包含改性粘土和共聚物的抗微生物组合物的制作方法

1.本发明属于个人护理领域。特别地，本发明涉及一种可用于例如口腔护理的抗微生物组合物。该抗微生物组合物包含改性粘土和共聚物。本发明还涉及该抗微生物组合物的用途。


背景技术：

2.卫生和适当的个人护理可以预防和治疗由微生物引起的多种疾病。促进和改善卫生的有用工具包括个人护理组合物。用于此目的的最有效的个人护理组合物包括抗微生物组分，其可减少皮肤和粘膜表面上的微生物数目。例如，除臭剂中的抗微生物组合物可减少或防止产生恶臭或促进身体油脂分解成有臭味的脂肪酸的微生物的生长。类似的原理适用于洗发水、沐浴露、牙膏、洗手液和沐浴剂以及包含抗微生物组合物的个人护理组合物的其它实例。
3.个人护理最重要的方面之一为口腔健康。龋齿、牙石、牙龈疾病例如齿龈炎、牙斑和口臭是口腔中的疾病(或由疾病引起或可能导致疾病的病症)，其可以通过足够的口腔卫生容易地预防或治疗。这些疾病和病症不仅从医学角度来看很重要，而且从美容角度来看也很重要，因为它们可能会损害一个人的笑容外观(诸如牙齿变黄或口臭，其不一定具有病理起源)。在任何情况下，不健康和/或受损的口腔病症均可能会影响人们的社交活动，有时会导致自卑。尽管其与人类受试者的口腔健康相关，但口腔护理在兽医行业中也越来越重要，无论是对于宠物或大型动物。
4.口腔疾病和损害美观的口腔病症是由牙齿表面生物膜的形成引起的。口腔生物膜会影响外观，因为其会促进牙齿变色和/或染色(staining)。
5.口腔生物膜通过将获得性薄膜(其为源自唾液糖蛋白的含蛋白薄膜)附着到洁净的牙齿表面而形成。该薄膜使得来自所谓的先锋物种如放线菌属(actinomyces spp)、链球菌属(streptococcus spp)、嗜血菌属(haemophilus spp)、二氧化碳噬纤维菌属(capnocytophaga spp)、韦永氏球菌属(veillonella spp)和奈瑟氏菌属(neisseria)的细菌能够粘附到牙齿表面。这种生物膜形成的早期阶段可以容易地逆转。然而，如果不去除，先锋细菌将使与牙斑、牙石、牙龈疾病等的形成相关的细菌种类如具核梭杆菌(fusobacterium nucleatum)、密螺旋体属(treponema spp)、福赛斯坦纳菌(tannerella forsythensis)、牙龈卟啉单胞菌(p.gingivalis)、放线共生放线杆菌(aggregatibacter actinomycetemcomitans)等随后附着。
6.口臭可为口腔疾病的一种症状，因为其通常指示引起例如蛀牙和齿龈炎的病原体的存在。然而，口臭并不总是与医学病症有关。口臭或口腔恶臭可由例如一些药物、过量摄入咖啡因或唾液产生减少(口干)引起。非病理性口臭可以用口腔护理组合物如漱口水、口香糖、牙膏、口气片剂和确保口腔清洁并提供清新口气的其它产品来预防或控制。
7.已经提出了多种口腔护理组合物，并且一些甚至已经上市以解决上述问题。尽管如此，消费者仍然需要解决上述问题，并且他们一直在寻找较少涉及或不涉及被认为是苛
刻化学品来源的活性物的解决方案。因此，通常被认为是惰性的化合物如天然存在的粘土或无论是天然或合成来源的聚合物通常均被消费者接受。本发明人在寻找此类解决方案时，通过这些材料的固有知识并通过广泛的实验，得到了改性粘土(其已获得专利并公布为wo 2011/036031)和提供协同抗生物膜功效的特定共聚物的组合。
