一种酶解桑葚复合饮料及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于食品加工技术领域，具体地说，涉及一种改进的酶解桑葚复合饮料。


背景技术：

2.目前，业内常用的现有技术是这样的：桑葚(mulberry)俗称桑果，桑、枣系桑科植物桑树的果实，多为肉浆果，是一种聚合果，成熟的桑葚为紫黑色，包含浆液，甘甜多汁，风味独，且有较高的营养与药用价值。医学界认为它是一种良好的中药，其味甘性寒，有滋阴补血，降压消渴，利关节、补五脏、乌发的功能，主要用于治疗头晕目眩、烦躁失眠、肝肾阴虚热、咽喉肿痛及咳嗽等症。我国很早就有食用桑葚的习惯，但尚未有大规模的食品加工生产，有些地区野外生长的桑葚无人采摘。而它们属于无化肥、农药及城市三废污染的天然无公害绿色食品。但是由于桑葚具有含水量大，熟透后受压受振易碎，易腐烂又不易保存的特点，影响了运输和销售。但作为发酵饮料，则可以很好避免这个问题，并且发酵后的饮料不会引起血糖升高等问题，是糖尿病人的最佳选择，是一种不错的桑葚发酵保健饮品。虽然生食桑葚具有滋阴养气，补血强身的功效，但是桑葚中的活性蛋白不易被人体吸收，经过发酵后的活性蛋白被分解，更易被人体吸收，避免了营养物质的浪费，解决了营养不易吸收的问题，把桑葚的营养吸收发挥到最大化。
3.例如，现有技术，申请号为cn201210231061.x的发明专利公开了桑葚复合果蔬汁饮料及其制备方法，其技术方案如下：
[0004]“一种桑葚复合果蔬汁饮料，其各组分含量重量比为：
[0005]
桑葚汁50％，山楂汁10％，砀山黄梨汁10％，
[0006]
山药汁10％，水9％，食品添加剂1％，
[0007]
羧甲基纤维素钠0.2％，黄原胶0.1％，柠檬酸0.2％，
[0008]
蛋白糖0.1％，异维生素c钠0.2％，氯化钠溶液0.2％。
[0009]
上述桑葚复合果蔬汁饮料的制备方法，按如下步骤进行：
[0010]
1)选择八九成熟、粒大、色鲜、无伤烂的桑葚果实，用清水洗净后进行打浆，打浆时添加护色；所述的护色液是异维生素c钠和柠檬酸按1：1比例制备的混合溶液，用量为桑葚果实重量的0.2％。
[0011]
2)向果浆中加入果浆重量0.05％的果胶酶进行酶解处理，酶处理条件是：温度40℃、时间2小时，以提高果汁得率。
[0012]
3)将酶解后的果浆进行榨汁，榨汁后的果渣用少量温水浸泡后再进行榨汁，榨出的果汁用板框过滤机进行过滤。
[0013]
4)将挑选、清洗、去核后的山楂进行打浆、榨汁，得到山楂汁备用。
[0014]
5)将挑选、清洗、去核后的砀山黄梨进行破碎、打浆、榨汁，得到黄梨汁备用。
[0015]
6)将桑葚汁、山楂汁、黄梨汁、山药汁按比例混合，并按比例添加羧甲基纤维素钠、黄原胶、柠檬酸、蛋白糖、异维生素c钠、氯化钠溶液，和纯净水，进行调配。
[0016]
7)将调配好的汁液进行均质，均质压力20兆帕，然后在0.075兆帕下进行脱气。
[0017]
8)将脱气后的果汁饮料进行超高温瞬时杀菌，杀菌条件130℃、2分钟，然后进行无菌灌装。
[0018]
9)冷却后即得到桑葚复合果蔬汁饮料成品”。
[0019]
但上述专利存在以下问题：
[0020]
ace抑制活性较低，且不具有抗疲劳活性。


技术实现要素：

[0021]
1、要解决的问题
[0022]
针对上述现有技术存在的问题，本发明提供一种酶解桑葚复合饮料的制备方法和应用，制备的酶解桑葚复合饮料的抗氧化性能强。
[0023]
2、技术方案
[0024]
为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。
[0025]
一种酶解桑葚复合饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0026]
(1)酶解处理：
[0027]
选取新鲜的桑葚，清洗干净，阴凉处晾干；
[0028]
将晾干后的桑葚输送至榨汁机中，榨汁后加入复合酶剂，不断搅拌并恒温处理，酶解后瞬时高温杀死复合酶剂，接着进行离心过滤，获取酶解液；
[0029]
(2)发酵处理：
[0030]
将步骤(1)中得到的酶解液，加入土黑糖，充分搅拌，并接入复合菌剂，发酵三个月，然后离心过滤，获取发酵液；
[0031]
(3)后处理：
[0032]
