一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制作方法

技术特征：
1.一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针，其特征在于为乳腺癌特异靶向分子探针naerf4@nayf4@pol6326，以特异性识别乳腺癌，balixafortide作为靶向肽，偶联生物相容性好、nir
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b发光的稀土纳米颗粒；所述靶向分子探针以稀土纳米颗粒naerf4为内核，表面覆盖nayf4，合成稀土核壳纳米颗粒naerf4@nayf4(ernps),在nayf4层的外表面通过修饰paa以提供羧基，通过edc/nhs活化羧基，偶联靶向cxcr4的肿瘤特异性导向肽balixafortide(pol6326)，从而合成nir
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b发光的稀土纳米探针ernps@pol6326。2.如权利要求1所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)高温共沉淀合成法合成naerf4核；2)外延生长法合成稀土核壳纳米材料naerf4@nayf4(ernps)；3)酸洗法去除ernps上的油酸配体,增加材料的亲水性；4)ernps表面修饰聚丙烯酸(paa)；5)edc/nhs活化ernps@paa上的羧基后连接靶标pol6326，即得所述用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针。3.如权利要求2所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制备方法，其特征在于在步骤1)中，所述高温共沉淀合成法合成naerf4核的具体步骤为：在容器中加入油酸(oa)和十八烯(ode)，再加入er(ch3coo)3混合搅拌，在室温下抽真空；升温至110～150℃反应后冷却至40～60℃；加入0.6～1.0m氟化铵甲醇溶液、0.4～0.6m氢氧化钠甲醇溶液反应；打开容器的玻璃塞，升温至100～150℃，完全去除甲醇；然后抽真空通n2，再升温至280～320℃反应；冷却至室温，加入过量乙醇，离心去上清，再加入环己烷和乙醇(1︰2)洗涤，再次离心；分散在环己烷中。4.如权利要求2所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制备方法，其特征在于在步骤2)中，所述外延生长法合成稀土核壳纳米材料naerf4@nayf4(ernps)的具体步骤为：在容器中加入油酸(oa)和十八烯(ode)，再加入y(ch3coo)3混合搅拌，在室温下抽真空后，升温至110～150℃反应；然后冷却至40～60℃；加入步骤1)合成的naerf4核心颗粒，再加入0.7～0.9m氟化铵甲醇溶液、0.4～0.6m氢氧化钠甲醇溶液，40～60℃反应；打开容器的玻璃塞，升温至100～150℃，完全去除甲醇；再次抽真空，通n2，升温至280～320℃反应；然后冷却至室温，加入过量乙醇，离心，去上清，加入环己烷和乙醇(1︰2)洗涤，再次离心后分散在环己烷中。5.如权利要求2所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制备方法，其特征在于在步骤3)中，所述酸洗法去除ernps上的油酸配体的具体步骤为：ernps离心后弃去上清，沉淀中加入5ml ph＝1的盐酸在超声清洗仪中重悬，采用磁力搅拌器搅拌50分钟后，滴加适量乙醚，于通风橱内室温静置萃取；弃去上层乙醚，再次滴加乙醚，于通风橱内室温静置萃取；弃去上层乙醚，离心，超纯水洗涤、离心3次；在超纯水中重悬。6.如权利要求2所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制备方法，其特征在于在步骤4)中，所述ernps表面修饰聚丙烯酸(paa)的具体步骤为：按去除油酸配体后的ernps︰聚丙烯酸(paa)为1︰2的比例称取聚丙烯酸，充分溶解在2～4ml超纯水中，加入步骤3)去除油酸配体后的ernps，超声，离心去上清，超纯水洗涤，沉淀在5ml超纯水
中重悬，得ernps@paa。7.如权利要求2所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针的制备方法，其特征在于在步骤5)中，所述edc/nhs活化ernps@paa上的羧基后连接靶标pol6326的具体步骤为：取1ml步骤4)合成的ernps@paa溶解到mes缓冲液中，加入10～20mg edc搅拌0.5h；加入10～20mg nhs试剂,搅拌1h；离心后，弃去上清，0.9％生理盐水重悬；加入pol6326,4℃搅拌24h；离心弃上清，用0.9％生理盐水洗涤、离心，分散到1ml的0.9％生理盐水里，得到目标探针ernps@pol6326。8.如权利要求1所述一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针在制备用于无创评估乳腺癌sln转移状态的示踪剂中的应用。9.如权利要求8所述应用，其特征在于所述应用的具体方法为：在局部注射所述靶向分子探针时，探针可通过淋巴管进入前哨淋巴结；当前哨淋巴结无乳腺癌癌转移时，分子探针ernps@pol6326无法长时间滞留在前哨淋巴结中；当前哨淋巴结出现乳腺癌癌转移时，分子探针ernps@pol6326可通过结合癌细胞表面的cxcr4受体而滞留在前哨淋巴结中；所述探针在808nm激光的激发下于nir
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b区有一个强的发射光，通过近红外二b区成像观察前哨淋巴结的荧光信号强度，当出现强荧光时可认为前哨淋巴结存在癌转移。

技术总结
一种用于无创评估乳腺癌前哨淋巴结转移的靶向分子探针，涉及医学技术领域。以稀土纳米颗粒NaErF4为内核，表面覆盖NaYF4，合成稀土核壳纳米颗粒NaErF4@NaYF4(ErNPs),在NaYF4层的外表面通过修饰PAA以提供羧基，通过EDC/NHS活化羧基，偶联靶向CXCR4的肿瘤特异性导向肽Balixafortide(POL6326)，从而合成NIR


技术研发人员：张国君 朱媛媛 张云 宋良 张永渠 黄文河 刘婉玲
受保护的技术使用者：厦门稀土材料研究所
技术研发日：2022.03.10
技术公布日：2022/6/24