一种PD-L1调控剂及其应用的制作方法

技术特征：
1.一种抑制细胞中pd-l1的方法，其包括使所述细胞暴露于叶酸循环的抑制剂。2.一种抑制肿瘤细胞生长的方法，其包括使所述肿瘤细胞暴露于叶酸循环的抑制剂。3.一种治疗肿瘤的方法，其包括向有此需要的对象施用叶酸循环的抑制剂。4.如权利要求1至3任一项所述的方法，其中所述抑制剂抑制5,10-methf到10-formyl-thf的转化，特别地所述抑制剂抑制将5,10-methf转化为10-formyl-thf的酶，更特别地所述酶是亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(mthfd2)或亚甲基四氢叶酸脱氢酶2样蛋白(mthfd2l)，优选地所述抑制剂特异性抑制mthfd2和mthfd2l之一，更优选地所述抑制剂特异性抑制mthfd2。5.如权利要求1至3任一项所述的方法，其中所述抑制剂抑制10-formyl-thf到formate的转化，特别地所述抑制剂抑制将10-formyl-thf转化为formate的酶，更特别地所述酶是亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白(mthfd1l)。6.如权利要求1至3任一项所述的方法，其中所述抑制剂抑制formate到10-formyl-thf的转化，特别地所述抑制剂抑制将formate转化为10-formyl-thf的酶，更特别地所述酶是亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(mthfd1)。7.如权利要求1至3任一项所述的方法，其中所述抑制剂抑制10-formyl-thf到5,10-methf的转化，特别地所述抑制剂抑制将10-formyl-thf转化为5,10-methf的酶，更特别地所述酶是亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(mthfd1)。8.如权利要求1至7任一项所述的方法，所述抑制剂选自小分子化合物、多核苷酸、蛋白质(如抗体)和病毒。9.如权利要求1至8任一项所述的方法，其中所述抑制剂为多核苷酸，其包含靶向抑制亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(mthfd1)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(mthfd2)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白(mthfd1l)或亚甲基四氢叶酸脱氢酶2样蛋白(mthfd2l)基因表达的序列，例如所述多核苷酸是rna干扰抑制剂，特别地，所述多核苷酸长度为10-100、15-30或18-25，例如12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。10.如权利要求9所述的方法，其中所述多核苷酸包含ggaugcuucacuuugucaa(seq id no：26)、gaaugaagacucuacugua(seq id no：27)、aguucuaaguuuauugcaa(seq id no：28)、uggcaaugcuaaugaagaa(seq id no：33)、cucgcggcaguucgguaaga(seq id no：30)、guguggccguuuguugccug(seq id no：36)、gcugcagguaagaacacaag(seq id no：38)中任一项所示的序列，或其互补序列。11.如权利要求10所述的方法，其中所述多核苷酸的形式为小干扰rna(sirna)、短发夹rna(shrna)或小向导rna(sgrna)。12.如权利要求11所述的方法，其中所述多核苷酸为短发夹rna，所述短发夹rna序列包含ggaugcuucacuuugucaa(seq id no：26)或其互补序列，特别地所述短发夹rna的序列为ccggggaugcuucacuuugucaacucgaguugacaaagugaag caucc(seq id no：39)。13.如权利要求11所述的方法，其中所述多核苷酸为小干扰rna，所述小干扰rna序列包含ggaugcuucacuuugucaa(seq id no：26)、uggcaaugcuaaugaagaa(seq id no：33)，或其互补序列；特别地所述小干扰rna如seq id no：26或seq id no：33所示。14.如权利要求11所述的方法，其中所述多核苷酸为小向导rna，所述小向导rna序列包含cucgcggcaguucgguaaga(seq id no：30)、guguggccguuuguugccug(seq id no：36)、
gcugcagguaagaacacaag(seq id no：38)，或其互补序列；特别地所述小向导rna如seq id no：30、seq id no：36或seq id no：38所示。15.一种多核苷酸，所述多核苷酸包含靶向抑制亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(mthfd1)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(mthfd2)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白(mthfd1l)或亚甲基四氢叶酸脱氢酶2样蛋白(mthfd2l)基因表达的序列，例如所述多核苷酸是rna干扰抑制剂，特别地，所述多核苷酸长度为10-100、15-30或18-25，例如12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29或30。16.如权利要求15所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸包含ggaugcuucacuuugucaa(seq id no：26)、gaaugaagacucuacugua(seq id no：27)、aguucuaaguuuauugcaa(seq id no：28)、uggcaaugcuaaugaagaa(seq id no：33)、cucgcggcaguucgguaaga(seq id no：30)、guguggccguuuguugccug(seq id no：36)、gcugcagguaagaacacaag(seq id no：38)中任一项所示的序列，或其互补序列。17.