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使用抗-IL-13抗体治疗IL-13活性在其中有害的疾病的方法与流程

2022-06-16 02:44:36 来源:中国专利 TAG:

使用抗-il-13抗体治疗il-13活性在其中有害的疾病的方法
1.本技术是申请日为2017年4月27日,申请号为201780040303.8,发明名称为“使用抗-il-13抗体治疗il-13活性在其中有害的疾病的方法”的发明专利申请的分案申请。
2.本技术要求2016年4月27日提交的美国临时申请号62/328,539的优先权,其整个内容明确地通过引用并入本文。
技术领域
3.本发明涉及疾病治疗的领域,特别是治疗il-13活性在其中有害的疾病(包括嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)和哮喘)的方法。


背景技术:

4.嗜酸性粒细胞病症构成广范围的经常特征在于嗜酸性粒细胞的数目和/或活性的异常的病症(被称作嗜酸性粒细胞增多症)。该畸变经常与许多涉及胃肠道的变应性病症一起观察到,且有时构成所述变应性病症的病理学基础。最近已经在医学文献中表征的这样的嗜酸性粒细胞性胃肠道病症(egid)的例子包括嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe或ee)、嗜酸性粒细胞性胃炎(eog或eg)、嗜酸性粒细胞性十二指肠炎(ed)、嗜酸性粒细胞性空肠炎(ej)、嗜酸性粒细胞性回肠炎(ei)和嗜酸性粒细胞性结肠炎(ec)。参见,例如,rothenberg等人,allergyclin.immunol.,113:11-28(2004);furata等人,gastroenterology133:1342-63(2007);和talley等人.gut31:54-8(1990)。
5.已经研究得最多的egid是eoe,部分地因为逐渐增加的频率而做出了诊断(furata等人,gastroenterology133:1342-63(2007))。eoe最频繁地特征在于与食管功能病症有关的征象和征状(liacouras等人,j.allergyclin.immunol.128:3-20(2011))。在成年人中,这些包括吞咽困难、胸痛、食物嵌塞、呕吐和上腹疼痛(croese等人,gastrointest.endosc.,58:516-522(2003))。在儿童中的临床表现随年龄变化。婴儿经常出现进食困难和发育停滞,而学龄儿童可能表现出增加的呕吐和胸痛(liacouras等人,2011;出处同上)。
6.认为eoe具有变应性病原学,70%的患者具有当前或既往的变应性疾病或者对食物或其它变应原的阳性皮肤点刺试验(blanchard等人,gastrointest.endosc.clin.n.am.,18:133-43(2008))。eoe的征状通常对质子泵抑制剂(ppi)疗法具有抗性,尽管患者的小子集没有表现出对ppi的临床病理学应答(molina-infante等人,clin.gastroenterol.hepatol.,9:110-117(2011))。局部皮质类固醇(在eoe中“核准标示以外”使用)可以有效地减轻食管中的嗜酸性粒细胞负荷。例如,临床研究已经证实,氟替卡松和布地奈德可以在具有eoe的儿童和成年人中有效地作为用于减轻嗜酸性粒细胞负荷和征状的诱导治疗(schaefer等人,clin.gastroenterol.hepatol.,6:165-173(2008);konikoff等人,gastroenterology,131:1381-1391(2006);dohil等人,gastroenterology,139:418-429(2010);straumann等人,gastroenterology,139:1526-1537(2010))。但是,由于eoe的慢性性质和类固醇试剂的许多副作用,绝大多数患
者、特别是儿童被迫保持质子泵抑制剂,尽管中至低水平的有效性伴随此类试剂。
7.白介素-13 (il-13)已经涉及进前述胃肠道病症。此外,炎症性细胞因子(诸如il-13)对于其它变应性/炎性疾病而言也是有关的。例如,认为il-13在人哮喘的发病机制中是关键性的,因为升高的水平的il-13存在于哮喘患者的肺中,并且这些水平与疾病严重程度相关。同样地,增加的il-13存在于具有中等至严重哮喘的患者的痰和肺活组织检查中,所述患者用吸入型皮质类固醇(ics)或全身性皮质类固醇治疗,但是继续具有征状。此外,人il-13遗传多态性与哮喘和特应性有关(变应性超敏反应)。
8.由于人il-13在多种人病症中的作用,已经设计了治疗策略来抑制或抵消il-13活性。但是,本领域中仍然需要改进的il-13抑制剂,其在治疗和改善疾病(诸如egid和哮喘)中是有用的且有效的。此外,发现治疗剂的最佳剂量和施用途径是一个复杂的过程,其涉及具有数百患者的大量数据和临床试验的发明性输入、分析;这不是常规的过程。因此,存在未得到满足的鉴别治疗剂和最佳剂量方案的需要,其允许有效地治疗嗜酸性粒细胞病症(诸如eoe)和炎性疾病(诸如哮喘)。


技术实现要素:

9.本发明提供了使用抗-il-13抗体或其抗原结合部分有效地治疗il-13活性在其中有害的疾病(诸如哮喘和嗜酸性粒细胞病症,例如,嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe或ee))的问题的解决方案。具体地,本发明提供了具有改善的治疗效果的定量施用方案。例如,要求保护的使用抗-il-13抗体的治疗方法被证实令人惊讶地和显著地减少具有eoe的患者的食管活组织检查中的食管嗜酸性粒细胞计数。
10.在一个方面,本发明提供了治疗主体中的嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)的方法,所述方法包括每周给所述主体皮下地施用约180 mg至约360 mg的il-13抗体或其抗原结合片段,由此治疗所述主体中的eoe。
11.在一个实施方案中,所述il-13抗体或其抗原结合片段结合il-13并阻止il-13和il-13受体之间的相互作用。在一个实施方案中,所述il-13抗体或其抗原结合部分是单克隆抗体或其抗原结合部分。在一个实施方案中,所述il-13抗体或其抗原结合部分是人源化抗体或其抗原结合部分。在一个实施方案中,所述il-13抗体或其抗原结合部分是人抗体或其抗原结合部分。
12.在一个实施方案中,所述il-13抗体或其抗原结合片段是抗体13c5.5或其抗原结合片段。在一个实施方案中,所述13c5.5抗体或其抗原结合片段含有包含seq id no: 2的重链可变区和包含seq id no: 3的轻链可变区。
13.在另一个实施方案中,所述抗-il-13抗体是6a1、3g4、tralokinumab、lebrikizumab、qaz-576、ima-638或ima-026或其抗原结合部分。
14.在一个实施方案中,所述方法包括每周给所述主体皮下地施用约180 mg的il-13抗体或其抗原结合片段。在另一个实施方案中,所述方法包括每周给所述主体皮下地施用约360 mg的il-13抗体或其抗原结合片段。
15.在一个实施方案中,所述方法还包括选择主体的步骤,所述主体表现出至少一种与eoe有关的征状。在一个实施方案中,所述与eoe有关的征状选自食管的嗜酸性粒细胞浸润、食管壁的增厚、拒食、呕吐、腹部疼痛、胃灼热、反胃、吞咽困难和食物嵌塞。
16.在一个实施方案中,所述方法还包括选择也具有选自特应性皮炎、哮喘、变应性鼻炎、变应性结膜炎和它们的组合的疾病或病症的主体。
17.在一个实施方案中,所述选择步骤包括基于升高的与嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)有关的生物标志物的水平来选择主体。在一个实施方案中,所述生物标志物选自食管嗜酸性粒细胞、嗜酸性粒细胞趋化因子-3、骨膜蛋白、血清ige、il-13、il-5、血清胸腺和活化调节的趋化因子(tarc; ccl17)、胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)、血清ecp和嗜酸性粒细胞-衍生的神经毒素(edn)或它们的组合。
18.在一个实施方案中,所述选择步骤包括:基于在食管内窥镜检查术过程中得自主体的活组织检查样品中的平均食管嗜酸性粒细胞计数,选择主体。在一个实施方案中,所述选择步骤包括:基于在食管中每高倍视野(hpf)≥15的高峰嗜酸性粒细胞计数,选择主体。
19.在一个实施方案中,在施用il-13抗体或其抗原结合片段至少16周以后,所述主体表现出每hpf的嗜酸性粒细胞数目从高峰水平的至少50%减少。
20.在一个实施方案中,所述主体是以前尚未经历类固醇疗法的类固醇原初主体。在另一个实施方案中,所述主体是以前已经经历类固醇疗法的人主体。在一个实施方案中,所述主体是以前已经经历类固醇疗法且非类固醇难治的人主体。在另一个实施方案中,所述主体是以前已经经历类固醇疗法且类固醇难治的人主体。
21.在一个实施方案中,将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体至少约16周。在另一个实施方案中,在eoe疾病期间将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体。
22.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定在食管中在5个最发炎的高倍视野(hpf)中测量的平均食管嗜酸性粒细胞计数。在另一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定在食管中在5个最发炎的高倍视野(hpf)中测量的平均食管嗜酸性粒细胞计数。在一个实施方案中,与施用之前的平均食管嗜酸性粒细胞计数相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后平均食管嗜酸性粒细胞计数的减少指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
23.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定吞咽困难临床征状。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定吞咽困难临床征状,其中与施用之前的吞咽困难临床征状相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后吞咽困难临床征状的减少指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
24.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定嗜酸性粒细胞性食管炎活性指数(eesai)并记录为每日征状日志(dsd)。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定嗜酸性粒细胞性食管炎活性指数(eesai)并记录为每日征状日志(dsd),其中与施用之前的eesai相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后eesai的下降指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
25.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定吞咽困难征状问卷调查(dsq)评分。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定dsq评分;其中与施用之前的dsq评
分相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后dsq评分的下降指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
26.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定内窥镜参考评分(eref)。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定eref评分;其中与施用之前的eref评分相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后eref评分的下降指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
27.在一个实施方案中,基于食管中的炎症标志物的存在、食管中的改造标志物的存在或它们的组合,确定eref。在一个实施方案中,基于选自水肿、固定环(fixed ring)、渗出物、沟和狭窄或它们的组合的多个特征的存在或不存在,确定eref。
28.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定所述主体的疾病严重程度总体评估。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定所述主体的疾病严重程度总体评估;其中与施用之前的主体的疾病严重程度总体评估相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后所述主体的疾病严重程度总体评估的下降指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
29.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定临床医师的疾病严重程度总体评估。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定临床医师的疾病严重程度总体评估;其中与施用之前的临床医师的疾病严重程度总体评估相比在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后临床医师的疾病严重程度总体评估的下降指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
30.在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之前,确定组织学等级和平均阶段调节评分(hgmsas)。在一个实施方案中,所述方法包括,在将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体之后,确定hgmsas;其中与施用之前的hgmsas相比在施用所述抗体或其抗原结合部分之后hgmsas的下降指示,所述抗体或其抗原结合部分有效地治疗所述主体。
31.在一个实施方案中,所述方法还包括施用额外试剂。在一个实施方案中,所述额外试剂是类固醇。在一个实施方案中,所述额外试剂是类固醇化合物布地奈德。在一个实施方案中,所述额外试剂选自:治疗剂、成像剂、细胞毒性剂、血管生成抑制剂、激酶抑制剂、共刺激分子阻滞剂、粘附分子阻滞剂、抗-细胞因子抗体或其功能片段;甲氨蝶呤、环孢素、雷帕霉素、fk506、可检测标记物或报告物、tnf拮抗剂、抗-风湿药、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇抗炎药(nsaid)、镇痛剂、麻醉剂、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂、抗银屑病药、皮质类固醇、促蛋白合成类固醇、促红细胞生成素、免疫接种、免疫球蛋白、免疫抑制剂、生长激素、激素替代药物、放射性药物、抗抑郁药、抗精神病药、刺激剂、哮喘药物、β激动剂、吸入的类固醇、口服类固醇、肾上腺素或类似物、细胞因子和细胞因子拮抗剂。
32.在一个方面,本发明提供了用于治疗哮喘的组合物和方法。在一个方面,本发明提供了一种治疗主体的哮喘的方法,所述方法包括每周给所述主体皮下地施用约180 mg至约360 mg的il-13抗体或其抗原结合片段,由此治疗所述主体的哮喘。
33.在一个实施方案中,所述il-13抗体或其抗原结合片段结合il-13并阻止il-13和il-13受体之间的相互作用。在一个实施方案中,所述抗体或其抗原结合部分是单克隆抗体。在一个实施方案中,所述抗体或其抗原结合部分是人源化抗体。在一个实施方案中,所述抗体或其抗原结合部分是人抗体。
34.在一个实施方案中,所述抗体或其抗原结合部分是13c5.5抗体。在一个实施方案中,所述13c5.5抗体或其抗原结合片段含有包含seq id no: 2的重链可变区和包含seq id no: 3的轻链可变区。
35.在另一个实施方案中,所述抗-il-13抗体是6a1、3g4、tralokinumab、lebrikizumab、qaz-576、ima-638或ima-026或其抗原结合部分。
36.在一个实施方案中,所述方法包括每周给所述主体皮下地施用约180 mg的il-13抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中,所述方法包括每周给所述主体皮下地施用约360 mg的il-13抗体或其抗原结合片段。
37.在一个实施方案中,所述哮喘是轻度至中度哮喘。
38.在另一个方面,所述方法还包括选择表现出至少一种与哮喘有关的征状的主体。在一个有关的实施方案中,所述至少一种与哮喘有关的征状选自:粘性粘液或痰的分泌或积累、咳嗽、哮鸣、呼吸短促、胸部紧迫感、胸痛和胸部压迫感。
39.在一个实施方案中,所述主体是人主体。在另一个实施方案中,所述主体是以前尚未经历类固醇疗法的类固醇原初主体。在一个实施方案中,所述主体以前已经经历类固醇疗法。在一个实施方案中,所述主体是以前已经经历类固醇疗法的主体,且所述主体是非类固醇难治的。在另一个实施方案中,所述主体是以前已经经历类固醇疗法的主体,且所述主体是类固醇难治的。
