一种清咽组合物、清咽抑菌液及制备方法和应用与流程

1.本发明涉及咽喉保健品技术领域，尤其涉及一种清咽组合物及其应用和该组合物制成的清咽抑菌液及其制备方法。


背景技术：

2.口腔、鼻腔是机体内环境与外环境直接联系门户，外界环境中许多生态系统中细菌可通过呼吸最终经咽喉部位进入肺部，所以咽喉在承担生理作用的同时，也承担着更多的危害，口腔、鼻腔的不适会及时反馈到咽喉，造成急慢性咽炎、喉咙肿痛、声音嘶哑，所以对咽喉的保护同样重要。另一方面，生活节奏加快和工作压力增大引起的生活方式的改变(如熬夜、加班、晚睡等)以及饮食习惯的改变(如不定时进餐或常吃各种快餐以及麻、辣、烫等重口味饮食)导致咽喉肿痛等问题快速蔓延。这些“小问题”虽然不足以去医院，却极大困扰了人们的情绪。
3.目前市售的咽喉用药按消费人群的需求一般分为治疗型和保健型两种。治疗型包括中成药和化学药两大类，主要用于治疗因感冒或咽喉炎引发的有明显症状的疾病。保健型主要是保健品和食品，活性成分大多由药食同源的中药组分和食品成分组成，一般面向烟酒过度、饮食不当或用嗓过度等咽喉症状较轻的人群。受绿色和健康消费理念的影响，保健型咽喉用药更符合中国消费者的养生传统。但是保健型咽喉用药往往起效慢，且对于咽喉不适通常仅能起到缓解和辅助治疗作用，对于大多数患者，单纯使用保健型咽喉用药并不能完全治愈咽喉不适，一般仍需配合治疗型药品，故其在使用中仍受到一定限制。


技术实现要素：

4.针对目前的保健型咽喉用药起效慢，并不能完全治愈咽喉不适的问题，本发明提供一种清咽组合物、抑菌液及制备方法和应用。
5.为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下技术方案：
6.一方面，本发明实施例提供一种清咽组合物，包括以下重量份数的成分：金银花提取液0.05～7份，甘草提取液0.05～7份，绿茶提取液0.05～7份，西吡氯铵0.02～0.1份和葡萄糖酸氯己定0.02～0.1份。
7.在该清咽组合物中，金银花含有绿原酸和异绿原酸，其提取液能够通过抑制炎症部位炎症因子的合成或释放而发挥类似非甾体类抗炎药物的抗炎作用。试验发现，金银花提取液还具有滋养并修复肌肤，促进细胞活力的作用，有助于维持皮肤健康，使皮肤恢复正常状态。
8.甘草主要活性成分为三萜皂苷和黄酮类化合物等，其提取液具有抗炎、抗菌、抗病毒、镇咳、抗溃疡、祛痰、抗氧化、抗癌、免疫调节等多种药理活性，具有良好的抗菌和抗病毒作用，对多种革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌均表现一定的抑制，还能够抑制人类免疫缺陷病毒(hiv-1)、传染性非典型肺炎病毒(sars)、呼吸系统病毒、水泡性口膜炎病毒等多种病毒的增殖。
9.茶叶不仅具有提神清心、清热解暑、消食化痰、去腻减肥、清心除烦、解毒醒酒、生津止渴、降火明目、止痢除湿等药理作用，还对辐射病、心脑血管病、癌症等疾病有一定的药理功效。茶叶具有药理作用的主要成份是茶多酚、咖啡碱、脂多糖、茶氨酸等。其中茶多酚有较强的收敛作用和一定的消炎作用，并对病原菌、病毒有明显的抑制和杀灭作用。
10.西吡氯铵通过降低表面张力而抑制和杀灭多种口腔致病菌和非致病菌细菌，并能减少或抑制牙菌斑的形成，有助于保持口腔清洁、清除口腔异味。葡萄糖酸氯己定具有相当强的广谱抑菌、杀菌作用，可冲洗创口。
11.本发明通过试验研究发现，将金银花提取液、甘草提取液、绿茶提取液与西吡氯铵和葡萄糖酸氯己定合用，在较小的用量下即可发挥显著的杀菌、抗病毒作用，减少西吡氯铵和葡萄糖酸氯己定的用量，并可消除细菌的耐药性，能够有效消灭口腔、咽部中的有害菌，起效迅速。与此同时，该组合物还能够保护口腔、咽部中的有益菌，从而改善口腔微循环。并且，当将该组合物直接用于咽部时，能够立即缓解咽部不适，能够有效维护咽部健康，多数咽部不适患者在使用过程中症状均有缓解，部分患者在使用数日后可完全治愈其咽部不适。该组合物几乎无刺激性，对于咽喉敏感、口腔内或咽喉有溃疡或其他创面的患者同样适用。
12.优选地，所述组合物包括以下重量份数的成分：金银花提取液0.5～7份，甘草提取液0.5～7份，绿茶提取液0.5～7份，西吡氯铵0.06～0.08份和葡萄糖酸氯己定0.05～0.06份。
13.优选地，所述组合物包括以下重量份数的成分：金银花提取液7份，甘草提取液7份，绿茶提取液7份，西吡氯铵0.08份和葡萄糖酸氯己定0.06份。该组合物的以上成分采用该配比时，其抑菌效果更显著，对咽部不适的改善效果更快速。
14.可选地，所述金银花提取液的制备方法为：以10～25％v/v乙醇水溶液在55～70℃对金银花进行超声提取，先在20～35khz的频率下超声提取20～30min，再在60～70khz的频率下超声提取15～20min；提取完成后过滤，将所得滤液浓缩至1.2～1.3g/ml，得所述金银花提取液；其中，所述10～25％v/v乙醇水溶液的质量优选采用金银花质量的7～10倍。
