一种白及总生物碱的提取方法与流程

一种白及总生物碱的提取方法
所属技术领域：
1.本发明涉及一种白及总生物碱提取方法及其应用，属于天然药物应用的技术领域。


背景技术：

2.白及(bletilla striata)，又名白给、连及草、紫兰根，为兰科白及属多年生草本植物，株高18～60cm。白及假鳞茎是常用中药，止血收敛、消肿生肌功效好。入药内服主治肺结核咯血、支气管扩张咯血、胃溃疡吐血、尿血、便血等症；外用治外伤出血、烧烫伤、手足皲裂等。
3.白及的主要化学成分是联苄类、菲类及其衍生物。此外，还含有少量挥发油，粘液质、白及甘露聚糖，以及淀粉，葡萄糖等。最近几年白及化学成分的研究，主要集中在鳞茎中的联苄类、二氢菲类和联菲类化合物，已从中分离鉴定出一系列具有活性的联苄、二氢菲类和联菲类新化合物。
4.白及假鳞茎中的粘液质含有丰富的葡甘聚糖，含量占粘液质总量的30％，以白及胶的形式存在，也是白及最主要的药效成分。白及止血效果确切可靠，与所含大量白及胶有关。白及胶成膜具有较强粘附力，敷于动物的出血点或面，可立刻与创面融合而难以剥离，而且仅仅是接触伤口的一面溶融，这样就可迅速止血和防止感染。实验证明，白及提取物具有缩短凝血时间、抑制肌体对纤维素溶解的作用，可迅速形成人工血栓，对外伤止血或内脏出血临床治疗均有较好疗效，安全且无任何副作用。
5.经研究发现白及生物碱和白及多糖在加工过程中都易发生氧化现象，直接影响到后期药物的疗效。因此本发明提供一种白及总生物碱提取方法，有效地防止在提取分离过程中白及生物碱被氧化，达到充分利用白及原料的目的，缩短了其生产工艺。


技术实现要素：

6.因此，本发明第一个目的是提供一种白及总生物碱提取方法，取鲜白及，洗净，直接浸泡在乙酸乙酯中，过夜，采用捣碎机捣碎或匀浆机匀浆，继续浸泡在乙酸乙酯中，过夜，萃取出乙酸乙酯溶液(上层)，再向沉淀中加入甲醇，在50～70℃进行回流提取1～6h，过滤得提取液，分别将乙酸乙酯溶液和提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收乙酸乙酯、甲醇，再将两种浓缩液合并，真空干燥得白及总生物碱。
7.在一个实施方案中，所述加入乙酸乙酯量的量l与鲜白及重量kg比为2～4：1。
8.在一个实施方案中，所述加入甲醇的量l与鲜白及重量kg比为2～4：1。
9.在一个实施方案中，所述过滤采用陶瓷膜过滤一次或三层纱布过滤一次。
10.在一个实施方案中，所述白及总生物碱的含量达到70％以上，其中1,4-二[4-(葡萄糖氧) 苄基]-2-异丁基苹果酸酯达到20％以上。
[0011]
本发明第二个目的是提供一种白及总生物碱产品的应用，将其直接添加到糊精中用于致病微生物感染的治疗，或采用胶囊包裹进行制成药品用于致病微生物感染的治疗。
[0012]
技术效果
[0013]
1、充分利用有机溶剂对白及蛋白氧化酶或水解酶的变性失活特性，有效地抑制了白及生物碱中大量酚类物质被氧化。
[0014]
2、本发明所获得的白及总生物碱色泽度低，可广泛应用于杀灭各种致病微生物，也有效地解决了白及饮片中生物碱含量过低等问题。
附图说明：
[0015]
图1：1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯标准样品图谱；
[0016]
图2：总生物碱样品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量图谱；
[0017]
图3：总生物碱样品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量图谱；
[0018]
图4：总生物碱样品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量图谱；
[0019]
图5：总生物碱样品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量图谱。
具体实施方式
[0020]
下面，本发明将用实施例进行进一步的说明，但是它并不限于这些实施例的任一个或类似实例。
[0021]
实施例1：白及总生物碱的制备方法
[0022]
取鲜白及100kg，用水冲洗干净，直接浸泡在300l乙酸乙酯中，过夜，采用捣碎机捣碎，继续浸泡在乙酸乙酯中，过夜，萃取出乙酸乙酯溶液(上层)，再向沉淀中加入300l甲醇，在60℃进行回流提取3h，陶瓷膜过滤一次得提取液，分别将乙酸乙酯溶液和提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收乙酸乙酯、甲醇，再将两种浓缩液合并，真空干燥得白及总生物碱。
[0023]
检测设备为agilent1100高效液相色谱仪，色谱柱为hypersil ods(250mm
×
4.6mm，5μ)， 1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯的检测条件∶流动相为乙腈与0.1％磷酸溶液体积比22/78，检测波长为223nm、流速为l ml/min、进样量为20μl，产品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量为24.95％，见图2。
[0024]
实施例2：白及总生物碱的制备方法
[0025]
取鲜白及100kg，用水冲洗干净，直接浸泡在300l乙酸乙酯中，过夜，采用捣碎机捣碎，继续浸泡在乙酸乙酯中，过夜，萃取出乙酸乙酯溶液(上层)，再向沉淀中加入250l甲醇，在55℃进行回流提取2h，陶瓷膜过滤一次得提取液，分别将乙酸乙酯溶液和提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收乙酸乙酯、甲醇，再将两种浓缩液合并，真空干燥得白及总生物碱。经检测产品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量为23.78％，见图3。
[0026]
对照实施例1：白及总生物碱的制备方法
[0027]
取鲜白及100kg，用水冲洗干净，按中药饮片方法进行炮制(放入锅中蒸煮30min，冷却后切成片，再高温烘干)，用粉碎机粉碎成粉，向其中加入300l甲醇，在60℃进行回流提取3h，陶瓷膜过滤一次得提取液，将提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收甲醇，真空干燥得白及总生物碱。经检测产品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量为16.25％，见图4。
[0028]
对照实施例2：白及总生物碱的制备方法
[0029]
取鲜白及100kg，用水冲洗干净，乙采用捣碎机捣碎，直接浸泡在300l乙酸乙酯中，
过夜，萃取出乙酸乙酯溶液(上层)，再向沉淀中加入300l甲醇，在60℃进行回流提取3h，陶瓷膜过滤一次得提取液，分别将乙酸乙酯溶液和提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收乙酸乙酯、甲醇，再将两种浓缩液合并，真空干燥得白及总生物碱。经检测产品中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯含量为18.68％，见图5。


