扎那米韦在制备治疗或预防先兆子痫的药物中的用途的制作方法

1.本技术提供了扎那米韦在制备治疗或预防先兆子痫的药物中的用途以及相应药物和治疗方法。


背景技术：

2.先兆子痫，又称子痫前期或妊娠毒血症，是指妊娠20周后出现的以高血压，蛋白尿和水肿为主要症状，并伴随头痛、眼花、恶性、呕吐、腹部不适等的临床综合征。先兆子痫不仅影响胎儿的发育，而且经常危及孕产妇的生命安全。该疾病的病生理过程大致分为2个阶段：1)异常的胎盘形成，尤其是子宫螺旋小动脉舒张障碍，并影响到母体向胎儿的血流供应。减少的胎盘血流灌注则会激活胎盘释放相关的细胞因子并引起全身性的血液动力学的改变。2) 孕产妇出现临床症状，主要是由母体血管内皮细胞功能障碍引起的循环系统紊乱，包括血管反应性的改变，凝血级联反应的激活和血管完整性的破坏等。先兆子痫对孕产妇的大部分器官都会产生影响，但主要是肾脏，肝脏和大脑。
3.尽管对于先兆子痫有大量临床前和临床研究，其发病机制目前已知复杂但尚不明确，相应治疗手段也相当匮乏，一般仅为对症的降血压、利尿、镇静治疗等，重度子痫出现时可使用硫酸镁解除痉挛症状，目前终止妊娠仍是最有效的临床治疗措施。先兆子痫的病因可能是在多基因遗传因素的基础上，易感因素导致细胞免疫异常，胎盘和滋养细胞缺血缺氧，氧化应激反应异常，引起继发性全身血管内皮细胞受损而导致该病的发生。鉴于此，科学界提出了一系列的机制学说包括胎盘或滋养细胞缺血学说，氧化应激学说，免疫调节异常学说，遗传学说以及血管内皮损伤学说等来阐释先兆子痫的发病机制。胎盘螺旋小动脉重铸障碍和胎盘浅着床，滋养细胞缺血缺氧以及血管内皮细胞损伤通常被认为是先兆子痫发病的病理生理基础。大量研究表明，由于缺血缺氧引起的胎盘及血管源性循环因子的释放，包括血管内皮生长因子(vegf)、可溶性血管内皮生长因子-1(sflt-1)、血管紧张素ii受体1的自身抗体及肿瘤坏死因子-α(tnf-α)、白细胞介素1(il-1)和il-6、正五聚蛋白3(ptx3)等可通过不同途径引起母体血管内皮功能损伤。此外，先兆子痫患者血液中的血管舒张因子和血管收缩因子比例失调，血管内皮受损使血管对血管收缩因子的敏感性增加，而对血管舒张因子的敏感性下降，从而导致全身小动脉痉挛。原有高血压，糖尿病，肥胖以及高脂血症的患者，在妊娠前即可能存在氧化应激和血管内皮功能异常，妊娠后更易于发生先兆子痫。
4.血管内皮细胞平铺于血管内腔面，是流动剪切力的直接感受者与响应者，内皮细胞通过各种途径将胞外力学信号转化为胞内信号，进而引发下游生化反应。血管内皮细胞糖萼是位于内皮细胞顶膜的一层绒毛状多糖蛋白复合结构，介于管壁与血液之间，是内皮细胞表面的动态天然屏障，并介导内皮细胞的力传导功能。血管内皮细胞糖萼是由末端含唾液酸残基的寡糖链糖蛋白与包含糖胺聚糖侧链的蛋白聚糖所组成的带高度负电荷的内皮细胞表面层。除了作为血管壁的选择性通透屏障，调节微循环流变性质，参与血管保护和信号传递之外，大量的证据表明内皮细胞糖萼也介入了流动剪切力的感受与传导过程。采
用选择性酶降解的方法，manolis等通过同时选择性降解糖萼中的唾液酸，硫酸肝素，硫酸软骨素，透明质酸来对牛胸主动脉内皮细胞进行处理，结果发现流动剪切力诱导的一氧化氮(no)合成受阻，表明完整无损的糖萼在剪切力诱导的no合成中发挥了重要作用。研究亦证实，当糖萼完整无损时，流动剪切力可以通过核心蛋白传递到肌动蛋白细胞骨架，或者通过核心蛋白直接传递到细胞膜上，从而介导细胞下游的信号传导，如no的生成，细胞骨架的重组等。而当糖萼受损时，血管内皮细胞的正常功能则受到影响。最近的一项临床研究发现在早发型先兆子痫患者中可以检测到更多的糖萼降解，并且伴随着血液中糖萼成分硫酸肝素蛋白聚糖和透明质酸水平的升高，从而表明血管内皮糖萼降解与早发型先兆子痫发病密切相关。