8.wo2011/036031a1描述了一种用于衣物洗涤剂组合物、织物调理剂、个人护理和化妆品组合物的双极性抗微生物颗粒及其制备方法。其中描述的抗微生物颗粒包含具有连接其上的抗微生物基团的改性粘土颗粒。实施例描述了该改性粘土颗粒的制备及其特别是在织物上的抗微生物活性。
9.还报道了包含共聚物的口腔护理组合物。ep0341660(goodrich,1989)公开了用于抑制牙结石的口腔组合物和方法，其特征在于存在氟化物源、牙科磨料和至少两种聚合物的抗牙结石剂，该聚合物选自羧基单体的均聚物和含有至少30％所述羧基单体的共聚物，所述羧基单体选自具有3至5个碳的单不饱和羧酸、其酸酐、其盐以及所述羧基单体的混合物。
10.wo13187918(p&g)公开了一种液体、清洁(cleaning)和/或清洗(cleansing)组合物，其包含可生物降解的磨料清洁颗粒，该磨料清洁颗粒包含选自一大组共聚物的可生物降解的聚酯材料。
11.ep0525913(colgate,1993)公开了一种牙膏或牙用凝胶组合物，其含有一定量的合成线性粘弹性交联聚合增稠剂，尤其是交联的甲基乙烯基醚/马来酸酐共聚物，其有效地使该组合物具有线性粘弹性，以及一种通过将有效量的组合物施用于牙齿表面来促进口腔卫生的方法。
12.尽管有上述公开的技术，仍然需要具有进一步改进的抗微生物活性的抗微生物组合物，特别是用于个人护理诸如口腔护理的组合物。


技术实现要素：

13.本发明人惊奇地发现，当用于进一步包含所选共聚物的组合物中时，包含抗微生物组分的改性粘土颗粒表现出协同抗微生物活性。
14.因此，在第一方面，本发明涉及一种抗微生物组合物，其包含：
15.a)包含抗微生物化合物的改性粘土颗粒，该改性粘土颗粒包含：
16.(i)不对称的1﹕1或2﹕1﹕1的粘土颗粒，其包含交替的四面体片和八面体片，该交替的四面体和八面体片在一个外表面平面处终止于四面体片，而在另一外表面平面处终止于八面体片，以及
17.(ii)至少一种口腔可接受的抗微生物化合物，其与粘土颗粒的外表面平面上的配位阳离子连接；以及
18.b)聚合物，其选自(i)苯乙烯磺酸和马来酸的共聚物；(ii)聚丁二酸亚乙酯；(iii)聚己二酸亚乙酯；(iv)膦基羧酸共聚物；或(v)羧酸盐磺酸盐三元共聚物。
19.在第二方面，本发明涉及第一方面的组合物，其用于预防或治疗哺乳动物的疾病，优选地，用于预防或治疗口腔疾病，该口腔疾病选自包含龋齿、牙石、牙菌斑、牙龈疾病及它们的组合的组。
20.在第三方面，本发明涉及第一方面的组合物，其用于去除哺乳动物受试体的口腔
生物膜。
21.还另一方面要求保护一种处理哺乳动物皮肤和/或口腔的非治疗性方法，该方法包括使哺乳动物的皮肤和/或口腔与第一方面的抗微生物组合物接触的步骤。
22.本发明的又另一个方面涉及本发明的组合物用于在哺乳动物中减少身体恶臭(优选口腔恶臭)和/或用于减少口腔生物膜形成和/或用于减少牙齿变色的用途。
23.发明详述
24.改性颗粒
25.根据本发明的组合物包含含有抗微生物化合物的改性粘土颗粒，该改性粘土颗粒包含不对称的1﹕1或2﹕1﹕1的粘土颗粒，该粘土颗粒具有交替的四面体片和八面体片，其在外表面平面处终止于四面体片和八面体片。优选1﹕1粘土颗粒。