技术特征：
1.一种白及总生物碱提取方法，取鲜白及，洗净，直接浸泡在乙酸乙酯中，过夜，采用捣碎机捣碎或匀浆机匀浆，继续浸泡在乙酸乙酯中，过夜，萃取出乙酸乙酯溶液，再向沉淀中加入甲醇，在50～70℃进行回流提取1～6h，过滤得提取液，分别将乙酸乙酯溶液和提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收乙酸乙酯、甲醇，再将两种浓缩液合并，真空干燥得白及总生物碱。2.根据权利要求1的方法，所述加入乙酸乙酯量的量l与鲜白及重量kg比为2～4：1。3.根据权利要求1的方法，所述加入甲醇的量l与鲜白及重量kg比为2～4：1。4.根据权利要求1的方法，所述过滤采用陶瓷膜过滤一次或三层纱布过滤一次。5.根据权利要求1的方法，所述白及总生物碱的含量达到70％以上，其中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯达到20％以上。6.一种白及总生物碱产品的应用，将其直接添加到糊精中用于致病微生物感染的治疗，或采用胶囊包裹进行制成药品用于致病微生物感染的治疗。

技术总结
本发明涉及一种白及总生物碱提取方法，取鲜白及，洗净，直接浸泡在乙酸乙酯中，过夜，采用捣碎机捣碎或匀浆机匀浆，继续浸泡在乙酸乙酯中，过夜，萃取出乙酸乙酯溶液，再向沉淀中加入甲醇，回流提取，过滤得提取液，分别将乙酸乙酯溶液和提取液减压浓缩至无有机溶剂，回收乙酸乙酯、甲醇，再将两种浓缩液合并，真空干燥得白及总生物碱。本发明充分利用有机溶剂对白及蛋白氧化酶或水解酶的变性失活特性，有效地抑制了白及生物碱中大量酚类物质被氧化；所获得的白及总生物碱色泽度低，可广泛应用于杀灭各种致病微生物，也有效地解决了白及饮片中生物碱含量过低等问题。碱含量过低等问题。


技术研发人员：李兰岚 曾黎明 徐智康 王启青
受保护的技术使用者：江西艾丽斯日化有限公司
技术研发日：2022.07.02
技术公布日：2022/8/30