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺
[0369][0370]
将新鲜制备的在thf中的lda(0.5ml)冷却至-78℃，并且经5min逐滴添加(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷(在醚中的2m)(0.09ml，0.181mmol)。将混合物搅拌30min并且缓慢添加7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-甲醛(50mg，0.151mmol)在thf(1.5ml)中的溶液。允许将反应混合物缓慢升温至室温并且搅拌过夜。反应完成约40％(通过lcms监测)。将混合物用水淬灭，用etoac萃取，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品使用isco快速色谱法
(硅胶/己烷/乙酸乙酯100:0至0:100梯度)纯化，以得到呈浅棕色固体的7-溴-3-乙炔基-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺(9mg，18％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.21(s,1h),8.05(dd,j＝8.4,0.5hz,1h),7.72(dd,j＝1.6,0.5hz,1h),7.34(dd,j＝8.4,1.7hz,1h),4.71(dt,j＝12.7,6.3hz,1h),3.95-3.92(m,1h),1.38-1.33(m,6h)。lcms m/z 328.0,330.0(m 1)。
[0371]
中间体73c：7-溴-3-(1-异戊基-1h-1,2,3-三唑-4-基)-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺
[0372][0373]
将7-溴-3-乙炔基-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺(15mg，0.046mmol)、1-叠氮基-3-甲基丁烷(6.72mg，0.06mmol)、抗坏血酸钠(3.62mg，0.018mmol)和硫酸铜(ii)(1.46mg，9.14μmol)在t-buoh(0.5ml)和水(0.5ml)中的溶液在60℃下加热1.5h。将反应混合物冷却，用etoac稀释并且用水洗涤。将有机层干燥(mgso4)并且浓缩以得到呈棕色胶状物的粗7-溴-3-(1-异戊基-1h-1,2,3-三唑-4-基)-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺(23mg，100％产率)。lcms m/z 443.0(m 2)。
[0374]
实施例73：
[0375]
将7-溴-3-(1-异戊基-1h-1,2,3-三唑-4-基)-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺(21mg，0.048mmol)、氰化锌(11.17mg，0.095mmol)和pd(ph3p)4(5.5mg，4.76μmol)在dma(0.8ml)中的混合物在100℃下搅拌过夜。lcms指示反应完成。将混合物冷却并且过滤，并且将滤液用etoac稀释，用饱和nh4cl、水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗材料用以下条件经由制备型lc/ms纯化：柱：xbridge c18，19x 200mm，5-μm颗粒；流动相a：5:95乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；流动相b：95:5乙腈:水(含10-mm乙酸铵)；梯度：经19分钟40％-80％b，然后在100％b下保持5分钟；流速：20ml/min。将含有产物的级分合并并且经由离心蒸发干燥以得到3-(1-异戊基-1h-1,2,3-三唑-4-基)-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈(8.6mg，44.3％产率)。1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δ8.57-8.52(m,2h),8.34(d,j＝8.1hz,1h),7.98(d,j＝0.9hz,1h),7.52(dd,j＝8.1,1.4hz,1h),4.59-4.51(m,2h),4.42(quin,j＝6.3hz,1h),1.95-1.87(m,2h),1.63(dt,j＝13.4,6.7hz,1h),1.37(d,j＝6.3hz,6h),1.02(d,j＝6.6hz,6h)。lcms m/z 388.2(m 1)。
[0376]
表5
[0377]
[0378][0379]
实施例76
[0380]
4-(异丙基氨基)-3-(3-(哌啶-4-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈
[0381][0382]
中间体76a：4-(5-(7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-基)异噁唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，tfa
[0383][0384]