40.在一个实施方案中,每周将所述抗体或其抗原结合片段施用给所述主体持续至少约16周。在另一个实施方案中,在eoe疾病期间每周将所述抗体或其抗原结合部分施用给所述主体。
41.在一个实施方案中,所述方法还包括,在将il-13抗体或其抗原结合片段施用给所述主体之前和之后确定与哮喘有关的生物标志物,其中生物标志物水平的变化指示il-13抗体或其抗原结合片段在治疗所述主体中的效力。
42.在一个实施方案中,所述方法还包括施用额外试剂。在一个实施方案中,所述额外试剂是类固醇。在另一个实施方案中,所述额外试剂是布地奈德。在另一个实施方案中,所述额外试剂选自:治疗剂、成像剂、细胞毒性剂、血管生成抑制剂、激酶抑制剂、共刺激分子阻滞剂、粘附分子阻滞剂、抗-细胞因子抗体或其功能片段;甲氨蝶呤、环孢素、雷帕霉素、fk506、可检测标记物或报告物、tnf拮抗剂、抗-风湿药、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇抗炎药(nsaid)、镇痛剂、麻醉剂、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂、抗银屑病药、皮质类固醇、促蛋白合成类固醇、促红细胞生成素、免疫接种、免疫球蛋白、免疫抑制剂、生长激素、激素替代药物、放射性药物、抗抑郁药、抗精神病药、刺激剂、哮喘药物、β激动剂、吸入的类固醇、口服类固醇、肾上腺素或类似物、细胞因子和细胞因子拮抗剂。
43.本发明的其它特征和优点将从其优选实施方案的下述描述和从权利要求显而易见。引用的参考文献特此通过引用并入。
附图说明
44.本文中描述的实施方案的各种特征和优点可以完全理解为当结合附图考虑时会更好地理解它们:图1显示了在安慰剂组、低剂量(180 mg)治疗组和高剂量(360 mg)治疗组中在基线时和在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)。通过测量来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线平均食管嗜酸性粒细胞计数调节过)的p-值,计算统计显著性。
45.图2(a)显示了相对于用低(180 mg)剂量的rpc4046治疗的主体在安慰剂组中在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)。
46.图2(b)显示了相对于用高(360 mg)剂量的rpc4046治疗的主体在安慰剂组中在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)。
47.图3显示了在第16周时在主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分(关键性次要端点),所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的itt组(随机化的主体,其接受至少一剂的rpc4046)。通过测量来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线复合日志评分调节过)的p-值,计算统计显著性。结果概述在表4中。
48.图4显示了在第16周时在主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分(关键性次要端点),所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的itt组(根据类固醇难治的状态分成小组)。结果概述在表5中。
49.图5显示了在主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分(随时间),所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的itt组。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线复合日志评分调节过)的p-值,确定统计显著性。对于多重比较没有调节p-值。
50.图6显示了在主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分(随时间),所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的非类固醇难治的小组。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线复合日志评分调节过)的p-值,确定统计显著性。对于多重比较没有调节p-值。
51.图7显示了在主体中的(随时间),所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的类固醇难治的小组。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线复合日志评分调节过)的p-值,确定统计显著性。对于多重比较没有调节p-值。
52.图8显示了与安慰剂相比在用口服布地奈德混悬液(ods)治疗的主体中吞咽困难征状问卷调查(dsq)评分从基线的平均变化。条指示标准差(sd)。表6显示了结果的概述。
53.图9显示了在第16周时在主体中的平均嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)内窥镜参考评分(另外的次要端点)。从在基线时和在第16周时的主体中的分析(erefs特征)计算eref总评分。在《0.05的p-值确定统计显著性。
54.图10显示了在第16周时在主体中的平均嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)内窥镜参考评分,如关于炎症标志物(是水肿、渗出物和/或沟阳性的)或改造标志物(例如,是固定环和/或狭窄阳性的)的存在所评价的。在《0.05的p-值确定统计显著性。
55.图11显示了在安慰剂组、低剂量(180 mg)治疗组和高剂量(360 mg)治疗组中在基线时和在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)。通过确定来自ancova模型
(针对类固醇难治的状态和基线高峰hpf食管嗜酸性粒细胞计数调节过)的p-值,评价统计显著性。表7显示了结果的概述。
56.图12显示了与用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体相比,在安慰剂组中在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分。通过来自ancova模型的p-值(针对类固醇难治的状态和基线eesaipro评分调节过),确定统计显著性。表8显示了结果的概述。
57.图13显示了在根据类固醇难治的状态分成小组的主体中在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分。给每个小组施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。在p 《0.05确定统计显著性。*指示p《0.05。结果概述在表9中。
58.图14显示了在主体中在基线时和在第16周时的平均主体的疾病严重程度总体评估,给所述主体施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。通过从ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线疾病严重程度总体评估评分调节过)计算p-值,确定统计显著性(在p《0.05)。结果概述在表10中。
59.图15显示了在主体中在基线时和在第16周时的平均临床医师的疾病严重程度总体评估,给所述主体施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。通过从ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线疾病严重程度总体评估评分调节过)计算p-值,确定统计显著性(在p《0.05)。结果概述在表11中。
60.图16显示了在主体中在基线时和在第16周时主体的总印象,给所述主体施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。在p《0.05确定统计显著性。
61.图17显示了在主体中在基线时和在第16周时的组织学等级和平均阶段调节评分,给所述主体施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。在p《0.05确定统计显著性。*指示p《0.0001。
62.表格简述表1提供了在研究中招募的主体的人口统计的概述。
63.表2提供了样品每日征状日志(dsd)问卷调查和用于计算dsd评分的方法。
64.表3显示了吞咽困难临床征状频率和严重程度从基线至第16周的平均变化,如通过在2周中完成的dsd所评估的。
65.表4提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价在主体中在第16周时的吞咽困难征状复合日志评分,所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的itt组。
66.表5提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价在主体中在第16周时的吞咽困难征状复合日志评分,所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的itt组(根据类固醇难治的状态分成小组)。
67.表6提供了在三个不同研究中评价安慰剂、口服布地奈德、rpc4046和qax576的效力的结果的概述。
68.表7提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价与用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体相比在安慰剂组中在第16周时高峰食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)的平均变化。
69.表8提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价与用低剂量(180 mg)或高剂量
(360 mg)的rpc4046治疗的主体相比在安慰剂组中在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分。
70.表9提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价与施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的非类固醇难治的主体相比在类固醇难治的主体中在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分。
71.表10提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价在主体中在基线时和在第16周时主体的疾病严重程度总体评估,给所述主体施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。
72.表11提供了来自研究的结果的概述,所述研究评价在主体中在基线时和在第16周时临床医师的疾病严重程度总体评估,给所述主体施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗。
73.表12提供了用rpc4046治疗的主体中治疗相关的不利事件的概述。
具体实施方案
74.本发明令人惊讶地提供了使用抗-il-13抗体或其抗原结合部分治疗或改善主体中的嗜酸性粒细胞病症(例如,eoe)的至少一种征状的方法。令人惊讶地,用数百位患者在人类中执行ii期临床试验以后,本发明令人惊讶地证实,发现以180 mg至360 mg的剂量每周施用的抗-il-13抗体的皮下剂量在治疗eoe中是有效的,例如,通过减少吞咽困难临床征状。在下面的子部分中更详细地描述了本发明的具体实施方案。
75.i. il-13抗体及其抗原结合部分本文中使用的术语“il-13”和“il-13野生型”(在本文中缩写为il-13、il-13 wt)包括主要由t辅助2细胞分泌的细胞因子。术语“il-13”和“il-13野生型”(在本文中缩写为il-13、il-13 wt)包括13 kda多肽的单体蛋白。il-13的结构进一步描述在,例如,moy, diblasio等人,j mol biol 310 219-30 (2001)中。术语il-13意图包括重组人il-13 (rh il-13),其可以通过标准重组表达方法来制备。另外,所述术语可以包括在其它物种(例如,狗、猫、牛、马、猪、鸡等)中的il-13的直系同源物/同系物。
76.优选地,本发明的il-13多肽靶标包括人il-13蛋白,包括其变体、片段、同种型和同源物。人il-13的氨基酸序列是本领域已知的且描述在seq id no: 1 (ncbi登记号af043334.1 (第1版,2010年3月10日更新);uniprot登记号p35225 (第170版;2016年3月16日评论))中。
77.人il-13野生型的序列:malllttvialtclggfaspgpvppstalrelieelvnitqnqkaplcngsmvwsinltagmycaaleslinvsgcsaiektqrmlsgfcphkvsagqfsslhvrdtkievaqfvkdlllhlkklfregrfn (seq id no: 1)。
78.本文中使用的术语“il-13变体”(在本文中缩写为il-13v)包括il-13的任何变体。人il-13变体的一个例子是这样的,其中将seq id no: 1的氨基酸残基130从精氨酸变成谷氨酰胺(r130q)。该特定人il-13变体序列是本领域已知的(ncbi登记号aah96141.2 (第2版,2014年9月23日更新))。
79.il-13配体/受体系统的受体部分包含多聚体跨膜受体,所述多聚体跨膜受体包括
il-4受体的α链(il-4rα)和两个已知的il-13-特异性结合链中的至少一个(wynn等人,annu.rev.immunol.21:425-56(2003))。所述效应主要经由转录因子(信号转导蛋白和转录活化剂6(stat6))介导。
80.具体地,所述抗体或其抗原结合片段特异性地结合il-13多肽,由此减少或中和il-13配体与它的相应受体的结合。伴随地,il-13抗体或其抗原结合部分可以导致il-13配体/受体系统的生物活性的抑制和/或中和。
81.本文中使用的“生物活性”表示细胞因子的所有固有的生物学特性。il-13的生物学特性包括、但不限于:在包围胃肠道的粘膜层的上皮组织中的组织中结合il-13受体以引起炎症,增强的趋化因子分泌,增加的变应性效应细胞的迁移,转化等。另外,已经证实il-13诱导20%的ee转录组,且更具体地在原代食管上皮细胞中诱导嗜酸性粒细胞趋化因子-3表达(blanchard等人,jallergyclinimmunol.,120:1292,2007)。
82.本文中使用的关于抗体、蛋白或肽与第二种化学物质的相互作用的术语“特异性结合”或“特异性地结合”是指,所述相互作用依赖于特定结构(例如,抗原决定簇或表位)在化学物质上的存在;例如,抗体会识别和结合特定蛋白结构,而不是普遍地识别和结合蛋白。如果抗体对表位“a”是特异性的,含有表位a(或游离的、未标记的a)的分子在含有标记的“a”和所述抗体的反应中的存在会减少与所述抗体结合的标记的a的量。
83.本文中使用的术语“抗体”概括地表示包含4个多肽链(2个重(h)链和2个轻(l)链)的任何免疫球蛋白(ig)分子或其任意功能片段、突变体、变体或衍生物,其保留ig分子的基本表位结合特征。这样的突变体、变体或衍生物抗体形式是本领域已知的。本文讨论了它们的非限制性的实施方案。在一个实施方案中,在本发明的组合物和方法中使用的抗体是在美国专利号7,915,388(通过引用并入本文)中描述的抗-il-13抗体13c5.5。在另一个实施方案中,在本发明的组合物和方法中使用的抗体是抗体6a1、3g4、tralokinumab、lebrikizumab、dectrekumab(qax-576)、ima-638或ima-026。
84.在全长抗体中,每个重链包含重链可变区(在本文中缩写为hcvr或vh)和重链恒定区。所述重链恒定区包含3个结构域:ch1、ch2和ch3。每个轻链包含轻链可变区(在本文中缩写为lcvr或vl)和轻链恒定区。所述轻链恒定区包含一个结构域cl。所述vh和vl区域可以进一步细分成被称作互补性决定区(cdr)的高变异性区域,其散布有被称作框架区(fr)的更保守的区域。每个vh和vl由3个cdr和4个fr组成,从氨基端至羧基端以下列顺序排列:fr1、cdr1、fr2、cdr2、fr3、cdr3、fr4。免疫球蛋白分子可以是任意类型(例如,igg、ige、igm、igd、iga和igy)、种类(例如,igg1、igg2、igg3、igg4、iga1和iga2)或亚类。
85.本文中使用的术语抗体的“抗原结合部分”(或简称“抗体部分”)表示,抗体的保留特异性地结合抗原(例如,il-13)的能力的一个或多个片段。已经证实,抗体的抗原结合功能可以由全长抗体的片段执行。这样的抗体实施方案也可以是双特异性的、双重特异性的或多特异性的形式;特异性地结合两种或更多种不同的抗原。被术语抗体的“抗原结合部分”包含的结合片段的例子包括:(i)fab片段,即由vl、vh、cl和ch1结构域组成的单价片段;(ii)f(ab')2片段,即包含2个fab片段的二价片段,所述fab片段在铰链区通过二硫键连接;(iii)由vh和ch1结构域组成的fd片段;(iv)由抗体的单臂的vl和vh结构域组成的fv片段;(v)dab片段(ward等人,(1989)nature341:544-546,winter等人,pct公开wo90/05144a1,通过引用并入本文),其包含单个可变结构域;和(vi)分离的互补性决定区