15.可选地，所述甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，用15～25％v/v乙醇水溶液回流提取1～1.5h，过滤，得乙醇提取液和滤渣，向所述滤渣中加入水，在20～30khz的频率下超声提取20～30min，然后加入相当于所述生甘草质量0.5～1.5％的纤维素酶在40～50℃酶解2～3h，然后升温至90～95℃保持5～10min灭酶，过滤，得酶解液；将所述乙醇提取液和所述酶解液合并后，浓缩至1.2～1.3g/ml，得所述甘草提取液。其中，15～25％v/v乙醇水溶液的质量优选采用所述生甘草质量的5～7倍，水的质量优选采用所述滤渣质量的5～7倍。
16.可选地，所述绿茶提取液的制备方法为：将绿茶在100～110℃条件下蒸30～60min，再用水煎煮提取，过滤，得水煎提取液和残渣；将所述残渣用15～25％v/v乙醇水溶液在功率为800～900w、温度为30～40℃条件下微波萃取10～15min，过滤，得微波提取液；将所述水煎提取液和微波提取液分别浓缩至1.2～1.3g/ml，合并，得所述绿茶提取液。其中，水的质量优选采用所述绿茶质量的10～12倍，15～25％v/v乙醇水溶液的质量优选采用所述残渣质量的6～8倍。
17.用上述制备方法制得的金银花提取液、甘草提取液和绿茶提取液均能够提高该组
合物的抑菌效果以及对咽部不适的改善效果，并使其对口腔内黏膜或创面的刺激性进一步降低。
18.第二方面，本发明实施例还提供了上述组合物在制备清咽抑菌产品中的应用。
19.上述组合物对于咽喉不适的症状起效迅速，多次使用后具有较高的治愈率，且口感清爽、气味清新、几乎无刺激，可用于制备清咽抑菌产品，如清咽喷剂，该剂型能直接作用于咽部，使用简单，并且携带方便。
20.第三方面，本发明实施例还提供了一种清咽抑菌液，包括上述清咽组合物。该清咽抑菌液可灌装于喷雾装置中作为咽部喷雾剂直接喷于患处，作用直接，起效快速。
21.优选地，所述清咽抑菌液还包括以下重量份数的成分：
[0022][0023]
所述矫味剂可选自木糖醇、山梨醇、甘露醇中的至少一种，优选采用木糖醇。木糖醇不仅能够增加该抑菌液的甜味，还能提升清凉感，增加该抑菌液使用过程的舒适度，同时木糖醇能够减少牙斑菌的附着，有利于防止龋齿；
[0024]
柠檬酸和柠檬酸钠具有抗氧化作用，并可调节产品酸味，提升产品口感。
[0025]
以上优选的成分均为口腔用产品的常用组分，安全性高。由上述成分制得的清咽抑菌液具有口感清爽、气味清新、刺激性小，能够滋润咽喉的优点，在抑菌的同时能够维护咽部、口腔微循环。
[0026]
第四方面，本发明还提供上述清咽抑菌液的制备方法，包括以下步骤：
[0027]
向所述水中加入所述甘油、矫味剂、西吡氯铵、葡萄糖酸氯己定、柠檬酸钠和柠檬酸，搅拌至溶解，得到水相；
[0028]
将所述聚山梨醇酯-80和泊洛沙姆407加热至溶解，加入香精混合均匀，得到油相；
[0029]
向所述水相中加入所述油相，搅拌至完全混合均匀；
[0030]
加入所述金银花提取液、甘草提取液和绿茶提取液，搅拌至分散均匀，得所述清咽抑菌液。
具体实施方式
[0031]
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用于解释本发明，并不
用于限定本发明。
[0032]
以下实施例中所采用的实验方法如无特殊说明，均为本领域的常规方法。
[0033]
以下实施例中所使用的金银花和生甘草均符合《中国药典》(2015年版)一部正文各药材项下的有关规定。
[0034]
以下实施例中所采用的原料、试剂等，如无特殊说明，均从商业途径获得。
[0035]
实施例1～6
[0036]
本发明实施例提供了清咽组合物及其制备方法：各实施例中包括以下如表1所示的重量份数配比的成分：
[0037]
表1实施例1～6清咽组合物
[0038]
成分实施例1实施例2实施例3实施例4实施例5实施例6金银花提取液70.530.050.057甘草提取液70.530.050.057绿茶提取液70.530.050.057西吡氯铵0.080.060.080.10.020.1葡萄糖酸氯己定0.060.050.060.080.020.1
[0039]
将各实施例中的各成分分别混合，即得各实施例的清咽组合物。
[0040]
