一种尼可地尔冻干制剂的制备方法与流程

1.本发明涉及医药技术领域，特别涉及一种尼可地尔冻干制剂的制备方法。


背景技术：

2.尼可地尔，化学名为n-(2-羟基乙基)烟酰胺硝酸酯，分子式为c8h9n3o4，是首个用于临床的atp敏感的钾离子通道开放剂，其可提升心肌细胞对缺血的耐受性，保护心肌细胞，解除患者的冠状动脉痉挛症状，并可改善心脏能量代谢，溶解心脏纤维，促使患者的心脏血流量增加，且能抑制血小板聚集，避免血栓形成，同时还能够防止不良心血管事件的发生。
3.目前，市面上的尼可地尔主要有片剂和冻干粉针剂。相对于片剂，注射用制剂有着良好的适应性，如公开号为cn101474161a的发明专利公开了一种尼可地尔冻干粉针剂及其制备方法，其通过在尼可地尔冻干粉针剂制备过程中采用酸碱调节剂调节中间体溶液ph值在 5.0～8.0之间，将冻干过程中二次升华温度控制在5℃～20℃之间,来改善药物含量和有关物质的稳定性。但尼可地尔本身热不稳定性药物，即便制备成冻干粉针剂也会因为其他条件或制备工艺不同而变得不稳定。此外，而对于通过注射给药的针剂而言，如果活性成分降解成产生副作用的不利产物或者其活性成分发生氧化变化变质等，还可能会带来严重的、急性的临床后果。
4.因此，本领域亟需对尼可地尔冻干制剂的制备方法提出改进，从而解决现有技术的缺陷和限制。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提出一种尼可地尔冻干制剂的制备方法，其方法简单，能使制备得到的制剂具有良好的稳定性；采用本方法制备的制剂活性成分不易分解或氧化，实用性强，适用于大规模生产。
6.实现本发明目的的技术方案为：
7.一种尼可地尔冻干制剂的制备方法，具体包括以下步骤：
8.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至80℃以上，再进行冷却；
9.步骤s2，氮气除氧，向冷却后的注射用水中用氮气吹扫或鼓泡，使溶解氧降至2ppm以下；
10.步骤s3，加入配料，向步骤s2得到的注射用水溶液中依次加入甘露醇、枸橼酸钠水合物和尼可地尔，并搅拌均匀；
11.步骤s4，除菌及灌装，对步骤s3得到的混合液进行除菌后灌装至小瓶中；
12.步骤s5，半加塞及冻干，对步骤s4灌装后的小瓶进行半加塞，然后进行冻干处理；
13.步骤s6，加塞，在步骤s5冻干步骤完成后，将瓶内采用氮气释放真空至600mbar，完全加塞小瓶；
14.步骤s7，密封，完全加塞密封小瓶，并置于2℃～8℃下贮存。
15.进一步地，在步骤s1中，将注射用水升温后冷却至10℃～18℃。
16.进一步地，步骤s1中的注射用水重量为100％总批量，且注射用水的ph为4.0～9.0。
17.进一步地，在步骤s3中，加入配料的具体步骤为：
18.步骤s301，将步骤s2除氧后的注射用水取出20％的量，并转移至不锈钢容器中，用于最终体积补偿；
19.步骤s302，向步骤s301剩下80％的注射用水中加入甘露醇，并搅拌；
20.步骤s303，向步骤s302的混合溶液中加入枸橼酸钠水合物，并搅拌；
21.步骤s304，向步骤s303的混合溶液中加入尼可地尔，并搅拌；
22.步骤s305，停止搅拌，将步骤s301中取出的20％注射用水补偿步骤s304的体积至 100％总批量，并搅拌12min～18min；
23.步骤s306，检查溶液的最终ph、颜色和澄清度，保证溶液为澄清无色溶液，且ph值为7.0～8.0。
24.进一步地，在步骤s302中，加入甘露醇后，搅拌8min～12min，直至溶液澄清；
25.在步骤s303中，加入枸橼酸钠水合物后，搅拌12min～18min，直至溶液澄清；
26.在步骤s304中，加入尼可地尔后，搅拌搅拌50min～70min，直至溶液澄清。
27.进一步地，在步骤s5中，冻干过程包括预冷却、冷冻、初次干燥和二次干燥四个阶段。
28.进一步地，预冷却温度为-5℃；冷冻温度为-50℃～-3℃；初次干燥温度为-50℃～-0℃；二次干燥温度为21℃～40℃。
29.在冻干过程中，冷冻过程为：由预冷温度降温后升温，再降温后升温多个反复过程，整个冷冻过程持续时间为，整个冷冻过程持续时间为300min～1320min；
30.初次干燥过程为：在冷冻过程结束后升温，初次干燥过程整体持续时间为1700min～ 4170min；
31.二次干燥过程为：在冷冻过程结束后升温，二次干燥过程整体持续时间为300min～ 1410min；