(cdr)。此外,尽管fv片段的两个结构域(vl和vh)由分开的基因编码,但它们可以使用重组方法通过合成接头连接到一起,所述合成接头使它们能够制成单个蛋白链,其中vl和vh区域配对以形成单价分子(称为单链fv(scfv);参见例如,bird等人(1988)science242:423-426;和huston等人(1988)proc.natl.acad.sci.usa85:5879-5883)。这样的单链抗体也意图被术语抗体的“抗原结合部分”包括。也包括单链抗体的其它形式,诸如双体。双体是二价的双特异性抗体,其中vh和vl结构域表达于单个多肽链上,但使用因为过短而不允许同一链上的两个结构域之间配对的接头,由此迫使所述结构域与另一链的互补结构域配对且产生两个抗原结合位点(参见例如,holliger等人,proc.natl.acad.sci.usa90:6444-6448(1993);poljak等人,structure2:1121-1123(1994))。这样的抗体结合部分是本领域已知的(kontermann和dubel编,antibodyengineering(2001)springer-verlag.newyork.第790页(isbn3-540-41354-5)。
86.本文中使用的术语“抗体构建体”表示这样的多肽:其包含与接头多肽或免疫球蛋白恒定结构域连接的本发明的一个或多个抗原结合部分。接头多肽包含通过肽键连接的两个或更多个氨基酸残基且用于连接一个或多个抗原结合部分。这样的接头多肽是本领域众所周知的(参见例如,holliger等人,proc.natl.acad.sci.usa90:6444-6448(1993);poljak等人,structure2:1121-1123(1994))。免疫球蛋白恒定结构域表示重链或轻链恒定结构域。人igg重链和轻链恒定结构域氨基酸序列是本领域已知的且公开在美国专利号7,915,388(其整个内容通过引用并入本文)的表2中。
87.更进一步,抗体或其抗原结合部分可以是较大免疫粘附分子的部分,所述较大免疫粘附分子通过抗体或抗体部分与一种或多种其它蛋白或肽的共价或非共价结合而形成。这样的免疫粘附分子的例子包括抗生蛋白链菌素核心区域用于制备四聚体scfv分子的用途(kipriyanov等人,humanantibodiesandhybridomas6:93-101(1995))和半胱氨酸残基、标志物肽和c-端聚组氨酸标签用于制备二价和生物素化的scfv分子的用途(kipriyanov等人,mol.immunol.31:1047-1058(1994))。使用常规技术,诸如完整抗体的分别木瓜蛋白酶或胃蛋白酶消化,可以从完整抗体制备抗体部分,诸如fab和f(ab’)2片段。此外,如本文中所述的,使用标准的重组dna技术可以得到抗体、抗体部分和免疫粘附分子。
88.本文中使用的“分离的抗体”意图表示基本上不含有具有不同抗原特异性的其它抗体的抗体(例如,分离的特异性地结合il-13的抗体基本上不含有特异性地结合除了il-13以外的抗原的抗体)。但是,分离的特异性地结合il-13的抗体具有与其它抗原(诸如来自其它物种的il-13分子)的交叉反应性。此外,分离的抗体可以基本上不含有其它细胞物质和/或化学物质。
89.本文中使用的术语“人抗体”意图包括具有从人种系免疫球蛋白序列衍生出的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可以包括不由人种系免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如,通过随机的或位点特异性的体外诱变或体内体细胞突变而导入的突变),例如在cdr中且特别是在cdr3中。但是,本文中使用的术语“人抗体”不意图包括这样的抗体:其中从另一哺乳动物物种(诸如小鼠)的种系衍生出的cdr序列已经移植至人框架序列上。
90.本文中使用的术语“重组人抗体”意图包括通过重组方式制备、表达、建立或分离的所有人抗体,诸如使用转染进宿主细胞中的重组表达载体表达的抗体(在美国专利号7,
915,388中进一步描述,其内容通过引用并入本文)、从重组的组合人抗体文库分离的抗体(hoogenboom等人,tibtech.15:62-70(1994);azzazy等人,clin.biochem.35:425-445(2002);gavilondo等人,biotechniques29:128-145(2002);hoogenboom等人,immunologytoday21:371-378(2000))、从人免疫球蛋白基因的转基因动物(例如,小鼠)分离的抗体(参见例如,taylor等人,nucl.acidsres.20:6287-6295(1992);kellermann等人,currentopinioninbiotechnology13:593-597(2002);little等人,immunologytoday21:364-370(2002))、或通过涉及将人免疫球蛋白基因序列剪接至其它dna序列的任何其它方式制备、表达、建立或分离的抗体。这样的重组人抗体具有从人种系免疫球蛋白序列衍生出的可变区和恒定区。但是,在某些实施方案中,对这样的重组人抗体进行体外诱变(或,当使用人ig序列转基因的动物时,体内体细胞诱变),且因而重组抗体的vh和vl区域的氨基酸序列是这样的序列:其尽管源自人种系vh和vl序列和与人种系vh和vl序列有关,但是不可能天然存在于体内人抗体种系谱系内。一个实施方案提供了能够结合人il-13的全人抗体,其可以使用本领域众所周知的技术制备,例如,但不限于,使用人ig噬菌体文库诸如在jermutus等人,pct公开号wo2005/007699a2中公开的那些。
91.术语“嵌合抗体”表示这样的抗体:其包含来自一个物种的重链和轻链可变区序列和来自另一个物种的恒定区序列,诸如具有与人恒定区连接的鼠重链和轻链可变区的抗体。用于产生嵌合抗体的方法是本领域已知的并在实施例2.1中详细地讨论。参见例如,morrison,science229:1202(1985);oi等人,biotechniques4:214(1986);gillies等人,(1989)j.immunol.methods125:191-202;美国专利号5,807,715;4,816,567;和4,816,397,它们通过引用整体并入本文。另外,通过本领域已知的技术可以生产“嵌合抗体”。参见,morrison等人,1984,proc.natl.acad.sci.81:851-855;neuberger等人,1984,nature312:604-608;takeda等人,1985,nature314:452-454它们通过引用整体并入本文。
92.在一个实施方案中,通过用人igg1恒定区替换在部分1中所述的鼠单克隆抗人il-13抗体的重链恒定区,生产用于用在本发明的组合物和/或方法中的嵌合抗体。在一个具体实施方案中,本发明的嵌合抗体包含重链可变区(vh)和轻链可变区(vl),所述重链可变区包含在美国专利号7,195,388中公开的seqidno:34、seqidno:36、seqidno:41、seqidno:42、或seqidno:46的氨基酸序列,所述轻链可变区包含seqidno:35、seqidno:37、seqidno:40、seqidno:43、或seqidno:47的氨基酸序列。可以采用前述vh和vl序列的任意组合。
93.术语“cdr-移植抗体”表示这样的抗体:其包含来自一个物种的重链和轻链可变区序列,但是其中vh和/或vl的一个或多个cdr区域的序列被另一个物种的cdr序列替换,诸如具有鼠重链和轻链可变区的抗体,其中一个或多个鼠cdr(例如,cdr3)已经被人cdr序列替换。
94.术语“人源化抗体”表示这样的抗体:其包含来自非人物种(例如,小鼠)的重链和轻链可变区序列,但是其中vh和/或vl序列的至少一部分已经被改变得更“类人”,即,与人种系可变序列更相似。一类人源化抗体是cdr移植抗体,其中人cdr序列被引入非人vh和vl序列中以替换对应的非人cdr序列。在一个实施方案中,提供了人源化的抗人il-13抗体和抗原结合部分。这样的抗体如下制备:使用传统的杂交瘤技术得到鼠抗-il-13单克隆抗体,
随后使用体外基因工程(诸如在kasaian等人pct公开号wo2005/123126a2中公开的那些)进行人源化。人ig序列是本领域已知的。参见,例如,kabat等人,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,u.s.dept.health(1983),整体通过引用并入本文。如本领域已知的,这样的引入的序列可以用于降低免疫原性,或降低、增强或修改结合、亲和力、结合速率、解离速率、亲合力、特异性、半衰期或任意其它合适的特征。
95.可以用得自cdr供体抗体的对应残基置换人框架区中的框架残基以改变、优选地改善抗原结合。通过本领域众所周知的方法,例如,通过cdr和框架残基的相互作用的模型化(以鉴定对于抗原结合而言重要的框架残基)和序列对比(以鉴定在特定位置处的罕见框架残基),鉴定这些框架置换(参见,例如,queen等人,美国专利号5,585,089;riechmann等人,nature332:323(1988),它们通过引用整体并入本文)。三维免疫球蛋白模型是通常可得到的,并且是本领域技术人员熟知的。可得到显示和展示选择的候选免疫球蛋白序列的可能三维构象结构的计算机程序。对这些显示的检查,允许分析残基在候选免疫球蛋白序列的功能中的可能作用,即分析影响候选免疫球蛋白的结合其抗原的能力的残基。以此方式,可以从共有和引入序列选择fr残基并组合,从而实现期望的抗体特征,诸如增加的对靶抗原的亲和力。一般而言,cdr残基直接地并且最显著地涉入影响抗原结合。使用本领域已知的多种技术,诸如但不限于在以下文献中描述的那些,可以将抗体人源化:jones等人,nature321:522(1986);verhoeyen等人,science239:1534(1988)),sims等人,j.immunol.151:2296(1993);chothia和lesk,j.mol.biol.196:901(1987),carter等人,proc.natl.acad.sci.u.s.a.89:4285(1992);presta等人,j.immunol.151:2623(1993),padlan,molecularimmunology28(4/5):489-498(1991);studnicka等人,proteinengineering7(6):805-814(1994),roguska.等人,pnas91:969-973(1994);pct公开wo91/09967,pct/:us98/16280,us96/18978,us91/09630,us91/05939,us94/01234,gb89/01334,gb91/01134,gb92/01755;wo90/14443,wo90/14424,wo90/14430,ep229246,ep592,106;ep519,596,ep239,400,美国专利号5,565,332,5,723,323,5,976,862,5,824,514,5,817,483,5,814,476,5,763,192,5,723,323,5,766886,5,714,352,6,204,023,6,180,370,5,693,762,5,530,101,5,585,089,5,225,539;4,816,567,每篇完整地通过引用并入本文,包括其中引用的参考文献。
96.其它类型的文库可以由来自特定基因来源的抗体片段构成,所述基因来源没有明确地偏向结合抗原的克隆。因而,“原初抗体”或“天然抗体”文库源自天然的、未免疫的、重排的v基因。“合成抗体”文库完全通过体外方法构建,从而将完全或定制简并性的区域引入一个或多个v基因的cdr中。“半合成文库”组合了天然的和合成的多样性,且经常被建立以增加天然多样性,同时维持期望的功能多样性水平。因而,这样的文库可以例如如下建立:改组天然的cdr区域(soderlind等人,nat.biotechnol.18:852-856(2000)),或将来自人b细胞的天然地重排的cdr序列与合成的cdr1和cdr2多样性组合(hoet等人,nat.biotechnol.23:455-38(2005))。本发明包括原初的/天然的、合成的和半合成的抗体文库或它们的任意组合的应用。
97.术语“kabat编号”、“kabat定义”和“kabat标记”在本文中可互换地使用。本领域公认的这些术语表示氨基酸残基编号系统,所述氨基酸残基比抗体的重链和轻链可变区或其
抗原结合部分中的其它氨基酸残基更可变(即高变)(kabat等人(1971)ann.nyacad,sci.190:382-391和,kabat,e.a.,等人(1991)sequencesofproteinsofimmunologicalinterest,第5版,u.s.departmentofhealthandhumanservices,nih公开号91-3242)。对于重链可变区,高变区对于cdr1为氨基酸位置31-35,对于cdr2为氨基酸位置50-65,且对于cdr3为氨基酸位置95-102。对于轻链可变区,高变区对于cdr1为氨基酸位置24-34,对于cdr2为氨基酸位置50-56,且对于cdr3为氨基酸位置89-97。
98.本文中使用的术语“受体”和“受体抗体”表示这样的抗体或核酸序列:其提供或编码一个或多个框架区的氨基酸序列的至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%、至少99%或100%。在某些实施方案中,术语“受体”表示提供或编码恒定区的抗体氨基酸或核酸序列。在另一个实施方案中,术语“受体”表示提供或编码一个或多个框架区和恒定区的抗体氨基酸或核酸序列。在一个具体实施方案中,术语“受体”表示这样的人抗体氨基酸或核酸序列:其提供或编码一个或多个框架区的氨基酸序列的至少80%、优选地,至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或100%。根据该实施方案,受体可以含有至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个或至少10个不会发生在人抗体的一个或多个位置处的氨基酸残基。受体框架区和/或受体恒定区可以例如源自或得自种系抗体基因、成熟的抗体基因、功能性抗体(例如,本领域众所周知的抗体、开发中的抗体或商购可得的抗体)。
99.本文中使用的术语“cdr”表示在抗体可变序列内的互补性决定区。在重链和轻链的每个可变区中存在三个cdr,对于每个可变区,命名为cdr1、cdr2和cdr3。本文中使用的术语“cdr集合”表示存在于能够结合抗原的单个可变区中的三个cdr的集合。这些cdr的确切边界已根据不同系统不同地限定。kabat(kabat等人,sequencesofproteinsofimmunologicalinterest(nationalinstitutesofhealth,bethesda,md.(1987)和(1991))描述的系统不仅提供了可应用于抗体的任何可变区的明确残基编号系统,而且提供了限定三个cdr的精确残基边界。这些cdr可以被称为kabatcdr。chothia和同事(chothia和lesk,j.mol.biol.196:901-917(1987)和chothia等人,nature342:877-883(1989))发现,kabatcdr内的某些子部分尽管在氨基酸序列水平上具有极大多样性,但是呈现几乎相同的肽主链构象。这些子部分被命名为l1、l2和l3或h1、h2和h3,其中“l”和“h”分别表示轻链区和重链区。这些区域可以被称为chothiacdr,所述chothiacdr具有与kabatcdr重叠的边界。限定与kabatcdr重叠的cdr的其它边界已由padlan(fasebj.9:133-139(1995))和maccallum(jmolbiol262(5):732-45(1996))描述。其它的cdr边界定义可能不严格地遵循以上系统之一,但尽管如此仍将与kabatcdr重叠,尽管考虑到以下预测或实验发现,可以缩短或加长它们:特定残基或残基组或甚至整个cdr不会显著影响抗原结合。本文使用的方法可以利用根据这些系统中的任一种限定的cdr,尽管优选的实施方案使用kabat或chothia限定的cdr。
100.本文中使用的术语“规范”残基表示在cdr或框架中的残基,其限定特定规范cdr结构,如chothia等人所定义的(j.mol.biol.196:901-907(1987);chothia等人,j.mol.biol.227:799(1992),二者通过引用并入本文)。根据chothia等人,尽管在氨基酸序列水平具有显著的多样性,但是许多抗体的cdr的关键部分具有几乎相同的肽主链构象。每个规范结构基本上为形成环的氨基酸残基的相邻段规定一组肽主链扭转角。
101.本文中使用的术语“供体”和“供体抗体”表示提供一个或多个cdr的抗体。在一个
优选的实施方案中,所述供体抗体是来自特定物种的抗体,所述特定物种不同于从其得到或衍生出框架区的抗体。在人源化抗体的上下文中,术语“供体抗体”表示提供一个或多个cdr的非人抗体。