将7-溴-3-乙炔基-n-异丙基-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-4-胺(16.5mg，0.05mmol)、4-(氯(羟基亚胺基)甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(39.6mg，0.151mmol)和三乙胺(0.028ml，0.20mmol)在dce(1.2ml)中的溶液在60℃下加热18h。lcms显示少量区域异构体。将混合物冷却至室温，用dcm稀释，用水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。将粗品使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；21.2x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经12min从20％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持2min，其中a＝10:90:0.05meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.05meoh-h2o-tfa)纯化，以得到呈棕色胶状物的4-(5-(7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-基)异噁唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，tfa(8.7mg，26％产率)。
[0385]
中间体76b：4-(5-(7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-基)异噁唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
[0386][0387]
将4-(5-(7-溴-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-基)异噁唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，tfa(8.7mg，0.013mmol)、氰化锌(3.06mg，0.026mmol)在dma(0.5ml)中的混合物用氮气吹扫并且在90℃下搅拌18h。添加另外的氰化锌(3.06mg，0.026mmol)和pd(ph3p)4(1.504mg，1.301μmol)。将反应混合物在120℃下加热24h。通过lcms观察到产物。将反应混合物冷却至室温，过滤，用etoac稀释，用饱和nh4cl、水洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩以得到粗4-(5-(7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-基)异噁唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯。
[0388]
实施例71：
[0389]
将4-(5-(7-氰基-4-(异丙基氨基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-3-基)异噁唑-3-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯的溶液在tfa(0.5ml，6.49mmol)和dcm(0.5ml)》中搅拌15min并且浓缩。将粗品使用制备型hplc(phen luna axia c18 5μm；21.2x 100mm柱；在220nm下检测；流速＝40ml/min；经10min从10％b至100％b的连续梯度 在100％b下保持2min，其中a＝10:90:0.1meoh-h2o-tfa并且b＝90:10:0.1meoh-h2o-tfa)纯化，以得到4-(异丙基氨基)-3-(3-(哌啶-4-基)异噁唑-5-基)-5h-吡啶并[3,2-b]吲哚-7-甲腈，2tfa(3mg，36％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.53(s,1h),8.37(dd,j＝8.4,0.6hz,1h),8.19(s,1h),7.69(dd,j＝8.4,1.3hz,1h),6.92(s,1h),4.15(d,j＝6.1hz,1h),3.53(dt,j＝13.0,3.6hz,2h),3.29-3.17(m,3h),2.36(dd,j＝14.7,3.2hz,2h),2.14-1.98(m,2h),1.41(d,j＝6.4hz,6h)。lcms m/z 401.1(m 1)。
[0390]
表6
[0391][0392]
实施例81
[0393]
(r)-6-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酰胺
[0394][0395]
中间体81a：5-(5-氰基-2-硝基苯基)烟酸甲酯
[0396][0397]