26.该颗粒由具有双极性拓扑特异性(topospecific)特征的前体制备。其中抗微生物化合物选择性地连接到不对称粘土的四面体或八面体表面平面的外表面上的配位阳离子上的任何化学反应或一系列反应可用于制备用于本发明的包含抗微生物化合物的双极性颗粒。为了获得真正的双极性抗微生物颗粒，优选反应仅对一个外部平面具有选择性。选择性是指超过50％的总抗微生物化合物存在于外部平面之一上，优选超过75％，更优选超过80％，还更优选超过90％，甚至更优选超过95％，或甚至超过99％。包含在根据本发明的组合物中使用的抗微生物化合物的双极性颗粒可以例如通过wo 2011/036031中描述的方法制备，其通过引用并入本技术中。
27.根据本发明，优选的1﹕1粘土包括高岭石和蛇纹石亚族矿物。包括在高岭石亚族内的种类包括但不限于高岭石、地开石、埃洛石和珍珠陶土。蛇纹石亚族内的种类包括但不限于贵橄榄石、利蛇纹石和镁绿泥石。
28.根据本发明，优选的2﹕1﹕1粘土包括绿泥石族矿物。一些矿物学家有时将绿泥石错称为2﹕2粘土。绿泥石包含四面体-八面体-四面体片，如2﹕1粘土，在四面体层之间具有额外的弱结合的水镁石样层。
29.四面体片优选包含硅的配位四面体阳离子。四面体片还可包含不是硅的同晶取代的配位四面体阳离子。同晶(isomorphously)取代的配位四面体阳离子包括但不限于铝、铁或硼的阳离子。
30.八面体片优选包含铝的配位八面体阳离子。八面体片还可包含不是铝的同晶取代的配位八面体阳离子。同晶取代的配位八面体阳离子包括镁或铁的阳离子。
31.所述至少一种抗微生物化合物与粘土颗粒的外表面平面上的配位阳离子连接。优选地，没有抗微生物化合物与非外部四面体或八面体平面或表面片的内侧上的配位阳离子连接。
32.抗微生物化合物可与四面体片的外侧上的配位阳离子或八面体片的外侧上的配位阳离子连接。优选地，所述至少一种抗微生物化合物与八面体表面平面的外表面上的配位阳离子连接。
33.所述至少一种抗微生物化合物可与同一表面片的外侧上或在四面体和八面体表面片中每一个的外侧上的配位阳离子连接。抗微生物化合物可相同或不同。优选地，连接到四面体表面片的外侧上的配位阳离子的抗微生物化合物优选地与连接到八面体表面片的外侧上的配位阳离子的化合物不同。
34.优选地，改性粘土颗粒的粘土﹕抗微生物化合物的重量比为1﹕0.001至1﹕0.1，更优选为1﹕0.01至1﹕0.05，最优选约1﹕0.018。
35.抗微生物化合物
36.抗微生物化合物优选选自下组﹕季铵物质优选盐、抗微生物醇、抗微生物酚、抗微生物有机酸/盐，或它们的组合。
37.优选的抗微生物醇包括但不限于苯氧基乙醇、苯甲醇、二氯苯甲醇、二甲基噁唑烷、dmdm乙内酰脲、2-溴-2-硝基丙烷-1,3-二醇、重氮烷基脲(diazolidinyl urea)、六氯酚。
38.优选的抗微生物酚包括例如三氯生、百里酚、二氯酚、2-氯-4-氟苯酚、四氟苯甲酸、甲酚、己基间苯二酚、微内酯(microlide)等。
39.优选的抗微生物有机酸/盐选自苯甲酸/苯甲酸钠、水杨酸/水杨酸钠、山梨酸/山梨酸钾、羟甲基甘氨酸钠、环己烷二乙酸单酰胺、氯烟酸、琥珀酸、过乙酸或吡啶硫酮锌、酮康唑、吡罗克酮乙醇胺或它们的组合。
40.优选的季铵物质或盐选自包含以下的组﹕十六烷基氯化吡啶鎓(cpc)、十六烷基三甲基氯化铵(ctac)、十六烷基三甲基溴化铵(ctab)、苯扎氯铵(bkc)、苄索氯铵(bzc)、西曲溴铵、聚六亚甲基bh等。进一步更优选的季铵盐选自包含以下的组﹕cpc、ctac、ctab、bkc或bzc。