102.本文中使用的术语“框架”或“框架序列”表示可变区减去cdr的剩余序列。因为cdr序列的精确定义可以由不同系统确定,所以可以相应地不同地解释框架序列的含义。六个cdr(轻链的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3,和重链的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3)也将轻链和重链上的框架区分成每个链上的四个子区域(fr1、fr2、fr3和fr4),其中cdr1位于fr1与fr2之间,cdr2位于fr2与fr3之间,且cdr3位于fr3与fr4之间。在不将特定子区域指定为fr1、fr2、fr3或fr4的情况下,如其他人提及的框架区代表在单个天然存在的免疫球蛋白链的可变区内的组合fr。本文中使用的fr代表四个子区域之一,且fr代表构成框架区的四个子区域中的两个或更多个。
103.人重链和轻链受体序列是本领域已知的。在本发明的一个实施方案中,人重链和轻链受体序列选自在美国专利号7,915,388(其内容通过引用并入本文)中公开的表3和表4所述的序列。
104.本文中使用的术语“种系抗体基因”或“基因片段”表示由尚未经历成熟过程的非淋巴样细胞编码的免疫球蛋白序列,所述成熟过程导致特定免疫球蛋白的基因重排和表达突变(参见,例如,shapiro等人, crit. rev. immunol. 22(3): 183-200 (2002);marchalonis等人, adv exp med. biol. 484:13-30 (2001))。由本发明的不同实施方案提供的优点之一源于以下认识:种系抗体基因比成熟抗体基因更可能保留物种中的个体特有的基本氨基酸序列结构,因此当治疗性地用于该物种中时不太可能被识别为来自外来来源。
105.本文中使用的术语“关键”残基表示对抗体(尤其是人源化抗体)的结合特异性和/或亲和力具有更多影响的可变区内的某些残基。关键残基包括、但不限于以下的一种或多种:邻近cdr的残基,潜在的糖基化位点(可以是n-或o-糖基化位点),罕见的残基,能够与抗原相互作用的残基,能够与cdr相互作用的残基,规范残基,在重链可变区和轻链可变区之间的接触残基,在vernier地带内的残基,和在可变重链cdr1的chothia定义和第一重链框架的kabat定义之间重叠的区域中的残基。
106.本文中使用的术语“人源化抗体”是这样的抗体或其变体、衍生物、类似物或片段:其免疫特异性地结合目标抗原,且其包含基本上具有人抗体的氨基酸序列的框架(fr)区和基本上具有非人抗体的氨基酸序列的互补决定区(cdr)。本文中使用的术语“基本上”在cdr的背景下表示这样的cdr:其氨基酸序列与非人抗体cdr的氨基酸序列具有至少80%、优选地至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%同一性。人源化抗体包含基本上所有的至少一个且通常两个可变结构域(fab、fab’、f(ab’)2、fabc、fv),其中所有或基本上所有的cdr区对应于非人免疫球蛋白(即,供体抗体)的那些cdr区,且所有或基本上所有的框架区是人免疫球蛋白共有序列的那些框架区。优选地,人源化抗体也包含免疫球蛋白恒定区(fc)(通常是人免疫球蛋白的恒定区)的至少一部分。在某些实施方案中,人源化抗体含有轻链以及至少重链的可变结构域。抗体也可以包括重链的ch1、铰链、ch2、ch3和ch4区域。在某些实施方案中,人源化抗体仅含有人源化轻链。在某些实施方案中,人源化抗体仅含有人源化重链。在特定实施方案中,人源化抗体仅含有轻链和/或人源化重链的人源
化可变结构域。
107.所述人源化抗体可以选自任何种类的免疫球蛋白,包括igm、igg、igd、iga和ige,和任何同种型,包括但不限于igg1、igg2、igg3和igg4。所述人源化抗体可以包含来自超过一个种类或同种型的序列,且可以使用本领域众所周知的技术选择特定恒定结构域以优化期望的效应子功能。
108.人源化抗体的框架和cdr区域不需要与亲本序列精确地对应,例如,通过至少一个氨基酸残基的置换、插入和/或缺失可以对供体抗体cdr或共有框架进行诱变处理,使得所述在该位点的cdr或框架残基不与供体抗体或共有框架对应。但是,在一个优选的实施方案中,这样的突变不是广泛的。通常,至少80%、优选地至少85%、更优选地至少90%和最优选地至少95%的人源化抗体残基将与亲本fr和cdr序列的残基对应。本文中使用的术语“共有框架”表示在共有免疫球蛋白序列中的框架区。本文中使用的术语“共有免疫球蛋白序列”表示在有关免疫球蛋白序列的家族中从最频繁地发生的氨基酸(或核苷酸)形成的序列(参见例如,winnaker, from genes to clones (verlagsgesellschaft, weinheim, germany 1987)。在免疫球蛋白的家族中,在共有序列中的每个位置被在所述家族中在该位置最频繁地发生的氨基酸占据。如果2个氨基酸同样经常地发生,在共有序列中可以包括任一个。
109.在本发明的一个实施方案中,人源化的抗-il-13抗体是13c5.5。13c5.5具有序列seq id no: 2 (重链可变区)和seq id no: 3 (轻链可变区)。也参见美国专利号7,915,388,其整个内容通过引用并入本文。
110.重链可变区13c5.5 (seq id no: 2)evtlresgpglvkptqtltltctlygfslstsdmgvdwirqppgkglewlahiwwddvkrynpalksrltiskdtsknqvvlkltsvdpvdtatyycartvssgyiyyamdywgqgtlvtvss轻链可变区13c5.5 (seq id no: 3)diqmtqspsslsasvgdrvtiscrasqdirnylnwyqqkpgkapkllifytsklhsgvpsrfsgsgsgtdytltisslqpediatyycqqgntlpltfgggtkveik13c5.5是以巨大亲和力结合白介素13 (il-13)的螺旋a和d的人源化抗体(参见美国专利公开号2014/0341913)。
111.il-13抗体的其它代表性例子是本领域已知的。在一个实施方案中,所述抗体是6a1、3g4、tralokinumab、lebrikizumab、qaz-576、ima-638或ima-026或其抗原结合部分。例如,美国专利号7,195,388 (其内容通过引用并入本文)的表5提供了要用在本发明的组合物和/或方法中的优选抗-il-13抗体的vh和vl区域的氨基酸序列的列表。这些分离的抗-il-13抗体cdr序列会建立根据本发明分离的il-13结合蛋白的家族,且包含包括在美国专利号7,195,388 (其内容通过引用并入本文)的表6中列出的cdr序列的多肽。为了制备和选择就il-13和/或il-13而言具有优选il-13结合和/或中和活性的本发明的cdr,可以使用本领域已知的用于制备本发明的结合蛋白和评估那些结合蛋白的il-13和/或il-13结合和/或中和特征的标准方法,包括、但不限于本文特别描述的那些。
112.本发明的抗体和它们的抗原结合相应物是中和性抗体。本文中使用的术语“中和”表示,当结合蛋白特异性地结合细胞因子时,细胞因子的生物活性的中和。优选地,中和性结合蛋白是其与il-13和/或il-13的结合导致il-13和/或il-13的生物活性的抑制的中和性抗体。优选地,中和性结合蛋白结合il-13和/或il-13并使il-13和/或il-13的生物活性
减小至少约20%、40%、60%、80%、85%或更多。通过测量本领域众所周知的il-13和/或il-13生物活性的一种或多种指标,可以评估中和性结合蛋白对il-13和/或il-13的生物活性的抑制。例如,可以测量人il-13诱导的a-549细胞对tarc(ccl-17)的产生的抑制(参见美国专利号7,915,388的实施例1.1.c,其通过引用并入本文)。
113.术语“活性”包括活性诸如抗体对抗原的结合特异性/亲和力,例如,结合il-13抗原的抗-il-13抗体,和/或抗体的中和效能,例如,其与il-13的结合抑制il-13的生物活性的抗-il-13抗体,例如人il-13诱导的a-549细胞对tarc(ccl-17)的产生的抑制(参见美国专利号7,915,388的实施例1.1.c,其通过引用并入本文)。
114.术语“表位”包括能够特异性地结合免疫球蛋白或t-细胞受体的任何多肽决定簇。在某些实施方案中,表位决定簇包括分子(例如氨基酸、糖侧链、磷酰基、或磺酰基)的化学活性表面分组(grouping),且在某些实施方案中,可以具有具体三维结构特征、和/或具体电荷特征。表位是被抗体结合的抗原区域。在某些实施方案中,当抗体在蛋白和/或大分子的复杂混合物中优选识别其靶抗原时,就说所述抗体特异性地结合所述抗原。
115.可以采用任何已知的方法来检测抗体-抗原相互作用。例如,表面等离子体共振(spr)是一种光学现象,其允许通过检测生物传感器基质内的蛋白浓度的改变来分析生物特异性相互作用,例如使用biacore系统(pharmaciabiosensor,piscataway,n.j.)。参见jonsson等人.(1993)ann.biol.clin.51:19-26;jonsson等人.(1991)biotechniques11:620-627;johnsson等人.(1995)j.mol.recognit.8:125-131;和johnnson,b.,等人.(1991)anal.biochem.198:268-277。
116.在本发明的方法的上下文中使用的抗-il-13抗体可以具有ph依赖性的结合特征。例如,用于用在本发明的方法中的抗-il-13抗体可以在酸性ph表现出与中性ph相比减小的与il-13的结合。可替换地,本发明的抗-il-13抗体可以在酸性ph表现出与中性ph相比增强的与其抗原的结合。表述“酸性ph”包括小于约6.2的ph值,例如,约6.0、5.95、5.9、5.85、5.8、5.75、5.7、5.65、5.6、5.55、5.5、5.45、5.4、5.35、5.3、5.25、5.2、5.15、5.1、5.05、5.0或更小。本文中使用的表述“中性ph”是指约7.0至约7.4的ph。表述“中性ph”包括约7.0、7.05、7.1、7.15、7.2、7.25、7.3、7.35和7.4的ph值。
117.在某些情况下,“在酸性ph与中性ph相比减小的与il-13的结合”以下述方式表达:所述抗体在酸性ph结合il-13的kd值与所述抗体在中性ph结合il-13的kd值之比(或反之亦然)。例如,如果抗体或其抗原结合片段表现出约3.0或更大的酸性/中性kd比率,那么可以将所述抗体或其抗原结合片段视作就本发明的目的而言表现出“在酸性ph与中性ph相比减小的与il-13的结合”。在某些示例性实施方案中,本发明的抗体或抗原结合片段的酸性/中性kd比率可以是约3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0、10.5、11.0、11.5、12.0、12.5、13.0、13.5、14.0、14.5、15.0、20.0、25.0、30.0、40.0、50.0、60.0、70.0、100.0或更大。
118.可以得到具有ph依赖性结合特征的抗体,例如,通过针对在酸性ph与中性ph相比减小的(或增强的)与特定抗原的结合来筛选抗体群体。另外,在氨基酸水平对抗原结合结构域的修饰可能产生具有ph依赖性特征的抗体。例如,通过用一个组氨酸残基置换抗原结合结构域(例如,在cdr内)的一个或多个氨基酸,可以得到在酸性ph与中性ph相比具有减小的抗原结合的抗体。本文中使用的表述“酸性ph”是指6.0或更小的ph。
publishingcompany,easton,pa。这些制剂包括,例如,粉剂、糊剂、软膏剂、凝胶剂、蜡状物、油、脂质、含脂质(阳离子的或阴离子的)的囊泡(诸如lipofectin

)、dna缀合物、无水吸收糊剂、水包油和油包水乳剂、乳剂碳蜡(不同分子量的聚乙二醇)、半固体凝胶和含有碳蜡的半固体混合物。也参见powell等人.“compendiumofexcipientsforparenteralformulations”pda(1998)jpharmscitechnol52:238-311。
127.多种递送系统是已知的,且可以用于施用药物组合物,例如,包囊在脂质体、微粒、微胶囊中、能够表达突变体病毒的重组细胞、受体介导的胞吞作用(参见,例如,wu等人,1987,j.biol.chem.262:4429-4432)。施用方法包括、但不限于真皮内、肌肉内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内、硬膜外和口服途径。通过任何方便的途径,例如通过输注或快速推注,通过经上皮或皮肤粘膜内衬(例如,口腔粘膜、直肠粘膜和肠粘膜等)的吸收,可以施用所述组合物,且可以与其它生物活性剂一起施用。
128.可以用标准针头和注射器皮下地或静脉内地递送药物组合物。另外,就皮下递送而言,笔式递送装置容易地应用在递送药物组合物中。这样的笔式递送装置可以是可重复使用的或一次用弃的。可重复使用的笔式递送装置通常利用含有药物组合物的可替换筒。一旦所述筒内的所有药物组合物已经被施用且所述筒是空的,可以将空筒容易地抛弃和用含有药物组合物的新筒替换。然后可以重复使用笔式递送装置。在一次用弃的笔式递送装置中,不存在可替换的筒。相反,一次用弃的笔式递送装置是预填充的,其中将药物组合物保持在所述装置内的蓄池中。一旦蓄池被排空药物组合物,就抛弃整个装置。
129.在某些情形下,可以在控释系统中递送药物组合物。在一个实施方案中,可以使用泵。在另一个实施方案中,可以使用聚合材料;参见,medicalapplicationsofcontrolledrelease,langer和wise(编),1974,crcpres.,bocaraton,fla。在另一个实施方案中,可以将控释系统放在组合物的靶标附近,因而仅需要全身剂量的部分(参见,例如,goodson,1984,medicalapplicationsofcontrolledrelease,出处同上,第2卷,第115-138页)。在langer,1990,science249:1527-1533的综述中讨论了其它控释系统。
130.所述可注射制剂可以包括用于静脉内、皮下、皮内和肌肉内注射、点滴输注等的剂型。这些可注射制剂可以通过已知方法制备。例如,可以如下制备可注射制剂:例如,将上述抗体或其盐溶解、悬浮或乳化在常规地用于注射剂的无菌水性介质或油性介质中。作为用于注射剂的水性介质,存在例如生理盐水、包含葡萄糖和其它助剂的等渗溶液等,其可与适当的增溶剂组合使用,所述增溶剂是诸如醇(例如,乙醇)、多元醇(例如,丙二醇、聚乙二醇)、非离子表面活性剂[例如,聚山梨醇80、hco-50(氢化蓖麻油的聚氧乙烯(50mol)加成化合物)]等。作为油性介质,使用例如芝麻油、大豆油等,其可与增溶剂(诸如苯甲酸苄酯、苯甲醇等)组合使用。优选地将如此制备的注射剂填充在适当的安瓿中。
[0131]
有利地,将用于上述口服或胃肠外使用的药物组合物制备成适合配合活性成分的剂量的单位剂量的剂型。这样的单位剂量的剂型包括,例如,片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂(安瓿)、栓剂等。
[0132]
可以用在本发明的上下文中的包含抗-il-13抗体的示例性药物组合物公开在例如美国专利申请公开号2012/0097565中,其整个内容明确地通过引用并入本文。
[0133]
本发明提供了一种药物组合物,其包含前述il-13抗体及其抗原结合部分中的一
种或多种和药学上可接受的载体。另外,在一个有关的实施方案中,本发明提供了一种诊断组合物,其包含前述il-13抗体及其抗原结合部分中的一种或多种和用于诊断试验的多种试剂、缓冲剂和载体。根据该方面,可以将所述药物组合物配制成用于静脉内施用、皮下施用、腹膜内施用或肌肉内施用。再进一步根据该方面,可以将所述药物组合物配制成作为显微操作针贴剂皮下施用。可以将所述药物组合物配制成用于通过快速推注或通过随时间逐渐灌注而胃肠外施用。可以将所述诊断组合物配制成用于体外、体内或离体应用。
[0134]
用于将前述il-13抗体及其抗原结合部分配制成药物组合物和/或诊断组合物的示例性试剂提供在美国专利公开号2014/0341913中,其通过引用并入本文。具体地,用于将前述il-13抗体及其抗原结合部分配制成用于治疗eoe的药物组合物的示例性试剂提供在美国专利公开号2015/0017176中,其通过引用并入本文。
[0135]
b. 剂量和施用根据本发明的方法施用给主体的il-13抗体或其抗原结合部分的量通常是治疗有效量。本文中使用的短语“治疗有效量”是指产生以下一种或多种的il-13抗体或其抗原结合部分的量:(a)嗜酸性粒细胞性食管炎的征状的严重程度或持续时间的减小;(b)食管中嗜酸性粒细胞数目的减小;(c)变应性的预防或减轻;和(d)常规变应性疗法的应用或需要的减少(例如,减少或消除的抗组胺药、解充血药、鼻或吸入类固醇、抗-ige治疗、肾上腺素等的应用)。
[0136]
在抗-il-13抗体或其抗原结合部分的情况下,本发明提供了ii期临床试验的惊人结果,其证实治疗上有效的量是在每周定量施用方案中皮下地施用的约180 mg至约360 mg的抗体或其抗原结合部分。在一个实施方案中,治疗有效量是约180 mg的抗体或其抗原结合部分。在另一个实施方案中,所述治疗有效量是约360 mg的抗体或其抗原结合部分。在一个实施方案中,治疗有效量可以是约150 mg、约160 mg、约170 mg、约180 mg、约190 mg、约200 mg、约210 mg、约220 mg、约230 mg、约240 mg、约250 mg、约260 mg、约270 mg、约280 mg、约290 mg、约300 mg、约310 mg、约320 mg、约330 mg、约340 mg、约350 mg、约360 mg、约370 mg、约380 mg、约390 mg、约400 mg或更多的抗-il-13抗体或其抗原结合部分。在另一个实施方案中,所述治疗有效量是约160 mg至约200 mg的抗体或其抗原结合部分。在另一个实施方案中,所述治疗有效量是约340 mg至约380 mg的抗体或其抗原结合部分。在另一个实施方案中,所述治疗有效量是约160 mg至约200 mg的抗体或其抗原结合部分。在另一个实施方案中,所述治疗有效量是约160 mg至约200 mg、约170 mg至约210 mg、约180 mg至约220 mg、约190 mg至约230 mg、约200 mg至约240 mg、约210 mg至约250 mg、约220 mg至约260 mg、约230 mg至约270 mg、约240 mg至约280 mg、约250 mg至约290 mg、约260 mg至约300 mg、约270 mg至约310 mg、约280 mg至约320 mg、约290 mg至约330 mg、约300 mg至约340 mg、约310 mg至约350 mg、约320 mg至约360 mg、约330 mg至约370 mg或约340 mg至约380 mg的抗体或其抗原结合部分。
