一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料及其制备方法、应用

技术特征：
1.一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：(1)将去离子水煮沸去除二氧化碳后冷却至室温；将六水硝酸锌和九水硝酸铝溶于去离子水中，得到的锌铝溶液，所述锌铝溶液中的六水硝酸锌和九水硝酸铝的浓度分别为0.3m和0.1m；将硝酸钠溶于去离子水得到0.2m的硝酸钠溶液，并使用0.8m的氢氧化钠溶液将硝酸钠溶液的ph调至9.5-10；将锌铝溶液逐滴加入硝酸钠溶液中，所述锌铝溶液与硝酸钠溶液的体积比为2:3，同时以800-1200rpm搅拌下滴加0.8m的氢氧化钠溶液维持ph在9.5-10，得到混合溶液，将混合溶液转移至水热釜中80℃反应16-24小时得到锌铝类水滑石晶体；重复三次超声和离心，过滤得到锌铝类水滑石水溶液；(2)将存放于-80℃下的含25％-30％甘油的痤疮丙酸杆菌冻存液取出，在35-38℃水浴解冻后，将其在厌氧超净工作台中加入液体培养基，置于35-38℃的摇床中，复苏40-50小时后，4000-5000rpm离心5-10分钟，去离子水清洗一次；再次4000-5000rpm离心5-10分钟，分散在去离子水中即得到痤疮丙酸杆菌分散液；(3)将步骤(1)得到的锌铝类水滑石水溶液和步骤(2)得到的痤疮丙酸杆菌分散液以50μg/ml和15x10
7 cfu/ml的比例混合得到混合液，所述混合液置于温度35-38℃下摇床中1-2小时；将混合液在4000-5000rpm下离心5-10分钟，去离子水重悬得到锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料。2.根据权利要求1所述的一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中滴加0.8m的氢氧化钠溶液维持碱性，其ph控制为9.5-10。3.根据权利要求1所述的一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中重复三次超声和离心，具体为，以频率为9.5-20.5hz下超声2-4分钟，再以10000-12000rpm离心5-10分钟，重复三次此过程。4.根据权利要求1所述的一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中在无氧超净工作台中加入液体培养基；培养需要使用厌氧反应包和密封袋，以确保无氧环境。5.根据权利要求1所述的一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中所述摇床的旋转速率为150-180rpm。6.一种由权利要求1-5任一项所述的制备方法得到的锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料。7.根据权利要求6所述的锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料在肿瘤一氧化氮杀伤、锌离子稳态失衡和免疫治疗剂中的应用。

技术总结
本发明公开了一种锌铝类水滑石-痤疮丙酸杆菌细菌杂化材料及其制备方法、应用，涉及肿瘤治疗领域，该方法是通过共沉淀法制备锌铝类水滑石，厌氧培养痤疮丙酸杆菌获得分散在去离子水中的菌液；锌铝类水滑石水溶液与菌液按比例混合、振荡、离心、重悬获得杂化材料。该杂化材料通过细菌代谢和免疫以及与纳米材料的协同实现对肿瘤的清除，解决单一治疗途径效果局限的难题。本发明中细菌杂化材料合成简单，细菌的厌氧特性使材料能够深入肿瘤组织低氧内部，并代谢产生具有杀伤作用的一氧化氮，同时促进锌铝类水滑石降解释放锌离子，锌离子与一氧化氮进一步打破肿瘤细胞内氧化还原平衡，促进细胞凋亡；细菌同时激活免疫反应，最终实现对肿瘤协同杀伤。对肿瘤协同杀伤。对肿瘤协同杀伤。


技术研发人员：朱佩佩 周成 傅译可 李翔
受保护的技术使用者：浙江大学
技术研发日：2022.09.06
技术公布日：2022/11/11