一种用于下鼻甲重建的组织工程骨移植物的制作方法

1.本发明属于生物医学组织工程领域，具体涉及一种用于下鼻甲重建的组织工程骨移植物。


背景技术：

2.空鼻综合征(empty nose syndrome,ens)是鼻甲过分切除导致的一种医源性并发症。表现为继发性鼻腔黏膜萎缩及一系列伴发症状，包括鼻腔咽部干燥感，注意力无法集中，疲劳、烦躁、焦虑、抑郁等。大约20％的下鼻甲切除术患者会发展出ens。由于治疗效果不佳，患者及其家属对手术医生、医院存在着敌对情绪,甚至发生激烈矛盾，给社会带来一定的不安定因素。
3.为了治疗ens，学者们尝试采用了各种填充材料，如硅胶，自体或异体骨、软骨，人工真皮、羟基磷灰石或其复合物。虽然上述方法能达到一定的治疗效果，但存在排异、过敏、组织相容性等问题。
4.综上所述，本领域迫切需要开发一种用于下鼻甲重建的组织工程骨移植物。


技术实现要素：

5.本发明提供了一种用于下鼻甲重建的组织工程骨移植物。
6.在本发明的第一方面，提供了一种组织工程化骨移植物，它包括：
7.(a)脱钙骨基质载体；
8.(b)人骨髓基质干细胞(bmsc)细胞；其中，
9.所述脱钙骨基质载体的脱钙程度为95-85％；和/或
10.所述脱钙骨基质载体的厚度为3-8mm。
11.在另一优选例中，所述脱钙骨基质载体的脱钙程度为92％-86％。
12.在另一优选例中，所述脱钙骨基质载体的厚度为4.5-5.5mm。
13.在另一优选例中，所述的bmsc为自体细胞。
14.在另一优选例中，所述的bmsc来源于松质骨。
15.在另一优选例中，所述的松质骨包括：髂骨、胸骨、肋骨。
16.在另一优选例中，所述移植物为固态细胞材料复合物，且bmsc在复合材料中的浓度为1
×
107个细胞/cm
3-1
×
108个细胞/cm3，优选2
×
107细胞/cm
3-7
×
107细胞/cm3。bmsc在复合材料中的含量为1
×
107个细胞/g-1
×
108个细胞/g，优选2
×
107细胞/g-7
×
107细胞/g。
17.在另一优选例中，所述组织工程化骨移植物形状与人体需要移植的下鼻甲缺损部位形状相符。
18.在本发明的第二方面，提供了一种制备如本发明第一方面所述骨移植物的方法，包括步骤：
19.(1)提供一自体bmsc细胞，所述bmsc细胞来自自体骨髓；
20.(2)通过含有碱性成纤维生长因子(bfgf)的培养液体外扩增培养bmsc细胞；
21.(3)接种bmsc细胞于脱钙骨基质载体，体外成软骨诱导培养，形成组织工程化骨(bmsc-脱钙骨复合物)。
22.在另一优选例中，步骤(2)中，所述体外培养液为低糖培养基。
23.在另一优选例中，步骤(2)中，所述扩增培养bmsc至第2-5代。
24.在另一优选例中，步骤(2)中，所述体外培养液中bfgf的浓度为0-10ng/ml；优选2-5ng/ml。
25.在另一优选例中，步骤(2)中，所述扩增的bmsc细胞为长梭形，细胞体积小，增殖活性强。
26.在另一优选例中，步骤(3)中，所述bmsc的接种浓度为1
×
107细胞/g-1
×
108细胞/g；优选为2
×
107细胞/g-7
×
107细胞/g；更优选地，为3.5
×
107细胞/g-5
×
107细胞/g。
27.在另一优选例中，步骤(3)中，所述体外成软骨诱导培养0.5-8周；优选0.5-4周。
28.在本发明的第三方面，提供了一种如本发明第一方面所述骨移植物的用途，用于制备一种修复下鼻甲缺损部位的药物。
29.在另一优选例中，所述下鼻甲缺损部位选自下鼻甲基底、下鼻甲周边组织、鼻腔外侧壁。
30.在另一优选例中，所述组织工程化骨移植物还用于增大下鼻甲面积、缩小鼻腔空隙。
31.应理解，在本发明范围内，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
附图说明
