用于表征纳米囊泡及其结合或缔合的靶标的方法和装置

技术特征：
1.一种用于检测和/或表征样品中的纳米囊泡的方法，所述方法包括以下步骤：a)使样品与纳米颗粒或纳米颗粒的前体接触，其中，所述纳米颗粒或纳米颗粒的前体能够结合到纳米囊泡的表面上并且原位形成环绕所述纳米囊泡的纳米壳；b)照射所述样品并且测量所述样品的光学信号以检测和/或表征所述样品中的纳米囊泡。2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述纳米壳的形成引起红外区中局部等离子体共振和/或增加的光学吸光度。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，调整所述纳米壳的光谱性质(吸光度)以区分所述纳米囊泡的尺寸和相应的囊泡计数。4.根据权利要求1至3中任一项所述的方法，其中，所述纳米颗粒是金属纳米颗粒。5.根据权利要求4所述的方法，其中，所述金属纳米颗粒是金纳米颗粒。6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述金属纳米颗粒的直径范围在7nm和11nm之间。7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中，所述纳米囊泡是外泌体。8.根据权利要求1至7中任一项所述的方法，其中，所述前体是金属盐。9.根据权利要求8的任一项所述的方法，其中，所述金属盐是金盐。10.一种用于检测与样品中的纳米囊泡结合或缔合的一种或更多种靶标的方法，所述方法包括以下步骤：a)使样品与纳米颗粒或纳米颗粒的前体以及一种或更多种荧光分子探针依次或同时接触，其中所述纳米颗粒或纳米颗粒的前体能够结合到所述纳米囊泡的表面上并且原位形成环绕所述纳米囊泡的纳米壳，并且其中所述一种或更多种荧光分子探针能够特异性结合至与所述纳米囊泡结合或缔合的一种或更多种靶标并且为每种所述靶标提供独特发射荧光波长；b)照射所述样品并且测量所发射的荧光，以检测与所述纳米囊泡结合或缔合的一种或更多种靶标，其中所述检测涉及识别每种所述靶标的独特发射荧光波长的增强荧光淬灭。11.根据权利要求10所述的方法，其中，所述荧光分子探针的光学性质与所述纳米壳的光谱兼容性相匹配，以增强检测信号。12.根据权利要求10或11所述的方法，其中，所述荧光分子探针的光学性质与所述纳米壳的光谱兼容性相匹配，以区分存在于不同大小的纳米囊泡内的靶标或者与不同大小的纳米囊泡缔合的靶标。13.根据权利要求10至12中任一项所述的方法，其中，所述一种或更多种靶标选自由蛋白、核酸、脂质和代谢物组成的组。14.根据权利要求10至13中任一项所述的方法，其中，所述纳米囊泡是外泌体。15.根据权利要求10至14中任一项所述的方法，其中，所述纳米颗粒是金属纳米颗粒。16.根据权利要求15所述的方法，其中，所述金属纳米颗粒是金纳米颗粒。17.根据权利要求16所述的方法，其中，所述金属纳米颗粒直径范围在7nm和11nm之间。18.根据权利要求10至17中任一项所述的方法，其中，所述前体是金属盐。19.根据权利要求18所述的方法，其中，金属盐溶液是金盐。20.根据权利要求10至19中任一项所述的方法，其中，所述方法涉及使所述样品与形成所述纳米壳所需的过量纳米颗粒接触。
21.根据权利要求10至20中任一项所述的方法，其中，所述荧光分子探针是核酸、适配体、肽、抗体或小分子。22.根据权利要求10至21中任一项所述的方法，其中，所述荧光分子探针经支化荧光修饰以增强检测信号。23.根据权利要求10至22中任一项所述的方法，其中，所述样品是已经从受试者获得的样品。24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述受试者是患有癌症的受试者。25.根据权利要求10至24中任一项所述的方法，其中，所述一种或更多种靶标的表征包括测量与所述纳米囊泡结合或缔合的一种或更多种靶标的水平。26.一种用于进行根据上述权利要求中任一项所述方法的微流体芯片。27.一种用于进行根据权利要求1至25中任一项所述方法的试剂盒。28.一种通过同时检测或表征一种或更多种靶标来确定受试者中癌症的预后的方法，所述一种或更多种靶标与来自所述受试者的样品中的纳米囊泡结合或缔合并且指示所述癌症的性质，所述方法包括：a)使样品与纳米颗粒或纳米颗粒的前体以及一种或更多种荧光分子探针依次或同时接触，其中所述纳米颗粒或纳米颗粒的前体能够结合到所述纳米囊泡的表面上并且原位形成环绕所述囊泡的纳米壳，并且其中所述一种或更多种荧光分子探针能够特异性结合至与所述纳米囊泡结合或缔合的一种或更多种靶标并且为每种所述靶标提供独特发射荧光波长；b)照射所述样品并且测量吸光度和/或所发射的荧光，以检测与所述纳米囊泡结合或缔合的一种或更多种靶标，其中所述检测涉及识别每种所述靶标的独特发射荧光波长的增强荧光淬灭。29.根据权利要求28所述的方法，其中，所述癌症是结肠直肠癌或胃癌。30.根据权利要求28或29所述的方法，其中，所述样品是临床癌症腹水。31.根据权利要求28至30中任一项所述的方法，其中，所述纳米颗粒是金属纳米颗粒。32.根据权利要求31所述的方法，其中，所述金属纳米颗粒是金纳米颗粒。33.根据权利要求28至32中任一项所述的方法，其中，所述前体是金属盐。34.根据权利要求33所述的方法，其中，所述金属盐是金盐。35.根据权利要求28至34中任一项所述的方法，其中，所述一种或更多种靶标包括选自由cd63、cd24、epcam和muc1组成的组的靶标。

技术总结
本发明涉及用于检测和/或表征样品中的纳米囊泡的方法或者检测与所述纳米囊泡结合或缔合的靶标的方法，其中使所述样品与纳米颗粒接触，所述纳米颗粒能够结合到纳米囊泡的表面上并且原位形成环绕所述纳米囊泡的纳米壳。在优选的实施方式中，纳米囊泡是带有荧光探针标签的外泌体，并且所述纳米颗粒是金纳米颗粒(AuNP)。本发明还涉及用于进行这些方法的试剂盒或微流体芯片，以及涉及通过进行该方法来在受试者中确定癌症的预后的方法。受试者中确定癌症的预后的方法。受试者中确定癌症的预后的方法。


技术研发人员：吴兴杰 赵海涛 邵慧琳
受保护的技术使用者：新加坡国立大学
技术研发日：2021.01.29
技术公布日：2022/10/25