41.在一个优选的实施方案中，该至少一种抗微生物化合物为季铵盐，更优选地，该至少一种抗微生物化合物为十六烷基氯化吡啶鎓(cpc)。
42.抗微生物组合物中的抗微生物化合物的浓度可取决于组合物的用途。因此，在一些实施方案中，抗微生物组合物可包含改性粘土颗粒，该改性粘土颗粒包含治疗有效量的抗微生物化合物。在另一实施方案中，抗微生物组合物可包含改性粘土颗粒，该改性粘土颗粒包含美容有效量的抗微生物化合物。
43.通常，按组合物的总重量计，该组合物包含0.01重量％至10重量％，更优选0.01重量％至5重量％的改性颗粒(即，包含至少一种抗微生物化合物的颗粒)。优选地，抗微生物化合物为cpc，因此，所述颗粒为cpc-粘土颗粒。
44.聚合物
45.该聚合物为一种或多种选自以下的共聚物﹕
46.(i)苯乙烯磺酸和马来酸的共聚物；(ii)聚丁二酸亚乙酯；(iii)聚己二酸亚乙酯；(iv)膦基羧酸共聚物；或(v)羧酸盐磺酸盐三元共聚物。
47.类别(i)的苯乙烯磺酸和马来酸的共聚物的优选聚合物为聚(4-苯乙烯磺酸-共-马来酸)钠盐。该化合物或其酸形式具有如下结构：
48.49.其可以cas编号68037-40-1获得。
50.类别(ii)的聚丁二酸亚乙酯的聚合物具有如下给出的结构：
[0051][0052]
其可以cas编号25569-53-3获得。
[0053]
类别(iii)的聚己二酸亚乙酯的聚合物具有如下给出的结构：
[0054][0055]
其可以cas编号24938-37-2获得。
[0056]
类别(iv)的膦基羧酸共聚物的聚合物具有如下给出的结构：
[0057][0058]
其可以cas编号110224-99-2获得。
[0059]
类别(v)的羧酸盐磺酸盐三元共聚物的优选聚合物本质上是非离子或阴离子的，优选阴离子的。这一类特别优选的聚合物为丙烯酸/n-叔丁基丙烯酰胺/2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙磺酸的共聚物，其cas编号为7732-18-5。
[0060]
优选地，聚合物选自苯乙烯磺酸和马来酸的共聚物；膦基羧酸共聚物；或羧酸盐磺酸盐三元共聚物。
[0061]
优选地，聚合物的含量为组合物重量的0.01-10重量％，更优选0.1-5重量％。
[0062]
在一个优选的实施方案中，该组合物为口腔护理组合物。优选地，该口腔护理组合物选自牙膏、洁齿剂、牙粉、局部口腔凝胶、漱口水、义齿产品、口腔喷雾剂、锭剂、口腔片剂、口香糖、浸渍的牙科用具、牙线及它们的组合。最优选的产品是牙膏或漱口水。
[0063]
当配制用于口腔护理益处时，该组合物包含口腔可接受的基质。口腔可接受的基质优选包含磨料、湿润剂、表面活性剂、挥发性醇或它们的组合。更优选的口腔可接受的基质包括磨料、湿润剂或其混合物。口腔可接受的基质占组合物重量的至少80％，更优选至少90％。
[0064]
本发明的口腔护理组合物可以以软膏、凝胶、洁齿剂或漱口水的形式递送。洁齿剂包括如牙膏和牙粉的形式。该组合物最优选以牙膏、牙粉或漱口水的形式存在。
[0065]
本发明的口腔护理组合物优选包含磨料。凝胶通常含有二氧化硅，而不透明的膏体通常含有钙基磨料，尤其是白垩。用于掺入本发明组合物中的磨料二氧化硅优选为具有低折射率的二氧化硅。其可以用作唯一的磨料二氧化硅，或与低含量的其它磨料二氧化硅