[0137]
在一个实施方案中,将本发明的组合物施用一次。在另一个实施方案中,每周施用所述组合物。在另一个实施方案中,施用所述组合物2周。在另一个实施方案中,施用所述组合物3周。在另一个实施方案中,施用所述组合物4周、5周、6周、7周、8周、9周、10周、11周、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、13个月、14个月、15个月、16个月、17个月、18个月、19个月、20个月、21个月、22个月、23个月、2年、3年、4年、5
年、10年、疾病的持续时间或主体的终生。
[0138]
在一个实施方案中,皮下地施用所述组合物。在另一个实施方案中,静脉内地施用所述组合物。在一个实施方案中,静脉内地施用所述组合物一次,随后每周皮下施用。在一个实施方案中,所述抗体或其抗原结合部分的第一次施用是在静脉内5 mg/kg的剂量,随后在180 mg的剂量每周皮下施用所述抗体或其抗原结合部分。在另一个实施方案中,所述抗体或其抗原结合部分的第一次施用是在静脉内10 mg/kg的剂量,随后在360 mg的剂量每周皮下施用所述抗体或其抗原结合部分。
[0139]
所述药物组合物的剂量可以随接受者的年龄、性别、健康和重量、当前治疗(如果有的话)的种类、治疗的频率和期望的效果的性质而改变。采用被接受的诊断和治疗的原理,技术人员可以生产用作临床前和临床治疗剂或用在临床诊断中的制剂。所述组合物的剂量范围可以足够大以产生期望的作用。同样地,根据诊断的性质,例如,体外相对于体内应用,可以改变所述诊断组合物的剂量。将il-13抗体及其抗原结合部分配制成诊断剂(例如,使抗体与选自放射性标记、比色测量部分、荧光部分、化学发光部分、酶部分和免疫原性部分的诊断剂螯合)的方法是本领域已知的。
[0140]
可以以试剂盒的形式包装前述组合物和药物制剂。本文中使用的术语“试剂盒”表示包装产品,其包含与本发明的抗-il-13抗体一起施用以治疗il-13相关病症的组分。所述试剂盒优选地包含容纳所述试剂盒的组分的盒子或容器。给所述盒子或容器附着标签或食品和药品管理局批准的方案。所述盒子或容器容纳本发明的组分,所述组分优选地被包含在塑料、聚乙烯、聚丙烯、乙烯或丙烯容器内。所述容器可以是带帽的试管或瓶子。所述试剂盒还可以包括关于施用抗-il-13抗体的说明书。
[0141]
c. 联合治疗本文中使用的术语“联合治疗”表示两种或更多种治疗物质(例如,抗-il-13抗体和另一种试剂)的施用。可以与抗-il-13抗体的施用伴随地、在其之前或之后施用其它药物。具体地,所述额外试剂是在嗜酸性粒细胞病症的诊断和/或治疗中有用的试剂。特别地,所述额外试剂是在嗜酸性粒细胞性胃肠道病症(egid)的治疗/诊断中有用的试剂。
[0142]
在egid的诊断和/或治疗的上下文中,所述额外试剂可以选自:治疗剂、成像剂、细胞毒性剂、血管生成抑制剂、激酶抑制剂、共刺激分子阻滞剂、粘附分子阻滞剂、抗-细胞因子抗体或其功能片段;甲氨蝶呤、环孢素、雷帕霉素、fk506、可检测标记物或报告物、tnf拮抗剂、抗-风湿药、肌肉松弛药、麻醉药、非类固醇抗炎药(nsaid)、镇痛剂、麻醉剂、镇静剂、局部麻醉剂、神经肌肉阻滞剂、抗微生物剂、抗银屑病药、皮质类固醇、促蛋白合成类固醇、促红细胞生成素、免疫接种、免疫球蛋白、免疫抑制剂、生长激素、激素替代药物、放射性药物、抗抑郁药、抗精神病药、刺激剂、哮喘药物、β激动剂、吸入的类固醇、口服类固醇、肾上腺素或类似物、细胞因子和细胞因子拮抗剂。
[0143]
特别地在egid的治疗的上下文中,所述额外试剂选自:il-1β抑制剂、il-5抑制剂、il-9抑制剂、il-17抑制剂、il-25抑制剂、tnf-α抑制剂、嗜酸性粒细胞趋化因子-3抑制剂、ige抑制剂、前列腺素d2抑制剂、免疫抑制剂、皮质类固醇、糖皮质激素、质子泵抑制剂、nsaid、用于变应原除去的试剂和辅助饮食管理的试剂。
[0144]
正如在短语“与第二种试剂组合的第一种试剂”中,术语“组合”包括第一种试剂和第二种试剂的共同施用,例如它们可以溶解或混合在相同的药学上可接受的载体中,或施
用第一种试剂,随后施用第二种试剂,或施用第二种试剂,随后施用第一种试剂。因此,本发明包括组合治疗性处理和组合药物组合物的方法。
[0145]
正如在短语“伴随的治疗性处理”中,术语“伴随的”包括在有第二种试剂存在下施用一种试剂。伴随的治疗性处理方法包括这样的方法:其中共同施用第一种、第二种、第三种或额外试剂。伴随的治疗性处理方法也包括这样的方法:其中在有第二种或额外试剂存在下施用第一种或额外试剂,其中所述第二种或额外试剂,例如,可能已经在以前施用。伴随的治疗性处理方法可以由不同的操作人员逐步执行。例如,一个操作人员可以给主体施用第一种试剂,且第二个操作人员可以给所述主体施用第二种试剂,且施用步骤可以同时或几乎同时或在远隔的时间执行,只要第一种试剂(和额外试剂)是在有第二种试剂(和额外试剂)存在下施用以后。操作人员和主体可以是相同的实体(例如,人)。
[0146]
ii. il-13活性在其中有害的病症本文中使用的术语“il-13活性在其中有害的病症”意图包括这样的疾病和其它病症:其中il-13在遭受所述病症的主体中的存在已经被证实或怀疑引起所述病症的病理生理学或者是促成所述病症的恶化的因素。在一个实施方案中,il-13活性在其中有害的病症是哮喘,例如,轻度哮喘或中度哮喘。在另一个实施方案中,il-13活性在其中有害的病症是嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)。
[0147]
因此,il-13活性在其中有害的病症是这样的病症:其中预期il-13活性的下降会减轻所述病症的征状和/或进展。这样的病症可以得到证实,例如,通过遭受所述病症的主体的生物流体中的il-13的浓度的增加(例如,主体的血清、血浆、滑液等中的il-13的浓度的增加),其可以被检测到,例如,使用如上所述的抗-il-13抗体。用本发明的抗体可以治疗的病症的非限制性例子包括哮喘,例如,轻度或中度哮喘、嗜酸性粒细胞性食管炎、以及在下面关于本发明的抗体的药物组合物的部分中讨论的那些病症。
[0148]
已经暗示il-13在造成与哮喘和eoe有关的病理学应答中具有关键作用。但是,差别免疫学途径的其它介质也参与疾病发病机制,并且阻断除了il-13以外的这些介质可能提供另外的治疗益处。
[0149]
a. 嗜酸性粒细胞病症,诸如嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)在一个实施方案中,使用本文中公开的抗-il-13抗体及其抗原结合部分可以治疗的嗜酸性粒细胞病症是嗜酸性粒细胞性胃肠道病症(egid)。嗜酸性粒细胞性胃肠道病症被定义为这样的病症:其在没有嗜酸性粒细胞增多症的已知原因(例如,药物反应、寄生虫感染和恶性肿瘤)存在下选择性地影响具有富含嗜酸性粒细胞的炎症的胃肠道。用本发明的组合物可治疗的egid(共同地称作“本发明的病症”)的例子包括、但不限于嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)、嗜酸性粒细胞性胃炎(eog)、嗜酸性粒细胞性十二指肠炎(ed)、嗜酸性粒细胞性空肠炎(ej)、嗜酸性粒细胞性回肠炎(ei)和嗜酸性粒细胞性结肠炎(ec)。
[0150]
前述疾病可以单独地或共同地呈现在主体中。诊断的频率可以随年龄、性别、种族和其它有关的遗传和/或环境因素而变化。例如,嗜酸性粒细胞性食管炎(变应性食管炎)可能是最常见的egid,其影响大致1%的人群。eoe是涉及嗜酸性粒细胞的浸润的食管的变应性炎性病症(arora等人,gastroenterology and hepatology, 第2卷, 第7期, 第523-530页(2004))。另一方面,嗜酸性粒细胞性胃肠炎(eg)是一种罕见的和异质的病症,其特征在于胃肠组织(例如,衬在胃、小肠和结肠上的组织)的斑块状或弥散性嗜酸性粒细胞浸润
(whitaker等人,eur j gastroenterol hepatol., 16(4):407-9 (2004))。嗜酸性粒细胞性十二指肠炎(ed)在儿科患者中最频繁地观察到,且特征在于导致白三烯产生的小肠的嗜酸性粒细胞性炎症(gaertner等人,gastroenterology research and practice, article id 857508 (2011))。嗜酸性粒细胞性回肠炎(ei)的特征在于嗜酸性粒细胞和肥大细胞向回肠中的大量浸润,且经常特征在于肠壁的穿孔和改造(lombardi等人,allergy, 62, 1343-1345 (2011))。嗜酸性粒细胞性空肠炎(ej)是一种特征在于嗜酸性粒细胞在肠中的浸润的罕见病症,且特征在于腹部疼痛和伴有重量减轻的梗阻征状(caliskan等人,langenbecks arch surg., 395:99-101 (2010))。
[0151]
本文中使用的“嗜酸性粒细胞性食管炎”(eoe)表示以食管内的异常嗜酸性粒细胞性炎症和食管功能病症为特征的炎性疾病。eoe的主要征状包括、但不限于胸部和腹部疼痛、吞咽困难、胃灼热、拒食、呕吐和食物嵌塞。eoe的临床病理学以脊或气管-样环在食管壁中的存在和食管粘膜层中的嗜酸性粒细胞浸润为特征。eoe目前通过食管的内窥镜检查术来诊断,继之以食管粘膜衬里的显微镜和生化分析。根据主体的状态,可以将eoe分类为变应性的或非变应性的。在一个实施方案中,本文中公开的方法可用于治疗变应性eoe。在另一个实施方案中,本文中公开的方法可用于治疗非变应性eoe。
[0152]
本文中使用的术语“治疗”、“处理”等是指减轻征状,暂时地或永久地消除征状的原因,或预防或减慢食管中嗜酸性粒细胞性炎症的征状的出现。在某些实施方案中,本发明的方法可用于减少与嗜酸性粒细胞病症(例如,eoe)有关的征状或指征的发生。本发明的特定实施方案涉及用于治疗或改善与嗜酸性粒细胞病症有关的至少一种征状或指征的方法。
[0153]
在这些实施方案中,本发明的方法可用于治疗或改善嗜酸性粒细胞性胃肠道病症(egid)的至少一种征状或指征。所述egid特别地选自嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)、嗜酸性粒细胞性胃炎(eog)、嗜酸性粒细胞性十二指肠炎(ed)、嗜酸性粒细胞性空肠炎(ej)、嗜酸性粒细胞性回肠炎(ei)和嗜酸性粒细胞性结肠炎(ec)。根据该实施方案可治疗的征状或指征包括、但不限于嗜酸性粒细胞浸润、胃肠道的改造、穿孔、炎症、肠运动的梗阻、便秘、腹部疼痛、重量减轻等。
[0154]
具体地,本发明的方法可用于治疗或改善嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)的至少一种征状或指征。根据该实施方案可治疗的与eoe有关的征状或指征包括、但不限于:食管的炎症、食管壁的增厚、气管-样环或脊在食管中的出现、胸部和腹部疼痛、拒食、呕吐、吞咽困难和食物嵌塞。
[0155]
在这些实施方案中,将本发明的治疗组合物施用给需要这种组合物的主体。本文中使用的表述“有此需要的主体”是指表现出嗜酸性粒细胞病症的一种或多种征状或指征和/或已经被诊断出嗜酸性粒细胞病症的人或非人哺乳动物。具体地,所述主体表现出与egid有关的一种或多种征状或指征,其中所述egid选自eoe、eg、ed、ei、ej和ec。特别地,所述主体表现出与嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)有关的一种或多种征状或指征。
[0156]
在某些实施方案中,本发明的方法可以用于治疗表现出升高的一种或多种egid-相关的标志物水平的主体。例如,本发明的方法包括治疗具有升高的血清ige (变应原特异性的ige或总ige库或二者)水平或升高的嗜酸性粒细胞趋化因子-3水平的主体。在其它实施方案中,所述主体可能表现出其它生理学标志物,例如,促炎症介质(诸如肥大细胞)的过表达、增强的粘膜的嗜酸性粒细胞浸润、上皮衬里的增厚、吞咽困难、食物嵌塞、胸部和腹部
可以包括具有遗传性结缔组织病症的主体的子集。
[0164]
在其它实施方案中,所述选择步骤可以用于鉴别更可能从使用il-13抗体或其抗原结合部分的治疗受益的群体的子集。这样的群体的子集的一个例子是以前已经经历使用至少一种类固醇试剂的治疗、但是被认为无应答、难治或已经从使用类固醇试剂的治疗复发的eoe患者。
[0165]
在另外包括选择易感主体群体的治疗实施方案中,所述方法可以包括执行用于检测与egid有关的疾病特异性标志物的一种或多种试剂和/或工具。例如,egid-相关的标志物可以包括蛋白标志物诸如升高的ige水平或升高的嗜酸性粒细胞趋化因子-3水平。在其它实施方案中,所述egid-相关的标志物可以包括生理学标志物,例如,促炎症介质的食管过表达、增强的粘膜衬里的嗜酸性粒细胞浸润水平、上皮的增厚、吞咽困难、食物嵌塞、胸部和腹部疼痛或它们的组合。也可以采用前述标志物的组合,例如,生物标志物和生理学标志物。
[0166]
在治疗eoe-特异性的主体的上下文中,本发明的方法可以包括首先基于eoe-特异性的标志物的检测而鉴别遭受eoe的主体的子集。eoe-特异性的标志物的例子包括生物标志物,例如,蛋白标志物和生理学标志物。例如,eoe-特异性的生物标志物可以是选自食管嗜酸性粒细胞、嗜酸性粒细胞趋化因子-3、骨膜蛋白、血清ige、il-13、il-5、血清胸腺和活化调节的趋化因子(tarc)、胸腺基质淋巴细胞生成素(tslp)、血清嗜酸性粒细胞性阳离子蛋白(ecp)和嗜酸性粒细胞-衍生的神经毒素(edn)的分子。eoe-相关的生理学标志物的例子包括,例如,在食管中每个高倍视野(hpf)≧15个嗜酸性粒细胞的计数、升高的周围嗜酸性粒细胞计数(》300个细胞/ μl)或升高的血清ige (》150 ku/l)或它们的组合。也可以采用前述标志物的组合,例如,生物标志物和生理学标志物。
[0167]
可替代地或另外,所述选择步骤可能涉及嗜酸性粒细胞浸润的确定、胃肠道的改造、穿孔、炎症、肠运动的梗阻、便秘、腹部疼痛、重量减轻等。关于eoe,所述选择步骤可能涉及确定食管的炎症、食管壁的增厚、气管-样环或脊在食管中的出现、胸部和腹部疼痛、拒食、呕吐、吞咽困难和食物嵌塞。一种阳性鉴别可能涉及至少1种、至少2种、至少3种或更多种前述标志物的存在。
[0168]
具体地,为根据本发明的治疗选择的主体包括表现出至少一种前述特性(例如,食物变应性、特应性皮炎、哮喘、变应性鼻炎和变应性结膜炎)的主体,并且其也是egid-相关的生物标志物(例如,ige、嗜酸性粒细胞趋化因子-3、骨膜蛋白、il-5或il-13)试验阳性的。
[0169]
在有关的实施方案中,“有此需要的主体”包括对变应原易感的主体。例如,“有此需要的主体”包括可能表现出下述特征之一的主体:(a)当暴露于一种或多种变应原时易发变应性或应答;(b)以前已经表现出对一种或多种变应原的变应性应答或反应;(c)具有已知的变应性史;和/或(d)表现出变应性应答或过敏反应的迹象或征状。在某些实施方案中,所述主体是对与egid有关的变应原变应性的,或者其使所述主体易感或易于发生egid。具体地,所述主体是对与eoe有关的变应原变应性的,或者其使所述主体易感或易于发生eoe。
[0170]
本文中使用的术语“变应原”包括能够在敏感个体中刺激变应性应答的任何物质、化学品、颗粒或组合物。变应原可以被包含在食物产品内或源自食物产品,例如,乳制品(例如,牛奶)、蛋、小麦、大豆、玉米、黑麦、鱼、贝类、花生和树坚果。可替换地,变应原可以被包含在非食物产品内或源自非食物产品,例如,灰尘(例如,含有尘螨)、花粉、昆虫毒液(例如,
蜜蜂、黄蜂、蚊子等的毒液)、霉菌、动物毛皮垢屑、胶乳、药剂、药物、豚草、草和桦木。
[0171]
在某些实施方案中,术语“有此需要的主体”包括表现出对食物变应原的变应性的群体的子集。例如,“有此需要的主体”可以包括对食物产品所含的变应原具有变应性的主体,所述食物产品包括、但不限于乳制品、蛋、小麦、大豆、玉米、黑麦、鱼、贝类、花生、树坚果、牛肉、鸡肉、燕麦、大麦、猪肉、四季豆和水果诸如苹果和菠萝。
[0172]
在某些实施方案中,该术语包括对非食物变应原诸如从灰尘、霉菌、昆虫、植物(包括花粉)和宠物(诸如猫和狗)衍生出的变应原具有变应性的主体。非食物变应原(也被称作环境变应原或气源性变应原)的例子包括、但不限于屋尘螨变应原、花粉变应原、动物毛皮垢屑变应原、昆虫毒液、草变应原和胶乳。
[0173]
本文中使用的短语“变应性应答”、“变应性”、“变应性征状”等包括一种或多种选自以下的征象或征状:风疹(例如,荨麻疹)、血管性水肿、鼻炎、哮喘、呕吐、喷嚏、流鼻水、窦炎、含泪眼、哮鸣、支气管痉挛、减小的呼气流量峰值(pef)、胃肠疼痛、潮红、唇肿大、舌肿大、血压降低、过敏反应和器官功能病症/衰竭。“变应性应答”、“变应性”、“变应性征状”等也包括免疫学应答和反应,例如,增加的ige产生、增加的变应原-特异性的免疫球蛋白产生和/或嗜酸性粒细胞增多症。
[0174]
本发明的实施方案涉及治疗原初的主体以及以前治疗过的主体的治疗。所述主体可以包括应答者、无应答者、难治的或复发的主体。
[0175]
术语“治疗原初的”意在包括从未积极地针对任何嗜酸性粒细胞病症进行过治疗的主体。egid的现有治疗模式包括,例如,饮食疗法(即,远离特定食物)、机械干预(例如,扩张食管、结肠或小肠,包括外科手术)或药理学疗法(即,使用药学试剂)。
[0176]
