细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料及其制备方法与流程

技术特征：
1.细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，其特征在于：包括细菌纤维素和胶原蛋白，细菌纤维素以木醋杆菌发酵形成，胶原蛋白从富含胶原蛋白的牛腱片中获得。2.根据权利要求1所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s2-1、细菌纤维素的制备：28℃条件下，将木醋杆菌在容积为100ml并含有20ml营养培养基的烧瓶中培养120小时，在空气/液体界面形成细菌纤维素薄膜，80℃条件下，将细菌纤维素薄膜浸入2wt％的naoh溶液1小时，然后浸入1wt％的naclo溶液中30分钟，浸泡结束后，用去离子水清洗，然后在120℃条件下，高压灭菌15分钟，得到细菌纤维素；s2-2、胶原蛋白的的制备：从厚度为1cm的牛腱片中获取胶原蛋白碎片，用丙酮处理胶原蛋白碎片后得到肌腱碎片，用蒸馏水清洗5g肌腱碎片，在4℃的条件下，将肌腱碎片浸入10wt％的nacl溶液中24小时，然后用蒸馏水清洗肌腱碎片，然后在室温下浸入0.02mol/l的柠檬酸盐缓冲液中48小时，浸泡结束后，在4℃的条件下，将肌腱碎片浸入500ml 0.5mol/l的乙酸溶液中，混合均匀，静置24小时后形成凝胶，向凝胶中加入5wt％的nacl溶液，沉淀得到胶原蛋白，沉淀出的胶原蛋白用蒸馏水透析72小时后备用；s2-3、通过高速分散器，把处于水介质中的细菌纤维素膜分离，得到细菌纤维素悬浮液，细菌纤维素悬浮液过筛去除过量的水，得到细菌纤维素浆液；在50℃的轨道震荡下，将0.2wt％的尼泊金酯溶解在5wt％的丙二醇中，混合均匀得到混合物，室温条件下，将混合物加入含有细菌纤维素浆液的烧杯中，混合均匀；然后边晃动边缓慢加入3wt％的羟乙酸纤维素，直至在室温下获得凝胶稠度；然后将8wt％的胶原蛋白和去离子水加入到凝胶中，在室温下摇晃3分钟，得到细菌纤维素胶原蛋白水凝胶敷料。3.根据权利要求2所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，其特征在于：所述s2-1中营养培养基含有2wt％的葡萄糖、0.5wt％的蛋白胨、0.5wt％的酵母提取物、0.27wt％的磷酸氢二钠和0.115wt％的柠檬酸。4.根据权利要求2所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，其特征在于：所述s2-2中柠檬酸盐缓冲液的ph值为4.3。5.根据权利要求2所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，其特征在于：所述s2-2乙酸溶液中含有与肌腱初始重量比例为1:50的胃蛋白酶。6.根据权利要求2所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，其特征在于：所述s2-3细菌纤维素悬浮液过筛为37目。7.根据权利要求2所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，其特征在于：所述s2-3制得的细菌纤维素胶原蛋白水凝胶储存在无菌容器中。8.根据权利要求1所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s8-1、每1l的胶原蛋白水溶液中加入由葡萄糖70g、酵母膏5g、na2hpo42g和蛋白胨1g配制的发酵培养基；选取能分泌细菌纤维素的木醋杆菌并将其活化，制备成种子醪液；然后将60wt％菌株浓度的种子醪液与胶原蛋白水溶液均匀混合，发酵培养6天后取出发酵产物；s8-2、发酵产物在质量百分含量为4％-6％的naoh水溶液中，在30℃-40℃的温度下加热6h，然后用纯化水反复冲洗至中性，以除去菌体蛋白和粘附的残余培养基，得到细菌纤维素胶原蛋白水凝胶敷料。
9.根据权利要求1所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：s9-1、细菌纤维素的制备：28℃条件下，将木醋杆菌在容积为100ml并含有20ml营养培养基的烧瓶下培养120小时，在空气/液体界面形成细菌纤维素薄膜；80℃条件下，将细菌纤维素薄膜浸入2wt％的naoh溶液1小时；然后浸入1wt％的naclo溶液中30分钟，浸泡结束后；用去离子水清洗，然后在120℃条件下，高压灭菌15分钟，得到细菌纤维素；上述营养培养基含有2wt％的葡萄糖、0.5wt％的蛋白胨、0.5wt％的酵母提取物、0.27wt％的磷酸氢二钠和0.115wt％的柠檬酸；s9-2、细菌纤维素的再处理：将获得的细菌纤维素在冷冻干燥机中冷冻24h，然后在80℃条件下，将其浸入0.01mol/l的2，2，5，5，-四甲基哌啶-n-氧基和0.01mol/l的辣根过氧化物酶水溶液中，并将溶液调整为20wt％，用稀盐酸稀释至溶液ph＝6；然后将其浸入40℃的1wt％的naclo溶液中30分钟，浸泡完成后，用去离子水清洗，得到处理后的细菌纤维素。s9-3、每1l的胶原蛋白水溶液中加入由葡萄糖70g、酵母膏5g、na2hpo42g和蛋白胨1g配制的发酵培养基；然后与处理后的细菌纤维素混合均匀，进行发酵，24小时后取出发酵产物，发酵产物在质量百分含量为1％的naoh水溶液中，在90℃的温度下加热3h；然后用纯化水反复冲洗至中性，以除去菌体蛋白和粘附的残余培养基，经过切割得到细菌纤维素胶原蛋白水凝胶敷料。

技术总结
本发明公开了细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料，包括细菌纤维素和胶原蛋白；胶原蛋白从富含胶原蛋白的材料中获得，醋酸菌属在一定条件下发酵形成细菌纤维素，细菌纤维素和胶原蛋白混合处理后得到细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料。本发明还公开了细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料的制备方法。本发明所述的细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶敷料及其制备方法操作简单、成本低；与传统伤口敷料相比，细菌纤维素胶原蛋白创伤水凝胶伤口修复率更好，阻菌率更好；在15天时，伤口修复率达90％。伤口修复率达90％。


技术研发人员：沈威 章梦贇 曹军 张佳程
受保护的技术使用者：浙江蓝禾医疗用品有限公司
技术研发日：2022.04.28
技术公布日：2022/8/30