如根据ep236070的那些结合使用。在本发明中用作磨料的低折射率二氧化硅优选为表观折射率(ri)在1.41至1.47，优选1.435至1.445范围内，优选地重均粒度为5至15mm，bet(氮)表面积为10至100m2/g，且吸油量为约70至150cm3/100g的二氧化硅，但也可使用具有更低表观折射率的磨料二氧化硅。合适的低折射率磨料二氧化硅(例如ri为1.435至1.445)的典型实例为源自rhone poulenc的tixosil 63和73；源自degussa的sident 10；源自zeofinn的zeodent 113；源自huber的zeodent 124，源自crosfield chemicals的sorbosil ac 77(ri约为1.440)。本发明组合物中这些二氧化硅的量通常为组合物重量的5-60％，通常为5-20％。
[0066]
在优选的实施方案中，该组合物包含增稠剂。可用于本发明的增稠剂包括羧甲基纤维素钠(scmc)、羟乙基纤维素、甲基纤维素、乙基纤维素、黄蓍胶、阿拉伯胶、刺梧桐树胶、黄原胶、海藻酸钠、角叉菜胶、瓜尔胶、角叉菜(irish moss)、淀粉、改性淀粉、二氧化硅基增稠剂包括二氧化硅气凝胶、硅酸镁铝(例如veegum)、卡波姆(交联的丙烯酸酯)及其混合物。
[0067]
通常，增稠二氧化硅、羧甲基纤维素钠和/或卡波姆是用于本发明组合物的优选的增稠剂。当使用卡波姆时，希望的是重均分子量为至少700,000的卡波姆，优选分子量为至少1,200,000的卡波姆，最优选分子量为至少约2,500,000的卡波姆。卡波姆的混合物也可用于本技术中。
[0068]
在一个特别优选的实施方案中，卡波姆为synthalen pnc、synthalen kp或其混合物。其被描述为高分子量和交联的聚丙烯酸，并可通过cas编号9063-87-0识别出。这些类型的材料可从供应商如sigma处商购获得。
[0069]
在另一个特别优选的实施方案中，使用的羧甲基纤维素钠(scmc)为scmc 9h。其被描述为纤维素衍生物的钠盐，其中羧甲基基团与吡喃葡萄糖骨架单体的羟基结合，并可通过cas编号9004-32-4识别。其可从供应商如alfa chem.处获得。
[0070]
增稠二氧化硅特别优选用于凝胶牙膏中。
[0071]
凝胶牙膏通常含有至多8.5重量％的增稠二氧化硅，而不透明牙膏通常含有3-4重量％的增稠二氧化硅。
[0072]
当存在时，优选的增稠二氧化硅包括degussa的aerosil t系列或cabot公司的cab-o-sil系列，硅胶诸如w.r.grace&co的sylodent或sylox系列，或沉淀二氧化硅诸如j.m.huber公司的zeothix 265。有用的二氧化硅增稠剂还包括zeodent 165、zeodent 163和/或167和zeofree 153、177和/或265二氧化硅，均可从j.m.huber公司获得。其它优选的增稠二氧化硅包括mfil、mfil-p(得自madhu silica,india)、sident 22s和aerosil 200(得自evonik industries)、wr grace&company的sylodent和perkasil增稠二氧化硅，以及rhodia的tixosil 43和331，合成的细分散热解二氧化硅，诸如以商标syloid 244、syloid 266和aerosil d-200销售的那些。
[0073]
