一种玄麦甘桔颗粒的灭菌方法与流程

1.本发明属于中药灭菌技术领域，具体涉及一种玄麦甘桔颗粒的灭菌方法。


背景技术：

2.玄麦甘桔颗粒是《中国药典》2020版载入的中成药颗粒制剂，由玄参、麦冬、甘草和桔梗4味药组成，辅以蔗糖、糊精，用于治疗阴虚火旺所致的咽喉肿痛、咳嗽等呼吸道系统疾病。在2020年中国城市实体药店终端咽喉中成药产品中，玄麦甘桔颗粒占咽喉中成药市场份额的3.10％，位列第八，在保护国民生命健康领域中发挥着重要的作用。
3.目前，对于中成药颗粒剂产品多采用原料药材加工前处理灭菌和半成品热风干燥处理的方式控制微生物，其整个生产过程受到了原料药材含菌量、加工环境等诸多因素影响，导致市售的产品质量参差不齐。常采用的灭菌方式，包括
①
湿热灭菌法：常用于原材料灭菌，灭菌效果显著，但不耐热成分易被分解，对某些中药需要谨慎选择；
②
乙醇蒸汽灭菌：以一定浓度的乙醇作为杀菌剂，通过加热气化对药物进行熏蒸达到杀菌目的，具有较好的灭菌效果，但易造成试剂残留、影响产品的性状及成分，并且存在消防安全隐患；
③
环氧乙烷灭菌法：具有光谱杀菌作用，但对含有维生素、氨基酸的营养药品等容易被其破坏；
④
60co-γ辐照灭菌法：60co-γ射线是一种波长极短的电磁波，能自发的放射出射线的放射性同位素，具有能量高，穿透力强，对生物破坏性大，导致害虫不育或死亡且无残留等特点，但需要具备专门的设备和场所。这些灭菌方式用于中药制剂灭菌存在活性成分易分解、易燃易爆、安全性低等不足。


