一种用于养殖场污水处理的微生态制剂及制备方法和应用与流程

1.本发明涉及污水处理技术领域，更具体的说是涉及一种用于养殖场污水处理的微生态制剂及制备方法和应用。


背景技术：

2.生猪是我国家畜养殖的主要组成。近年来，生猪养殖的年养殖量达到4200万头，每年可以为我国居民提供4000万t的优质猪肉产品，保障了我国人民肉制品消费需求，年产值达到1万亿以上，占畜牧经济的32.3％。所以，生猪养殖对于实现农村经济发展具有重要意义。
3.目前，我国生猪养殖规模化程度达到32.1％。在养猪产业发展的同时，也出现发展瓶颈问题，生猪规模化养殖中不可避免的会产生大量废弃物，特别是在高度集中饲养的规模化养殖场中，废弃物年产生量非常大。
4.cod(chemical oxygen demand)是以化学方法测量水样中需要被氧化的还原性物质的量，是反映污水中需要被氧化的还原性物质的量，在河流污染和工业污水性质的研究以及污水处理厂的运行管理中，cod是一个重要的而且能较快测定的有机物污染参数。随着近年来规模化养殖场的快速发展，多数养殖场实现了干湿分离，粪便经过堆肥还田，然而对于污水的处理尚无较好的措施，这些污水的排放，给大气、土壤和水体等环境均带来不同程度的污染，严重影响了环境质量。
5.因此，开展针对养殖场污水处理的相关研究具有重要意义。


