一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法和培养基与流程

技术特征：
1.一种菊叶薯蓣组培苗的脱分化培养基，其特征在于，所述脱分化培养基以改良ms培养基为基础培养基，包括以下浓度的组分：6-ba 1～3mg
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l-1
，naa 0.1～0.3mg
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，蔗糖2～4wt％和琼脂4～5g
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，所述脱分化培养基的ph为5～6，所述改良ms培养基的组分包括：kno314～16mmol/l，ca(no3)214～16mmol/l，(nh4)2so
4 7～8mmol/l和kcl 4～6mmol/l。2.一种菊叶薯蓣组培苗的增殖培养基，其特征在于，所述增殖培养基以ms培养基为基础培养基，包括以下浓度的组分：6-ba 1～3mg
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l-1
，naa0.1～0.3mg
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，谷氨酸0.04～0.06wt％，蔗糖2～4wt％和琼脂4～5g
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，所述增殖培养基的ph为5～6。3.一种菊叶薯蓣组培苗的再分化培养基，其特征在于，所述再分化培养基以ms培养基为基础培养基，包括以下浓度的组分：6-ba 1～3mg
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l-1
，naa 0.3～0.5mg
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，维生素e 0.005～0.015wt％，硒代半胱氨酸0.02～0.03wt％，蔗糖2～4wt％和琼脂4～5g
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l-1
，所述再分化培养基的ph为5～6。4.一种菊叶薯蓣组培苗的生根培养基，其特征在于，所述生根培养基以改良ms培养基为基础培养基，包括以下浓度的组分：iba 0.5～1.5mg
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l-1
，naa 0.05～0.15mg
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和蔗糖2～4wt％，所述生根培养基的ph为5～6，所述改良ms培养基的组分包括：kno
3 14～16mmol/l，ca(no3)
2 14～16mmol/l，(nh4)2so
4 7～8mmol/l和kcl 4～6mmol/l。5.一种菊叶薯蓣组培苗快繁的培养基组合，其特征在于，包括权利要求1～4所述的脱分化培养基、增殖培养基、再分化培养基和生根培养基。6.一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)将菊叶薯蓣根状茎种植于基质土中进行脱菌培养，得菊叶薯蓣外植体；(2)对所述菊叶薯蓣外植体依次进行消毒和水洗，然后置于权利要求1所述菊叶薯蓣组培苗脱分化培养基中进行脱分化培养，得菊叶薯蓣胚性愈伤组织；(3)将所述菊叶薯蓣胚性愈伤组织置于权利要求2所述菊叶薯蓣组培苗增殖培养基中进行增殖培养，然后置于权利要求3所述菊叶薯蓣组培苗再分化培养基中进行再分化培养，得菊叶薯蓣再生苗；(4)将所述菊叶薯蓣再生苗的叶腋转移至权利要求4所述菊叶薯蓣组培苗生根培养基中进行生根培养，得菊叶薯蓣完整再生苗；(5)将所述菊叶薯蓣完整再生苗进行炼苗，然后移栽至育苗土中进行育苗培养，得菊叶薯蓣组培苗。7.根据权利要求6所述的一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法，其特征在于，步骤(1)中所述基质土组分包括营养土和蛭石，所述营养土和蛭石的质量比为2～4:1；所述脱菌培养的光照强度为1500～2500lux，所述脱菌培养的光照周期为15～17h/d，所述脱菌培养的温度为25～30℃，所述脱菌培养的时间为8～12min；所述菊叶薯蓣外植体包括茎、叶片、腋芽和顶芽。8.根据权利要求6或7所述的一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法，其特征在于，步骤(2)中所述消毒包括升汞溶液消毒，所述升汞溶液的质量浓度为0.05～0.15％，所述升汞溶液消毒的时间为5～15min；所述水洗的次数为5～7次；所述脱分化培养的光照强度为1500～2500lux，所述脱分化培养的光照周期为7～9h/d，所述脱分化培养的温度为25～30℃，所述脱分化培养的时间为10～15d。
9.根据权利要求8所述的一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法，其特征在于，步骤(3)中所述增殖培养的光照强度为1500～2500lux，所述增殖培养的光照周期为19～21h/d，所述增殖培养的温度为25～30℃，所述增殖培养的时间为18～22d；所述再分化培养的光照强度为1500～2500lux，所述再分化培养的光照周期为15～17h/d，所述再分化培养的温度为25～30℃，所述再分化培养的时间为28～32d。10.根据权利要求9所述的一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法，其特征在于，步骤(4)中所述生根培养的光照强度为1500～2500lux，所述生根培养的光照周期为15～17h/d，所述生根培养的温度为25～30℃，所述生根培养的时间为28～32d；步骤(5)中所述炼苗的时间为1～3d，所述炼苗的温度为20～30℃，所述炼苗的湿度为50～70％；步骤(5)中所述育苗土组分包括草炭土；步骤(5)中所述育苗培养的光照强度为1500～2500lux，所述育苗培养的光照周期为15～17h/d，所述育苗培养的温度为25～30℃，所述育苗培养的时间为8～12d。

技术总结
本发明属于植物组织培养技术领域，本发明提供了一种菊叶薯蓣组培苗的快繁方法和培养基。本发明以菊叶薯蓣腋芽作为外植体，在改良MS 2mg/L6-BA 0.2mg/LNAA的培养基上促使产生愈伤组织，在MS 2mg/L6-BA 0.2mg/LNAA 0.05％谷氨酸的培养基上促使愈伤组织增殖，在MS 2mg/L 6-BA 0.4mg/L NAA 0.01％维生素E 0.025％硒代半胱氨酸促使丛生芽的再分化，在改良MS 1mg/L IBA 0.1mg/LNAA促使腋芽产生完整的根部结构。本发明为墨西哥菊叶薯蓣的工厂化规模育种提供了技术基础，也为其基因工程改良和分子育种奠定了技术基础。良和分子育种奠定了技术基础。良和分子育种奠定了技术基础。


技术研发人员：宋文芹 田卫华
受保护的技术使用者：中植联合生物技术研究院（北京）有限公司 天津天药药业股份有限公司 任茂宾 张滢滢
技术研发日：2022.05.05
技术公布日：2022/7/8