将步骤(2)中得到的发酵液，进行超滤处理及巴氏杀菌，灌装，即可。
[0033]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0034]
步骤(1)中桑葚的挑选标准为gb/t 29572-2013桑椹(桑果)，其外形饱满丰盈，整体的小圆球且光滑无皱。
[0035]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0036]
步骤(1)中榨汁机的转速为1200rpm；
[0037]
步骤(1)中榨汁机的温度控制在4℃。
[0038]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0039]
步骤(1)中复合酶包括蛋白酶、果胶酶及脂酶，其中添加后蛋白酶的用量为20mg/l，其中添加后果胶酶的用量为40mg/l，其中添加后酯酶的用量为15mg/；
[0040]
步骤(1)中恒温处理的温度为37℃；
[0041]
步骤(1)中瞬时高温的温度为125℃；
[0042]
步骤(1)中瞬时高温的时间为15s；
[0043]
步骤(1)中离心过滤的离心力为10000g；
[0044]
步骤(1)中离心过滤的目数为200目。
[0045]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0046]
步骤(2)中土黑糖的加入质量为酶解液的2％；
[0047]
步骤(2)中充分搅拌的转速为2000rp。
[0048]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0049]
步骤(2)中复合菌剂的添加质量为发酵液的0.1％；
[0050]
步骤(3)中复合菌剂的剂型为冻干粉；
[0051]
步骤(2)中复合菌剂包括乳酸菌、醋酸杆菌及红曲霉，其中乳酸菌、醋酸杆菌及红曲霉三者之间的质量比为1：5：3；
[0052]
步骤(2)中发酵的温度为42℃；
[0053]
步骤(2)中离心过滤的离心力为20000g；
[0054]
步骤(2)中离心过滤的目数为2000目。
[0055]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0056]
步骤(2)中复合菌剂采购自鹤壁市天沐阳生物科技有限公司；
[0057]
其中乳酸菌的货号为hz-098；
[0058]
其中醋酸杆菌的货号为x1-057；
[0059]
其中红曲霉的货号为005-4-23。
[0060]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0061]
步骤(3)中超滤处理的方法如下：
[0062]
选择孔径为2000d、1000d的超滤膜分别进行过滤，洗脱液为纯水，将过滤液进行超声分散，其中超声分散的功率为150w，其中超声分散的时间为1h，其中超声分散的温度为4℃；
[0063]
步骤(3)中巴氏杀菌的温度为65℃；
[0064]
步骤(3)中巴氏杀菌的时间为20min。
[0065]
一种如上述所述的制备方法得到的酶解桑葚复合饮料。
[0066]
一种如上述所述的酶解桑葚复合饮料在抗氧化中的应用。
[0067]
3、有益效果
[0068]
相比于现有技术，本发明的有益效果为：
[0069]
制备的酶解桑葚复合饮料具有较好的抗氧化活性，具体来说，经验证，是被的饮料具有显著差异的ace抑制活性，其ic50值仅为0.015。同时，结合对比例来看，本发明的复合菌剂起到关键性作用，具体包括乳酸菌、醋酸杆菌及红曲霉，对比例设置了上述三种菌剂的缺失试验，可以明显看出ace抑制活性的显著降低，并低于现有技术中涉及的产品。
具体实施方式
[0070]
下面结合具体实施例对本发明进一步进行描述。
[0071]
实施例1
[0072]
酶解桑葚复合饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0073]
(1)酶解处理：
[0074]
选取新鲜的桑葚，清洗干净，阴凉处晾干；
[0075]
将晾干后的桑葚输送至榨汁机中，榨汁后加入复合酶剂，不断搅拌并恒温处理，酶解后瞬时高温杀死复合酶剂，接着进行离心过滤，获取酶解液；
[0076]
(2)发酵处理：
[0077]
