一种蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物及其应用

1.本发明涉及昆虫食诱剂技术领域，具体涉及一种蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物及其应用。


背景技术：

2.冬虫夏草是中国著名的中药材，具有补肾益肺、止血化痰的功效，还具有调节免疫、抗肿瘤、抗氧化、抗病毒等生理活性，是治疗和保健佳品。国内外对冬虫夏草的需求量日益增加，但冬虫夏草的分布区域有限，生长时间长，天然产量供不应求，加之人们过度采挖、气候变暖等因素使得冬虫夏草生长的生态环境遭到破坏，导致虫草分布范围缩减、产量明显减少。
3.蝙蝠蛾是冬虫夏草的主要寄主，属于鳞翅目(lepidoptera)、蝙蝠蛾科(hepialidae)，为完全变态昆虫，其幼虫历期最长。冬虫夏草人工培育过程中，寄主蝙蝠蛾昆虫的规模化饲养是关键技术。目前蝙蝠蛾昆虫的饲料主要采自天然植物，如胡萝卜、珠芽蓼、鹅绒委陵菜、苹果、马铃薯等。但是，蝙蝠蛾幼虫对食物的取食效率不高。如果在饲养过程中加入诱导幼虫取食的化合物，提高幼虫的取食效率，将极大地促进蝙蝠蛾人工培育技术的升级。但是，目前未见蝙蝠蛾幼虫食诱剂的报道。
4.仅投喂饲料饲养时，蝙蝠蛾幼虫会出现拒食期，取食效率难以提高。相较于仅投喂饲料的方法，添加食诱剂可针对性和持效性地提升幼虫对饲料的取食效率，且操作简单。食诱剂还可与人工饲料配合使用，不仅能提高幼虫取食效率，也能降低冬虫夏草寄主昆虫饲养成本。
5.因此，冬虫夏草人工繁育产业需要一种含有蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物的诱芯，诱导幼虫及时取食大量饲料，以便提高幼虫的取食效率、减少饲养周期，从而降低饲养成本。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供蝙蝠蛾幼虫的食诱剂组合物及其应用，提高人工培育蝙蝠蛾幼虫的取食效率，从而降低蝙蝠蛾幼虫的饲养成本，促进冬虫夏草产业化。本发明还提供所述食诱剂组合物在引诱蝙蝠蛾幼虫取食中的应用和含有该食诱剂组合物的诱芯。
7.本发明的第一个目的是提供一种蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物，包括以下组分：邻苯二甲酸二丁酯、十五烷、亚油酸乙酯、石竹素、对异丙基甲苯。
8.优选地，所述的食诱剂组合物，包括以下重量份的组分：邻苯二甲酸二丁酯1.5-4份、十五烷0.3-1份、亚油酸乙酯1-3份、石竹素1-1.5份、对异丙基甲苯2-2.5份。
9.优选地，所述的食诱剂组合物包括以下重量份的组分：邻苯二甲酸二丁酯3.3份、十五烷0.7份、亚油酸乙酯2.5份、石竹素1.3份、对异丙基甲苯2.2份。
10.本发明的第二个目的是提供上述的食诱剂组合物在吸引蝙蝠蛾幼虫取食中的应用。
11.优选地，所述的蝙蝠蛾幼虫为4龄期的蝙蝠蛾幼虫。
12.优选地，所述应用包括将所述食诱剂施加到空白的诱芯上。
13.优选地，将所述的食诱剂组合物添加至饲料中。
14.更优选地，包括以下步骤：将所述的食诱剂组合物溶解于正己烷中，制成多组分协同剂的正己烷溶液，均匀滴加至饲料上，放置待正己烷挥发殆尽后用于饲喂。
15.更优选地，每g饲料添加100μg的食诱剂组合物。
16.更优选地，所述的饲料包括以下重量份的成分：珠芽蓼根75份、黄豆粉25份、麸皮25份、酵母粉15份、蔗糖10份、干酪素15份、琼脂10份、水500份、氯化胆碱0.1份、抗坏血酸4.5份、山梨酸3份、泥泊金3份和复合维生素8份。
17.与现有技术相比，本发明的优势在于：