增稠剂当存在时，其优选占组合物重量的0.01至约10％，更优选0.1至9％，最优选1.5至8％。
[0074]
合适的湿润剂优选用于本发明的口腔护理组合物中，并且它们包括，例如甘油、山梨醇、丙二醇、双丙甘醇、双甘油、三醋精、矿物油、聚乙二醇(优选peg-400)、链烷二醇如丁二醇和己二醇、乙醇、戊二醇或其混合物。甘油、聚乙二醇、山梨糖醇或其混合物是优选的湿润剂，最优选的湿润剂是甘油(也称为丙三醇)和山梨糖醇。
[0075]
湿润剂可以口腔护理组合物重量的10-90％存在。更优选地，湿润剂占组合物重量的25-80％，最优选45-70％，基于组合物的总重量，并包括其中包含的所有范围。
[0076]
优选地，口腔护理组合物包含表面活性剂。当配制成牙膏时，组合物优选包含组合物总重量0.01-20％的表面活性剂。优选地，按所述组合物的重量计，组合物包含至少0.01％，更优选至少0.1％且最优选0.5至7％的表面活性剂。合适的表面活性剂包括阴离子表面活性剂，例如c8至c18烷基硫酸的钠盐、镁盐、铵盐或乙醇胺盐(例如月桂基硫酸钠)，c8至c18烷基磺基琥珀酸的钠盐、镁盐、铵盐或乙醇胺盐(例如二辛基磺基琥珀酸钠)，c8至c18烷基磺基乙酸的钠盐、镁盐、铵盐或乙醇胺盐(例如月桂基磺基乙酸钠)，c8至c18烷基肌氨酸的钠盐、镁盐、铵盐或乙醇胺盐(例如月桂基肌氨酸钠)，c8至c18烷基磷酸的钠盐、镁盐、铵盐或乙醇胺盐(其可任选地包含至多10个环氧乙烷和/或环氧丙烷单元)和硫酸化的单甘油酯。更优选地，表面活性剂包含阴离子表面活性剂或者是阴离子表面活性剂。优选的阴离子表面活性剂为月桂基硫酸钠和/或十二烷基苯磺酸钠。最优选地，表面活性剂为月桂基硫酸钠。
[0077]
其它合适的表面活性剂包括非离子表面活性剂，诸如任选地聚乙氧基化脂肪酸脱水山梨糖醇酯、乙氧基化脂肪酸、聚乙二醇的酯、脂肪酸甘油单酯和甘油二酯的乙氧基化物以及环氧乙烷/环氧丙烷嵌段聚合物。其它合适的表面活性剂包括两性表面活性剂，诸如甜菜碱或磺基甜菜碱。也可以使用任何上述材料的混合物。最优选的表面活性剂为碱金属烷基硫酸盐或甜菜碱。
[0078]
水可以优选占组合物总重量的5-95％，特别是10-75％，尤其是10-60％，进一步更优选10-45％。
[0079]
当本发明的口腔护理组合物为牙膏或凝胶时，其粘度通常为约30,000-180,000厘泊，优选60,000-170,000厘泊，且最优选65,000-165,000厘泊。
[0080]
本发明的口腔护理组合物可包含本领域常用的各种其它成分以增强物理性质和性能。这些成分包括抗微生物剂、抗龋齿剂、牙斑缓冲剂、氟化物源、维生素、植物提取物、脱敏剂、抗牙结石剂、生物分子、调味剂、蛋白质材料、防腐剂、不透明剂、着色剂、ph调节剂、甜味剂、颗粒研磨材料、聚合物、缓冲组合物的ph和离子强度的缓冲剂和盐，及它们的混合物。这些成分通常并共同占组合物重量的小于20％，优选0.0-15％，最优选0.01-12％，包括其中包含的所有范围。
[0081]
优选地，组合物包含一种或多种口腔可接受的组分，诸如磨料、口腔可接受的活性物(诸如fluor)、牙齿增白剂、芳香剂、稳定剂、防腐剂以及口腔护理组合物的其它常规组分。
[0082]
抗微生物组合物的用途
[0083]
本发明人已发现根据本发明的抗微生物组合物具有改善的抗微生物活性。因此，该抗微生物组合物可用于美容(非治疗)或治疗应用。
[0084]
a)治疗用途
[0085]