将步骤(1)中得到的酶解液，加入土黑糖，充分搅拌，并接入复合菌剂，发酵三个
月，然后离心过滤，获取发酵液；
[0078]
(3)后处理：
[0079]
将步骤(2)中得到的发酵液，进行超滤处理及巴氏杀菌，灌装，即可。
[0080]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0081]
步骤(1)中桑葚的挑选标准为gb/t 29572-2013桑椹(桑果)，其外形饱满丰盈，整体的小圆球且光滑无皱。
[0082]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0083]
步骤(1)中榨汁机的转速为1200rpm；
[0084]
步骤(1)中榨汁机的温度控制在4℃。
[0085]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0086]
步骤(1)中复合酶包括蛋白酶、果胶酶及脂酶，其中添加后蛋白酶的用量为20mg/l，其中添加后果胶酶的用量为40mg/l，其中添加后酯酶的用量为15mg/；
[0087]
步骤(1)中恒温处理的温度为37℃；
[0088]
步骤(1)中瞬时高温的温度为125℃；
[0089]
步骤(1)中瞬时高温的时间为15s；
[0090]
步骤(1)中离心过滤的离心力为10000g；
[0091]
步骤(1)中离心过滤的目数为200目。
[0092]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0093]
步骤(2)中土黑糖的加入质量为酶解液的2％；
[0094]
步骤(2)中充分搅拌的转速为2000rp。
[0095]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0096]
步骤(2)中复合菌剂的添加质量为发酵液的0.1％；
[0097]
步骤(3)中复合菌剂的剂型为冻干粉；
[0098]
步骤(2)中复合菌剂包括乳酸菌、醋酸杆菌及红曲霉，其中乳酸菌、醋酸杆菌及红曲霉三者之间的质量比为1：5：3；
[0099]
步骤(2)中发酵的温度为42℃；
[0100]
步骤(2)中离心过滤的离心力为20000g；
[0101]
步骤(2)中离心过滤的目数为2000目。
[0102]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0103]
步骤(2)中复合菌剂采购自鹤壁市天沐阳生物科技有限公司；
[0104]
其中乳酸菌的货号为hz-098；
[0105]
其中醋酸杆菌的货号为x1-057；
[0106]
其中红曲霉的货号为005-4-23。
[0107]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0108]
步骤(3)中超滤处理的方法如下：
[0109]
选择孔径为2000d、1000d的超滤膜分别进行过滤，洗脱液为纯水，将过滤液进行超声分散，其中超声分散的功率为150w，其中超声分散的时间为1h，其中超声分散的温度为4℃；
[0110]
步骤(3)中巴氏杀菌的温度为65℃；
[0111]
步骤(3)中巴氏杀菌的时间为20min。
[0112]
如上述所述的制备方法得到的酶解桑葚复合饮料。
[0113]
对比例1
[0114]
酶解桑葚复合饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0115]
(1)酶解处理：
[0116]
选取新鲜的桑葚，清洗干净，阴凉处晾干；
[0117]
将晾干后的桑葚输送至榨汁机中，榨汁后加入复合酶剂，不断搅拌并恒温处理，酶解后瞬时高温杀死复合酶剂，接着进行离心过滤，获取酶解液；
[0118]
(2)发酵处理：
[0119]
将步骤(1)中得到的酶解液，加入土黑糖，充分搅拌，并接入复合菌剂，发酵三个月，然后离心过滤，获取发酵液；
[0120]
(3)后处理：
[0121]
将步骤(2)中得到的发酵液，进行超滤处理及巴氏杀菌，灌装，即可。
[0122]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0123]
步骤(1)中桑葚的挑选标准为gb/t 29572-2013桑椹(桑果)，其外形饱满丰盈，整体的小圆球且光滑无皱。