32.图1显示了培养基中有无纤维生长因子(bfgf)对bmsc细胞生长的影响；其中，a图中“ bfgf”为添加bfgf培养，
“‑
bfgf”为未添加bfgf培养；b图中的折线图中，纵坐标为cck-8检测结果的od(optical density)值，横坐标为培养天数(d)。
33.图2显示了脱钙骨样品图。
34.图3显示了bmsc-复合脱钙骨体外成骨诱导4周后形成的组织工程骨。
35.图4显示了bmsc接种聚羟基乙酸/聚乳酸支架材料体外培养8周形成软骨样移植物的示意图，其中，a图为软骨样移植物，b、d、f图分别为该移植物的组织学、蕃红-o、和ii型胶原免疫组化染色(比例尺为1mm)，c、e、g图分别为b、d、f图中黑框内容的放大(比例尺为100μm)。
36.图5显示了bmsc接种聚羟基乙酸/聚乳酸支架材料形成的组织工程软骨植入皮下环境中的示意图。其中，a图为bmsc-聚羟基乙酸/聚乳酸组织的软骨样移植物在裸鼠皮下继续发育形成的组织工程骨，b图为a图的组织学染色(比例尺为100μm)。
37.图6显示了bmsc-脱钙骨复合物移植到裸鼠皮下环境中形成的组织工程骨组织。
38.图7显示了bmsc-脱钙骨复合物的组织学染色。
39.图8显示了bmsc-脱钙骨复合物植入空鼻症患者鼻腔外侧壁相当于下鼻甲部位术前术后mri影像。
具体实施方式
40.本发明人通过广泛而深入的研究，首次开发了一种基于特定材质的脱钙骨基质，复合bmsc细胞构建的组织工程骨，本发明的组织工程骨特别适用于修复下鼻甲缺损。本发明中的脱钙骨基质具有特定的硬度、厚度：合适的厚度有利于支撑下鼻甲部位，便于bmsc细胞负载；特定的硬度便于修剪，同时提供下鼻甲支撑时所需强度。此外，材料的微环境有利于鼻腔粘膜修复。具体地，本发明人通过优化脱钙骨载体材料的厚度和脱钙程度、bmsc体外培养条件，构建了一种特殊的组织工程骨移植物材料，便于下鼻甲重建。在此基础上完成了本发明。
41.本发明基于微创取少量的bmsc细胞，通过体外培养，高密度接种于特定规模大小和厚度的脱钙骨材料后，通过培养得到一种有生物活性的脱钙骨材料，依靠自体组织细胞的成骨作用及生物材料的降解吸收，最终形成新生的下鼻甲骨。
42.术语
43.本发明的“下鼻甲重建的组织工程骨移植物”、“本发明的组织工程化软骨/骨移植物”、“本发明的软骨/骨移植物”可以互换使用，皆指本发明第一方面述及的用于下鼻甲修复的组织工程骨移植物。
44.一般地，可选用脱钙骨-明胶复合支架，聚羟基乙酸/聚乳酸(pga/pla)，聚己内酯(pcl)，或者聚己内酯复合羟基磷灰石作为组织工程骨的支架材料。
45.术语“诱导”指提供特殊的生化环境，将具有多向分化能力的干细胞等细胞群体转变为另一种功能特性不同的细胞群体的过程。
46.术语“接种”指将细胞均匀分布于三维支架材料上的过程。
47.术语“自体移植”指将所需生物活体材料(如骨髓基质干细胞)从某个体中取出并再施用于同一个体的过程。
48.在本发明的一个优选例中，选用的组织工程载体的材料为脱钙骨基质。
49.脱钙骨基质
50.脱钙骨基质(dbm)是由同种异体骨或异种骨经脱钙处理，能降低免疫原性的骨移植材料。脱钙程度不同对应的机械强度也不同。具有良好的生物学特性、骨诱导性和骨传导性和生物降解性，促进新骨形成及骨组织矿化，进而加速骨愈合，可以单独或与自体骨、其它生物材料、生长因子联合有效修复骨损伤，是比较理想的骨组织工程支架材料。
51.在另一优选例中，所述脱钙骨材料的长度为10-40mm，优选为34.5-35.5mm；宽度为5-15mm，优选为9.5-10.5mm。
52.在本发明的一个实施例中，脱钙骨材料的长、宽、高分别为35mm、10mm、5mm。
53.应理解，本发明的组织工程化骨移植物大小可以根据不同患者的情况来定制。例如，可以根据不同患者下鼻甲缺损的部位进行修剪，已满足实际要求。
