用于降解丙烯酰胺的酶的制作方法

技术特征：
no.14、seq id no.15、seq id no.16、seq id no.17、seq id no.18、seq id no.19、seq id no.20、seq id no.21和seq id no.22组成的组的序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列或由与选自由序列seq id no.14、seq id no.15、seq id no.16、seq id no.17、seq id no.18、seq id no.19、seq id no.20、seq id no.21和seq id no.22组成的组的序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列组成。5.根据前述权利要求中任一项所述的酶，其中，所述酶包含与选自由序列seq id no.19、seq id no.20、seq id no.21和seq id no.22组成的组的序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列或由与选自由序列seq id no.19、seq id no.20、seq id no.21和seq id no.22组成的组的序列具有至少95％、96％、97％、98％或99％的序列同一性的氨基酸序列组成。6.根据前述权利要求中任一项所述的酶，其中，所述酶是酰胺酶。7.根据前述权利要求中任一项所述的酶，其中，所述酶在高达50℃或更高温度、优选至少高达60℃的温度、更优选至少高达70℃的温度、进一步优选至少高达80℃的温度时表现出催化活性。8.根据前述权利要求中任一项所述的酶，其中，所述酶在ph4至ph7的范围内具有催化活性，优选地其中所述酶在ph4至ph6.5的范围内具有催化活性，进一步优选在ph4.5至ph5.5的范围内具有催化活性。9.根据前述权利要求中任一项所述的酶，其中，所述酶在ph4至ph7的范围内、优选ph4至ph6.5的范围内、更优选ph4.5至ph5.5的范围内在高达50℃或更高的温度、优选至少高达60℃的温度、更优选至少高达70℃的温度、进一步优选至少高达80℃的温度时表现出催化活性。10.根据前述权利要求中任一项所述的酶，其中，所述酶是嗜热假诺卡氏菌的经修改的酰胺酶。11.一种用于降解丙烯酰胺，优选地用于减少制剂中丙烯酰胺的量的方法，所述方法由以下步骤组成或包括以下步骤：(i)提供根据权利要求1至10中任一项所述的酶，(ii)提供含有丙烯酰胺的混合物，优选制剂，并添加步骤(i)的所述酶，(iii)将步骤(ii)产生的所述混合物优选在40℃至80℃的温度范围内、更优选在45℃至75℃的温度范围内孵育至少20分钟，(iv)任选地，加热步骤(iii)产生的孵育后的混合物以使所述酶失活，优选通过加热至至少90℃的温度并将温度保持为90℃以上至少15分钟，并任选地冷却所述混合物，以获得一种丙烯酰胺含量低于步骤(ii)中提供的所述混合物或制剂的产品。12.根据权利要求11所述的方法，其中，在步骤(ii)中提供含有丙烯酰胺的制剂，其中所含丙烯酰胺优选为美拉德反应的产物，并且其中所述制剂是用于娱乐或营养的制剂，或化妆品制剂，或用于生产此类制剂的半成品，优选地其中所述制剂选自由油煎或油炸土豆制品、烤谷类或含有它们的产品、玉米制品、咖啡制品例如固体或液体咖啡提取物和生咖啡、菊苣提取物、谷物咖啡制品、咖啡替代品、零食、小麦制品、化妆品、烘焙食品或糕点例如饼干、曲奇、脆饼干、谷物棒、司康饼、冰淇淋甜筒、华夫饼、松脆饼、姜饼、薄脆饼干和面包替
代品、意大利面、大米、鱼制品、肉制品、谷物、啤酒、坚果、儿童和婴儿辅食、发型产品、个人护理产品、头发护理产品和面部护理产品组成的组。13.根据权利要求11或12所述的方法，其中，在每种情况下，基于所述产品的总重量，所得产品中的丙烯酰胺含量＜2000μg/kg、优选＜850μg/kg、特别优选＜500μg/kg。14.一种用于生产丙烯酰胺含量降低的用于娱乐或营养的制剂或化妆品制剂的方法，优选地其中所述制剂选自由油煎或油炸土豆制品、烤谷类或含有它们的产品、玉米制品、咖啡制品例如固体或液体咖啡提取物和生咖啡、菊苣提取物、谷物咖啡制品、咖啡替代品、零食、小麦制品、化妆品、烘焙食品或糕点例如饼干、曲奇、脆饼干、谷物棒、司康饼、冰淇淋甜筒、华夫饼、松脆饼、姜饼、薄脆饼干和面包替代品、意大利面、大米、鱼制品、肉制品、谷物、啤酒、坚果、儿童和婴儿辅食、发型产品、个人护理产品、头发护理产品和面部护理产品组成的组，其中，所述方法由以下步骤组成或包括以下步骤：(i)(a)提供通过根据权利要求11至13中任一项所述的方法获得的产品，和(b)进一步加工所述产品和/或添加一种或多种其他成分以获得所述用于娱乐或营养的制剂或化妆品制剂，或(ii)(i)提供根据权利要求1至10中任一项所述的酶，(ii)提供含有丙烯酰胺的用于娱乐或营养的制剂或化妆品制剂并添加步骤(i)的所述酶，(iii)将步骤(ii)产生的所述制剂优选在40℃至80℃的温度范围内、更优选在45℃至75℃的温度范围内孵育至少20分钟，(iv)任选地，加热步骤(iii)产生的孵育后的制剂以使所述酶失活，优选通过加热至至少90℃的温度并将温度保持为90℃以上至少15分钟，并任选地冷却所述制剂，以获得一种丙烯酰胺含量低于步骤(ii)中提供的所述制剂的制剂。15.一种根据权利要求1至10中任一项所述的酶用于降解丙烯酰胺和/或用于生产具有降低的丙烯酰胺含量的用于娱乐或营养的制剂或化妆品制剂的用途，在每种情况下，基于所述制剂的总重量，丙烯酰胺含量优选＜2000μg/kg、优选＜850μg/kg、特别优选＜500μg/kg。16.一种用于娱乐或营养的制剂或化妆品制剂，通过或可通过根据权利要求11至13中任一项所述的方法制备，其中，在每种情况下，基于所述制剂的总重量，丙烯酰胺含量＜2000μg/kg、优选＜850μg/kg、特别优选＜500μg/kg。

技术总结
本发明主要属于食品和高档食品，例如咖啡和咖啡替代品的生产领域。提供一种能够降解丙烯酰胺的酶——优选也在50℃以上的温度下，特别是在咖啡/咖啡替代品生产过程中出现的温度范围内，和/或在pH 4和pH 7之间的pH值，这与咖啡/咖啡替代品生产过程中常见的情况一样。此外，本发明提供了从选自半成品和成品的制剂降解丙烯酰胺的方法。此外，本发明还涉及与未采用通过根据本发明的酶去除根据本发明的丙烯酰胺的方法的制剂相比，丙烯酰胺含量降低的制剂。剂。剂。


技术研发人员：奥利弗
受保护的技术使用者：安卡咖啡技术应用有限公司
技术研发日：2021.01.21
技术公布日：2022/11/11