一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条的制作方法

0.03wt％；所述离心的条件为：转速8000-10000rpm，时间25-30min。
12.进一步地，所述igm检测线的包被方法为：将鼠抗人u链单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。
13.进一步地，所述igg检测线的包被方法为：将鼠抗人igg单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。
14.进一步地，所述质控线的包被方法为：将羊抗兔igg单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。
15.采用上述技术方案后，本发明与

背景技术：
相比，具有如下优点：
16.本发明的试纸条利用胶体金法同时检测伤寒细菌的igg和igm，提高检测的灵敏度和特异性；此外，本发明的试纸条仅需一次加样就能实现伤寒细菌igg和igm的联合检测，操作简单，且15min左右就能出现检测结果，大大缩短了检测时间，提高检测效率，节省检测费用。
附图说明
17.图1为本发明试纸条的结构示意图。
18.附图标记说明：
19.100、底板；200、样品垫；300、金标垫；400、nc膜；410、igm检测线；420、igg检测线；430、质控线；500、吸样垫。
具体实施方式
20.为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合附图及实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
21.实施例
22.如图1所示，一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，包括底板100，所述底板100上方从前往后顺次粘贴有样品垫200、金标垫300、nc膜400(即硝酸纤维素膜)和吸样垫500，所述nc膜400上从前往后依次设有igm检测线410、igg检测线420和质控线430，所述金标垫300含有伤寒h抗原-胶体金复合物、伤寒o抗原-胶体金复合物和兔igg抗体-胶体金复合物，所述igm检测线410上包被有鼠抗人u链单抗，所述igg检测线420上包被有鼠抗人igg单抗，所述质控线430上包被有羊抗兔igg单抗。
23.所述样品垫200的后端搭设在所述金标垫300的前端上方，所述nc膜400的两端搭设在所述金标垫300和吸样垫500之间。
24.所述底板100采用聚酯板。
25.所述金标垫300的制备方法为：将所述伤寒h抗原-胶体金复合物、伤寒o抗原-胶体金复合物、兔igg抗体-胶体金复合物按1:1:0.5混合后，均匀涂抹于所述nc膜400上冻干3-5h。
26.所述伤寒h抗原-胶体金复合物的制备方法为：按10-20μg/ml的比例往胶体金分散液中快速加入伤寒h抗原，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μl/ml的比例快速加入封闭液，反应10-30min后，离心后弃上清液得沉淀，按100μl/ml的比例往该沉淀中加
入复溶液，超声复溶，获得伤寒h抗原-胶体金复合物。
27.所述伤寒o抗原-胶体金复合物的制备方法为：按10-20μg/ml的比例往胶体金分散液中快速加入伤寒o抗原单抗，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μl/ml的比例快速加入封闭液，反应10-30min，离心后弃上清液得沉淀，用ph值7.4的20mmpb缓冲液复溶，按10-20μg/ml的比例加入伤寒o抗原，室温反应1小时，离心后弃上清液得沉淀，按100μl/ml的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，获得伤寒o抗原-胶体金复合物。
28.所述兔igg抗体-胶体金复合物的制备方法为：按5-15μg/ml的比例往胶体金分散液中快速加入兔igg抗体，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μl/ml的比例快速加入封闭液，反应10-30min，离心后弃上清液得沉淀，按100μl/ml的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，制成兔igg抗体-胶体金复合物。
29.所述胶体金分散液中的胶体金颗粒大小为40-60nm、浓度为0.01-0.03wt％；所述离心的条件为：转速8000-10000rpm，时间25-30min。
30.所述igm检测线410的包被方法为：将鼠抗人u链单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。
31.所述igg检测线420的包被方法为：将鼠抗人igg单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。
32.所述质控线430的包被方法为：将羊抗兔igg单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。
33.使用时，将待测样品液滴加到样品垫200上，在吸样垫500的引导下，待测样品液从样品垫200往吸样垫500的方向移动，途中依次经过金标垫300和nc膜400，等待约15min左右就能出现检测结果。其中，质控线430显色表示本次结果有效，否则无效；igm检测线410或igg检测线420显色表示该检测项目呈阳性，否则表示阴性。
34.以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。