具体地,在该实施方案下,提供了一种用于治疗以前已经经历药理学疗法的遭受嗜酸性粒细胞病症的主体的方法。在egid的上下文中,药理学疗法可以包括,例如,使用酸性助悬剂诸如质子泵抑制剂,用糖皮质激素诸如氟替卡松、布地奈德和环索奈德治疗,使用前列腺素d2受体拮抗剂诸如oc000459,全身或局部使用抗组胺药和/或肥大细胞稳定剂诸如色甘酸,和使用抗体诸如美泊珠单抗、瑞利珠单抗、奥马珠单抗、英夫利昔单抗或实验试剂诸如孟鲁司特的疗法。特别地,在该实施方案下,所述主体是对使用一种或多种前述药理学试剂的疗法无应答的或已经从使用一种或多种前述药理学试剂的疗法复发。
[0177]
因此,本发明的实施方案涉及用于治疗、预防或改善主体中的egid的至少一种征状或指征、或者降低其发生率的方法,所述主体以前已经经历针对egid的疗法且其被视作对所述egid疗法无应答或已经从所述egid疗法屈服或复发,所述方法包括给所述主体施用治疗有效量的白介素-13抗体或其抗原结合部分。所述主体优选地是表现出与eoe、eg、ed、ei、ej或ec有关的至少一种征状或指征的人主体。具体地,在这些实施方案中,所述主体已经从类固醇疗法复发或是类固醇疗法难治的,例如,使用氟替卡松、布地奈德和环索奈德(包括有关的分子,例如,前述类固醇试剂的互变异构体、类似物、衍生物)的疗法。氟替卡松、布地奈德和环索奈德等的同源物的代表性例子是已知的,例如,经由pubchem化合物数据库。
[0178]
用于鉴别难治的主体的方法是本领域已知的。例如,在30天(对于口服疗法)或7-10天(对于静脉内疗法)内对多达20-80 mg/天(特别是在40-60 mg/天之间)的糖皮质激素不具有有意义的临床应答的主体被视作类固醇难治的。可以在病理学上、在组织学上或在
临床上确定类固醇试剂在治疗嗜酸性粒细胞病症中的有意义的临床应答。这样的方法可能涉及实验室研究、内窥镜分析、粪便分析、成像研究(例如,经由计算机体层摄影术(ct)肠动描记法、磁共振(mr)肠动描记法或专用小肠系列检查)等。
[0179]
2.治疗效力的确定根据本发明的其它方面,将用于治疗eoe的方法与治疗的有效性的确定相联系。在该实施方案下,给所述主体施用包含治疗有效量的il-13拮抗剂的组合物,并在治疗之前和/或之后监测eoe-相关的标志物的变化。如果与所述施用之前主体中的标志物水平相比,至少一种eoe-相关的标志物(例如,食管嗜酸性粒细胞计数、嗜酸性粒细胞趋化因子-3、ige等)在所述组合物施用以后的时间减少,那么认为所述治疗是有效的。在该实施方案下,与所述组合物的治疗(或安慰剂的治疗)之前的标志物水平相比在含有il-13抗体或其抗原结合部分的组合物治疗之后的标志物水平的至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更多的下降,表示所述治疗是有效的。
[0180]
在一个实施方案中,本发明的方法包括确定eoe-相关的参数,其选自: (a)吞咽困难临床征状频率/严重程度,如通过每日征状日志(dsd)评分所评估的;(b)高峰食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf);(c)平均eesai pro评分;(d)主体的疾病严重程度总体评估;(e)临床医师的疾病严重程度总体评估;和(f)治疗相关的不利事件(teae)的数目和/或严重程度,其中的每一个在下面更详细地描述。
[0181]
在一个实施方案中,为了确定对治疗的应答,在用抗体或其抗原结合部分治疗之前和之后在主体中确定平均食管嗜酸性粒细胞计数。使用本领域技术人员已知的任何方法,例如,但不限于组织学、流式细胞计量术,可以评估嗜酸性粒细胞计数。参见,美国专利申请公开号2013/0096096和2009/0181099和rodrigo等人(the american journal of gastroenterology 103, 435-442 (2008)),在其中的公开内容通过引用并入本文。在一个实施方案中,从食管中的至少1个、至少2个、至少3个、至少4个、至少5个、至少6个、至少7个、至少8个、至少9个、至少10个、至少15个、至少20个、至少25个、至少30个或更多个发炎的高倍视野测量平均食管嗜酸性粒细胞计数。在一个实施方案中,通过商购可得的试剂盒中的任一种可以测量嗜酸性粒细胞计数。
[0182]
在一个实施方案中,在用抗体或其抗原结合部分治疗之前,在主体中确定在食管的至少5个发炎的高倍视野(hpf)中的平均食管嗜酸性粒细胞计数。在一个实施方案中,》15个细胞/hpf的计数指示,所述主体具有eoe。典型地,在eoe主体中的平均食管嗜酸性粒细胞计数是在50-200个细胞/hpf之间,在80-150个细胞/hpf之间,和具体地在90-125个细胞/hpf之间。在一个有关的实施方案中,在15-40个细胞/hpf之间的计数指示eoe的轻等级/严重程度,在41-80个细胞/hpf之间的计数指示eoe的中等级/严重程度,且》80个细胞/hpf的计数指示eoe的高等级/严重程度。
[0183]
在一个实施方案中,为了确定对治疗的应答,在用抗体或其抗原结合部分治疗之前(基线)和治疗之后(治疗后),在主体中确定在食管的至少5个发炎的高倍视野(hpf)中的平均食管嗜酸性粒细胞计数。在一个实施方案中,与治疗前水平相比治疗后水平中的平均食管嗜酸性粒细胞计数的下降指示治疗的效力。在这些实施方案中,eoe主体中的基线平均食管嗜酸性粒细胞计数是在50-200个细胞/hpf之间,在80-150个细胞/hpf之间,或优选地在90-125个细胞/hpf之间。在一个实施方案中,在0-85个细胞/hpf之间、优选地在10-60个
细胞/hpf之间和特别优选地在15-40个细胞/hpf之间的治疗后平均食管嗜酸性粒细胞计数指示对治疗的应答。
[0184]
在一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),在主体中确定在食管的至少5个发炎的高倍视野(hpf)中的高峰食管嗜酸性粒细胞计数,其中治疗后高峰食管嗜酸性粒细胞计数相对于基线的下降指示治疗的效力。在一个实施方案中,eoe主体中的基线高峰食管嗜酸性粒细胞计数是在18-389个细胞/hpf之间,在40-160个细胞/hpf之间,或在70-140个细胞/hpf之间。在一个实施方案中,在0-157个细胞/hpf之间、优选地在10-70个细胞/hpf之间和特别优选地在14-40个细胞/hpf之间的治疗后高峰食管嗜酸性粒细胞计数指示对治疗的应答。
[0185]
在另一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),执行主体中的吞咽困难临床征状的评分,其中治疗后吞咽困难临床征状相对于基线的下降指示治疗的效力。吞咽困难临床征状包括,例如,当不能吞咽时具有疼痛(吞咽痛),具有食物卡在喉咙或胸部中或在胸骨(胸板)后面的感觉,多涎,反胃,频繁胃灼热,酸回流,意外的重量减轻,当吞咽时咳嗽或作呕,嘶哑的/听不到的言语等。使用本领域技术人员已知的任何方法,可以评估吞咽困难临床征状。参见,cheung等人(j. pediatr. gastroenterol. nutr., 37:498-503 (2003))和furata等人(gastroenterology; 133:1342-1363 (2007)),在其中的公开内容通过引用并入本文。在一个实施方案中,通过患者的吞咽困难征状问卷调查(dsq)评分,评估吞咽困难临床征状。确定dsq评分的方法是本领域已知的。参见,例如,美国专利申请公开号2016/0078186和delton等人(aliment pharmacol ther., 38(6):634-642 (2013)), 在其中的公开内容通过引用并入本文。在下面在实施例部分中提供了用于确定dsq的一种代表性方法。
[0186]
在另一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),执行主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分,其中治疗后平均吞咽困难征状复合日志评分相对于基线的下降指示治疗的效力。在一个实施方案中,》5的平均吞咽困难征状复合日志评分指示,所述主体具有eoe。在一个实施方案中,在治疗前在eoe主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分是在5-50之间,在19-40之间,或在25-35之间。在一个实施方案中,在5-15之间的基线评分指示轻等级/严重程度eoe,在16-25之间的评分指示中等级/严重程度eoe,且》25的评分指示高等级/严重程度eoe。在一个实施方案中,在0-40之间、优选地在6-32之间和特别优选地在10-20之间的治疗后评分指示有效的治疗。在类固醇难治的具有eoe的主体中,基线评分可以是在5-50之间,在19-40或25-35之间;且在0-40之间、优选地在10-24之间和特别优选地在14-18之间的治疗后评分指示对治疗的应答。
[0187]
在另一个实施方案中,可以在治疗前和治疗后测量嗜酸性粒细胞性食管炎活性指数(eesai或eoeai)的评分。使用本领域技术人员已知的任何方法,可以评估eesai。参见,美国专利公开号2015/0017176和schoepfer等人(gastroenterology, 147(6):1255-66 (2014))。也参见schoepfer等人的综述文章(digestive diseases, 第32卷, 第1
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2期(2014)),其描述了一个多参数方案来确定eesai,包括确定(a)征状、(b)生活质量、(c)内窥镜检查术、(d)组织学、(e)血液标志物和(f)技术评估,例如,endoflip。在下面在实施例部分中举例说明了一种类似的技术。
[0188]
在一个实施方案中,》10的基线评分指示,所述主体具有eoe。典型地,eoe主体中的
eesai是在5-100之间,在30-90之间,或在40-70之间。在一个实施方案中,在0-20之间的eesai评分指示轻等级/严重程度eoe,在21-40之间的评分指示中等级/严重程度eoe,且》41的评分指示高等级/严重程度eoe。
[0189]
在另一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),确定主体中的eesai,其中治疗后eesai相对于基线的下降指示治疗的效力。在这些实施方案中,在5-90之间、优选地在10-60之间、和特别优选地在20-40之间的治疗后水平指示对治疗的应答。在类固醇难治的eoe主体中,基线水平是在5-100之间,在30-90之间,或优选地在40-70之间,且在5-90之间、优选地在20-50之间和特别优选地在30-40之间的治疗后水平指示对治疗的应答。通常,低于40的eesai的下降指示显著有效的治疗。
[0190]
在另一个实施方案中,确定内窥镜参考评分(erefs)。使用本领域技术人员已知的任何方法,例如,但不限于测量炎症性和改造性食管特征,可以评估eref评分。参见,美国专利公开号2015/0017176和van rhijn等人(endoscopy 46(12):1049-55 (2014))。在下面在实施例部分中提供了用于测量eref评分的一种代表性方法。eoe主体中的基线eref评分是在4-10之间,在5-10之间,或在7-9之间。在一个实施方案中,在0-4之间的eref评分指示轻等级/严重程度eoe,在4-7之间的评分指示中等级/严重程度eoe,且》7的评分指示高等级/严重程度eoe。
[0191]
在另一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),确定主体中的eref,其中治疗后eref相对于基线的下降指示治疗的效力。在这些实施方案中,基线水平是在4-10之间,在5-10之间,或优选地》9。在一个实施方案中,在3-8之间、优选地在4-7之间和特别优选地《5.5的治疗后水平指示对治疗的应答。
[0192]
在一个实施方案中,炎症特异性的eref的基线水平是在4-8之间,在5-8之间,或》5。在另一个实施方案中,在1-6之间、优选地在2-5之间和特别优选地《3.0的炎症特异性的eref的治疗后水平指示对治疗的应答。在另一个实施方案中,改造特异性的eref的基线水平是在2-5之间,在3-4之间,或》2.5。在一个实施方案中,在2-4之间、优选地在2.2至3.1之间和特别优选地《3.0的炎症特异性的eref的治疗后水平指示对治疗的应答。
[0193]
在另一个实施方案中,确定主体的疾病严重程度总体评估。
[0194]
在另一个实施方案中,确定临床医师的疾病严重程度总体评估。在另一个实施方案中,确定主体的疾病严重程度总体评估和临床医师的疾病严重程度总体评估的组合。eoe疾病治疗的总体评估是本领域众所周知的。例如,schoepfer等人(the american journal of gastroenterology 110, 402-414 (2015))描述了涉及肠胃科医生(physga)的评估的方法,其涉及在食管胃十二指肠镜检查以后分析活组织检查样品,基于患者病史以及内窥镜和组织学发现在从0至10范围内的likert量表上做出评分。平行地执行患者(patga)对eoe征状严重程度的第二次总体评估,其也在从0 (无活性)至10 (最大活性)范围内的likert量表上做出评分。使用线性回归和方差分析来量化归因于总体评估的eoe征状以及内窥镜和组织学发现的严重程度的变化所达到的程度,将其报告为各个评分。在下面在实施例部分中举例说明了一种类似的技术。
[0195]
在另一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),在主体中确定所述主体的疾病严重程度评估,其中所述主体的疾病严重程度评估相对于基线的下降指示治疗的效力。在一个实施方案中,》1的基线评分指示,所述主体具有
eoe。在一个实施方案中,在2-9之间、在3-8之间或》5的基线评分指示,所述主体具有eoe。在一个实施方案中,在1-3之间的主体的评分指示轻等级/严重程度eoe,在4-7之间的评分指示中等级/严重程度eoe,且》7的评分指示高等级/严重程度eoe。在一个实施方案中,在0-9之间、优选地在2-6之间和特别优选地《3的治疗后水平指示对治疗的应答。
[0196]
在另一个实施方案中,在抗体或其抗原结合部分施用之前(基线)和施用之后(治疗后),在主体中确定临床医师的疾病严重程度评估,其中临床医师的疾病严重程度评估相对于基线的下降指示治疗的效力。在一个实施方案中,》2的临床医师评分指示,所述主体具有eoe。在一个实施方案中,eoe主体中的基线临床医师评分是在3-10之间,在3-9之间,或》6。在一个实施方案中,在1-3之间的临床医师评分指示轻等级/严重程度eoe,在4-7之间的评分指示中等级/严重程度eoe,且》7的评分指示高等级/严重程度eoe。在一个实施方案中,在0-8之间、优选地在2-6之间和特别优选地《3.3的治疗后水平指示对治疗的应答。
[0197]
在有关的实施方案中,确定在组合物施用之前(基线水平)和组合物施用之后(治疗后水平)的主体评分和临床医师评分的复合体(合成评分),其中治疗后合成评分相对于基线的下降指示治疗的效力。在一个实施方案中,基线合成评分是在2-20之间,在6-18之间,或》11。在另一个实施方案中,在0-17之间、优选地在4-12之间和优选地《6.3的治疗后水平指示对治疗的有效应答。
[0198]
如本领域普通技术人员会理解的,通过对比以下水平,可以确定eoe-相关的生物标志物的增加或减少:(i)在包含il-13抗体或其抗原结合部分的组合物施用之后的确定时间点在主体中测得的生物标志物的水平,(ii)在包含il-13抗体或其抗原结合部分的组合物施用之前在患者中测得的生物标志物的水平(即,“基线测量”)。测量生物标志物的确定时间点可以是,例如,在包含il-13抗体或其抗原结合部分的组合物施用之后约4小时、8小时、12小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、15天、20天、35天、40天、50天、55天、60天、65天、70天、75天、80天、85天或更多。
[0199]
根据本发明的某些实施方案,在施用包含il-13抗体或其抗原结合部分的组合物以后,主体可能表现出ige和/或嗜酸性粒细胞趋化因子-3中的一种或多种的水平的下降。例如,在施用第一、第二、第三或第四剂包含约75 mg至约600 mg的抗-il-13抗体的组合物(例如,rpc4046)以后约第1天、第4天、第8天、第15天、第22天、第25天、第29天、第36天、第43天、第50天、第57天、第64天、第71天或第85天,根据本发明的主体可能表现出从基线约1%、2%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更多的嗜酸性粒细胞趋化因子-3下降(其中“基线”被定义为在即将第一次施用之前在所述主体中的嗜酸性粒细胞趋化因子-3水平)。类似地,在施用第一、第二、第三或第四剂包含约75 mg至约600 mg的抗-il-13抗体的组合物(例如,rpc4046)以后约第1天、第4天、第8天、第15天、第22天、第25天、第29天、第36天、第43天、第50天、第57天、第64天、第71天或第85天,根据本发明的主体可能表现出从基线约1%、2%、5%、10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或更多的ige下降(其中“基线”被定义为在即将第一次施用之前在所述主体中的ige水平)。
[0200]
本发明也包括用于确定主体是否适合用包含il-13抗体或其抗原结合部分的组合物治疗的方法。例如,如果个体在接受包含il-13抗体或其抗原结合部分的组合物之前表现出表明疾病状态的eoe-相关的生物标志物水平,因此将所述个体鉴别为本发明的组合物