将3-溴-4-硝基苯甲腈(0.59g，2.6mmol)、5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)烟酸甲酯(0.684g，2.6mmol)、磷酸三钾(1.66g，7.8mmol)和双(三苯基膦)氯化钯(ii)(0.091g，0.13mmol)在thf(15ml)和水(3ml)中的混合物在90℃下搅拌5h。将反应混合物用etoac稀释，用饱和碳酸氢钠洗涤，干燥(mgso4)并且浓缩。使粗产物经受isco快速色谱法(硅胶/己烷-etoac 100:0至0:100梯度)以得到5-(5-氰基-2-硝基苯基)烟酸甲酯(370mg，50％产率)。lcms m/z 284.0(m 1)。
[0398]
中间体81b和81c：8-氰基-5h-吡啶并[4,3-b]吲哚-4-甲酸甲酯和6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯
[0399][0400]
将5-(5-氰基-2-硝基苯基)烟酸甲酯(370mg，1.31mmol)、dppf(651mg，1.63mmol)在1,2-二氯苯(1.5ml，13.1mmol)中的混合物用氮气吹扫并且在150℃下搅拌1h。将反应混合物冷却并且浓缩，并且将残余物从dmf中重结晶，以得到作为主要产物的6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯(130mg，40％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.80(br s,1h),9.22(d,j＝2.0hz,1h),9.07(d,j＝2.1hz,1h),8.93(s,1h),7.89(br d,j＝8.4hz,1h),7.69(d,j＝8.4hz,1h),3.93(s,3h)。lcms m/z 250.0(m 1)。
[0401]
中间体81d：6-氰基-3-(甲氧基羰基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚1-氧化物
[0402][0403]
在90℃下在具有隔板的密封小瓶中将过氧化氢(30％，453μl，5.17mmol)经2h分3份添加到6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯(130mg，0.517mmol)在乙酸(3ml)中的搅拌悬浮液中。将混合物浓缩并且将残余物用半饱和nahco3溶液超声处理。将白色固体通过过滤分离；用水洗涤，干燥以得到粗6-氰基-3-(甲氧基羰基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚1-氧化物(130mg，94％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.01(d,j＝1.0hz,1h),8.90(d,j＝1.2hz,1h),8.80(d,j＝1.2hz,1h),7.96(dd,j＝8.4,1.6hz,1h),7.74(d,j＝8.4hz,1h),3.95(s,3h)。lcms m/z 267.8(m 1)。
[0404]
中间体81e和81f：4-氯-6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯和2-氯-6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯
[0405][0406]
在4℃下将pocl3(91μl，0.97mmol)添加到6-氰基-3-(甲氧基羰基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚1-氧化物(130mg，0.49mmol)在dmf(4ml)中的搅拌悬浮液中，并且允许温热至室温并且搅拌4h。将混合物浓缩并且将残余物悬浮在半饱和nahco3中，超声处理并且过滤。将固体用水洗涤并且干燥以得到130mg的4-氯-6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯和2-氯-6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯的1.6:1混合物。
[0407]
将氯化物和丙烷-2-胺(26.9mg，0.455mmol)在乙腈(2ml)中的混合物在90℃下搅拌5h并且浓缩。使粗产物经受制备型hplc(ods柱/水-ch3oh-tfa 90:10:0.05至10:90:0.05梯度)按以下洗脱顺序得到：6-氰基-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯，tfa(22mg，11％产率)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ12.66(s,1h),8.85(s,1h),8.12(s,1h),8.04(d,j＝10.4hz,1h),7.80(dd,j＝8.4,1.2hz,1h),7.64(d,j＝8.3hz,1h),4.29-4.12(m,1h),3.88(s,3h)。lcms m/z 308.9(m 1)和2-氯-6-氰基-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯，tfa(52mg，27％产率)；1h nmr at 100℃(400mhz,dmso-d6)δ11.69(br.s.,1h),8.87(s,1h),8.34(d,j＝1.2hz,1h),7.59(dd,j＝8.3,1.6hz,1h),7.47(d,j＝8.3hz,1h),4.40(spt,j＝6.5hz,1h),3.90(s,3h),1.31(d,j＝6.5hz,6h)；lcms m/z 308.9(m 1)。