技术特征：
1.一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：包括底板，所述底板上方从前往后顺次粘贴有样品垫、金标垫、nc膜和吸样垫，所述nc膜上从前往后依次设有igm检测线、igg检测线和质控线，所述金标垫含有伤寒h抗原-胶体金复合物、伤寒o抗原-胶体金复合物和兔igg抗体-胶体金复合物，所述igm检测线上包被有鼠抗人u链单抗，所述igg检测线上包被有鼠抗人igg单抗，所述质控线上包被有羊抗兔igg单抗。2.如权利要求1所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述底板采用聚酯板。3.如权利要求1所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述金标垫的制备方法为：将所述伤寒h抗原-胶体金复合物、伤寒o抗原-胶体金复合物、兔igg抗体-胶体金复合物按1:1:0.5混合后，均匀涂抹于所述nc膜上冻干3-5h。4.如权利要求3所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述伤寒h抗原-胶体金复合物的制备方法为：按10-20μg/ml的比例往胶体金分散液中快速加入伤寒h抗原，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μl/ml的比例快速加入封闭液，反应10-30min后，离心后弃上清液得沉淀，按100μl/ml的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，获得伤寒h抗原-胶体金复合物。5.如权利要求3所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述伤寒o抗原-胶体金复合物的制备方法为：按10-20μg/ml的比例往胶体金分散液中快速加入伤寒o抗原单抗，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μl/ml的比例快速加入封闭液，反应10-30min，离心后弃上清液得沉淀，用ph值7.4的20mmpb缓冲液复溶，按10-20μg/ml的比例加入伤寒o抗原，室温反应1小时，离心后弃上清液得沉淀，按100μl/ml的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，获得伤寒o抗原-胶体金复合物。6.如权利要求3所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述兔igg抗体-胶体金复合物的制备方法为：按5-15μg/ml的比例往胶体金分散液中快速加入兔igg抗体，并用搅拌器快速搅拌，反应15-30min后，按10-15μl/ml的比例快速加入封闭液，反应10-30min，离心后弃上清液得沉淀，按100μl/ml的比例往该沉淀中加入复溶液，超声复溶，制成兔igg抗体-胶体金复合物。7.如权利要求4-6任一项所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述胶体金分散液中的胶体金颗粒大小为40-60nm、浓度为0.01-0.03wt％；所述离心的条件为：转速8000-10000rpm，时间25-30min。8.如权利要求1所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述igm检测线的包被方法为：将鼠抗人u链单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。9.如权利要求1所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述igg检测线的包被方法为：将鼠抗人igg单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。10.如权利要求1所述的一种用于联合检测伤寒细菌igg和igm的试剂条，其特征在于：所述质控线的包被方法为：将羊抗兔igg单抗用包被缓冲液稀释到1-3mg/ml后进行混合包被，再于18-25℃干燥20-25h。

技术总结
本发明公开了一种用于联合检测伤寒细菌IgG和IgM的试剂条，包括底板，底板上方从前往后顺次粘贴有样品垫、金标垫、NC膜和吸样垫，NC膜上从前往后依次设有IgM检测线、IgG检测线和质控线，金标垫含有伤寒H抗原-胶体金复合物、伤寒O抗原-胶体金复合物和兔IgG抗体-胶体金复合物，IgM检测线上包被有鼠抗人u链单抗，IgG检测线上包被有鼠抗人IgG单抗，质控线上包被有羊抗兔IgG单抗。本发明的试纸条仅需一次加样就能实现伤寒细菌IgG和IgM的联合检测，操作简单，且大大缩短了检测时间，提高检测效率、灵敏度和特异性。敏度和特异性。敏度和特异性。


技术研发人员：张茂泉 李智彪 陈亨利 周旻
受保护的技术使用者：英科新创（厦门）科技股份有限公司
技术研发日：2022.02.25
技术公布日：2022/6/10