54.为了在下鼻甲这一特定位置起支撑作用，本发明的组织工程骨移植物中的脱钙骨材料需要一定厚度。厚度过大，不利于干细胞接种和细胞悬液的充分渗透，并且培养的细胞材料复合体会出现中空现象，影响植入后的修复效果；厚度过小，无法满足力学强度要求，导致接种时细胞悬液流失，进而无法有效的负载细胞，降低接种效率。
55.本发明人优化了脱钙骨材料的厚度，在一优选例中，本发明的脱钙骨材料厚度为1-8mm；更佳地，厚度为2-5mm。
56.脱钙程度
57.可用于本发明组织工程载体的骨组织来源没有特别限制，可以是来源于人的同种异体骨组织，也可以是来源于动物(如猪、牛、羊、狗等)的异种骨组织。优选的是来源于猪、牛的异种骨组织。
58.在同样的处理条件下，脱钙程度较小时材料韧性较低，在修剪材料时会导致材料较易发生碎裂现象，增加操作难度，同时会延长材料在体内的降解时间；但脱钙程度过大时，材料强度不足，难以符合修复下鼻甲所需的强度，影响患者预后。
59.在本发明的一个实施例中，本发明的脱钙骨材料所述脱钙骨基质载体的脱钙程度为95-85％，优选为92％-86％。即，本发明中的脱钙骨材料的含钙量应控制在5-15％左右，优选为8-14％。
60.脱钙的方法
61.将骨组织浸入液氮中5min，随后置于75％乙醇溶液中进行脱脂处理；随后加入0.5m的hcl溶液中进行脱钙处理，hcl溶液每两小时更换一次，共更换3次；使用去离子水洗涤3次后加入0.05％胰酶溶液置于37℃恒温摇床消化2h进行脱细胞处理；最后经冷冻干燥制成脱钙骨基质，干燥箱储存备用。
62.脱钙程度的测定
63.使用等离子发射光谱分析法测量。取0.5g冻干脱钙骨，充分研磨制成脱钙骨基质粉末粉末，置入100ml容量瓶，加入5ml浓hno3，微波190℃消解18分钟，定容至100ml；取溶液1.5ml加入等离子发射光谱仪(icp)进行检测，读取数值；重复三次，取平均值。
64.骨髓基质干细胞
65.骨髓基质干细胞(bone marrow stromal cell，bmsc)是一类具有多向分化潜能的组织干细胞,在体内外适当的诱导环境下可以分化为骨、软骨、脂肪、肌肉、神经、肌腱及韧带等多种组织细胞。该细胞群来源充足,取材方便,增殖能力强。
66.在本发明的一个实施例中，直接以成骨诱导液扩增bmsc，待细胞达到一定数量之后，接种于脱钙骨或其他组织工程支架材料，继续以成骨诱导液培养1-3周。
67.在另一优选例中，以含bfgf的低糖培养基扩增bmsc。bfgf可显著提高bmsc增殖活性，有利于维持其干细胞特性，进而节省所需bmsc的数量并且提高成骨活性。
68.在另一优选例中，以高浓度的bmsc接种于脱钙骨材料，依患者下鼻甲萎缩程度决定脱钙骨大小，形成组织工程化骨(bmsc-脱钙骨复合物)。
69.本发明用于接种的bmsc浓度通常为1
×
107细胞/g-8
×
107细胞/g，较佳地为2
×
107细胞/g-5
×
107细胞/g。通常，以培养液调整种子细胞浓度，然后与本发明的组织工程载体混合，其中混合时培养液与固体性材料的比例没有特别限制，但是以本发明载体能够吸附的培养液最大量为准。
70.在本发明的移植物中，还可添加或复合其他各种细胞、生长因子、各种转基因成分，从而保持细胞表型、促进细胞生长或基质合成能力等，或者促进组织生长、血管、神经长入等。
71.形成的骨移植物，可直接植入体内骨缺损处等部位，修复骨组织缺损或填充骨组织。
72.hbmsc-脱钙骨复合物
73.本发明中hbmsc一脱钙骨复合物的细胞接种浓度通常约为1
×
107细胞/g-8
×
107细胞/g或更高。材料为脱钙骨材料或者其他固体性材料，固、液体复合材料。以培养液调整细胞浓度，然后与脱钙骨材料混合，其中混合时培养液与脱钙骨材料的比例没有特别限制，但是以该脱钙骨材料所能够吸附培养液的最大量为准。当支架材料为特殊三维形状时，如下鼻甲时，按实际体积的大小来进行计算。
74.制备方法
75.本发明的本发明的组织工程化软骨移植物制作简便。