5.血管内皮糖萼的降解通常由多种特异性的酶介导。神经氨酸苷酶，亦称为唾液酸酶，可以作用于糖萼末端含有唾液酸残基的寡糖链糖蛋白，使其酮糖苷键发生水解而放出唾液酸，并最终引起糖萼降解和相应的血管内皮功能受损。有文献表明，在一些心血管系统相关疾病如ii型糖尿病的患者血液中可以检测到神经氨酸苷酶水平的升高，而抑制神经氨酸苷酶则可以通过抑制糖萼降解来相应地改善血管内皮功能以及整个心血管系统的功能。鉴于目前临床上并无有效预防和治疗先兆子痫的药物，在本领域中存在对用于预防和治疗该疾病药物的极大需要，抑制神经氨酸苷酶的药物则为预防和治疗先兆子痫的药物开发提供了全新的思路和手段。


技术实现要素：

6.一方面，本技术提供了扎那米韦在制备治疗或预防先兆子痫的药物中的用途。
7.所述扎那米韦包括化合物扎那米韦及其医学或药学上可接受衍生物或盐。
8.进一步地，所述药物剂型为注射剂，口服制剂或外用制剂；优选注射剂，口服制剂；特别优选注射剂。
9.进一步地，所述注射剂包括注射液、粉针剂；口服制剂包括片剂、胶囊剂、口服液、咽喉或鼻喷剂，外用制剂包括软膏剂、喷剂、贴剂。
10.进一步地，所述治疗或预防先兆子痫为改善头痛、眼花、恶性、呕吐、腹部不适、高血压，蛋白尿，水肿，肝肾功能，血小板减少和/或凝血系统异常；肌酐、神经氨酸苷酶和唾液酸升高，血液no水平降低；以及改善妊娠结局。
11.另一方面，本技术提供了治疗或预防先兆子痫的方法，包括向有先兆子痫风险或患有先兆子痫的患者施用扎那米韦。
12.进一步地，所述扎那米韦剂型为注射剂，口服制剂或外用制剂；优选注射剂，口服制剂；特别优选注射剂。
13.所述注射剂包括注射液、粉针剂；口服制剂包括片剂、胶囊剂、口服液、咽喉或鼻喷剂，外用制剂包括软膏剂、喷剂、贴剂。
14.进一步地，所述治疗或预防先兆子痫为改善头痛、眼花、恶性、呕吐、腹部不适、高血压，蛋白尿，水肿，肝肾功能，血小板减少和/或凝血系统异常；肌酐、神经氨酸苷酶和唾液酸升高，血液no水平降低；以及改善妊娠结局。
15.进一步地，所述扎那米韦的施用方法可选肌肉注射、静脉注射、静脉输液，优选肌肉注射；每周给药1-7次，优选1-4次；更优选1-2次；给药持续时间1-30日，优选1-7 日，更优
7日，更优选1-7日。
33.另一方面，本技术提供了治疗或预防先兆子痫的药物。
34.进一步地，所述药物剂型为注射剂，口服制剂或外用制剂；优选注射剂，口服制剂；特别优选注射剂；进一步优选肌肉注射剂。。
35.进一步地，所述药物包含说明书，说明书中记载神经氨酸酶抑制剂的施用方法为每周给药1-7次，优选1-4次；更优选1-2次；给药持续时间1-30日，优选1-7日，更优选 1-7日。
36.进一步地，所述治疗或预防先兆子痫为改善头痛、眼花、恶性、呕吐、腹部不适、高血压，蛋白尿，水肿，肝肾功能，血小板减少和/或凝血系统异常；肌酐、神经氨酸苷酶和唾液酸升高，血液no水平降低；以及改善妊娠结局。
37.进一步地，本技术的方法或药物在施用时，剂量为20-40mg/天，90mg/kg或者120mg/kg，优选20mg/天。