32.本发明的有益效果在于：
33.(1)本发明加入物料前先在注射用水中进行氮气鼓泡，且在加塞前用氮气释放真空至 600mbar；使用氮气作为加工助剂，可排出产品中的溶解氧，防止产品后期氧化变质。
34.(2)本发明制备方法简单，能使制备得到的制剂具有良好的稳定性。
35.(3)采用本方法制备的制剂活性成分不易分解或氧化，实用性强，适用于大规模生产。
附图说明
36.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
37.图1是本发明试验6中的样品溶液的图像。
具体实施方式
38.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
39.实施例1
40.一种尼可地尔冻干制剂的制备方法，具体包括以下步骤：
41.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至83℃，并将其加入至适当容量的ss316l反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至13℃。检查注射用水的ph(限度： 5.0～7.0)。本发明先将注射用水进行升温的目的是将其进行初步灭菌，而后降温的目的是保证产品的稳定性。
42.步骤s2，氮气除氧，向冷却后的注射用水中用氮气吹扫或鼓泡，使溶解氧降至2ppm以下；
43.步骤s3，加入配料，向步骤s2得到的注射用水溶液中依次加入甘露醇、枸橼酸钠水合物和尼可地尔，并搅拌均匀；加入配料的具体步骤为：
44.步骤s301，将步骤s2除氧后的注射用水(基于密度为0.997g/ml，重量相当于20％批量)中取出20％的量，并转移至适当不锈钢容器中，用于最终体积补偿；
45.步骤s302，向步骤s301剩下80％的注射用水中加入甘露醇，搅拌10min，直至溶液澄清；
46.步骤s303，向步骤s302的混合溶液中加入枸橼酸钠水合物，搅拌13min，直至溶液澄清；
47.步骤s304，向步骤s303中加入尼可地尔，搅拌搅拌60min，直至溶液澄清；
48.步骤s305，停止搅拌，将步骤s301中收集的20％注射用水补偿步骤s304的体积至 100％总批量(基于wt/ml＝0.999/ml)，搅拌13min；
49.步骤s306，检查溶液的最终ph、颜色和澄清度，保证溶液为澄清无色溶液，且ph值为 7.5。
50.步骤s4，除菌及灌装，对步骤s3得到的混合液进行除菌后灌装至小瓶中。
51.qc批准后，用灭菌的0.2μpvdf过滤器过滤步骤s305的药物溶液(来自步骤s305散装溶液制备)，收集至ss316l暂存容器中。
52.将所需灌装重量设为2.10ml(限度：2.00ml～2.20ml)，灌装至清洁且去热原的5ml小瓶中。
53.计算：灌装重量的计算应基于散装溶液的wt/ml，具体公式如下：
54.灌装重量＝散装溶液的wt/ml
×
灌装体积
55.灌装重量的最小值＝散装溶液的wt/ml
×
2.00ml(单位：g)
56.灌装重量的目标值＝散装溶液的wt/ml
×
2.10ml(单位：g)
57.灌装重量的最大值＝散装溶液的wt/ml
×
2.20ml(单位：g)
58.步骤s5，半加塞及冻干，对步骤s4灌装后的小瓶进行半加塞，然后进行冻干处理。本发明的半加塞技术为现有技术。
59.在步骤s5中，冻干步骤分为预冷却、冷冻、初次干燥和二次干燥四个阶段，其中，
60.预冷却温度为-5℃；冷冻温度为-50℃～-3℃；初次干燥温度为-50℃～-0℃；二次干燥温度为21℃～40℃。
61.在冻干过程中，冷冻过程为：由预冷温度降温后升温，再降温后升温多个反复过程，整个冷冻过程持续时间为，整个冷冻过程持续时间为1230min；
62.初次干燥过程为：在冷冻过程结束后升温，整个初次干燥过程持续时间为2330min；
63.二次干燥过程为：在冷冻过程结束后升温，整个二次干燥过程持续时间为1410min；
64.步骤s6，加塞，在步骤s5冻干步骤完成后，将瓶内采用氮气释放真空至600mbar，完全加塞小瓶；
65.步骤s7，密封，完全加塞密封小瓶，并置于2℃～8℃下贮存。
66.过程检查：采用顶空气体分析仪，随机检查各货架少量小瓶的顶空气体。(限度：低于2.0％氧气)
67.分析用成品：依照制剂放行质量标准，对样品进行分析，具体地：依照成品(fp)质量标准进行样品分析。
68.本实施例还包括包检查和包装步骤，具体如下步骤s10和步骤s11：