76.在一个具体实施例中，先以含bfgf的低糖培养基扩增bmsc，待细胞达到一定数量之后，接种于脱钙骨或其他组织工程支架材料，再以专利(zl201110268830.9)中实施例6所公开的体外成软骨诱导液培养1-8周，形成软骨样移植物。
77.本发明的主要优点包括
78.(1)本发明的脱钙骨基质材料能够有效重建下鼻甲。
79.(2)本发明所需干细胞取材于自体，无免疫原性，安全性高。
80.(3)bmsc微环境有利于鼻腔的黏膜修复。
81.(4)本发明仅需微量干细胞，取材过程为常规操作，不损伤正常组织。
82.(5)可按照组织缺损形状制备移植物大小，以达到精确修复。
83.(6)体外培养方法简便易学，便于推广，易形成产业化产品。
84.(7)本发明的组织工程化软骨/骨移植物具有较好的可塑性及一定的机械强度，容易加工成所需的形状并有支撑作用，满足下鼻甲特定位置的要求。
85.下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，例如sambrook等人，分子克隆：实验室手册(new york:cold spring harbor laboratory press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数是重量百分比和重量份数。
86.成骨条件培养液
87.培养液为dmem(delbecco's modified eagle medium)，加入β-磷酸甘油钠10nmol/l，地塞米松0.1μmol/l，l-α-磷酸抗坏血酸50μmol/l，l-谷氨酰胺300mg/l，1.25(oh)2vd
3 10nmol/l和10％胎牛血清(hyclone，usa)，未注明试剂均为sigma公司，usa。
88.体外成软骨诱导液
89.如专利(zl 201110268830.9)中实施例6所公开的体外成软骨诱导液。
90.bmsc的扩增培养基(含bfgf的低糖培养基)：
91.用于扩增bmsc的培养基每升液体含低糖dmem培养基10g，l-谷氨酰胺300mg，维生素c 50mg，碳酸氢钠3.7g。优选地，加入2-5ng/ml的碱性成纤维生长因子(bfgf)。
92.成骨诱导液
93.高糖dmem培养液中含10％fbs，β-磷酸甘油10mm，维生素d310nm，地塞米松0.1μm。
94.实施例1：bmsc的获取和培养
95.从患者髂前上棘经穿刺取骨髓3～5ml，置于percoii分离液上(密度1.073g/l)行梯度密度离心，骨髓与分离液比例为1:2。2550r/min离心30分钟，吸取中间云雾状细胞层，磷酸缓冲液(pbs)洗1次。1550r/min离心后弃上清获取有核细胞，以2
×
107细胞/cm2接种培
养皿，进行体外细胞扩增，以成骨条件培养液予成骨诱导。
96.原代细胞接种后48小时换液，细胞达80％～90％融合后，采用0.25％胰酶消化，2
×
103细胞/cm2传代培养，置于37℃，5％co2培养箱培养至第3代，收集细胞并计数。
97.实施例2：bmsc培养条件的优化
98.以含bfgf的低糖培养基扩增bmsc。用于扩增bmsc的培养基中，每升液体含低糖dmem培养基10g，l-谷氨酰胺300mg，维生素c 50mg，碳酸氢钠3.7g。培养基中添加0ng、1ng/ml、2ng/ml、5ng/ml、10ng/ml碱性成纤维生长因子(bfgf)。分别以上述培养基培养bmsc。
99.结果显示，在表明含bfgf的培养基中，bfgf浓度范围为2-5ng/ml左右最佳。
100.添加( bfgf)与未添加(-bfgf)bfgf培养的细胞形态结果如图1a所示：添加bfgf培养的bmsc更能维持长梭形，且细胞体积较小；而未添加bfgf培养的普通体系中扩增的bmsc，形态较为铺展。