在一方面，根据本发明的组合物用于预防或治疗哺乳动物的疾病。如本文所用的疾病是指在体表(皮肤、指甲、粘膜等)上由微生物引起的疾病。在一个实施方案中，该疾病为皮肤病，诸如选自包含以下的组﹕痤疮、湿疹或头皮、指甲或皮肤上的细菌或真菌感染，诸如由丙酸杆菌属(propionibacteria spp.)、棒状杆菌属(corynebacteria spp.)、放线菌
属(actinobacteriales)、葡萄球菌属(staphylococci spp.)(例如表皮葡萄球菌(s.epidermidis))、乳杆菌属(lactobacilales)、梭菌目(clostridiales)、变形菌门(proteobacteria)、黄杆菌目(flavobacteriales)，拟杆菌目(bacteriodales)，马拉色菌属(malassezia)酵母(例如糠秕马拉色菌(malassezia furfur)和malassezia lobose)等引起的那些。
[0086]
优选地，该用途为预防或治疗口腔疾病。优选的口腔疾病选自龋齿、牙石、牙斑、牙龈疾病及它们的组合，例如由放线菌属、链球菌属(诸如变形链球菌(s.mutans)和茸毛链球菌(s.sobrinus))、乳杆菌属(lactobacillus ssp)(诸如嗜酸乳杆菌(lactobacillus acidophilus))、诺卡菌属(nocardia spp)、嗜血菌属、二氧化碳噬纤维菌属、韦永氏球菌属、奈瑟氏菌属、梭菌属(fusobacterium)，诸如具核梭杆菌、密螺旋体属、坦纳菌属(tannerella ssp)诸如福赛斯坦纳菌、牙龈卟啉单胞菌、放线共生放线杆菌等引起的疾病。
[0087]
在另一方面，本发明的抗微生物组合物用于去除哺乳动物受试体的口腔生物膜。
[0088]
b)美容/非治疗用途
[0089]
本发明提供了抗微生物组合物在体表诸如皮肤、牙齿、头皮、粘膜(牙龈)、舌头等上的美容用途。本发明人已发现对通常在所述体表上发现，并且可能损害身体外观(例如牙齿变黄)或体味、特别是口腔恶臭的微生物具有改善的抗微生物活性。优选地，该抗微生物组合物用于预防或治疗口腔中由微生物引起的口臭的美容用途。
[0090]
因此，在另一方面，本发明涉及一种处理哺乳动物的皮肤或口腔的非治疗性方法，该方法包括使哺乳动物的皮肤或口腔与本发明的抗微生物组合物接触的步骤。
[0091]
在另一方面，本发明涉及本发明的抗微生物组合物用于在哺乳动物中减少身体恶臭、优选口腔恶臭和/或用于减少口腔生物膜形成和/或用于减少牙齿变色的用途。
具体实施方式
[0092]
实施例
[0093]
实施例1﹕改性粘土颗粒的制备
[0094]
为了制备根据本发明的包含抗微生物化合物的改性粘土颗粒，使用以下方法：
[0095]
将5g的高岭石(super shine 90，eicl)置于500ml的0.1n hcl(merck)溶液中并超声处理30分钟。然后通过滴加naoh(merck)溶液将ph提高至9。向其中加入10g cpc，并将悬浮体在磁力搅拌器(spinpot)上搅拌6小时，同时将溶液的温度保持在75-80℃。然后将悬浮体用水洗涤约10次以除去过量的cpc，最后用乙醇(les alcools de commerce)洗涤。然后将粘土在热空气烘箱中干燥。
[0096]