[0124]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0125]
步骤(1)中榨汁机的转速为1200rpm；
[0126]
步骤(1)中榨汁机的温度控制在4℃。
[0127]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0128]
步骤(1)中复合酶包括蛋白酶、果胶酶及脂酶，其中添加后蛋白酶的用量为20mg/l，其中添加后果胶酶的用量为40mg/l，其中添加后酯酶的用量为15mg/；
[0129]
步骤(1)中恒温处理的温度为37℃；
[0130]
步骤(1)中瞬时高温的温度为125℃；
[0131]
步骤(1)中瞬时高温的时间为15s；
[0132]
步骤(1)中离心过滤的离心力为10000g；
[0133]
步骤(1)中离心过滤的目数为200目。
[0134]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0135]
步骤(2)中土黑糖的加入质量为酶解液的2％；
[0136]
步骤(2)中充分搅拌的转速为2000rp。
[0137]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0138]
步骤(2)中复合菌剂的添加质量为发酵液的0.1％；
[0139]
步骤(3)中复合菌剂的剂型为冻干粉；
[0140]
步骤(2)中复合菌剂包括醋酸杆菌及红曲霉，其中醋酸杆菌、红曲霉之间的质量比为5：3；
[0141]
步骤(2)中发酵的温度为42℃；
[0142]
步骤(2)中离心过滤的离心力为20000g；
[0143]
步骤(2)中离心过滤的目数为2000目。
[0144]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0145]
步骤(2)中复合菌剂采购自鹤壁市天沐阳生物科技有限公司；
[0146]
其中乳酸菌的货号为hz-098；
[0147]
其中醋酸杆菌的货号为x1-057；
[0148]
其中红曲霉的货号为005-4-23。
[0149]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0150]
步骤(3)中超滤处理的方法如下：
[0151]
选择孔径为2000d、1000d的超滤膜分别进行过滤，洗脱液为纯水，将过滤液进行超声分散，其中超声分散的功率为150w，其中超声分散的时间为1h，其中超声分散的温度为4℃；
[0152]
步骤(3)中巴氏杀菌的温度为65℃；
[0153]
步骤(3)中巴氏杀菌的时间为20min。
[0154]
如上述所述的制备方法得到的酶解桑葚复合饮料。
[0155]
对比例2
[0156]
酶解桑葚复合饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0157]
(1)酶解处理：
[0158]
选取新鲜的桑葚，清洗干净，阴凉处晾干；
[0159]
将晾干后的桑葚输送至榨汁机中，榨汁后加入复合酶剂，不断搅拌并恒温处理，酶解后瞬时高温杀死复合酶剂，接着进行离心过滤，获取酶解液；
[0160]
(2)发酵处理：
[0161]
将步骤(1)中得到的酶解液，加入土黑糖，充分搅拌，并接入复合菌剂，发酵三个月，然后离心过滤，获取发酵液；
[0162]
(3)后处理：
[0163]
将步骤(2)中得到的发酵液，进行超滤处理及巴氏杀菌，灌装，即可。
[0164]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0165]
步骤(1)中桑葚的挑选标准为gb/t 29572-2013桑椹(桑果)，其外形饱满丰盈，整体的小圆球且光滑无皱。
[0166]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0167]
步骤(1)中榨汁机的转速为1200rpm；
[0168]
步骤(1)中榨汁机的温度控制在4℃。
[0169]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0170]