18.(1)本发明提供的蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物，多种成分按配比共同用于吸引幼虫取食，吸引效果明显增强，吸引率达60％以上。
19.(2)添加本发明食诱剂组别幼虫的15日增重率达18.8％，显著高于仅添加溶剂的对照组11.3％和空白组1.7％。
20.(3)本发明提供的食诱剂成分价格低廉，使用简便，从而降低蝙蝠蛾幼虫的饲养成本，有利于促进冬虫夏草产业化。
附图说明
21.图1为蝙蝠蛾幼虫食诱剂的室内试验结果，1-5为使用单一化合物所制诱芯的效果，m为使用自配蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物诱芯的效果，n1-n3为使用天然气味所制诱芯的效果；横坐标表示蝙蝠蛾幼虫数量占每组总数的百分比，选择处理的幼虫数量百分比由黑色柱形图表示，选择对照的幼虫数量百分比由灰色柱形图表示，对处理和对照都没有选择的幼虫数量百分比由白色柱形图表示；每组数据经卡方统计检验，差异显著的用*标记，用于表示p＜0.05，即所用食诱剂对蝙蝠蛾幼虫具有显著的吸引效果。
22.图2为蝙蝠蛾幼虫食诱剂的室内饲喂试验结果，白色柱图为空白对照，灰色为溶剂对照，黑色为食诱剂处理。每组数据经配对t检验其与0天幼虫体重的差异，差异显著的用*标记，用于表示p＜0.05，即所用食诱剂对蝙蝠蛾幼虫具有显著的增重效果。
具体实施方式
23.下面结合具体实施方式对本发明进行进一步的详细阐述，提供的实施例仅为了阐明本发明，而不是为了限制本发明的范围。
24.实施例1本发明食诱剂组合物对蝙蝠蛾幼虫的诱食效率
25.2021年9月16日在广东省科学院动物研究所资源昆虫与生物工程研究中心进行食诱剂吸引蝙蝠蛾幼虫的室内实验。
26.食诱剂组分为邻苯二甲酸二丁酯、十五烷、亚油酸乙酯、石竹素和对异丙基甲苯，纯度均为100％。
27.以正己烷为溶剂，分别配制邻苯二甲酸二丁酯、十五烷、亚油酸乙酯、石竹素和对异丙基甲苯溶液，浓度为10毫克/毫升，将上述化合物200微升分别滴加于使用正己烷清洗过的反口橡胶塞(杭州费洛蒙公司产品)的隔片上，待正己烷挥发后即制得食诱剂诱芯。将制成的食诱剂诱芯装入铝箔内密封，于-20℃下保存。
28.按照表1中的组成混合各成分溶解于正己烷中，制成多组分协同剂的正己烷溶液，多组分的混合物总浓度为10毫克/毫升，每毫升溶液含邻苯二甲酸二丁酯3.3毫克、十五烷0.7毫克、亚油酸乙酯2.5毫克、石竹素1.3毫克和对异丙基甲苯2.2毫克。滴加200微升混合液于使用正己烷清洗过的反口橡胶塞的隔片上，待正己烷挥发后即制得食诱剂诱芯。将制成的多组分的食诱剂诱芯装入铝箔内密封，于-20℃下保存，即获得组合物诱芯。
29.表1多组分食诱剂的组成
[0030][0031][0032]
以正己烷为萃取剂，分别萃取鹅绒委陵菜、胡萝卜、珠芽蓼的天然挥发性气味，24小时后经无水氯化钙脱水，将所制得的含天然气味的正己烷溶液200微升分别滴加于使用正己烷清洗过的橡胶塞的隔片上，待正己烷挥发后即制得天然气味食诱剂诱芯。将制成的食诱剂诱芯装入铝箔内密封，于-20℃下保存。
[0033]
挑选4龄期的蝙蝠蛾(thitarodes larva)幼虫放置于培养皿(直径＝15厘米)中，置于10℃下饥饿2小时。沿培养皿内壁随机放置一枚单一组分或组合诱芯，对侧放置一枚滴加过正己烷的诱芯作为对照。用镊子小心夹取一头蝙蝠蛾幼虫置于培养皿中央，盖上皿盖，记录幼虫对诱芯的选择情况，记录总时长3分钟。每测定5头幼虫更换诱芯，每个诱芯对应一个培养皿。如果蝙蝠蛾幼虫被食诱剂吸引，蝙蝠蛾幼虫会爬行至滴加有食诱剂组分的诱芯处。对每种食诱剂，设置30头幼虫作为重复。
[0034]