实施例1～4中，金银花提取液的制备方法为：将金银花以相当于其质量8倍的20％v/v乙醇水溶液在60℃超声提取：先在30khz超声提取25min，再在65khz的频率下超声提取18min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；其中，20％v/v乙醇水溶液的质量为金银花质量的8倍；
[0041]
甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于该生甘草质量6倍的20％v/v乙醇水溶液回流提取1.2h，过滤，得乙醇提取液和滤渣，向滤渣中加入相当于滤渣质量6倍的水，在25khz的频率下超声提取25min，然后加入相当于生甘草质量1.0％的纤维素酶在45℃酶解2.5h，然后升温至93℃保持8min灭酶，过滤，得酶解液；将所得乙醇提取液和酶解液合并后，在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0042]
绿茶提取液的制备方法为：将绿茶在105℃条件下蒸45min，再用相当于该绿茶蒸前质量11倍的水煎煮提取，过滤，得水煎提取液和残渣；将所得残渣用相当于该残渣质量7倍的20％v/v乙醇水溶液，在功率为850w、温度为35℃条件下微波萃取12min，过滤，得微波提取液；将所得水煎提取液和微波提取液分别在50℃减压浓缩至1.25g/ml，合并，即得。
[0043]
实施例5中，金银花提取液的制备方法为：将金银花以相当于其质量7倍的10％v/v乙醇水溶液在70℃超声提取：先在20khz超声提取30min，再在60khz的频率下超声提取20min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.2g/ml，即得；其中，10％v/v乙醇水溶液的质量为金银花质量的7倍；
[0044]
甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于该生甘草质量5倍的15％v/v乙醇水溶液回流提取1h，过滤，得乙醇提取液和滤渣，向滤渣中加入相当于滤渣质量5倍的水，在20khz的频率下超声提取30min，然后加入相当于生甘草质量0.5％的纤维素酶在50℃酶解2h，然后升温至90℃保持10min灭酶，过滤，得酶解液；将所得乙醇提取液和酶解液合并后，在50℃减压浓缩至1.2g/ml，即得；
[0045]
绿茶提取液的制备方法为：将绿茶在100℃条件下蒸60min，再用相当于该绿茶蒸
前质量10倍的水煎煮提取，过滤，得水煎提取液和残渣；将所得残渣用相当于该残渣质量6倍的15％v/v乙醇水溶液，在功率为800w、温度为40℃条件下微波萃取10min，过滤，得微波提取液；将所得水煎提取液和微波提取液分别在50℃减压浓缩至1.2g/ml，合并，即得。
[0046]
实施例6中，金银花提取液的制备方法为：将金银花以相当于其质量10倍的25％v/v乙醇水溶液在55℃超声提取：先在35khz超声提取20min，再在70khz的频率下超声提取15min；提取完成后过滤，将所得滤液在50℃减压浓缩至1.3g/ml，即得；其中，25％v/v乙醇水溶液的质量为金银花质量的10倍；
[0047]
甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，加入相当于该生甘草质量7倍的25％v/v乙醇水溶液回流提取1.5h，过滤，得乙醇提取液和滤渣，向滤渣中加入相当于滤渣质量7倍的水，在30khz的频率下超声提取20min，然后加入相当于生甘草质量1.5％的纤维素酶在40℃酶解3h，然后升温至95℃保持5min灭酶，过滤，得酶解液；将所得乙醇提取液和酶解液合并后，在50℃减压浓缩至1.3g/ml，即得；
[0048]
绿茶提取液的制备方法为：将绿茶在110℃条件下蒸30min，再用相当于该绿茶蒸前质量12倍的水煎煮提取，过滤，得水煎提取液和残渣；将所得残渣用相当于该残渣质量8倍的25％v/v乙醇水溶液，在功率为900w、温度为30℃条件下微波萃取15min，过滤，得微波提取液；将所得水煎提取液和微波提取液分别在50℃减压浓缩至1.3g/ml，合并，即得。
[0049]
实施例7～12
[0050]
本发明实施例提供了清咽抑菌液及其制备方法：各实施例中包括以下如表2所示的重量份数配比的成分：
[0051]
表2实施例7～12清咽抑菌液
[0052]
成分实施例7实施例8实施例9实施例10实施例11实施例12水857580706060甘油655.5433木糖醇31.5310.010.01柠檬酸钠0.010.50.20.60.80.01柠檬酸0.0020.020.010.030.0150.002聚山梨醇酯-80867523泊洛沙姆40721.21.510.10香精1.20.81.00.50.10.2金银花提取液70.530.050.057甘草提取液70.530.050.057绿茶提取液70.530.050.057西吡氯铵0.080.060.080.10.020.1葡萄糖氯己定0.060.050.060.080.020.1