步骤(1)中复合酶包括蛋白酶、果胶酶及脂酶，其中添加后蛋白酶的用量为20mg/l，其中添加后果胶酶的用量为40mg/l，其中添加后酯酶的用量为15mg/；
[0171]
步骤(1)中恒温处理的温度为37℃；
[0172]
步骤(1)中瞬时高温的温度为125℃；
[0173]
步骤(1)中瞬时高温的时间为15s；
[0174]
步骤(1)中离心过滤的离心力为10000g；
[0175]
步骤(1)中离心过滤的目数为200目。
[0176]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0177]
步骤(2)中土黑糖的加入质量为酶解液的2％；
[0178]
步骤(2)中充分搅拌的转速为2000rp。
[0179]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0180]
步骤(2)中复合菌剂的添加质量为发酵液的0.1％；
[0181]
步骤(3)中复合菌剂的剂型为冻干粉；
[0182]
步骤(2)中复合菌剂包括乳酸菌及红曲霉，其中乳酸菌、红曲霉之间的质量比为1：3；
[0183]
步骤(2)中发酵的温度为42℃；
[0184]
步骤(2)中离心过滤的离心力为20000g；
[0185]
步骤(2)中离心过滤的目数为2000目。
[0186]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0187]
步骤(2)中复合菌剂采购自鹤壁市天沐阳生物科技有限公司；
[0188]
其中乳酸菌的货号为hz-098；
[0189]
其中醋酸杆菌的货号为x1-057；
[0190]
其中红曲霉的货号为005-4-23。
[0191]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0192]
步骤(3)中超滤处理的方法如下：
[0193]
选择孔径为2000d、1000d的超滤膜分别进行过滤，洗脱液为纯水，将过滤液进行超声分散，其中超声分散的功率为150w，其中超声分散的时间为1h，其中超声分散的温度为4℃；
[0194]
步骤(3)中巴氏杀菌的温度为65℃；
[0195]
步骤(3)中巴氏杀菌的时间为20min。
[0196]
如上述所述的制备方法得到的酶解桑葚复合饮料。
[0197]
对比例3
[0198]
酶解桑葚复合饮料的制备方法，包括以下步骤：
[0199]
(1)酶解处理：
[0200]
选取新鲜的桑葚，清洗干净，阴凉处晾干；
[0201]
将晾干后的桑葚输送至榨汁机中，榨汁后加入复合酶剂，不断搅拌并恒温处理，酶解后瞬时高温杀死复合酶剂，接着进行离心过滤，获取酶解液；
[0202]
(2)发酵处理：
[0203]
将步骤(1)中得到的酶解液，加入土黑糖，充分搅拌，并接入复合菌剂，发酵三个月，然后离心过滤，获取发酵液；
[0204]
(3)后处理：
[0205]
将步骤(2)中得到的发酵液，进行超滤处理及巴氏杀菌，灌装，即可。
[0206]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0207]
步骤(1)中桑葚的挑选标准为gb/t 29572-2013桑椹(桑果)，其外形饱满丰盈，整体的小圆球且光滑无皱。
[0208]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0209]
步骤(1)中榨汁机的转速为1200rpm；
[0210]
步骤(1)中榨汁机的温度控制在4℃。
[0211]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0212]
步骤(1)中复合酶包括蛋白酶、果胶酶及脂酶，其中添加后蛋白酶的用量为20mg/l，其中添加后果胶酶的用量为40mg/l，其中添加后酯酶的用量为15mg/；
[0213]
步骤(1)中恒温处理的温度为37℃；
[0214]
步骤(1)中瞬时高温的温度为125℃；
[0215]
步骤(1)中瞬时高温的时间为15s；
[0216]
步骤(1)中离心过滤的离心力为10000g；
[0217]
步骤(1)中离心过滤的目数为200目。
[0218]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0219]