101.图1b中显示，添加bfgf培养的bmsc在培养的第九天依然可以有较好的增殖活性；未添加bfgf培养的bmsc在培养的第五天后增殖活性不断降低。
102.实施例3：bmsc复合组织工程支架材料的体外培养
103.(1)实验方法：
104.方法1：直接以成骨诱导液扩增bmsc，待细胞达到一定数量之后，接种于脱钙骨或其他组织工程支架材料，继续以上述成骨诱导液培养1-3周。
105.方法2：先以含bfgf的低糖培养基扩增bmsc，待细胞达到一定数量之后，接种于脱钙骨或其他组织工程支架材料，再以成骨诱导液培养1-3周。
106.方法3：先以含bfgf的低糖培养基扩增bmsc，待细胞达到一定数量之后，接种于脱钙骨或其他组织工程支架材料，再以专利(zl 2011 1 0268830.9)实施例6中优选的体外成软骨诱导液培养0.5-8周，形成软骨样移植物。
107.其中，方法1从细胞扩增阶段就通过成骨诱导液提供成骨环境，可能更有利于后续骨再生；
108.方法2通过含bfgf的低糖培养基扩增细胞，与第一种方法相比可以获得更多的细胞数量；
109.方法3则在方法2的基础上，采用成软骨诱导液对细胞材料复合物进行为期更长的体外培养，体外再生出来的组织更加接近于软骨，植入下鼻甲缺损部位之后有望存活更长时间(下鼻甲缺损部位处于粘膜下的微环境，血供并不是非常丰富，不利于一般组织工程骨的长久存活)。
110.注：方法3优于1优于2。
111.(2)bmsc接种于脱钙骨材料：
112.选用脱钙骨作为组织工程骨的支架材料。通过脱钙处理，控制脱钙骨材料的含钙量在8-10％左右。脱钙骨材料的大小需根据不同患者的情况来定制。通常较为适宜的脱钙骨基质载体材料的长、宽、高分别为35mm、10mm、5mm，材料的质量为4-5g。脱钙骨样品图如图2所示。
113.成骨诱导后bmsc以3.5
×
107细胞/g浓度接种于脱钙骨材料，培养0.5-8周，依患者下鼻甲萎缩程度决定脱钙骨大小，形成bmsc-脱钙骨复合物组织工程化骨。体外成骨诱导4周后形成的bmsc-脱钙骨复合物如图3所示。
114.(3)bmsc接种于其他材料：
115.以含bfgf的低糖培养基扩增bmsc，待细胞达到一定数量之后，接种于聚羟基乙酸/聚乳酸支架材料，成软骨诱导液培养0.5、1、2、3、4、6、8、12周之后，在体外均可形成软骨样移植物。实验结果如图4所示。
116.体外培养8周后，构建产物形成了瓷白色软骨样外观(图4a)，组织学结果显示典型的软骨陷窝结构(图4b、图4c)，并且表达了丰富的软骨特异基质，包括糖胺聚糖(图4d、图4e，红色)和ii型胶原(图4f、图4g，褐色)。
117.这表明，用成软骨诱导液培养0.5-12周所的构建产物具有典型的软骨组织特征。
118.实施例4：动物移植实验
119.将实施例3制备的bmsc-聚羟基乙酸/聚乳酸支架材料的软骨样移植物(培养时间为0.5、1、2、3、4、6、8、12周)，分别植入裸鼠皮下，12周后发育而成的组织工程骨样本。取出所述样本，进行检测。
120.结果如图5a所示。软骨样移植物在体外是组织工程软骨，植入体内之后bmsc发生终末骨化，最终形成了组织工程骨(硬骨)；图5b为5a的组织学染色，可见典型的骨样组织结构。
121.其中：图5a为大体观：体外再生的组织工程软骨，植入皮下非软骨再生微环境之后，可发育为骨样组织；
122.图5b为he染色：组织学染色结果显示了典型的骨样结构。
123.将bmsc-复合脱钙骨体外成骨诱导4周后形成的组织工程骨(图3)，植入裸鼠皮下。
124.结果表明，4-8周发育后形成组织工程骨组织。其中，一个6周发育后所形成组织工程骨组织样品示于图6。
125.体外再生的组织工程软骨植入皮下环境中(非软骨再生微环境)，组织工程软骨发生异位骨化，形成组织工程骨。下鼻甲缺损部位属于非软骨再生微环境，经成软骨诱导的bmsc-脱钙骨复合物在该环境中可发生异位骨化形成组织工程骨。
