一种石蜡包埋组织切片DNA全自动提取的方法及试剂盒与流程

技术特征：
1.一种石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于该方法包括如下步骤：s1、石蜡包埋组织切片制备：将石蜡包埋组织放在石蜡切片机上进行切片，获取片厚为3～15μm组织切片；将切片组织漂浮于摊片机内的45℃
±
5℃温水上，将组织展平，并用载玻片将待提取的组织捞起，放入烘箱中烘烤，待水分烘干后取出，得到待测石蜡包埋组织切片；s2、向石蜡包埋组织切片添加细胞裂解液、蛋白酶k溶液、液体石蜡；s3、根据核酸提取程序，向s2的体系中添加超顺纳米磁珠、清洗液及洗脱液；s4、放置自动化核酸提取仪中，设定核酸提取程序，开始核酸提取自动操作；s5、提取完成，使用含提取产物的洗脱液进行下一步操作，或转移至无酶保存管中保存。2.根据权利要求1所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于：s2步骤所述细胞裂解液含有浓度为2-5m的盐酸胍或异硫氰酸胍，细胞裂解液的ph值为6.0-7.5。3.根据权利要求1所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于：s2步骤所述液体石蜡的体积用量为600μl至900μl/600μl细胞裂解液。4.根据权利要求1所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于：步骤s4所述核酸提取程序为：5.根据权利要求1所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于：s3所述的超顺纳米磁珠是硅羟基超顺纳米磁珠，粒径大小为100-300nm。6.根据权利要求1所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于：s3所述的清洗液由清洗液1和清洗液2组成，其中，清洗液1由16μl0.5m tris、4.7mgnacl、300μl无水乙醇、180μl纯化水组成，清洗液2由500μl75％(体积)乙醇组成。7.根据权利要求1所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的方法，其特征在于：s3所述的洗脱液为te缓冲液。8.一种石蜡包埋组织切片dna全自动提取的试剂盒，其特征在于该试剂盒包括：600μl
含有浓度为2-5m的盐酸胍或异硫氰酸胍、ph值为6.0-7.5的细胞裂解液，20μl 20mg/ml蛋白酶k溶液，600μl至900μl液体石蜡；由16μl0.5m tris、4.7mgnacl、300μl无水乙醇、180μl纯化水组成的清洗液1，由500μl75％(体积)乙醇组成的清洗液2。9.根据权利要求8所述的石蜡包埋组织切片dna全自动提取的试剂盒，其特征在于：细胞裂解液由300μl 4-5m盐酸胍或异硫氰酸胍和300μl异丙醇混匀配制而成。

技术总结
本发明涉及一种石蜡包埋组织切片DNA全自动提取的方法及试剂盒，该方法包括如下步骤：S1、石蜡包埋组织切片制备；S2、向石蜡包埋组织切片添加细胞裂解液、蛋白酶K溶液、液体石蜡；S3、根据核酸提取程序，向S2的体系中添加超顺纳米磁珠、清洗液及洗脱液；S4、核酸提取；S5、提取完成。一般情况下，液体石蜡不作为石蜡包埋组织核酸提取试剂的组分。本发明使用液体石蜡作为萃取剂使用，可将融化后固体石蜡萃取到液体石蜡中并混合，从而降低石蜡融点，使其在冷却时保持石蜡处于液体状态，利于后续核酸提取自动化操作。自动化操作。自动化操作。


技术研发人员：朱小娟 陈文 徐骏 吴志铭
受保护的技术使用者：杭州丹威生物科技有限公司
技术研发日：2022.03.31
技术公布日：2022/8/12