69.步骤s8，检查，采用目视检查，用黑白背景，在2000-3750lux光强下进行目视检查，检测溶液为澄清无色溶液则合格。
70.步骤s9，包装，依照现行包装质量标准/说明/sop进行产品贴签并包装小瓶。具体包装材料信息如下表1所示：
71.表1.包装材料信息表
72.序号材料来源15ml/13mm透明管状i型玻璃瓶重庆正川永成医药材料有限公司213mm单槽胶塞江苏华兰药用新材料股份有限公司313mm易拉密封河北金环包装有限公司
73.实施例2-实施例7
74.实施例2-实施例7与实施例1相比，其他加工条件均相同，区别仅仅在于步骤s1的溶液制备步骤不同。
75.实施例2
76.与实施例1相比，本实施例步骤s1中注射用水的升温和冷却温度不同，且本实施中的步骤s1具体为：
77.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至83℃，并将其加入至适当容量的ss316l反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至13.5℃。检查注射用水的ph(限度： 5.0～7.0)。
78.实施例3
79.与实施例1相比，本实施例步骤s1中注射用水的升温和冷却温度不同，且本实施中的步骤s1具体为：
80.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至86℃以上，并将其加入至适当容量的ss316l 反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至14℃。检查注射用水的ph(限度：5.0～7.0)。
81.实施例4
82.与实施例1相比，本实施例步骤s1中注射用水的升温和冷却温度不同，且本实施中的步骤s1具体为：
83.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至90℃，并将其加入至适当容量的ss316l反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至15℃。检查注射用水的ph(限度： 5.0～7.0)。
84.实施例5
85.与实施例1相比，本实施例步骤s1中注射用水的升温和冷却温度不同，且本实施中的步骤s1具体为：
86.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至93℃，并将其加入至适当容量的ss316l反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至15.5℃。检查注射用水的ph(限度： 5.0～7.0)。
87.实施例6
88.与实施例1相比，本实施例步骤s1中注射用水的升温和冷却温度不同，且本实施中的步骤s1具体为：
89.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至96℃，并将其加入至适当容量的ss316l反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至16℃。检查注射用水的ph(限度： 5.0～7.0)。
90.实施例7
91.与实施例1相比，本实施例步骤s1中注射用水的升温和冷却温度不同，且本实施中的步骤s1具体为：
92.步骤s1，溶液制备，先将注射用水升温至100℃以上，并将其加入至适当容量的ss316l反应器中，其重量约为100％总批量(基于密度为0.997g/ml，重量相当于100％批量)。循环反应器夹套中的冷却水，使配料容器中注射用水的温度降至17℃。检查注射用水的ph (限度：5.0～7.0)。
93.试验及结论
94.试验1：
95.目的：在2℃～8℃进行批量生产。
96.组成：
[0097][0098]
程序：
[0099]
步骤1：将120％批量的注射用水收集在一个干净的玻璃烧杯中，并将其进行冰浴，使注射用水的温度保持在2℃～8℃。
[0100]
步骤2：将步骤1的注射用水用氮气吹扫20min。
[0101]
步骤3：将步骤2中80％的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，并将其进行冰浴，使注射用水的温度保持在2℃～8℃。
[0102]
步骤4：在上述步骤3的注射用水中加入称量的甘露醇，搅拌至得到澄清溶液。
[0103]
