一种装载IL-33的DNA水凝胶的制备方法及其产品与应用

技术特征：
1.一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：s1)备料：包括重组小鼠il-33和如seq id no.1、seq id no.2、seq id no.3、seq id no.4及seq id no.5所示的5种单链dna；s2)溶解：将s1)中所述的5种单链dna各自分别溶解于pbs缓冲液中；s3)构建单体：将s2)中通过如seq id no.1、seq id no.2和seq id no.3所示的单链dna分别溶解于pbs缓冲液得到的溶解液混合后得到的混合液依次通过恒温处理、降温处理进行反应得到y单体，将s2)中通过如seq id no.4和seq id no.5所示的单链dna分别溶解于pbs缓冲液得到的溶解液混合后得到的混合液依次通过恒温处理、降温处理进行反应得到l单体；s4)孵育和混合：将s3)中得到的y单体与重组小鼠il-33混合孵育后得到产物a，再将s3)中得到的l单体与重组小鼠il-33混合孵育后得到产物b，然后将产物a和产物b混合。2.根据权利要求1所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述s2)中的pbs缓冲液为1xpbs缓冲液。3.根据权利要求2所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述pbs缓冲液中添加有1～2mmol/l的mgcl2，所述pbs缓冲液的ph为7.2～8.0，s2)中将所述的5种单链dna各自分别溶解于pbs缓冲液后其最终浓度均为1～2mmol/l。4.根据权利要求1所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述s3)中的恒温处理均为：将混合液在95℃的条件下静置1～3min；所述s3)中的降温处理均为：将恒温处理后的混合液在95℃的条件下，每0.06s降低0.1℃，直至温度降低至25℃，然后将得到的y单体和l单体进行贮存，贮存温度为4～8℃。5.根据权利要求1所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述通过如seq id no.1、seq id no.2和seq id no.3所示的单链dna分别溶解于pbs缓冲液得到的溶解液混合后得到的混合液的浓度为250～300μmol/l，所述通过如seq id no.4和seq id no.5所示的单链dna分别溶解于pbs缓冲液得到的溶解液混合后得到的混合液的浓度为375～500μmol/l。6.根据权利要求1所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法或液相色谱-质谱联用的测定方法对s3)中构建的y单体或/和l单体进行处理，用于判断y单体或/和l单体是否构建成功。7.根据权利要求1所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述s3)中y单体的浓度与l单体的浓度比为2:3，所述s4)中y单体与小鼠il-33的体积比为24:1，l单体与小鼠il-33的体积比为24:1。8.根据权利要求7所述的一种转载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述s1)中重组小鼠il-33的浓度为0.5～1ng/μl。9.根据权利要求1所述的一种装载il-33的dna水凝胶的制备方法，其特征在于，所述s4)中在20～30℃的条件下将产物a和产物b通过摇床振荡1min～2min混合。10.一种装载il-33的dna水凝胶，其特征在于，通过权利要求1～9任一所述的制备方法得到。11.一种装载il-33的dna水凝胶在伤口治疗中的应用，其特征在于，所述装载il-33的dna水凝胶通过权利要求1～9任一所述的制备方法得到。

技术总结
本发明公开一种装载IL-33的DNA水凝胶的制备方法及其产品与应用，属于药物制剂领域。目的是提供一种制备工艺简单的装载IL-33的DNA水凝胶的制备方法，其产品应用于伤口愈合中时具有缓释、抗氧化及自我降解能力。技术方案是供一种装载白介素IL-33的DNA水凝胶的制备方法，包括以下步骤：S1)备料；S2)溶解；S3)构建Y单体及L单体；S4)孵育和混合。S4)孵育和混合。S4)孵育和混合。


技术研发人员：郑晓峰 王成世 李威 王政昊
受保护的技术使用者：四川大学华西医院
技术研发日：2022.03.25
技术公布日：2022/6/28