(包含抗-il-13抗体的组合物)的施用将对其有益的合适患者。在有关的实施方案中,本发明包括治疗合适的主体的方法,其中合适的主体可以是对eoe更易感的,例如,由于食物变应性或特应性疾病。例如,本发明包括这样的方法,其包括给具有食物变应性、特应性皮炎、哮喘、变应性鼻炎或变应性结膜炎的主体施用il-13抗体或其抗原结合部分。在另一个实施例中,本发明包括这样的方法,其包括给主体施用il-13抗体或其抗原结合部分,所述主体具有孟德尔遗传性结缔组织病症,例如,马方综合征, loeys-dietz综合征、过渡活动性ehlers danlos综合征(eds)或关节活动过度综合征(jhs)。这样的主体群体可能具有升高的eoe-相关的生物标志物水平。
[0201]
根据某些示例性实施方案,如果个体表现出以下一项或多项,可以将所述个体鉴别为抗-il-13疗法的好候选人:(i)大于约30 pg/ml、大于约40 pg/ml、大于约50 pg/ml、大于约100 pg/ml、大于约1500 pg/ml、大于约200 pg/ml、大于约250 pg/ml、大于约300 pg/ml、大于约350 pg/ml、大于约400 pg/ml、大于约450 pg/ml或大于约500 pg/ml的嗜酸性粒细胞趋化因子-3水平;或(ii)大于约114 ku/l、大于约150 ku/l、大于约500 ku/l、大于约1000 ku/l、大于约1500 ku/l、大于约2000 ku/l、大于约2500 ku/l、大于约3000 ku/l、大于约3500 ku/l、大于约4000 ku/l、大于约4500 ku/l或大于约5000 ku/l的血清ige水平;或(iii)在主体的食管中15个嗜酸性粒细胞/高倍视野。另外的标准,诸如eoe的其它临床指标(例如,食管壁的增厚和指示eoe的食物变应性),可以与前述eoe-相关的生物标志物中的任一种组合使用,以将个体鉴别为如本文别处所述的抗-il-13疗法的合适候选物。
[0202]
在其它实施方案中,所述诊断方法可以由基因表达测定的效力来辅助。在基因表达分析中使用的芯片和对egid特异性的标志物是本领域已知的,例如,美国专利公开号2015/0045334和2014/0286896,它们的内容通过引用整体并入本文。
[0203]
本文中使用的“嗜酸性粒细胞浸润”表示嗜酸性粒细胞在主体的器官或组织(包括血液、食管、胃、十二指肠、回肠、结肠)中的存在。在本发明的上下文中,术语“嗜酸性粒细胞浸润”表示嗜酸性粒细胞在胃肠道的区域(包括、但不限于,食管、胃、回肠、十二指肠、结肠等)的粘膜衬里中的存在。可以分析嗜酸性粒细胞浸润,例如,在遭受嗜酸性粒细胞病症的主体的组织活组织检查中。具体地,从遭受选自eoe、eg、ed、ej、ei和ec的egid的主体的组织活组织检查做出诊断。在活组织检查中有用的组织包括,例如,食管、肠、十二指肠、空肠、回肠、结肠或它们的组合。也可以任选地和/或额外地采用其它组织样品,例如,胃肠道的器官和衬里。
[0204]
根据特定实施方案,“嗜酸性粒细胞浸润”表示≧15个嗜酸性粒细胞/高倍视野(hpf)在食管中的存在。术语“高倍视野”表示用于观察组织(例如,来自主体的食管)中的嗜酸性粒细胞的显微镜的200倍(或更大)的标准总放大率。具体地,hpf表示显微镜的400倍的标准总放大率。
[0205]
在某些实施方案中,“嗜酸性粒细胞浸润”包括白血球(例如,淋巴细胞、嗜中性粒细胞和肥大细胞)向组织中的浸润。通过细胞表面标志物诸如嗜酸性粒细胞特异性的标志物(例如,cd11clow/neg、siglecf 、f4/80 、emr1 、siglec 8 和mbp2 )、巨噬细胞特异性的标志物(例如,cd11b 、f4/80 、cd14 、emr1 和cd68 )、嗜中性粒细胞特异性的标志物(例如,cd11b 、ly6g 、ly6c 、cd11b 和cd66b )和t-细胞特异性的标志物(例如,cd3 cd4 cd8 ),可以检测白血球向例如食管组织中的浸润。
[0206]
本文中使用的嗜酸性粒细胞的减少是指,与没有用il-13抑制剂(例如,il-13抗体或其抗原结合部分)治疗的相同或等同主体相比,在经治疗的主体中在特定目标组织/部位(例如,具有egid的主体的食管、肠、十二指肠、空肠、回肠和/或结肠)测得的嗜酸性粒细胞和其它白血球的数目减少。在这些实施方案中,用本发明的组合物治疗会导致所述组织/部位中的嗜酸性粒细胞和/或白血球的数目与未治疗的主体的数目相比至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少70%、至少80%、至少90%或至少99%的净减少。
[0207]
具体地,其中所述egid是eoe,用本发明的组合物治疗会导致食管中的嗜酸性粒细胞和/或白血球的数目与未治疗的主体的数目相比至少5%、至少10%、至少20%、至少50%、至少70%、至少80%、至少90%或至少99%的净减少。
[0208]
在某些实施方案中,减少嗜酸性粒细胞浸润是指,在目标组织/部位的活组织检查中检测到少于50个嗜酸性粒细胞/高倍视野,特别是少于30个嗜酸性粒细胞、少于20个嗜酸性粒细胞、少于15个嗜酸性粒细胞、少于10个嗜酸性粒细胞、少于8个嗜酸性粒细胞或少于6个嗜酸性粒细胞/高倍视野(hpf)。在与egid的治疗有关的实施方案中,减少嗜酸性粒细胞浸润是指,在gi组织(例如,衬食管的上皮粘膜层)的活组织检查中检测到少于15个嗜酸性粒细胞、少于12个嗜酸性粒细胞、少于10个嗜酸性粒细胞、少于8个、或少于6个嗜酸性粒细胞/hpf。在某些实施方案中,嗜酸性粒细胞浸润的减少是指,在主体的食管粘膜层中没有检测到嗜酸性粒细胞。
[0209]
在一个实施方案中,使用多种特异性的和总体的标志物,在不同时间点评估已经用il-13抗体或其抗原结合部分治疗的主体。所述特异性的标志物可以是前述的生物标志物或生理学标志物。如在实施例部分中详细描述的,在基线(t=0)和目标时间点(t=ti)之间的标志物的平均和/或高峰水平的调节允许预测和推荐随访。例如,取决于eoe特异性的标志物的减少,可以将治疗的预后描述为好的或有利的。在该场景下,基于观察到的治疗后标志物水平的至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更多的下降水平,可以将所述主体推荐继续用所述治疗剂治疗。
[0210]
另外,本发明的有关实施方案提供了用于监测接受针对嗜酸性粒细胞病症的治疗的主体的方法,所述方法包括确定治疗之前和之后的参数。更具体地,所述嗜酸性粒细胞病症是选自eoe、eg、ej、ei、ed和ec的egid。这样的参数的代表性例子包括egid的前述生理学标志物或生物标志物的减少。在其它实施方案中,所述参数选自:主体的疾病严重程度总体评估;临床医师的疾病严重程度总体评估;主体的总印象(例如,基于健康评分);组织学等级和阶段调节的疾病评分;治疗引起的不利事件(teae)的数目和严重程度(共同地称作“宏观评估”)。
[0211]
在与基于宏观评估而监测egid (例如,eoe)治疗有关的前述实施方案中,主体的/临床医师的疾病严重程度、组织学/阶段评分或teae数目评估相对于治疗前水平的至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%或更多的治疗后下降指示有效的治疗。同样地,改善和/或健康评分与在治疗前得到的那些相比至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少1倍、至少1.2倍、至少1.5倍、至少1.8倍、至少2.0倍、至少2.5倍、至少3.0倍或更多的治疗后增加指示有效的治疗。
[0212]
b. 哮喘哮喘是以哮鸣、气绝、胸部紧迫感和咳嗽为特征的气道的慢性炎症性病症。哮喘影
响大约2千万美国人,且约75%的哮喘患者是成年人。在成年哮喘患者中,大约60%的哮喘患者具有轻度疾病,约20%具有中度疾病,且剩余的20%具有严重疾病。
[0213]
认为白介素-13 (il-13)在人哮喘的发病机制中是关键性的,因为升高的il-13水平存在于哮喘患者的肺中,并且这些水平与疾病严重程度相关。同样地,增加的il-13存在于具有中等至严重哮喘的患者的痰和肺活组织检查中,所述患者用吸入的皮质类固醇(ics)或全身皮质类固醇治疗并继续呈现征状。此外,人il-13遗传多态性与哮喘和特应性(变应性超敏反应)有关。il-13结合两种受体il 13rα1和il 13rα2。il 13是一种经充分验证的哮喘靶标,因为在哮喘的多种临床前模型中使用不同的il-13拮抗机理已经证实了效力。
[0214]
根据本发明可治疗的哮喘的例子包括、但不限于:变应性和非变应性哮喘(例如,由感染例如呼吸道合胞体病毒(rsv)引起的哮喘,例如,在年轻儿童中))、慢性阻塞性肺疾病(copd)以及涉及气道炎症、嗜酸性粒细胞增多症、纤维化和过度粘液产生的其它病症,例如,囊性纤维化和肺纤维化。
[0215]
在其它实施方案中,本技术提供了治疗(例如,减轻、改善)或预防与呼吸病症有关的一种或多种征状的方法,所述呼吸病症是例如哮喘(例如,变应性和非变应性哮喘);变应性;慢性阻塞性肺疾病(copd);涉及气道炎症、嗜酸性粒细胞增多症、纤维化和过度粘液产生的病症,例如,囊性纤维化和肺纤维化。例如,哮喘的征状包括、但不限于:哮鸣、呼吸短促、支气管收缩、气道高反应性、减小的肺容量、纤维化、气道炎症和粘液产生。所述方法包括以足以治疗(例如,减轻、改善)或预防一种或多种征状的量给所述主体施用il-13拮抗剂,例如,il-13抗体或其片段。可以治疗性地或预防性地或二者兼顾地施用il-13抗体。可以将il-13拮抗剂(例如,抗-il-13抗体或其抗原结合部分)单独地或与如本文中所述的其它治疗模态组合地施用给主体。优选地,所述主体是哺乳动物,例如,遭受il-13-相关的病症(诸如哮喘,如本文中所述的)的人。
[0216]
根据前述内容,本发明的实施方案涉及具有哮喘的患者的治疗,其包括给有此需要的主体施用il-13抗体或其抗原结合片段,包括含有这样的抗体的组合物。预见到,被发现可有效地治疗eoe的组合物的剂量和类型也可有效地治疗哮喘。
[0217]
此外,本发明的实施方案涉及评价这样的抗-il-13抗体或其抗原结合片段在降低主体的哮喘的严重程度或等级中的效力的方法。预见到,可有效地评价eoe的治疗效力的方法和测定也可适用于确定这样的药剂在治疗哮喘中的效力。
[0218]
本发明的抗体或其抗原结合部分可以单独地或组合地用于治疗这样的疾病。应当理解,本发明的抗体或其抗原结合部分可以单独使用,或者与额外试剂(例如,治疗剂)联合使用,所述额外试剂由熟练的技术人员针对它的预期目的选择。例如,所述额外试剂可以是本领域公知的治疗剂,其可用于治疗由本发明的抗体治疗的疾病或病症。所述额外试剂也可以是给治疗组合物赋予有益性质的试剂,例如,影响组合物的粘度的试剂。
[0219]
进一步应当理解的是,要被包括在本发明内的组合是对于它们的预期目的而言有用的那些组合。下述的试剂用于示例性目的,且无意进行限制。构成本发明的部分的组合可以是本发明的抗体和至少一种选自以下列表的额外试剂。如果所述组合使得形成的组合物可以执行它的预期功能,所述组合还可以包括超过一种额外试剂,例如,两种或三种额外试剂。
[0220]
所述联合治疗可以包括一种或多种il-13抑制剂,例如,抗-il-13抗体或其片段,它们与一种或多种另外的治疗剂(例如,一种或多种细胞因子和生长因子抑制剂、免疫抑制剂、抗炎剂(例如,全身性抗炎剂)、抗-纤维化剂、代谢抑制剂、酶抑制剂和/或细胞毒性剂或细胞抑制剂,如本文另外描述的)共同配制和/或共同施用。
[0221]
可以与一种或多种il-13拮抗剂(例如,抗-il-13抗体或其片段)共同施用和/或共同配制的优选另外治疗剂的例子包括、但不限于以下的一种或多种:吸入的类固醇;β-激动剂,例如,短效的或长效的β-激动剂;白三烯或白三烯受体的拮抗剂;组合药物诸如advair;ige抑制剂,例如,抗-ige抗体(例如,xolair);磷酸二酯酶抑制剂(例如,pde4抑制剂);黄嘌呤;抗胆碱能药物;肥大细胞-稳定剂诸如色甘酸;il-4抑制剂;il-5抑制剂;嗜酸性粒细胞趋化因子/ccr3抑制剂;组胺或它的受体(包括h1、h2、h3和h4)的拮抗剂,和前列腺素d或它的受体(dp1和crth2)的拮抗剂。这样的组合可以用于治疗哮喘和其它呼吸病症。可以与一种或多种抗-il-13抗体或其片段共同施用和/或共同配制的治疗剂的其它例子包括以下的一种或多种:tnf拮抗剂(例如,tnf受体的可溶性片段,例如,p55或p75人tnf受体或其衍生物,例如,75 kd tnfr-igg (75 kd tnf受体-igg融合蛋白, enbrel));tnf酶拮抗剂,例如,tnf转换酶(tace)抑制剂;毒蕈碱受体拮抗剂;tgf-β拮抗剂;干扰素γ;吡非尼酮;化学治疗剂,例如,甲氨蝶呤、来氟米特或西罗莫司(raparnycin)或其类似物,例如,cci-779;cox2和cpla2抑制剂;nsaid;免疫调节剂;p38抑制剂、tpl-2、mk-2和nfkb抑制剂,以及其它。
[0222]
其它优选组合是细胞因子抑制性抗炎药(csaid);其它人细胞因子或生长因子(例如,il-1、il-2、il-3、il-4、il-5、il-6、il-7、il-8、il-15、il-16、il-18、il-21、il-31、干扰素s、emap-ii、gm-csf、fgf、egf、pdgf和edothelin-1,以及这些细胞因子和生长因子的受体)的抗体或拮抗剂。本发明的抗体或其抗原结合部分可以与细胞表面分子(诸如cd2、cd3、cd4、cd8、cd25、cd28、cd30、cd40、cd45、cd69、cd80 (b7.1)、cd86 (b7.2)、cd90、ctla)或它们的配体(包括cd154)(gp39或cd40l)的抗体组合。
[0223]
治疗剂的优选组合可以在炎症级联的不同点处干扰;优选的例子包括:tnf拮抗剂如嵌合的、人源化的或人的tnf抗体、d2e7 (pct公开号wo 97/29131)、ca2 (remicade

)、cdp 571和可溶性的p55或p75 tnf受体、其衍生物(p75tnfr1gg (enbrel

)或p55tnfr1gg (来那西普)、以及tnf转换酶(tace)抑制剂;类似地,il-1抑制剂(白介素-1-转换酶抑制剂, il-1ra等)由于相同原因可能是有效的。其它优选组合包括白介素4。另一个优选组合是哮喘应答的其它关键角色,它们可以与il-13功能平行地、依赖于il-13功能或与il-13功能协同地起作用;特别优选的是il-9拮抗剂,包括il-9抗体。已经证实,il-13和il-9具有重叠的、但是不同的功能,且二者的拮抗剂的组合可能是最有效的。另一个优选组合是抗-il-5抗体。再其它优选组合包括趋化因子(包括mcp-1、mcp-4、嗜酸性粒细胞趋化因子、rantes、mdc、ccl-12和ccl-17 (tarc))和趋化因子受体(包括ccr2、ccr3、ccr4和cxcr4)的拮抗剂。其它组合可以包括哮喘介质(包括酸性哺乳动物壳多糖酶、crht2、胰凝乳蛋白酶、s1p1、s1p2、tyk2、rockii、stat6、p38、nfkb、磷酸二酯酶4 (pde-4)、肥大细胞类胰蛋白酶(trytase)、no、腺苷、ikk2、gata3、icam-1、vcam-1和icos)的拮抗剂。
[0224]
在美国专利申请公开号2008/0171014中的整个公开内容(包括其中引用的所有参考文献)都以它们的整体通过引用并入。
[0225]
下述实施例进一步例证了本发明,其不应解释为限制性的。在本技术中引用的所
有参考文献、专利和公开的专利申请的整个内容、以及图和序列表特此通过引用并入本文。
实施例
[0226]
实施例1:重组的人源化的、高亲和力、选择性的抗-白介素-13单克隆抗体对嗜酸性粒细胞性食管炎的效力的研究简介原代人食道上皮细胞的白介素(il)-13刺激会诱导嗜酸性粒细胞趋化因子-3(一种嗜酸性粒细胞化学引诱蛋白)和骨膜蛋白(一种细胞外基质粘着蛋白)的表达。这些il-13-诱导的蛋白在具有嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)的患者的食管组织中过表达,且强烈地促进变应性炎症。抗-il-13抗体(rpc4046 (也被称作13c5.5))结合人类型il-13和il-13序列变体r110q。已经证实这些细胞因子会增强人变应性炎症。rpc4046对il-13是高选择性的且不会结合其它细胞因子。
[0227]
目的在具有eoe的患者中在2期研究中评价了rpc4046的效力和安全性。试验的主要目的是表征rpc4046对来自具有有征状的嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)的主体的食管活组织检查样品中的嗜酸性粒细胞计数的影响。研究的次要目的是表征rpc4046对eoe的临床征状的影响;表征rpc4046对eoe内窥镜评分的影响;表征rpc4046对食管组织学发现的影响;和表征rpc4046的安全性和耐受性(包括抗-rpc4046抗体的开发)。
[0228]
研究设计在北美洲和瑞士在40个人(canters)中进行了一项双盲的、安慰剂对照的剂量发现研究。将具有eoe的患者(n=100,年龄18-65)随机化至在第1天静脉内负荷剂量的180 mg (低剂量; ld)或360 mg (高剂量; hd) rpc4046或安慰剂(pbo)(1:1:1),随后每周皮下施用15周。表1提供了患者人口统计的概述。在筛选过程中、在第16周时和在过早终止时(如果适用的话),从活组织检查测量食管嗜酸性粒细胞计数。使用嗜酸性粒细胞性食管炎活性指数(eesai)评估吞咽困难临床征状的频率和严重程度并记录在每日征状日志(dsd)中,其含有对标准问卷调查的回答,从其计算评分(表2)。在研究中监测安全性。主要端点是平均食道嗜酸性粒细胞计数中从基线(bl)向第16周的变化。为主要端点提供研究。次要端点包括吞咽困难临床征状频率和严重程度从基线(bl)向第16周的平均变化。
[0229]
表1:患者人口统计的概述.