搅拌时间：10min
[0104]
观察：清澈、无色溶液
[0105]
ph：5.601
[0106]
温度：1.2℃
[0107]
步骤5：制备0.1％的柠檬酸钠溶液(1mg/ml)
[0108]
将45ml的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入50mg柠檬酸钠，搅拌10min得到澄清的溶液，最终得到体积为50ml浓度为1mg/ml的柠檬酸钠溶液。
[0109]
步骤6：用0.1％(1mg/ml)柠檬酸钠溶液将上述步骤4溶液的ph值调整为ph值6.5。
[0110]
消耗量：1.0ml0.1％柠檬酸钠溶液
[0111]
观察ph：6.390
[0112]
步骤7：在上述步骤6得到的溶液中，加入称量的尼可地尔(api)，搅拌至得到透明溶液。
[0113]
api添加时间：2min
[0114]
api搅拌时间：30min
[0115]
观察：api未完全溶解
[0116]
步骤8：由于即使在2℃～8℃下搅拌30min，api也不能完全溶解，因此需要再搅拌30 分钟。
[0117]
观察：
[0118]
即使额外搅拌30分钟，api在2℃～8℃下也不能完全溶解。经过分析，考虑到尼可地尔在水相中的敏感性，搅拌时间越长可能会导致药物降解。取冷却的散装溶液，并将溶液的温度提高到约15℃，这可以使得原料药的快速溶解。因此，我们认为溶液制备温度应固定在15℃左右。
[0119]
观察：清澈、无色溶液
[0120]
ph观察：6.236
[0121]
温度：17.5c
[0122]
步骤9：用柠檬酸钠溶液(0.1％)将上述步骤8溶液的ph值调整为6.5
[0123]
消耗量：2ml0.1％柠檬酸钠溶液
[0124]
ph观察：6.344
[0125]
温度：20.5℃
[0126]
注：由于所获得的ph在5.5～7.5的限制范围内，因此没有进行进一步的ph调整
[0127]
步骤10：将上述步骤9的溶液用步骤3剩余的20％注射用水配制成体积至100％总批量，并在2℃～8℃下搅拌10min，得到清澈、均匀的溶液。
[0128]
结论：
[0129]
(1)根据上述批量生产过程，可以观察到药物在2℃～8℃下溶解的时间超过60分钟。
[0130]
(2)尼可地尔在观察温度17.5℃下在20min内溶解。
[0131]
(3)为了进一步测评尼可地尔的稳定性，通过在约室温(25℃)和15℃下制备散装溶液，试验批次如下试验2和实验3所示。
[0132]
试验2：
[0133]
目的：执行一批室温(25℃)注射体溶液的生产。
[0134]
组成：
[0135][0136]
程序：
[0137]
步骤1：将120％批量的注射用水收集在干净的玻璃烧杯中，进行氮气吹扫约20min。
[0138]
步骤2：将步骤1中80％的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入称量的甘露醇，搅拌10min，搅拌至得到澄清溶液。
[0139]
观察：清澈、无色溶液
[0140]
ph：5.664
[0141]
温度：26.0℃
[0142]
步骤3：制备1％柠檬酸钠溶液(10mg/ml)
[0143]
将20ml的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入50mg柠檬酸钠，搅拌10min得到澄清的溶液。
[0144]
步骤4：用步骤3的柠檬酸钠溶液将上述步骤3溶液的ph值调整为ph值6.7。
[0145]
消耗量：0.7ml1％柠檬酸钠溶液。
[0146]
ph：6.890
[0147]
步骤5：在上述步骤4得到的溶液中，加入称量的尼可地尔(api)，搅拌至得到透明溶液。
[0148]
api添加时间：1min
[0149]
api搅拌时间：15min
[0150]
观察：清澈、无色溶液
[0151]
ph：6.581
[0152]
步骤6：将上述步骤5的溶液用步骤1的注射用水配制成体积至100％总批量，并搅拌 10min，得到透明、无色的溶液。
[0153]
观察：透明无色溶液
[0154]
最终ph：6.432
[0155]
温度：23.7℃
[0156]
步骤7：将上述步骤6制备的得到的溶液散装入5ml/13mm透明管状小瓶中，填充体积为2.0ml，并按照以下配方装入预冷冻干器中。
[0157][0158][0159]