如权利要求15或16所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸的形式为小干扰rna(sirna)、短发夹rna(shrna)或小向导rna(sgrna)。18.如权利要求15或16所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸为短发夹rna，所述短发夹rna序列包含ggaugcuucacuuugucaa(seq id no：26)，或其互补序列，特别地所述短发夹rna的序列为ccggggaugcuucacuuugucaacucgaguugacaaagugaag caucc(seq id no：39)。19.如权利要求15或16所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸为小干扰rna，所述小干扰rna序列包含ggaugcuucacuuugucaa(seq id no：26)、uggcaaugcuaaugaagaa(seq id no：33)，或其互补序列；特别地所述小干扰rna如seq id no：26或seq id no：33所示。20.如权利要求15或16所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸为小向导rna，所述小向导rna序列包含cucgcggcaguucgguaaga(seq id no：30)、guguggccguuuguugccug(seq id no：36)、gcugcagguaagaacacaag(seq id no：38)，或其互补序列；特别地所述小向导rna如seq id no：30、seq id no：36或seq id no：38所示。21.如权利要求15至20任一所述的多核苷酸，其中所述多核苷酸是合成的或由载体表达的。22.一种载体，其包含或表达权利要求15至20任一项所述的多核苷酸。23.一种溶瘤病毒，其包含或表达权利要求15至20任一项所述的多核苷酸。24.一种药物组合物，其包含权利要求15至20任一项所述的多核苷酸、权利要求22所述的载体、或权利要求23所述的溶瘤病毒，以及药学上可接受的辅料。25.权利要求15至20任一项所述的多核苷酸、权利要求22所述的载体、权利要求23所述的溶瘤病毒或权利要求24所述的药物组合物在制备用于治疗肿瘤的药物中的用途。26.如权利要求25所述的用途，其中所述肿瘤表达pd-l1。27.如权利要求26所述的用途，其中所述肿瘤选自白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、脑肿瘤、头颈部鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、鼻咽癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、子宫肉瘤、前列腺癌、膀胱癌、肾细胞癌和黑色素瘤。28.一种治疗肿瘤的方法，其包括向有此需要的对象施用权利要求15至20任一项所述的多核苷酸、权利要求22所述的载体、权利要求23所述的溶瘤病毒或权利要求24所述的药物组合物。
29.如权利要求28所述的方法，其中所述施用途径选择口服、瘤内注射、癌旁注射、肌肉注射和静脉注射。30.如权利要求28所述的方法，其还包括向所述对象施用额外的抗肿瘤治疗。31.如权利要求30所述的方法，其中所述额外的抗肿瘤治疗选自化学治疗、放射治疗、靶向治疗和免疫治疗。32.如权利要求28所述的方法，其中所述肿瘤选自白血病、淋巴瘤、骨髓瘤、脑肿瘤、头颈部鳞状细胞癌、非小细胞肺癌、鼻咽癌、食道癌、胃癌、胰腺癌、胆囊癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、子宫肉瘤、前列腺癌、膀胱癌、肾细胞癌和黑色素瘤。33.一种筛选肿瘤治疗剂的方法，包括1)提供候选物质；和2)检测所述候选物质是否抑制叶酸循环，特别地，检测所述候选物质是否抑制5,10-methf到10-formyl-thf的转化、10-formyl-thf到formate的转化、formate到10-formyl-thf的转化、和/或10-formyl-thf到5,10-methf的转化；更特别地，检测所述候选物质是否抑制选自以下的酶：亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(mthfd1)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(mthfd2)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白(mthfd1l)和亚甲基四氢叶酸脱氢酶2样蛋白(mthfd2l)；其中所述转化被抑制表明所述候选物质可用作肿瘤治疗剂。34.一种鉴定肿瘤治疗剂的方法，包括1)提供候选物质；和2)检测所述候选物质是否抑制叶酸循环，特别地，检测所述候选物质是否抑制5,10-methf到10-formyl-thf的转化、10-formyl-thf到formate的转化、formate到10-formyl-thf的转化、和/或10-formyl-thf到5,10-methf的转化；更特别地，检测所述候选物质是否抑制亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(mthfd1)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(mthfd2)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白(mthfd1l)和亚甲基四氢叶酸脱氢酶2样蛋白(mthfd2l)；其中所述转化被抑制表明所述候选物质可用作肿瘤治疗剂。

技术总结
公开了一种能够抑制PD-L1功能的调控剂及其在肿瘤治疗中的应用。特别地，所述调控剂为RNA，其通过RNA干扰方式降低亚甲基四氢叶酸脱氢酶1(MTHFD1)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶1样蛋白(MTHFD1L)、亚甲基四氢叶酸脱氢酶2(MTHFD2)或亚甲基四氢叶酸脱氢酶2样蛋白(MTHFD2L)的表达，从而抑制PD-L1，达到肿瘤免疫治疗的目的。达到肿瘤免疫治疗的目的。达到肿瘤免疫治疗的目的。


技术研发人员：方先龙 章康健 王霆 刘新垣 顾锦法 尚曼 刘建敏
受保护的技术使用者：上海元宋生物技术有限公司
技术研发日：2021.02.24
技术公布日：2022/8/29