步骤(2)中土黑糖的加入质量为酶解液的2％；
[0220]
步骤(2)中充分搅拌的转速为2000rp。
[0221]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0222]
步骤(2)中复合菌剂的添加质量为发酵液的0.1％；
[0223]
步骤(3)中复合菌剂的剂型为冻干粉；
[0224]
步骤(2)中复合菌剂包括乳酸菌、醋酸杆菌，其中乳酸菌、醋酸杆菌之间的质量比为1：5；
[0225]
步骤(2)中发酵的温度为42℃；
[0226]
步骤(2)中离心过滤的离心力为20000g；
[0227]
步骤(2)中离心过滤的目数为2000目。
[0228]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0229]
步骤(2)中复合菌剂采购自鹤壁市天沐阳生物科技有限公司；
[0230]
其中乳酸菌的货号为hz-098；
[0231]
其中醋酸杆菌的货号为x1-057；
[0232]
其中红曲霉的货号为005-4-23。
[0233]
上述所述的酶解桑葚复合饮料的制备方法中，
[0234]
步骤(3)中超滤处理的方法如下：
[0235]
选择孔径为2000d、1000d的超滤膜分别进行过滤，洗脱液为纯水，将过滤液进行超声分散，其中超声分散的功率为150w，其中超声分散的时间为1h，其中超声分散的温度为4℃；
[0236]
步骤(3)中巴氏杀菌的温度为65℃；
[0237]
步骤(3)中巴氏杀菌的时间为20min。
[0238]
如上述所述的制备方法得到的酶解桑葚复合饮料。
[0239]
对比例4
[0240]
发明专利，申请号：cn201210231061.x，公开了桑葚复合果蔬汁饮料及其制备方法，参考其具体实施方式的技术方案，如下：
[0241]“第一步是选择八九成熟、粒大、色鲜、无伤烂的桑葚果实，用清水洗净后进行打浆，打浆时添加异维生素c钠和柠檬酸按1：1比例制备的混合溶液护色，用量为桑葚果实重量的0.2％；第二步是向桑葚果浆中加入桑葚果浆重量0.05％的果胶酶进行酶解处理，酶处理条件是40℃、2小时，以提高果汁得率；第三步是将酶解后的果浆进行榨汁，榨汁后的果渣
用少量温水浸泡后再进行榨汁，榨出的果汁用板框过滤机进行过滤，第四步是将挑选、清洗、去核后的山楂进行打浆、榨汁，得到山楂汁备用，第五步是将挑选、清洗、去核后的砀山黄梨进行破碎、打浆、榨汁，得到黄梨汁备用，第六步是将50公斤桑葚汁、10公斤山楂汁、10公斤黄梨汁、10公斤山药汁混合均匀，并添加0.2公斤羧甲基纤维素钠、0.1公斤黄原胶、0.2公斤柠檬酸、0.1公斤蛋白糖、0.2公斤异维生素c钠、0.2公斤氯化钠，加入纯净水至100公斤，进行调配，第七步是将调配好的汁液进行均质，均质压力20兆帕，然后在0.075兆帕下进行脱气，第八步是将脱气后的果汁饮料进行超高温瞬时杀菌，杀菌条件130℃、2分钟，然后进行无菌灌装，第九步是冷却后即得到100公斤桑葚复合果蔬汁饮料成品”。
[0242]
对比例5
[0243]
发明专利，申请号：cn202010163203.8，公开了桑葚酵素饮料的制备方法，参考其具体实施方式的实施例1的技术方案，如下：
[0244]“步骤一：液体菌种的制备
[0245]
依据微生物常规操作方法制取酵母菌，醋化醋杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种的液体菌液，酵母菌，醋化醋杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种均为我公司保藏菌种。
[0246]
步骤二：原料预处理
[0247]
采摘的新鲜桑葚(红紫色或黑色椭圆型聚花果，无腐烂，无裂果，未进行自然发酵)按照碱水、清水、酸水、纯化水的顺序将水果彻底清洗干净，每个清洁工序清洗1.2min-3.0min，洁净通风的环境中将清洗后的桑葚表面的水渍吹干，得原料a；
[0248]
原料a进行破碎，破碎后的桑葚果浆b加入到清洁消毒后的发酵罐/桶中，同时按照1-6kg白砂糖，100kg桑葚加入白砂糖，并进行搅拌，搅拌时间为10min-60min，直至形成均一的浆状料液c(其ph控制在3.5-6.5之间，糖度控制在16％-25％之间)；
[0249]
步骤三：接种
[0250]