a 百分比是基于随机化的主体的数目。
b itt群体由接受至少一剂研究药物的所有随机化的主体组成,根据随机化的治
疗指定治疗分配。
c 每个方案群体是来自具有高治疗顺应性且没有任何排除性方案偏差的itt群体的子集。
d 安全性群体由接受任何双盲研究药物的所有主体组成。根据实际接受的rpc4046的最高sc剂量,在该群体上进行安全性分析。
[0230]
双盲阶段之后跟着标签公开延伸(52周),其中用高剂量的rpc4046治疗所有主体。
[0231]
主体选择:基于下述标准选择/排除主体:包括标准:1. 在筛选之前在至少8周的高剂量ppi疗法之后经记录的eoe诊断;2. 在筛选内窥镜检查术中来自3个(近侧、中和/或远侧)食管水平中的2个,具有≥15/hpf的高峰嗜酸性粒细胞计数的eoe的组织学证据;3. 主体必须已经经历最少4天的吞咽困难并在筛选阶段的任何2个连续周中和在基线就诊之前2周中在≥70%的天完成dsq;4. 在筛选之前的4周中每周平均至少2次吞咽困难发作(摄入固体,无抗炎疗法)以及在筛选和基线之间的各周中每周平均至少2次经记录的吞咽困难发作的历史;将吞咽困难定义为难以吞咽固体食物,或具有固体食物卡住,由患者报告;5. 在筛选就诊之前必须保持稳定饮食≥3个月,并在筛选就诊时实际上继续任何饮食疗法和/或医学方案;排除标准:1. 先前参加rpc4046临床试验;2. 主体具有会危害主体的安全性或者干扰或复杂化eoe的征象或征状的评估的任何状况或异常;3. 主体在筛选之前8周内已经使用免疫调节疗法;4. 主体在使egd合格之前4周内已经在使用吞咽的局部皮质类固醇(为了eoe)或全身性皮质类固醇(为了任何病症),或预期在治疗阶段中使用;5. 主体已经在接受吸入的或鼻内的类固醇且在筛选就诊之前没有稳定治疗大于3个月,或预期在研究阶段中变化;6. 主体已经开始、中断或改变用于任何病症的ppi、h2拮抗剂、抗酸药、抗组胺药或白三烯抑制剂的剂量方案;7. 主体具有不允许诊断性成年人上消化道内窥镜穿过的食管狭窄,或在筛选之前3个月内已经具有食管扩张;8. 在筛选之前在2个月内或在5个半衰期(如果已知的话)内(以长者为准)用研究药物治疗。
[0232]
端点研究的一个关键性主要端点是在来自食管活组织检查的5个最发炎的高倍视野(hpf)中测得的平均食管嗜酸性粒细胞计数从基线至第16周的变化。所述研究的一个关键性次要端点是吞咽困难临床征状频率和严重程度从基线至第16周的平均变化,如在2周中完成的每日征状日志所评估的。另外,多个安全性和耐受性端点也是可测量的。通过不利事
件(ae)、严重ae(sae)、临床实验室异常的发生率、严重程度和关联、生命体征的变化、体格检查异常和抗-药物抗体的存在,评价安全性和耐受性参数。还要求主体输入日志中的各种征状相关问题的答案,其用于计算复合日志评分(cds)(表2)。
[0233]
表2: 样品每日征状日志(dsd)问卷调查和用于计算cds的方法.
[0234]
复合日志评分=(在阶段中的q2和q3评分的总和)/没有丢失日期的天的数目x阶段长度。
[0235]
取样为了使一致性最大化,在筛选时从近侧和远侧食管(即,来自每个水平的4个活组织检查片段)得到活组织检查。鼓励来自中食管的另外活组织检查,并努力得到来自相同水平的后续活组织检查。由对活组织检查不知情的单个中央病理学家读出活组织检查。为了对于试验而言合格,在筛选内窥镜检查术中来自3个(近侧、中和/或远侧)食管水平中的2个,针对≥15/hpf的高峰嗜酸性粒细胞计数评价了主体。
[0236]
结果的概述90位患者完成了最初的16周研究。人口统计/疾病特征在治疗分支之间是可比较的。在基线时,平均食道嗜酸性粒细胞计数是92.4 (安慰剂; pbo)、116.6 (低剂量; ld)和122.6 (高剂量; hd)。在16-周治疗阶段中对于rpc4046的两个剂量,在来自食道活组织检查的5个最发炎的高倍视野中测得的平均食道嗜酸性粒细胞计数从基线(bl)显著下降(平均变化pbo:
ꢀ‑
4.4, ld:
ꢀ‑
94.8;和hd:
ꢀ‑
99.9 [与安慰剂相比,都p《0.0001])。在基线时,平均吞咽困难征状复合日志评分是29.4 (pbo)、27.63 (ld)和29.03 (hd)。基于复合日志评分,在用rpc4046ld和hd治疗的患者中观察到相对于pbo的吞咽困难临床征状的减少
(pbo:-6.4;ld:-5.3[相对于pbo,p=0.9959),和hd:-13.3[相对于pbo,p=0.0733])。在16周通过类固醇难治的状态做出的小组分析表明吞咽困难的改善,如通过dsd报告的。rpc4046是良好耐受的,具有有利的安全性谱。在16-周治疗阶段中吞咽困难的净变化(如通过dsda测量的)显示在表3中。
[0237]
表3:如通过在2周中完成的dsd所评估的吞咽困难临床征状频率和严重程度从基线至第16周的平均变化。
[0238]
详细结果在第一个研究中,给主体提供安慰剂或者低或高剂量的治疗剂。在基线时和在第16周时计算平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)。发现用低剂量(180mg)和高剂量(360mg)rpc4046治疗导致在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数相对于对照的统计上显著的减小。结果呈现在图1中。图2(a)显示了相对于用低(180mg)剂量的rpc4046治疗的主体在安慰剂组中在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)(进一步突出在不同患者小组内的细胞计数)。图2(b)显示了相对于用高(360mg)剂量的rpc4046治疗的主体在安慰剂组中在第16周时的平均食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)(进一步突出在不同患者小组内的细胞计数)。
[0239]
在第二个研究中,给主体提供安慰剂或者低或高剂量的治疗剂。在基线时和在第16周时计算平均吞咽困难征状复合日志评分(关键性次要端点)。发现用低剂量(180mg)和高剂量(360mg)rpc4046治疗导致在第16周时的平均吞咽困难征状复合日志评分相对于对照的减小。结果呈现在图3中。结果的概述提供在表4中。
[0240]
表4:来自评价在主体中在第16周时的吞咽困难征状复合日志评分的研究的结果的概述,所述主体属于用低剂量(180mg)或高剂量(360mg)的rpc4046治疗的itt组。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线复合日志评分调节过)的p-值,确定统计显著性。
[0241]
执行主体的小组分析(基于类固醇难治的状态),其结果显示在图4中。在类固醇难治的主体中观察到平均吞咽困难征状复合日志评分的剂量依赖性减小。结果概述在表5中。
[0242]
表5: 来自评价在主体中在第16周时的吞咽困难征状复合日志评分的研究的结果的概述,所述主体属于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的itt组(根据类固醇难治的状态分成小组)。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过来自ancova模型(针对基线复合日志评分调节过)的p-值,确定统计显著性。
[0243]
在提供了安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体中的平均吞咽困难征状复合日志评分(在16周阶段中;每2周1次监测)显示在图5中。可以看出,用较高剂量(360 mg)的rpc4046治疗导致在第16周时的平均吞咽困难征状复合日志评分相对于安慰剂的净减少,这逼近统计显著性(p = 0.0733)。在小组分析(基于主体的类固醇难治的状态)中,发现类固醇难治的小组(图7)获益多于非类固醇难治的小组(图6)。
[0244]
在诊断出嗜酸性粒细胞性食管炎(eoe)的主体中评价口服布地奈德混悬液(obs)的效力的平行研究的结果显示在图8中。口服布地奈德混悬液rpc4046和qax576的效力之间的肩并肩对比显示在表6中。
[0245]
表6. 在三个不同研究中评价安慰剂、口服布地奈德rpc4046和qax576的效力的结果的概述。
[0246]
在进一步分析中,针对安慰剂和两个治疗分支分析在第16周时在主体中的平均嗜酸性粒细胞性食管炎内窥镜参考评分(eref)。eref评分是基于炎症标志物(例如,对水肿、渗出物和/或沟阳性的)和/或改造标志物(例如,对固定环和/或狭窄阳性的)的存在而评价的另外的次要端点。结果(显示总评分)呈现在图9中。可以看出,用rpc4046治疗导致在第16周时的eref评分的净下降,用较高剂量的rpc4046 (360 mg)达到的下降是统计上显著的(p《0.0001)。
[0247]
通过分析炎症标志物或改造标志物的复合eref评分,进一步检查eref研究的结果。发现较高剂量的rpc4046 (360 mg)达到了炎症的复合eref评分的统计上显著的下降(p《0.0001)。结果显示在图10中。
[0248]
接着,分析了rpc4046 (相对于安慰剂)在第16周时在降低eoe主体的高峰食管嗜酸性粒细胞计数中的有效性。发现用低(180 mg)和高剂量(360 mg)的rpc4046治疗就平均食管嗜酸性粒细胞计数的降低而言达到了统计显著性。结果显示在图11中并进一步概述在表7中。
[0249]
表7: 来自评价在第16周时相对于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体在安慰剂组中的高峰食管嗜酸性粒细胞计数(细胞/hpf)的平均变化的研究的结果的概述。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线高峰hpf食管嗜酸性粒细胞计数调节过)的p-值,确定统计显著性。
[0250]
另外,进行了在安慰剂组和治疗组之间在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分的对比。结果显示在图12中并进一步概述在表8中。
[0251]
表8: 来自评价相对于用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体在安慰剂组中在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分的研究的结果的概述。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线eesaipro评分调节过)的p-值,确定统计显著性。
[0252]
在第16周时观察到平均eesai pro的剂量依赖性减小。在进一步小组分析(基于类固醇难治的状态)中,发现在类固醇难治的小组中观察到平均eesai pro评分的统计上显著的减小。结果显示在图13中并进一步概述在表9中。
[0253]
表9: 来自评价相对于施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的
rpc4046治疗的非类固醇难治的主体在类固醇难治的主体中在基线时和在第16周时的平均eesai pro评分的研究的结果的概述。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过来自ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线eesaipro评分调节过)的p-值,确定统计显著性。
[0254]
更进一步,分析了rpc4046 (相对于安慰剂)在第16周时在降低主体的疾病严重程度总体评估中的有效性。在第16周时在治疗分支中观察到剂量依赖性减小,在用较高剂量(360 mg) rpc4046治疗的主体中达到的减小相对于安慰剂实现了统计显著性。结果显示在图14中并进一步概述在表10中。
[0255]
表10: 来自评价在施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体中在基线时和在第16周时主体的疾病严重程度总体评估的研究的结果的概述。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过从ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线疾病严重程度总体评估评分调节过)计算p-值,确定统计显著性(在p 《 0.05)。
[0256]
在第16周时在临床医师的疾病严重程度总体评估中,低以及高剂量的rpc4046都
达到了统计显著性。结果显示在图15中并进一步概述在表11中。
[0257]
表11: 来自评价在施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体中在基线时和在第16周时临床医师的疾病严重程度总体评估的研究的结果的概述。从数据集计算各种统计参数,例如,最小二乘法平均差(lsmd)、置信区间(ci)、平均值和中位值。通过从ancova模型(针对类固醇难治的状态和基线疾病严重程度总体评估评分调节过)计算p-值,确定统计显著性(在p 《 0.05)。
[0258]
在第16周时在主体的总印象分析中,用较高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体达到了统计显著性(p=0.0143)。相对于安慰剂,在治疗分支中的较大数目的主体应答为感到“好得多”或“好一些”。结果显示在图16中。
[0259]
最后,在第16周时为安慰剂组和治疗分支分析了食管活组织检查的组织学等级和平均阶段调节评分。结果显示在图17中。在治疗组中的较低以及高剂量分支达到了统计显著性(* 指示p《0.0001)。
[0260]
表12:在施用安慰剂或用低剂量(180 mg)或高剂量(360 mg)的rpc4046治疗的主体的安全性群体中由治疗引起的不利事件(teae)的概述。针对频率、严重程度、与病症的关系和治疗,监测治疗引起的不利事件。在安慰剂组中没有观察到导致研究药物中断(d/c)的teae。在报告≥1个严重teae的主体的安慰剂组和治疗组中,确定不利事件与安慰剂或药物无关。
[0261]
结论用rpc4046治疗会减少平均食管嗜酸性粒细胞计数,这在两个主动治疗分支中相对于安慰剂是统计上显著的。关于吞咽困难评分的改善的关键次要端点,用较高剂量(360 mg)的rpc4046相对于安慰剂观察到积极的数字趋势(接近统计显著性)。关于rpc4046对不同患者小组的影响,相对于非类固醇难治的小组在类固醇难治的小组中观察到更大的治疗效果。关于剂量,用rpc 360 mg剂量观察到在数字上更大的改善(通过dsd和eesai测量)。关于疾病严重程度总体评估(主体的和临床医师的),用rpc4046治疗导致相对于安慰剂统计上显著的改善。总rpc4046似乎是通常安全的和被主体良好耐受。最频繁地报告的不利事件是头痛、uri、关节痛、鼻咽炎、鼻窦炎、腹痛和口咽痛。在治疗组内没有报告输注超敏反应事件的例子。
[0262]
等同方案本领域技术人员会认识到,或使用不超过例行实验能够确定,本文描述的具体实施方案和方法的许多等同方案。这样的等同方案意图被下述权利要求的范围包括。
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