[0408]
中间体81g：6-氰基-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸
[0409][0410]
将6-氰基-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸甲酯(16mg，0.052mmol)和0.5n氢氧化锂(156μl，0.078mmol)在二噁烷(0.75ml)中的混合物在90℃下在密封小瓶中加热5h。将混合物用水(1ml)稀释，用醚洗涤并且将水层浓缩。将残余物吸收在1n hcl(0.45ml)中，超声处理并且浓缩。将粗产物与水一起研磨以得到6-氰基-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸，hcl(14mg，82％产率)。lcms m/z 295.1(m 1)。
[0411]
实施例81：
[0412]
将(r)-4-氨基-3-氟-2-甲基丁-2-醇、6-氰基-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酸，hcl(7mg，0.021mmol)、bop(11.23mg，0.025mmol)和tea(8.85μl，0.063mmol)在dmf(0.3ml)中的混合物在室温下搅拌5h。将反应混合物用甲醇稀释并且浓缩。使粗产物经受制备型hplc(ods柱/水r-meoh-tfa 90:10:0.1至10:90:0.1梯度)以得到(r)-6-氰基-n-(2-氟-3-羟基-3-甲基丁基)-4-(异丙基氨基)-9h-吡啶并[2,3-b]吲哚-3-甲酰胺，tfa(7.4mg，65％产率)。1h nmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.47(s,1h),8.37(s,1h),7.83(dd,j＝8.4,1.5hz,1h),7.75(dd,j＝8.4,0.5hz,1h),4.55-4.32(m,2h),3.91(ddd,j＝36.4,14.3,2.0hz,1h),3.55(ddd,j＝15.6,14.6,9.5hz,1h),1.44(d,j＝2.7hz,3h),1.42(d,j＝2.7hz,3h),1.30(s,3h),1.30(s,3h)。lcms m/z 398.2(m 1)。
[0413][0414]
hplc条件：
[0415]
方法a：waters acquity uplc beh c18，2.1x 50mm，1.7-μm颗粒；流动相a：5:95乙
腈:水(含10mm乙酸铵)；流动相b：95:5乙腈:水(含10mm乙酸铵)；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％b，然后在100％b下保持0.75分钟；流速：1.0ml/min；检测：在220nm下的uv。
[0416]
方法b：waters acquity uplc beh c18，2.1x 50mm，1.7μm颗粒；流动相a：5:95乙腈:水(含0.1％三氟乙酸)；流动相b：95:5乙腈:水(含0.1％三氟乙酸)；温度：50℃；梯度：经3分钟0-100％b，然后在100％b下保持0.75分钟；流速：1.0ml/min；检测：在220nm下的uv。
[0417]
方法c：waters acquity uplc beh c18，2.1x 50mm，1.7μm；流动相a：2:98乙腈:水(含0.0.05％三氟乙酸)；流动相b：98:2乙腈:水(含0.05％三氟乙酸)；温度：50℃；梯度：经1分钟0-100％b，然后在100％b下保持0.50分钟；流速：1.0ml/min；检测：在220nm下的uv。
[0418]
生物学测定
[0419]
本发明的化合物的药理学特性可以通过许多生物学测定来证实。已经用本发明的化合物进行以下例示的生物学测定。
[0420]
irak4抑制测定
[0421]
测定在u形底384孔板中进行。最终的测定体积为通过以下制备的30μl：添加15μl酶和底物(荧光肽和atp)以及在测定缓冲液中的测试化合物(20mm hepes ph 7.2，10mm mgcl2，0.015％brij 35和4mm dtt)。通过组合irak4与底物和测试化合物来开始反应。将反应混合物在室温下孵育60min，并且通过向每个样品中添加45μl的35mm edta而终止。在caliper 3000(caliper，马萨诸塞州霍普金顿)上通过电泳分离荧光底物和磷酸化产物来分析反应混合物。通过与无酶对照反应的100％抑制和仅媒介物反应的0％抑制比较来计算抑制数据。在测定中试剂的最终浓度为atp 500μm；fl-iptspitttyfffkkk肽1.5μm；irak4 0.6nm；和dmso 1.6％。
[0422]
irak4全血测定
[0423]
将含有抗凝剂acd-a的人全血铺板在384孔板(25μl/孔)中，并且在37℃下在5％co2孵育箱中与化合物孵育60分钟。在5％co2培养箱中，将血液用tlr2激动剂即在25μl rpmi(gibco)中终浓度为10μg/ml的脂磷壁酸(invivogen，加利福尼亚州圣地亚哥)刺激5小时。在孵育结束时，将板在2300rpm下离心5分钟。收获上清液并且通过流式细胞术珠测定(bd生物科学公司(bd biosciences)，加利福尼亚州圣何塞)分析il-6水平。
[0424]
表7
[0425]
irak4抑制数据
[0426]
[0427]