技术实现要素：

6.有鉴于此，本发明的目的在于提供一种用于养殖场污水处理的微生态制剂及制备方法和应用，以解决现有技术中的不足。
7.为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
8.一种用于养殖场污水处理的微生态制剂，该微生态制剂的活性成分为枯草芽孢杆菌，剂型为菌液、菌剂或载体菌剂。
9.进一步，上述枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌(bacillus sp.)accc 62075。
10.本发明枯草芽孢杆菌的有益效果为：该枯草芽孢杆菌能够在自然条件下，有效处理高cod浓度的养殖场污水。
11.进一步，上述枯草芽孢杆菌的分离及筛选方法为：
12.(1)在养殖场污水采集样本，采用有限稀释法，将污水样本接种于lb固体培养基上，37℃条件下培养，挑取单菌落并对菌株进行纯化；
13.(2)将菌株按0.1％的添加量加入实验室配制的人工污水中，进行菌株筛选；
14.(3)检测人工污水中cod、总氮和氨氮的含量，选择能够高效处理污水的菌株，并进行测序鉴定。
15.本发明枯草芽孢杆菌的分离及筛选方法的有益效果为：该方法高效，快速。
16.进一步，上述枯草芽孢杆菌经过革兰氏染色显阳性，平板培养时菌落呈圆形，表面光滑有略微凸起，边缘规则，颜色为红色，显微镜镜检，菌体成球状。
17.一种用于养殖场污水处理的微生态制剂的制备方法，步骤如下：将枯草芽孢杆菌活化后接种于lb液体培养基中，在20-45℃培养16-24h，即得菌液。
18.本发明菌液的有益效果为：该菌液可应用于养殖场污水的处理。
19.一种用于养殖场污水处理的微生态制剂的制备方法，步骤如下：
20.(1)将用于养殖场污水处理的枯草芽孢杆菌活化后接种于lb液体培养基中，在20-45℃培养16-24h，得到菌液；
21.(2)将菌液离心，即得菌剂。
22.本发明菌剂的有益效果为：该菌剂可应用于养殖场污水的处理。
23.一种用于养殖场污水处理的微生态制剂的制备方法，步骤如下：
24.(1)将用于养殖场污水处理的枯草芽孢杆菌活化后接种于lb液体培养基中，在20-45℃培养16-24h，得到菌液；
25.(2)将菌液离心，得到菌剂；
26.(3)将菌剂与载体混合，即得所述制剂。
27.本发明制剂的有益效果为：该制剂可应用于养殖场污水的处理。
28.本发明还请求保护上述制剂或上述制备方法制得的制剂在养殖场污水处理中的应用。
29.进一步，处理温度为20-35℃，处理对象为cod、总氮和氨氮。
30.本发明应用的有益效果为：处理工艺操作简单，出水水质良好，处理成本低。
附图说明
31.图1为分离菌株(编号分别为fyhmws101,fyhmws102,fyhmws103,fyhmws104,fyhmws105)对污水中化学需氧量的影响；
32.图2为分离菌株(编号分别为fyhmws101,fyhmws102,fyhmws103,fyhmws104,fyhmws105)对污水中总氮含量的影响；
33.图3为分离菌株(编号分别为fyhmws101,fyhmws102,fyhmws103,fyhmws104,fyhmws105)对污水中氨氮含量的影响；
34.图4为fyhmws101菌株的进化树分析。
具体实施方式
35.下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
36.以下实施例中的枯草芽孢杆菌(bacillus sp.)accc 62075已于本技术的申请日前收藏于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心，又称中国农业微生物菌种保藏管理中心(agricultural culture collection ofchina，简称accc，地址：北京市海淀区中关村南大街12号中国农业科学院院内，电话：010-82108636)，收藏日为2022年01月27日，自
收藏之日起，公众可从中国农业微生物菌种保藏管理中心获得该菌株。
37.实施例1菌种分离
38.取养殖场污水分别进行2倍、4倍、6倍和8倍稀释，分别取稀释液50μl均匀涂布于固体培养基上，37℃培养12h，待平板上长出单菌落时，挑取单菌落至另一新的平板，采用划线法进行纯化，分别得到5株菌株，分别命名为fyhmws101,fyhmws102,fyhmws103,fyhmws104,fyhmws105。
39.实施例2污水处理菌株筛选
40.将筛选出的5株微生物菌株(编号分别为fyhmws101,fyhmws102,fyhmws103,fyhmws104,fyhmws105)的保存斜面取出，分别接种至100ml灭菌的lb液体培养基中，置于振荡培养箱(37℃，130rpm)中培养24h。将上述菌液分别使用紫外分光光度计在600nm波长处检测，使用蒸馏水调整至od值为2.501，备用。
41.配制cod值为300mg/l的模拟农村污水，121℃高压灭菌30min，室温放置至冷却，备用。每个250ml三角瓶中装入100ml模拟农村污水，各取200μl上述制得的菌液加入模拟农村污水中，继续置于振荡培养箱(25℃，250r/min)中培养12d，静置30min后，取上清液测cod值，与初始模拟农村污水的cod比值较，计算cod去除率，结果如图1所示；检测总氮含量，结果如图2所示；检测氨氮含量，结果如图3所示。
42.由图1-3可知，本发明筛选出的5株微生物菌株(编号分别为fyhmws101,fyhmws102,fyhmws103,fyhmws104,fyhmws105)均能显著降低污水中的cod、总氮含量和氨氮含量。
43.实施例3fyhmws101的鉴定
44.取fyhmws101菌株进行测序鉴定，根据测序序列，进行进化树分析，结果如图4所示。
45.由图4可知，fyhmws101菌株为枯草芽孢杆菌。
46.实施例4
47.用于养殖场污水处理的微生态制剂的制备方法，步骤如下：将枯草芽孢杆菌(bacillus sp.)accc 62075活化后接种于lb液体培养基中，在25℃培养18h，即得菌液。
48.实施例5
49.用于养殖场污水处理的微生态制剂的制备方法，步骤如下：
50.(1)将枯草芽孢杆菌(bacillus sp.)accc 62075活化后接种于lb液体培养基中，在25℃培养18h，得到菌液；
51.(2)将菌液离心，即得菌剂。
52.实施例6
53.用于养殖场污水处理的微生态制剂的制备方法，步骤如下：
54.(1)将枯草芽孢杆菌(bacillus sp.)accc 62075活化后接种于lb液体培养基中，在25℃培养18h，得到菌液；
55.(2)将菌液离心，得到菌剂；
56.(3)将菌剂与载体混合，即得载体菌剂。
57.对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的
一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。