[0053]
其中金银花提取液、甘草提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1。
[0054]
该清咽抑菌液的制备方法为：
[0055]
向水中加入甘油、木糖醇、西吡氯铵、葡萄糖酸氯己定、柠檬酸钠和柠檬酸，搅拌至溶解(约15分钟)，得到水相；
[0056]
将聚山梨醇酯-80和泊洛沙姆407加热至溶解(约40～45℃)，加入香精混合均匀，
得到油相；
[0057]
向水相中缓慢加入油相，搅拌至完全混合均匀；
[0058]
加入金银花提取液、甘草提取液和绿茶提取液，搅拌至分散均匀，得清咽抑菌液。
[0059]
对比例1
[0060]
本对比例提供一种清咽组合物，其成分同实施例1。
[0061]
其中甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，用相当于其质量6倍的水煎煮提取2次，每次30min；过滤，合并滤液，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0062]
金银花提取液和绿茶提取液制备方法同实施例1。
[0063]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0064]
对比例2
[0065]
本对比例提供一种清咽组合物，其成分同实施例1。
[0066]
其中甘草提取液的制备方法为：将生甘草粉碎，用相当于其质量6倍的水溶液超声提取45min，超声频率为25hz；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0067]
金银花提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1。
[0068]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0069]
对比例3
[0070]
本对比例提供一种清咽组合物，其成分同实施例1。
[0071]
其中绿茶提取液的制备方法为：将绿茶用相当于其质量7倍的20％v/v乙醇水溶液加热回流提取2次，每次25min；过滤，合并滤液，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0072]
金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1。
[0073]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0074]
对比例4
[0075]
本对比例提供一种清咽组合物，其成分同实施例1。
[0076]
其中绿茶提取液的制备方法为：将绿茶用相当于其质量7倍的15％v/v乙醇水溶液在功率为850w、温度为35℃条件下微波萃取12min，过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0077]
金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1。
[0078]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0079]
对比例5
[0080]
本对比例提供一种清咽组合物，其成分同实施例1。
[0081]
其中金银花提取液的制备方法为：将金银花用8倍的55％v/v乙醇水溶液加热回流提取2次，每次30min；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0082]
甘草提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1。
[0083]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0084]
对比例6
[0085]
本对比例提供一种清咽组合物，其成分同实施例1。
[0086]
其中金银花提取液的制备方法为：将金银花用8倍的55％v/v乙醇水溶液超声提取45min，超声频率为45hz；过滤，将滤液在50℃减压浓缩至1.25g/ml，即得；
[0087]
甘草提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1。