将制备的酵母菌，醋化醋杆菌、嗜酸乳杆菌、嗜热链球菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和德氏乳杆菌保加利亚亚种种子培养基按照0.5：1：1：1：1：1的质量比混合均匀得到混合菌液，将混合菌液接种到发酵罐/桶中，接种量(按照质量比)为0.1-0.6
‰
。
[0251]
步骤四：初发酵
[0252]
接种后发酵液维持温度在25-35℃，并维持恒温环境发酵。每48h搅拌一次，每次搅拌15min左右，搅拌结束后，取样，检测其ph，可溶性固形物，糖度等，糖度检测值在5-10％，ph在3.5～5.5之间时即可停止搅拌，开始静置发酵1～3个月，其理化性质基本维持稳定，结束初发酵，得初发酵液d。
[0253]
步骤五：后熟发酵
[0254]
将得到的初发酵液d用规格为25目的滤网进行初过滤，弃滤渣，得到含有桑葚果肉的初发酵液e；亦可将初发酵液e进行80目规格滤网系过滤，得到较澄清透明的初发酵液f(可根据客户需求制备不含/含桑葚果肉的桑葚酵素饮料)；
[0255]
按照100kg初发酵液e/f，30-60kg低聚异麦芽糖，10-30kg麦芽糖醇的配比将初发酵液和原辅料混合后，搅拌均匀，得到均一的后熟配料液g；
[0256]
将后熟配料液g置于20-35℃洁净环境中进行后熟发酵，发酵时间3个月-2年，每半
月检测监控其ph，可溶性固形物，糖度，后熟发酵结束，即得到后熟后的桑葚酵素饮料。
[0257]
步骤六：过滤灭菌
[0258]
将后熟得到的桑葚酵素进行巴氏灭菌，立即灌装，即得到桑葚酵素饮料。桑葚酵素饮料常温避光静置半年后，其上层液中的残糖与下层液中的残糖含量之差与下层液体中的残糖含量之比不超过0.9％；其上层液中的sod与下层液中的sod含量之差与下层液体中的sod含量之比不超过1.3％”。
[0259]
实施例2
[0260]
如上述所述的酶解桑葚复合饮料在抗氧化中的应用。
[0261]
样品的ace抑制能力按照如下方法进行测定：
[0262]
ace抑制率的方法。用高效液相色谱在228nm下定量检测释放出的hip量，从而计算出多肽的ace抑制率。
[0263]
(1)试剂的配置
[0264]
ph8.3的磷酸盐缓冲溶液：用超纯水配制，其中含磷酸盐50mmol/l，nacl 300mmol/l，调整ph到8.3；
[0265]
ace酶液：将2ml的磷酸盐缓冲液加入1u的ace中，使其浓度变为0.5u/ml。
[0266]
hhl溶液：使用磷酸缓冲液溶解hhl，使其终浓度为5mmol/l。
[0267]
样品溶液：称取适量样品，用磷酸盐缓冲液所需浓度的溶液。
[0268]
(2)ace抑制率测定的色谱条件
[0269]
检测波长：228nm；流速：1ml/min；流动相a：超纯水(含0.1％三氟乙酸)，流动相b：甲醇(含0.1％三氟乙酸)；进样量：10μl，手动进样。
[0270]
(3)测定ace抑制活性的方法
[0271]
取120μl hhl底物溶液，加入20μl的样品混合均匀，在37℃恒温水浴中保温10min。然后加入10μl ace酶液在37℃恒温水浴中反应30min，再加入150μl 1mol/l的hcl终止反应，得到反应液。该反应液利用hplc进行分析，同时设置空白对照组。ace抑制活性计算公式如下：
[0272]
ace抑制活性％＝(m-n)/m
×
100％
[0273]
式中，m为对照组中马尿酸的峰面积，n为添加的样品组中马尿酸的峰面积。
[0274]
(4)半抑制浓度的测定
[0275]
按照ace抑制肽体外检测方法测定其抑制活性，以浓度为横坐标，ace抑制率为纵坐标绘成圆滑的曲线，从曲线中计算出ic50值
[0276]
上述相关测试如表1所示，
[0277]
表1
[0278][0279]
由表1可知，本发明制备的饮料具有很好的ace抑制活性，其ic50值小于0.069mg/ml。
[0280]
以上内容是结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明，不能认定本发明具体实施只局限于这些说明，对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的构思的前提下，还可以做出若干简单的推演或替换，都应当视为属于本发明所提交的权利要求书确定的保护范围。