技术实现要素：

4.本发明提供了一种玄麦甘桔颗粒的灭菌方法，该方法有效降低玄麦甘桔颗粒的微生物量，且对其质量无显著影响。
5.为解决上述技术问题，本发明提供了以下技术方案：
6.本发明提供一种玄麦甘桔颗粒的灭菌方法，将玄麦甘桔颗粒用剂量为2～7kgy的电子束进行辐照处理。
7.优选的，所述玄麦甘桔颗粒进行封装，封装的密度为0.2～0.6g/cm3，厚度为1～3cm。
8.优选的，所述封装用的材料为pet pe袋。
9.优选的，所述辐照处理包括单面辐照、双面辐照中的任意一种。
10.优选的，所述单面辐照的堆码厚度不超过5cm。
11.优选的，所述双面辐照的堆码厚度不超过7cm。
12.优选的，所述辐照处理的参数还包括电子加速器的功率15～25kw，电子束能量15～25mev，剂量率为200～300gy/s。
13.优选的，灭菌后，每1g玄麦甘桔颗粒中需氧菌总数不超过1.0
×
103cfu，霉菌及酵母菌总数不超过1.0
×
102cfu。
14.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
15.本发明首次利用电子束辐照对玄麦甘桔颗粒灭菌，与现有干热灭菌方法相比，有效降低玄麦甘桔颗粒的微生物量，且对玄麦甘桔颗粒的理化性状、水分、活性成分无显著影响，安全性更强、加工效率更高。
附图说明
16.图1封装的玄麦甘桔颗粒。
17.图2辐照剂量对各样品中需氧菌的影响。
18.图3辐照剂量对各样品中霉菌及酵母菌的影响。
19.图4哈巴俄苷、甘草酸铵混合对照品hplc色谱图。
20.图5不同剂量高能电子束辐照玄麦甘桔颗粒hplc指纹图谱的共有特征峰与共有模式图。
21.图6单面辐照和双面辐照工艺图。
具体实施方式
22.本发明提供了一种玄麦甘桔颗粒的灭菌方法，包括如下步骤：将玄麦甘桔颗粒用剂量为2～7kgy的电子束进行辐照处理。本发明所述玄麦甘桔颗粒为自制的玄麦甘桔颗粒，所述制备方法按照2020版《中国药典》制备。本发明中制备玄麦甘桔颗粒所用的原料为玄麦甘桔颗粒浓缩浸膏(厂家：太极绵药)，辅料为蔗糖(厂家：英茂糖业)、糊精(厂家：汉中秦发)。本发明制备玄麦甘桔颗粒所用的仪器包括：中药提取浓缩设备，卧式混料机，中药筛分机。本发明所述辐照处理设备为is1020高能电子加速器(厂家：同方威视科技)。
23.在本发明中，所述玄麦甘桔颗粒进行封装，所述封装的密度优选为0.2～0.6g/cm3，更优选为0.43g/cm
3，
厚度优选为1～3cm，更优选为1.5cm；所述封装用的材料优选为pet pe袋，所述pet pe袋尺寸优选为18*13cm，厚度优选为0.32mm。本发明中。每袋分装量为80～120g，优选为100g。
24.在本发明中，所述辐照处理包括单面辐照、双面辐照中的任意一种。本发明所述单面辐照的堆码厚度不超过5cm，优选为4.5cm；所述双面辐照的堆码厚度不超过7cm，优选为6cm。本发明通过测定辐照加工过程中不同厚度的最大吸收剂量(d
max
)和最小吸收剂量(d
min
)，计算对应的剂量不均匀度(u)＝d
max
/d
min
，以辐照不均匀度u《1.5为加工标准。
25.在本发明中，所述辐照处理的参数还包括电子加速器的功率15～25kw，电子束能量15～25mev，剂量率为200～300gy/s，优选为电子加速器的功率10kw，电子束能量10mev，剂量率为260gy/s
26.在本发明中，灭菌后，每1g玄麦甘桔颗粒中需氧菌总数不得超过1.0
×
103cfu，优选为不得超过4.0
×
102cfu，霉菌及酵母菌总数不得超过1.0
×
102cfu，优选为不得超过2.0
×
101。
27.下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
28.实施例1
29.按照2020版《中国药典》制备玄麦甘桔颗粒。原料为玄麦甘桔颗粒浓缩浸膏(厂家：太极绵药)，辅料为蔗糖(厂家：英茂糖业)、糊精(厂家：汉中秦发)。所用仪器包括：中药提取浓缩设备，卧式混料机，中药筛分机。将自制的玄麦甘桔颗粒用pet pe袋封装(尺寸18*13cm，厚度0.32mm)，每袋装量为100g，每一剂量装3袋，将包装好的玄麦甘桔颗粒分别放置在电子加速器辐照装置的样品托盘上，单次剂量2kgy辐照处理，其他辐照参数为：电子加速器的功率20kw，电子束能量10mev，剂量率为260gy/s。平行做3次重复试验。以未辐照样品为对照。对辐照样品和对照样品进行微生物、性状、理化指标、指纹图谱和活性成分含量定量测定。
30.实施例2
31.单次剂量3kgy辐照处理，其余步骤与实施例1相同。
32.实施例3
33.单次剂量5kgy辐照处理，其余步骤与实施例1相同。
34.实施例4
35.单次剂量7kgy辐照处理，其余步骤与实施例1相同。
36.对比例1
37.将实施例1自制的玄麦甘桔颗粒平铺于电热鼓风干燥箱(dhg-9123a)中，设定温度为80℃，时间30min。
38.实施例5