38.进一步地，所述药物中还包括药学上可接受的辅料，所述药学上可接受的辅料包括但不限于溶剂、助溶剂、稳定剂、分散剂、粘度调节剂、抗氧化剂、甜味剂、粘合剂、气体发生剂。
39.进一步地，神经氨酸酶抑制剂为方法或药物中的唯一有效成分；或者在方法中还包括施用其他有效成分或药物中还包含其他有效成分；所述其他有效成分包括但不限于降血压药，蛋白质补充剂，抗眩晕药，心血管疾病药物。
40.本技术的所述的扎那米韦不限为cas号139110-90-8的化学结构(即，5-乙酰氨基-4
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[(氨基亚氨基甲基)-氨基]-2，6-氢-3，4，5-三去氧-d-丙三醇基-d-半乳糖-2-烯醇酸，或 4-胍基-2-脱氧-2，3-二脱氢-n-乙酰神经氨酸)，也包含其医学或药学上可接受衍生物或盐。本技术中的神经氨酸酶抑制剂是指对神经氨酸酶起抑制作用的化合物或组合物，包括本领域已知和研究中的各种神经氨酸酶抑制剂，包括但不限于扎那米韦。
[0041]
本技术中己酸羟孕酮也被称为17-α己酸羟孕酮、17-hpc、17-己酸羟孕酮、17-羟己孕酮，cas编号为630-56-8。
[0042]
本技术所述的先兆子痫指妊娠过程中以高血压，蛋白尿和水肿为主要症状，并伴随头痛、眼花、恶性、呕吐、腹部不适等的临床综合征，主要症状还包括肌酐、神经氨酸苷酶和唾液酸升高以及血液no水平降低，其具体症状包含但不限于上述。
[0043]
本技术中扎那米韦可以作为治疗先兆子痫的唯一有效成分施用或制备相应药物，也可以与治疗先兆子痫或先兆子痫相关症状的已知或研究中的药物联合施用或制备成药物组合或药物组合物。这些药物包括但不限于降血压药，蛋白质补充剂，抗眩晕药，心血管疾病药物等。
[0044]
本技术中的扎那米韦注射给药方式可以为肌肉注射、静脉注射、静脉输液等，优选肌肉注射。
[0045]
依据剂型和病情不同，区别本技术中的扎那米韦给药频率可以为每周1-7次，优选 1-4次，更优选1-2次；给药持续时间可以为1-30日，优选1-14日，更优选1-7日。
[0046]
本技术中扎那米韦施用量不局限与说明书和权利要求中所记载的范围，临床医师可以根据患者情况和药物剂型等因素调整用量。
[0047]
本技术的扎那米韦可用剂型包括但不限于注射剂如注射液、粉针剂等，口服制剂
如片剂、胶囊剂、口服液等，咽喉或鼻喷剂，外用制剂如软膏剂、喷剂、贴剂等；优选注射剂，口服制剂；特别优选注射剂。
[0048]
本技术中所述的以及改善妊娠结局包括但不限于与先兆子痫或血压相关的流产和胎儿/婴儿健康问题。
[0049]
本领域技术人员可以根据药学领域一般知识为为本技术所涉及的药物选择适合的辅料，可用的辅料种类包括但不限于溶剂、助溶剂、稳定剂、分散剂、粘度调节剂、抗氧化剂、甜味剂、粘合剂、气体发生剂等。
[0050]
本发明中，神经氨酸酶抑制剂如扎那米韦施用量可为90mg/kg-120mg/kg；优选120 mg/kg。
[0051]
实验结果表明，扎那米韦可以改善先兆子痫的高血压以及蛋白尿症状，降低尿液中肌酐水平；扎那米韦可以降低血液中神经氨酸苷酶和唾液酸水平，增加血液中no水平。扎那米韦与己酸羟孕酮联用对先兆子痫显示出更优的预防和治疗作用。为预防和治疗先兆子痫的药物开发提供了全新的思路和手段。
附图说明
[0052]