[0088]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0089]
对比例7
[0090]
本对比例提供一种清咽组合物，包括以下重量份数配比的成分：
[0091]
去离子水21份、西吡氯铵0.08份和葡萄糖酸氯己定0.06份。
[0092]
将各成分混合，即得本对比例的清咽组合物。
[0093]
对比例8
[0094]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比和制备方法同实施例7，其中金银花提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1，甘草提取液的制备方法同对比例1。
[0095]
对比例9
[0096]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比和制备方法同实施例7，其中金银花提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1，甘草提取液的制备方法同对比例2。
[0097]
对比例10
[0098]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比和制备方法同实施例7，其中金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1，绿茶提取液的制备方法同对比例3。
[0099]
对比例11
[0100]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比和制备方法同实施例7，其中金银花提取液和甘草提取液的制备方法同实施例1，绿茶提取液的制备方法同对比例4。
[0101]
对比例12
[0102]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比和制备方法同实施例7，其中甘草提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1，金银花提取液的制备方法同对比例5。
[0103]
对比例13
[0104]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比和制备方法同实施例7，其中甘草提取液和绿茶提取液的制备方法同实施例1，金银花提取液的制备方法同对比例6。
[0105]
对比例14
[0106]
本对比例提供一种清咽抑菌液及其制备方法，该清咽抑菌液的成分配比以实施例7为基础，将金银花提取液、甘草提取液和绿茶提取液更换为去离子水，其余成分不变，制备方法同实施例7。
[0107]
试验例1
[0108]
本试验例对上述实施例1～6和对比例1～7制备所得清咽组合物进行了抑菌效果考察。
[0109]
下述实验中所采用的营养琼脂培养基的成分配比为：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化钠5g，琼脂17g，蒸馏水1000ml；
[0110]
沙氏培养基的成分为：蛋白胨10g、琼脂20g、葡萄糖40g，蒸馏水1l。
[0111]
试验菌株：金黄色葡萄球菌(atcc6538)、大肠杆菌(8099)、白色念珠菌(atcc10231)、铜绿假单胞菌(atcc15442)、肺炎克雷伯氏菌(atcc4352)、溶血性链球菌(atcc19615)。
[0112]
1、实验方法
[0113]
将试验菌第5代的营养琼脂培养基斜面培养物(24h)用5ml 0.03mol/l磷酸盐缓冲液(以下简称pbs)洗下菌苔，用上述pbs稀释，制成浓度为5
×
104cfu/ml的菌悬液。
[0114]
以实施例1～8和对比例1～7制备所得清咽组合物样品作为被试样液，取被试样液(5ml)和对照样液(经灭菌处理的去离子水)各7管。
[0115]
分别在每个被试样液和对照样液内滴加100μl上述菌悬液，均匀混合，开始计时，作用2min、5min、10min、20min、1h、2h，用无菌镊分别将混合后的样液(0.5ml)投入含5ml pbs的试管内，充分混匀，分别吸取0.5ml，置于两个平皿，用凉至40～50℃的营养琼脂培养基(细菌)或沙氏琼脂培养基(酵母菌)15ml作倾注，转动平皿，使其充分均匀，琼脂凝固后翻转平板，35℃
±
2℃培养48h(细菌)或72h(酵母菌)，作活菌菌落计数。
[0116]
试验重复3次，按下式计算抑菌率：
[0117]
x＝(a-b)/a
×
100％；
[0118]
式中：x为抑菌率，a为对照样液平均菌落数；b为被试样液平均菌落数。
[0119]
2、实验结果
[0120]
记录各清咽组合物在不同作用时间下的抑菌率平均值，结果见表3～8。