39.微生物检验：需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数按《中国药典》2020版非无菌药品微生物限度检查(通则1107)。结果如表1所示。
40.理化指标：按《中国药典》2020版中药颗粒剂照水分测定法(通则0832)测定。结果如表2所示。
41.活性成分含量定量分析：按《中国药典2020版(三部)通则0521高效液相色谱法中外标法》计算哈巴俄苷、甘草酸铵含量。结果如表3所示。
42.指纹图谱测定：分别取哈巴俄苷、甘草酸铵对照品，加80％甲醇制成每1ml含13.2ug哈巴俄苷和12.49ug甘草酸铵的混合标准溶液，过0.22μm微孔滤膜。色谱条件hyersil gold(250mm
×
4.6mm，5μm)；柱温30℃；进样量10μl；流速1.0ml
·
min-1
；检测波长280nm，甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相，收集72min保留时间，得哈巴俄苷、甘草酸铵对照品指纹图谱，结果如图1所示。
43.取实施例1-4和对比例1制备的样品2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入80％甲醇25ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，过0.22μm微孔滤膜。色谱条件hyersil gold(250mm
×
4.6mm，5μm)；柱温30℃；进样量10μl；流速1.0ml
·
min-1
；检测波长280nm，甲醇-0.1％磷酸溶液为流动相，收集72min保留时间，得样品指纹图谱，如图2所示。
44.对玄麦甘桔颗粒的指纹图谱上共选择标定了24个共有特征峰，通过与图1指纹图谱比对，可确认20号峰为哈巴俄苷、22号峰为甘草酸铵。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统2.0软件分别对不同剂量电子束辐照玄麦甘桔颗粒的指纹图谱进行多点位校正、自动匹配，用中位数法生成对照图谱r，即共有模式图，如图2所示，并计算相似度，如表4所示。
45.表1玄麦甘桔颗粒灭菌效果
[0046][0047]
注:
‑‑
表示未检出。
[0048]
由表1可知，未辐照的玄麦甘桔颗粒样品中检测出tamc和tymc的数量分别为2.2
×
103和2.0
×
101，不符合药典的规定。经2kgy辐照处理和热风干燥处理后，微生物数量均低于微生物限度标准。吸收剂量达到7kgy时，未检出微生物。
[0049]
表2不同灭菌方式对玄麦甘桔颗粒水分的影响
[0050][0051]
由表2可知，干热处理后水分损失最大(p《0.05)，剂量2～7kgy辐照处理的样品的水分含量相差不大。
[0052]
表3不同灭菌方式对玄麦甘桔颗粒活性成分含量的影响
[0053][0054]
由表3可知，干热处理和不同剂量的辐照处理玄麦甘桔颗粒中主要成分哈巴俄苷、甘草酸铵含量变化均无显著差异
[0055]
表4不同剂量辐照处理对玄麦甘桔颗粒相似度评价结果
[0056][0057]
根据图1-2，分别以哈巴俄苷为参比峰，计算玄麦甘桔颗粒特征峰的相对保留时间，依据表4中结果可知，5个辐照剂量下的特征峰相似度均达到0.96，相对保留时间的rsd均小于0.4％。不同剂量下的特征峰与热风干燥处理的色谱峰相似度小于0.82，并且干热灭菌的样品中的24号峰没有被检测到。说明在2～7kgy辐照剂量范围内不会对玄麦甘桔颗粒的化学成分一致性产生显著影响，但热风干燥处理后的化学成分产生了降解。
[0058]
实施例6
[0059]
将实施例1自制的玄麦甘桔颗粒包装，包装方式与实施例1一致，每袋的密度为0.43g/cm3，厚度为1.5cm，每袋上下分别放置1对重铬酸银剂量计，跟踪实际吸收剂量。采用单面辐照工艺，剂量设置为5kgy，具体工艺见图3，从第1层辐照。通过测定辐照加工过程中不同厚度的最大吸收剂量(d
max
)和最小吸收剂量(d
min
)，计算对应的剂量不均匀度(u)＝d
max
/d
min
，以辐照不均匀度u《1.5为加工标准，结果见表5。
[0060]
实施例7
[0061]
采用双面辐照，具体工艺见图3，从第1层进行5kgy剂量的辐照，然后反转180
°
，从
第5层再次给予5kgy剂量的辐照，其余实施操作均与实施例6相同。
[0062]
表5玄麦甘桔颗粒辐照吸收剂量分布
[0063][0064]
由表5可知，单面辐照时，设置了4层，随辐照厚度增加，剂量不均匀度(u)显著增加，层数为4层(6cm)时，不均匀度u＝2.15，不符合加工标准，层数为3层(4.5cm)时，u＝1.35，符合加工标准，得出单面辐照厚度不超过3层，均符合加工标准，从加工成本考虑，选定厚度3层(4.5cm)为适宜厚度。双面辐照时，同样设置了4层(6cm)，结果发现均符合加工标准，得出双面辐照厚度不超过4层(6cm)，均符合加工标准，从加工成本考虑，选定厚度为6cm为适宜加工厚度。
[0065]
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。