试验结果见表2。1-5组分别为使用单一化合物邻苯二甲酸二丁酯、十五烷、亚油酸乙酯、石竹素和对异丙基甲苯所制诱芯的效果；m组为使用自配蝙蝠蛾幼虫食诱剂组合物诱芯的效果；n1-n3组分别为使用鹅绒委陵菜、胡萝卜、珠芽蓼天然气味所制诱芯的效果。从表中可以看出，使用天然气味诱芯对蝙蝠蛾幼虫的吸引率为33.3％-43.3％；在使用了含有本实施例的蝙蝠蛾幼虫的食诱剂诱芯后，单一化合物诱芯对蝙蝠蛾幼虫的吸引率达33.3-50.0％，而组合物诱芯的吸引效果明显增强，吸引率达66.7％。(吸引率＝选择处理的幼虫数/幼虫总数
×
100％)
[0035]
对所有试验数据进行卡方统计检验，p＜0.05时表示所用诱芯对蝙蝠蛾幼虫的引诱性具有显著差异，结果见图1。
[0036]
表2利用表1中诱芯进行的选择试验数据
[0037]
处理组别12345mn1n2n3选择处理(/个)121015131120111013选择对照65810877710没有选择12157711312137
[0038]
实施例2本发明食诱剂组合物对蝙蝠蛾幼虫体重的影响
[0039]
2021年11月1日在广东省科学院动物研究所资源昆虫与生物工程研究中心进行食诱剂吸引蝙蝠蛾幼虫的室内实验。
[0040]
食诱剂组分为邻苯二甲酸二丁酯、十五烷、亚油酸乙酯、石竹素和对异丙基甲苯，纯度均为100％。
[0041]
按照表1中的组成混合各成分溶解于正己烷中，制成多组分协同剂的正己烷溶液，即得食诱剂溶液，多组分的混合物总浓度为10毫克/毫升，每毫升溶液含邻苯二甲酸二丁酯3.3毫克、十五烷0.7毫克、亚油酸乙酯2.5毫克、石竹素1.3毫克和对异丙基甲苯2.2毫克。将人工饲料(包括珠芽蓼根75份、黄豆粉25份、麸皮25份、酵母粉15份、蔗糖10份、干酪素15份、琼脂10份、水500份、氯化胆碱0.1份、抗坏血酸4.5份、山梨酸3份、泥泊金3份和广州凯欣药业有限公司产维生素8份，其制备方法是将各成分按其含量混合均匀)切割为重量为1克立方块，使用食诱剂溶液10微升从顶部均匀滴加至饲料上，放置5分钟待正己烷挥发殆尽后用于饲喂试验。对照组分别使用不处理饲料(空白对照)和等体积正己烷处理的饲料(溶剂对照)进行。
[0042]
选择发育良好的小金蝠蛾(thitarodesxiaojinensis)4龄幼虫，饥饿1天后单独放置于9cm培养皿中，用以上述饲料饲养，饲养温度为10℃。于试验首日称重每头幼虫体重，试验设置15天后再次称重，考察处理间幼虫体重变化情况。对每种处理，设置15头幼虫作为重复。
[0043]
试验结果见表3。使用体重增长率＝(处理后体重-处理前体重)/处理前体重
×
100％公式计算每种处理15天小金蝠蛾幼虫增重率，结果发现，添加食诱剂组别幼虫的15日增重率达18.8％，显著高于溶剂组11.3％和空白组1.7％。
[0044]
表3小金蝠蛾4龄幼虫饲喂试验结果(数据单位：克)
[0045][0046]
对所有试验数据进行配对t检验，p＜0.05时表示所用诱芯对蝙蝠蛾幼虫的引诱性具有显著差异，结果见图2。
[0047]
实施例3
[0048]
本实施例以不同重量配比制备食诱剂组合物，具体为：邻苯二甲酸二丁酯1.5份、十五烷0.3份、亚油酸乙酯1份、石竹素1份、对异丙基甲苯2份。制备方法：混合上述各成分溶解于正己烷中，制成多组分协同剂的正己烷溶液。
[0049]
实施例4
[0050]
本实施例以不同重量配比制备食诱剂组合物，具体为：邻苯二甲酸二丁酯4份、十五烷1份、亚油酸乙酯3份、石竹素1.5份、对异丙基甲苯2.5份。制备方法：混合上述各成分溶解于正己烷中，制成多组分协同剂的正己烷溶液。
[0051]
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。