步骤8：冻干过程完成后，用氮气将腔室真空释放到600mbar，完全停止小瓶，完全将真空放空，卸载小瓶，立即密封，在2℃～8℃下保存。
[0160]
上述批次小瓶通过稳定性协议号ssp/nici/cn/21/0001装入稳定性，分析结果如下表2 所示。
[0161]
表2.稳定性研究和分析结果
[0162][0163]
试验3：
[0164]
目的：执行一批15℃左右注射液生产。
[0165]
组成：
[0166][0167]
程序：
[0168]
步骤1：将100％批量的注射用水收集在干净的玻璃烧杯中，进行氮气吹扫约20min。
[0169]
步骤2：将步骤1中80％的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入称量的甘露醇，搅拌10min，搅拌至得到澄清溶液，并在冰浴中保持在15℃左右。
[0170]
观察：清澈、无色溶液
[0171]
ph：5.489
[0172]
温度：14.8℃
[0173]
步骤3：用1％柠檬酸钠溶液调整上述步骤2溶液的ph值调整为6.8。
[0174]
消耗量：2ml1％柠檬酸钠溶液。
[0175]
ph：6.862
[0176]
温度：16.8℃
[0177]
步骤4：在上述步骤3得到的溶液中，加入称量的尼可地尔(api)，搅拌至得到透明溶液。
[0178]
api添加时间：2min
[0179]
api搅拌时间：20min
[0180]
观察：清澈、无色溶液
[0181]
ph：6.734
[0182]
温度：17.6℃
[0183]
步骤5：将上述步骤4的溶液用步骤1的注射用水配制成体积至100％总批量，并搅拌 10min，得到透明、无色的溶液。
[0184]
观察结果：透明的无色溶液。
[0185]
最终ph：6.672
[0186]
温度：18.5℃
[0187]
步骤6：将上述步骤5制备的得到的溶液散装入5ml/13mm透明管状小瓶中，填充体积为2.0ml，并按照以下配方装入预冷冻干器中。
[0188][0189]
步骤7：冻干过程完成后，用氮气将腔室真空释放至600mbar，完全停止小瓶，并将真空完全释放，卸载小瓶，立即密封，在2℃～8℃下保存。
[0190]
上述批次小瓶通过稳定性协议号ssp/nici/cn/21/0002装入稳定性，分析结果如下表3 所示。
[0191]
表3.稳定性研究和分析结果
[0192][0193]
结论：
[0194]
两个批次的初期含水量均在2.0％以内。尽管含水率低于2.0％，优于参考产品含水率，但在2℃～8℃和25c/60％rh的1个月稳定时，未知杂质增加，这表明在这些批次中使用的缓冲区容量不足以稳定尼可地尔，因此，对柠檬酸钠的缓冲容量进行了进一步的研究。
[0195]
试验4：二次干燥时干燥时间略有增加
[0196]
组成：
[0197][0198][0199]
程序：
[0200]
步骤1：将100％批量的注射用水收集在干净的玻璃烧杯中，进行氮气吹扫约20min，温度保持在15℃左右。
[0201]
步骤2：将步骤1中80％的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入称量的甘露醇，搅拌5min，搅拌至得到澄清溶液。
[0202]
观察：清澈、无色溶液
[0203]
ph：5.890
[0204]
步骤3：在上述步骤2得到的溶液中，加入称量的柠檬酸钠水合物，搅拌30min，得到透明溶液。
[0205]
ph：7.699
[0206]
步骤4：在上述步骤3得到的溶液中，加入称量的尼可地尔(api)，搅拌至得到透明溶液。
[0207]
api添加时间：1min
[0208]
api搅拌时间：30min
[0209]
ph：7.567
[0210]
观察：清澈、无色溶液
[0211]
步骤5：将上述步骤4的溶液用步骤1的注射用水配制成体积至100％总批量，并搅拌 10min，得到透明、无色的溶液。
[0212]
最终ph：7.436
[0213]
步骤6：将上述步骤5制备的得到的溶液散装入5ml/13mm透明管状小瓶中，填充体积为2.0ml，半塞入，并按照以下配方装入预冷冻干器中。
[0214][0215][0216]
步骤7：冻干过程完成后，用氮气将腔室真空释放至600mbar，完全停止小瓶，并将真空完全释放，卸载小瓶，立即密封，在2℃～8℃下保存。
[0217]
步骤8：对小瓶进行分析，分析结果如下表4所示。
[0218]
表4.分析结果表
[0219][0220]
观察：
[0221]