126.图6所示的bmsc-脱钙骨复合物样品的组织学染色如图7所示。结果表明，所述bmsc-脱钙骨复合物样品具有典型的骨样结构。图7较图5b拥有骨组织特异性的骨小梁结构，更加符合天然骨组织的组织结构。
127.此外，成软骨诱导液培养时间0.5-8周的构建产物的终末骨化较为充分，可形成硬度合适的硬骨。当成软骨诱导液培养时间≥12周时，所构建产物仍具有软骨组织特征，然而作为下鼻甲重建的移植物植入体内后，不易通过软骨内骨化发生终末骨化。
128.这提示，采用0.5周-4周(或3-30天，或7-28天)的构建产物是优选的，因为一方面移植时为软骨状，便于移植操作；另一方面，移植物在移植后易于通过软骨内骨化发生终末骨化，形成形状和硬度与天然下鼻甲更为接近。
129.(注：体外成软骨诱导的时间如果超过8周，则会降低移植物在体内发生异位骨化的几率)。
130.实施例5：下鼻甲重建
131.组织工程骨体外培养1-3周左右，待细胞与生物材料附着良好后，鼻内镜下切开鼻腔黏膜，分离鼻粘膜和骨质，形成植入腔，将组织工程化骨体修成合适形状后植入志愿者下鼻甲内或鼻腔外侧壁相当于下鼻甲部位。
132.结果：图8显示志愿者的症状改善明显，显著影像学数据及主观量表评分均有显著改善。
133.结果说明由于移植物为软骨状，因此便于移植手术；另一方面，本发明的移植物在移植后易于通过软骨内骨化发生终末骨化，最终的形成形状和硬度与天然下鼻甲更为接近。
134.讨论：
135.本发明采用的bmsc细胞复合的生物材料有诸多优点：
136.(1)细胞拥有多项分化潜能，在特定分化环境中可分化为不同的组织。因此其在鼻黏膜环境中可定向分化为黏膜组织，以细胞替代的方式进行组织修复。
137.(2)干细胞具有一定的免疫调节作用。可以防止t淋巴细胞的不适当激活，抑制t细胞增殖，抑制t细胞向th1、th17分化。此外，可以通过产生ido分解代谢物来对t细胞进行免疫抑制。同时，干细胞可以将树突状细胞转化为耐受性表型，干细胞产生的hla-g5和b7-h4可使效应t细胞向treg(调节性t细胞)分化，维持t细胞静止状态和调节t细胞亚型平衡。干细胞也可抑制b细胞的活化和功能，通过旁分泌的方式将这些细胞阻滞在细胞周期的g0/g1期，从而抑制b细胞的增殖；也可通过下调b淋巴细胞诱导成熟蛋白-1(blimp-1)的mrna表达来抑制b细胞向浆细胞的分化。因此，干细胞在组织修复过程中可产生免疫耐受微环境，从而中断免疫反应，减少局部微环境的免疫炎症反应，有利于黏膜组织的修复。
138.(3)相对于无生物活性的假体植入，或羟基磷灰石这类的无细胞负载植入，干细胞在黏膜再生方面具有其显著优势。单纯假体植入或无细胞负载植入都无法实现干细胞微环境所产生的免疫调节作用，进而降低植入后鼻中隔黏膜再生效率，影响患者预后。
139.与其他材料对比，如使用自体骨、或使用无细胞移植物羟基磷灰石修复：自体骨为自体来源无免疫原性，但其来源有限，对于患者会造成二次伤害，部分患者难以接受；以羟基磷灰石等生物陶瓷为代表的无细胞植入物虽可改善鼻甲状态，改善通气量及生理结构，但其对于鼻黏膜修复并无明显效果。bmsc-聚羟基乙酸/聚乳酸的骨移植物，移植后降解会产生酸性降解产物，会干扰下鼻甲的再生。
140.与现有技术相比，本发明的bmsc-脱钙骨的骨移植物具有一定柔韧度，便于修剪为适宜大小的移植物。此外，本发明的移植物具有优异的力学强度特性，并且移植后不会产生酸性降解产物，并且通过提供利于骨再生的微环境使得本发明的移植物更易于通过软骨内骨化发生终末骨化，因此有助于形成性能(如硬度等)符合要求的下鼻甲。
141.因此，本发明用于下鼻甲重建的组织工程骨移植物具有显著的修复效果，具有安全性高、相容性好、可塑性强、修复效果优异等特点。
142.在本发明提及的所有文献都在本技术中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本技术所附权利要求书所限定的范围。