图1为各组孕鼠妊娠第12天平均动脉压情况图；其显示扎那米韦(120mg/kg)可以显著降低l-name引起的孕鼠平均动脉压升高(数据为平均值
±
标准误，n＝9-22，* p＜0.05)；
[0053]
图2为各组孕鼠妊娠第12天舒张压情况图；其显示扎那米韦(120mg/kg)可以显著降低l-name引起的孕鼠舒张压升高(数据为平均值
±
标准误，n＝9-22，*p＜0.05)；
[0054]
图3为各组孕鼠妊娠第12天收缩压情况图；其显示扎那米韦(120mg/kg)可以显著降低l-name引起的孕鼠收缩压升高(数据为平均值
±
标准误，n＝9-22，**p＜0.01)；
[0055]
图4为各组孕鼠妊娠第17-18天24小时尿蛋白情况图；其显示扎那米韦可以显著降低l-name引起的孕鼠24小时尿蛋白升高(数据为平均值
±
标准误，n＝5-22，**p＜0.01， ***p＜0.001)；
[0056]
图5为各组孕鼠产仔数量情况图；扎那米韦可以显著改善l-name引起的孕鼠产仔数量减少(数据为平均值
±
标准误，n＝9-16，*p＜0.05)。
具体实施方式
[0057]
实施例1先兆子痫动物模型的建立
[0058]
将怀孕的cd-1小鼠(年龄8-10周)随机分为对照组和先兆子痫模型组。在妊娠周期的第7-16天，模型组小鼠每天通过皮下注射50mg/kg的n-硝基-l-精氨酸甲酯(l-name) 诱导先兆子痫。对照组则皮下注射等体积的溶剂。
[0059]
实施例2实验分组
[0060][0061][0062]
实施例3治疗效果评估
[0063]
l-name诱导的先兆子痫动物模型，根据文献报道，在首次给予l-name的两天后即会出现高血压症状，并至少持续到首次给予l-name的五天后。蛋白尿症状的出现则相对较晚。因此，在本实验中，我们重点监测孕鼠妊娠第12天(即l-name首次给予的五天后) 的血压变化，以及收集妊娠第17-18天的24小时尿液并测定总蛋白的水平。同时，我们也记录了各组孕鼠生产的幼仔数量。
[0064]
实施例4实验结果
[0065]
孕鼠妊娠第12天的血压检测结果表明(图1-3)，和怀孕对照组相比，怀孕模型组小鼠的平均动脉压、收缩压以及舒张压均有显著的升高，预示本动物模型成功显示出先兆子痫的高血压症状。其中，90mg/kg扎那米韦对血压没有明显改变。但是，120mg/kg扎那米韦给药后可以显著降低l-name引起的孕鼠平均动脉压、收缩压以及舒张压的升高，且均具有统计学显著性差异。
[0066]
妊娠第17-18天的24小时尿液中总蛋白测定结果表明(图4)，和怀孕对照组相比，怀孕模型组小鼠的24小时尿蛋白有显著的升高，预示本动物模型成功显示出先兆子痫的蛋白尿症状。扎那米韦在90mg/kg和120mg/kg给药后可以显著降低l-name引起的孕鼠尿蛋白升高，且均具有统计学显著性差异。
[0067]
本实验中，我们也记录了各组孕鼠生产的幼仔数量。如图5所示，和怀孕对照组相比，怀孕模型组的孕鼠产仔数量明显减少。扎那米韦在90mg/kg和120mg/kg给药后可以显著改善l-name引起的孕鼠产仔数量减少，其中120mg/kg给药组的幼仔数量恢复到和怀孕对照组相当的水平，且具有统计学显著性差异。
[0068]
综上所述，扎那米韦可以显著改善l-name诱导的先兆子痫孕鼠的高血压和蛋白尿
症状，并增加孕鼠产仔数量。结果提示扎那米韦对先兆子痫有预防和治疗作用，可以改善母体的高血压和蛋白尿症状，同时也有保护胎儿发育的潜力。