根据上述初步结果，可以明显看出，含水量是可控的，并且与参考产品的含水量一
致，杂质也被发现在规格限制范围内。然而，考虑到扩大批量规模，实验室进一步扩大批量1000瓶执行如下。
[0222]
组成：
[0223][0224]
程序：
[0225]
步骤1：将100％批量的注射用水收集在干净的玻璃烧杯中，进行氮气吹扫约20min，温度保持在15℃左右。
[0226]
步骤2：将步骤1中80％的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入称量的甘露醇，搅拌5min，搅拌至得到澄清溶液。
[0227]
观察：清澈、无色溶液
[0228]
ph：5.924
[0229]
步骤3：在上述步骤2得到的溶液中，加入称量的柠檬酸钠水合物，搅拌30min，得到透明溶液。
[0230]
ph：8.217
[0231]
步骤4：在上述步骤3得到的溶液中，加入称量的尼可地尔(api)，搅拌至得到透明溶液。
[0232]
api添加时间：1min
[0233]
api搅拌时间：80min
[0234]
ph：7.912
[0235]
观察：清澈、无色溶液
[0236]
步骤5：将上述步骤4的溶液用步骤1的注射用水配制成体积至100％总批量，并搅拌 10min，得到透明、无色的溶液。
[0237]
最终ph：7.989
[0238]
步骤6：将上述步骤5制备的得到的溶液散装入5ml/13mm透明管状小瓶中，填充体积为2.0ml，半塞入，并按照以下配方装入预冷冻干器中。
[0239]
[0240][0241]
步骤7：冻干过程完成后，用氮气将腔室真空释放至600mbar，完全停止小瓶，并将真空完全释放，卸载小瓶，立即密封，在2℃～8℃下保存。
[0242]
步骤8：对小瓶进行分析，分析结果如下表5所示。
[0243]
表5.分析结果
[0244][0245]
观察：
[0246]
根据上述初步结果，可以明显看出，含水量是可控的，并且与参考产品的含水量一致，杂质也被发现在规格限制范围内。
[0247]
试验5：基于坍塌温度：
[0248]
冷冻干燥显微镜观察注射用12mg/小瓶散装溶液，检查冻干的关键参数。用微注射器在冷冻干燥显微镜的温度自动控制板上发现2μl样品溶液。预冷冻过程按照温度控制程序 (linksys32)的程序进行，按照下表6所显示的参数进行操作，然后使真空保持在3pa到 5pa的范围内，升华干燥过程也由控制程序监控(linksys32)。观察了样品溶液的图像，并记录了发生熔化或坍塌现象的温度，具体如图1所示。
[0249]
表6.操作过程参数表
[0250][0251]
图1显示了产品的坍塌温度为-35.8℃。根据图1中样品溶液的图像可以看出，产品的坍塌温度为-35.8℃，在初级干燥阶段，货架温度设置为-38℃，150mtorr真空为-38℃，以避免在初次干燥过程中熔化。
[0252]
组成：
[0253][0254]
程序：
[0255]
注：批量生产的温度约为15℃
[0256]
步骤1：将100％批量的注射用水收集在干净的玻璃烧杯中，进行氮气吹扫约20min，温度保持在15℃左右。
[0257]
步骤2：将步骤1中80％的注射用水收集到一个干净的玻璃烧杯中，加入称量的甘露醇，搅拌5min，搅拌至得到澄清溶液。
[0258]
观察：清澈、无色溶液
[0259]
ph：5.986
[0260]
搅拌时间：8min
[0261]
步骤3：在上述步骤2得到的溶液中，加入称量的柠檬酸钠水合物，得到透明溶液。
[0262]
ph：8.168
[0263]
步骤4：在上述步骤3得到的溶液中，加入称量的尼可地尔(api)，搅拌至得到透明溶液。
[0264]
api搅拌时间：80min
[0265]
ph：7.985
[0266]
观察：清澈、无色溶液
[0267]
步骤5：将上述步骤4的溶液用步骤1的注射用水配制成体积至100％总批量，并搅拌 10min，得到透明、无色的溶液。
[0268]
最终ph：7.926
[0269]
步骤6：将上述步骤5制备的得到的溶液散装入5ml/13mm透明管状小瓶中，填充体积为2.0ml，半塞入，并按照以下配方装入预冷冻干器中。
[0270][0271]
步骤7：冻干过程完成后，用氮气将腔室真空释放至600mbar，完全停止小瓶，并将真空完全释放，卸载小瓶，立即密封，在2℃～8℃下保存。
[0272]
步骤8：对小瓶进行分析，分析结果如下表7所示。
[0273]
表7.分析结果表