[0121]
表3对金黄色葡萄球菌的抑菌数据
[0122][0123][0124]
表4对大肠杆菌的抑菌数据
[0125][0126]
表5对白色念珠菌的抑菌数据
[0127][0128][0129]
表6对铜绿假单胞菌的抑菌数据
[0130][0131]
表7对肺炎克雷伯氏菌的抑菌数据
[0132][0133][0134]
表8对溶血性链球菌的抑菌数据
[0135][0136]
由表3～表8试验结果可见，本发明实施例1～6所得清咽组合物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯氏菌和溶血性链球菌都有抑制作用，其中实施例1、4～6对以上各致病菌的抑菌率在5～20min时均＞99.9％，表现出优异的抑菌作用。并且，实施例1所得清咽组合物对于以上各致病菌的抑菌率优于采用不同制备方法制得的各对比例的抑菌率。
[0137]
试验例2
[0138]
本试验例对上述实施例1～6和对比例1～7制备所得清咽组合物参照《消毒技术规范》2002年版-2.1.1.10.5残留消毒剂化学中和法的鉴定试验与2.1.1.10.7病毒灭活试验进行病毒灭活测试。测试结果如表9所示。
[0139]
表9病毒灭活数据
[0140][0141]
由表9数据可见，实施例1～6制备所得清咽组合物在对甲型流感病毒h1n1、h3n2作用时间5分钟的病毒灭活率全部为99.9％，且优于采用不同制备方法制得的各对比例。
[0142]
试验例3
[0143]
本试验例考察了上述实施例7～12和对比例8～14制备所得清咽抑菌液的急性眼刺激性。
[0144]
1、实验方法
[0145]
采用眼部健康的新西兰家兔21只，雌性，体重2.0～2.5kg，以普通级家兔维持饲料喂养，温度20～26℃，相对湿度40％～70％。
[0146]
根据《消毒技术规范》(2002年版)2.3.4.3对实施例7～12以及对比例14制备所得清咽抑菌液分别进行急性眼刺激试验(各样品以3只家兔进行试验)：实验前约24h对家兔两眼进行检查，所选动物均为无眼刺激症状、角膜缺陷及结膜损伤。试验时吸取待测清咽抑菌液0.1ml，滴入家兔一侧眼结膜囊内。另一侧眼以生理盐水作为正常对照。滴受试物后，将眼被动闭合4s，30s后用生理盐水冲洗。于滴眼后分别计算每只动物在1h、24h、48h、72h、7d、14d和21d对眼睛的刺激强度，并根据表10进行急性眼刺激反应评分。结果见表11(表中数值为各样品对应的3只家兔的平均评分)。
[0147]
表10急性刺激反应评分标准
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表11实施例7～12所得清咽抑菌液的试验结果
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[0151][0152]
由表11结果可见，实施例7～12所得清咽抑菌液对新西兰兔急性眼刺激强度为无刺激性。
[0153]
试验例4
[0154]
由以上试验例可见，从抑菌、病毒灭活和刺激性三方面综合评价，实施例1、4制备所得的清咽组合物其抑菌、灭活效果最佳，实施例7制备所得的清咽抑菌液活性成分与实施例1相同，实施例10制备所得的清咽抑菌液活性成分与实施例4相同，实施例7的刺激性更低。故本试验例对上述效果实施例7制备所得清咽抑菌液进行了其用于不同人群的使用感受评价。
[0155]
受试人群分别为用嗓习惯不当人群，着急上火人群和咽炎人群，临床表现为咽喉肿痛、声音嘶哑。
[0156]
试验期间每次喷实施例7制备所得清咽抑菌液4次，相邻两次之间间隔4～6小时，喷后30min内不饮食。试验期间不使用其他任何药物，保持规律作息，常规饮食。
[0157]
以咽喉明显感觉清爽，且咽喉肿痛、嘶哑有明显缓解感觉作为起效的考察指标，记录受试人群在第一次使用后不同时间的起效率，结果如表12所示。
[0158]
表12第一次使用后不同时间的起效率
[0159][0160]
使用3天时对受试人群咽喉肿痛、嘶哑症状的缓解情况进行考察，记录受试人群在使用3天时的症状缓解情况，结果如表13所示。
[0161]
表13使用3天时的症状缓解情况
[0162][0163]
以咽喉肿痛、嘶哑症状完全消除作为治愈的考察指标，记录受试人群在使用不同时间后的治愈率，结果如表14所示。
[0164]
表14使用不同时间后的治愈率
[0165][0166]
由以上表12～14的结果可见，本发明提供的清咽抑菌液具有起效迅速，多数患者使用过程中咽部不适症状均有缓解，部分患者使用数日后可完全治愈。
[0167]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。