为了确定反应后cpc连接到粘土上，采用ftir光谱法。所用仪器为perkin elmer仪器，spectrum one ft-ir分光计。将粉末(漫反射)技术用于该测量。作为对照的粘土和本发明的反应后的粘土在研钵和研槌中用50％w/w的kbr研磨，然后对这些粉末测量ir。将反应后粘土的红外光谱与纯粘土的红外光谱进行比较。反应后的粘土在2926cm-1
、2855cm-1
、1487cm-1
和1466cm-1
处观察到新峰。2926cm-1
和2855cm-1
处的峰归因于cpc的烷基链的c-c拉伸，而1487cm-1
和1466cm-1
处的峰归因于cpc的环碳和氮。
[0097]
实施例2﹕活性物质的抗微生物活性
[0098]
将根据本发明的组合物的抗微生物活性与仅包含改性粘土颗粒(其包含抗微生物
化合物(“cpc”，如实施例1中制备))或仅包含共聚物的组合物的抗微生物活性进行比较。将唾液菌群和活性物(根据下表1)共同温育过夜，并在温育结束时用结晶紫将生物膜染色。详细方案如下所述﹕
[0099]
处理和生物膜形成
[0100]
收集4-5人刷牙前的清晨唾液样品，汇集在一起并在盐水中洗涤两次。将超滤的胰蛋白胨酵母提取物肉汤(2％蔗糖)的吸光度设定为0.2od620nm，并用于进一步步骤中提到的实验。将2ml固定培养物加入24/12孔板中，向各孔中加入不同浓度的测试活性物。将所述板在37℃下厌氧温育过夜。
[0101]
染色方案
[0102]
在过夜温育结束时，将板倾倒在生物危害品袋中以除去所有浮游细菌。然后将板在一盘水中冲洗，然后将水倾倒在该盘上。该步骤进行一次以除去松散粘附的生物膜。然后将该板放在工作台面上的吸墨纸/纸巾上。所有测试孔均用1ml的1％结晶紫染色剂(cv)染色10分钟。此步骤使用移液管进行。将板倾倒在生物危害品袋中以除去所有染色剂。然后将板在一盘水中冲洗，并将水倒在盘上。该步骤在三个单独的水盘中连续进行三次。(每个托盘程序重复3次-共9次冲洗)。用更多的吸墨纸/纸巾覆盖该工作台面，并将板撞击该台面上直至所有孔均没有任何液体。进行该步骤以确保仅剩余cv与孔底部的生物膜结合。在室温(23
±
2℃)下将板面向上放置在台面上，直至其完全干燥。向测试孔中加入1ml 33％冰醋酸以溶解生物膜结合的cv染色剂。使醋酸静置10分钟。在孔中上下吸取醋酸和cv的混合物。
[0103]
将10μl上述溶液转移至平底96孔板的孔中的90μl的33％醋酸中。将溶液充分混合，并在540nm处测定吸光度。所有测试活性物均一式两份进行。
[0104]
每个样品获得的生物膜百分比总结在下表中﹕
[0105]
表1
[0106]
实施例组合物％生物膜标准偏差2a基质99.970.052b2％pss-co马来酸127.53.32c1.5％cpc-粘土99.0122d2％pss co-马来酸 1.5％cpc-粘土25.30.22e2％conwtp3100332.22.12f2％conwtp3100 1.5％cpc-粘土2.60.22g2％膦基羧酸共聚物40.512.22h2％膦基羧酸共聚物 1.5％cpc-粘土2.20.2
[0107]1pss-co马来酸是苯乙烯磺酸和马来酸的共聚物
[0108]2cpc粘土是如实施例1中制备的改性粘土颗粒
[0109]3conwtp3100是羧酸盐磺酸盐三元共聚物
[0110]
上表-1中数据表明，包含改性粘土和共聚物的组合物(实施例2d、2f和2h)提供了优于单独组分(实施例2b、2c、2e和2g)的协同抗生物膜功效。