一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法与流程

技术特征：
1.一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于，包括以下步骤，a、配制香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的混合标准工作溶液；b、芝麻油样品用乙腈提取，经正己烷去脂，旋转蒸发浓缩样品，使用80％甲醇溶液复溶并得到样品溶液；c、采用液相色谱仪依次对a步骤中得到的混合标准工作溶液进行测定，并绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程；再采用液相色谱仪对b步骤中得到的样品溶液进行检测,并根据生成的标准曲线得到样品溶液被测组分的溶液浓度值c；d、根据公式计算得到样品溶液中香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的含量，式中，x为样品中被测组分的含量，单位为mg/kg；c为溶液浓度,单位为mg/l，v为乙腈体积，单位为ml，m为样品质量，单位为g；10为样品浓缩倍数。2.如权利要求1所述的一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于：步骤a中，包括以下步骤：获取0.1％甲酸甲醇溶液、80％甲醇溶液和磷酸二氢钠溶液备用；准确称取0.02g香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的标准物质，分别用0.1％甲酸甲醇溶液溶于10ml棕色容量瓶中，定容至刻度,配置成浓度为2000mg/l的标准系列储备液，0℃～4℃避光保存，得到标准物质储备液；分别准确移取1ml的浓度为2000mg/l的4种标准储备液于10ml容量瓶中，使用0.1％甲酸甲醇溶液定容，配置成浓度为200mg/l的混合标准中间液；分别准确吸取一定体积的混合标准中间液，使用80％甲醇溶液定容，稀释至浓度为0.2mg/l、1.0mg/l、5.0mg/l、20mg/l、50mg/l的混合标准工作液。3.如权利要求2所述的一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于：步骤a中，取0.1ml甲酸于100ml容量瓶中，用甲醇定容制备得到0.1％甲酸甲醇溶液；取0.1ml甲酸于100ml容量瓶中，加入80ml甲醇，用水定容制备得到80％甲醇溶液；称取3.90g磷酸二氢钠，加水溶解并稀释至近1000ml，经磷酸调节ph至3.0
±
0.1，定容至1000ml，经微孔滤膜过滤得到磷酸二氢钠溶液。4.如权利要求1所述的一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于：步骤b中，称取1g芝麻油作为样品，将样品置于50ml离心管中，涡旋30s，再加入20ml乙腈，涡旋1min，超声提取40min，加入1g氯化钠，涡旋1min，8000r/min4℃冷冻离心10min，吸取上层乙腈溶液于50ml离心管中，加入10ml正己烷去脂，8000r/min4℃离心5min，去除上层正己烷溶液，取10ml下层乙腈溶液，36℃下旋转蒸发至干，加1ml80％甲醇溶液复溶，过0.45μm有机系滤膜得到样品溶液，供液相测定。5.如权利要求1所述的一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于：步骤c中，液相色谱条件为，流动相：a相：磷酸二氢钠溶液，b相：甲醇；梯度洗脱：35％b(0min～26min)，100％b(26.1min～30.0min)，后运行三分钟；色谱柱：c18柱，柱长250mm，内径4.6mm，填料粒径5.0μm；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样体积：10μl；
检测波长：279nm。6.如权利要求1所述的一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于：步骤c中，标准曲线的制作，系列浓度的混合标准工作溶液由低到高浓度依次注入液相色谱仪中，测定相应的峰面积，以峰面积为纵坐标，以系列混合标准工作液浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程。7.如权利要求1所述的一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，其特征在于：根据液相色谱仪图谱信噪比s/n 3：1时，评价液相色谱仪的检出限，香兰素为0.10mg/kg；甲基香兰素为0.60mg/kg；乙基香兰素为0.20mg/kg；香豆素为0.25mg/kg。

技术总结
本发明涉及食品检测技术领域，特别是涉及一种液相色谱同时测定芝麻油中四种香精的方法，包括以下步骤，a、配制香兰素、甲基香兰素、乙基香兰素和香豆素的混合标准工作溶液；b、芝麻油样品用乙腈提取，经正己烷去脂，旋转蒸发浓缩样品，使用80％甲醇溶液复溶并得到样品溶液；c、采用液相色谱仪依次对a步骤中得到的混合标准工作溶液进行测定，并绘制标准曲线，得到标准曲线回归方程；再采用液相色谱仪对b步骤中得到的样品溶液进行检测,并根据生成的标准曲线得到样品溶液被测组分的溶液浓度值C。本发明具有设备投入低，并且可同步检测，检测效率高，能够降低检测成本，因而便于推广应用的特点。的特点。的特点。


技术研发人员：汪成 刘大良 杨秋枚 戴善碧 殷文君
受保护的技术使用者：重庆馨可元油脂有限公司
技术研发日：2022.06.21
技术公布日：2022/8/12