[0274][0275]
结论
[0276]
根据初始分析数据，对水含量结果进行了控制，但与之前的试验批号nici/002/035.相比，杂质水平略有增加；此外，在初次干燥过程中，产品在-38℃下保持约2220min，以达到设定的温度，与之前批号nici/001/025、nici/001/033、nici/002/034和nici/002/035 的试验相比非常高。
[0277]
产品介绍及生产说明
[0278]
1、采用本发明方法制备的产品信息简介：
[0279]
(1)性状：白色物质或粉末。
[0280]
(2)规格：5ml/13mm透明、无色管状i型玻璃瓶，带13mm易拉密封件(冻干注射液)。
[0281]
(3)标示量：每瓶含12mg尼可地尔。
[0282]
(4)贮存条件：贮存于2℃～8℃。
[0283]
2、一般生产说明
[0284]
注意事项：
[0285]
(1)分装和生产时，佩戴手套和口罩。
[0286]
(2)将所有原材料分装至双层聚乙烯袋中，贴上适当的标签，并注明材料名称、批号和数量。
[0287]
(3)分装后，尼可地尔api(药物活性成分)贮存于2℃～8℃下，直至用于批量生产。
[0288]
(4)依照工厂作业程序(sop)，清洁所有设备并清除生产区域的任何先前产品残留，并在批生产记录(bmr)中注明以证明清场完成。
[0289]
(5)整个工艺期间，区域的温度为25℃
±
2℃；相对湿度不超过(nmt)60％rh。
[0290]
(6)原料药制备在15℃
±
2℃下进行。
[0291]
3、生产处方
[0292]
本发明所述配料的具体信息如下表8所示：
[0293]
表8.本发明配料的具体信息参数表
[0294][0295]
在表8中，注射用水含量里面的“*”代表将在冻干工艺中去除；
[0296]
成分中，氮气右上角的“#”代表在散装原料药生产过程中用作加工助剂，在过滤和灌装过程中用于转移散装溶液。
[0297]
计算：
[0298]
尼可地尔(以无水物计)标准数量计算公式：
[0299][0300]
溢装：不适用
[0301]
4、设备要求
[0302]
称量天平；分装间；洗瓶机；hphv(高压高真空)蒸汽灭菌器；隧道式灭菌器；ph 计；溶解氧计；小瓶灌装和加塞(半塞)机；冻干机；瓶密封机；顶空气体分析仪；小瓶检查机/台；小瓶贴签机；过滤器完整性检查仪；100级层流罩；
[0303]
容量合适的316/316l不锈钢级夹套配料容器(维持在15℃
±
2℃)；
[0304]
容量合适的316/316l不锈钢级夹套灌装罐(维持在2℃～8℃)；
[0305]
容量合适的316/316l不锈钢级夹套压力容器(维持在15℃
±
2℃，用于体积补偿)。
[0306]
5、产品具体说明/建议
[0307]
(1)批量生产和贮存应使用ss316l级不锈钢容器。
[0308]
(2)在配料、过滤、灌装和冻干完全加塞及真空释放期间，使用0.22μm过滤器过滤的氮气。
[0309]
(3)使用venabio flow硅胶管过滤和灌装。
[0310]
(4)用于产品生产的加工辅助部件(如o型圈、垫圈和其他附件)应使用硅结构材料。
[0311]
(5)与管路的静态接触时间不得过6小时；与管路静态接触超过6小时的散装溶液应丢弃。
[0312]
(6)与过滤器的静态接触时间不得过6小时；与过滤器静态接触超过6小时的散装溶液应丢弃。
[0313]
(7)总加工时间为24小时(自加入api至冻干机装载完成的时间)。各阶段的加工时间定义如下表3所示：
[0314]
表9.各阶段的加工时间定义表
[0315]
阶段推荐时间散装溶液配制总时间(自api加入开始)nmt6小时散装溶液配制结束至过滤结束nmt6小时过滤结束至开始灌装，完成灌装并装载至冻干机nmt12小时
[0316]
(8)过滤前、后检查产品过滤器的过滤器完整性。
[0317]
(9)保持最低搅拌速度，以在配料过程中溶解原材料，并将速度记录至批记录中。
[0318]
以上所述的具体实施方式，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步地的详细说明，所应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施方法而已，并不用于限制本发明，凡是在本发明的主旨之内，所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。