N,S-GQDs/CoOOH纳米复合物及其制备方法和应用

技术特征：
1.一种n,s-gqds/coooh纳米复合物，其特征在于：包括n,s掺杂的石墨相氮化碳量子点n,s-gqds和具有荧光猝灭作用的氢氧化氧钴coooh。2.根据权利要求1所述的n,s-gqds/coooh纳米复合物，其特征在于：所述n,s-gqds平均粒径为1~5 nm；所述coooh为六边形层状纳米片，尺寸范围为75~85 nm。3.权利要求1或2所述的n,s-gqds/coooh纳米复合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，n,s掺杂的石墨相氮化碳量子点的制备：将柠檬酸和l-半胱氨酸混合后加热反应，将得到的液体溶解在超纯水中，透析后的溶液经冷冻干燥得到n,s-gqds固体粉末；步骤二，coooh纳米片的制备：将naoh溶液和cocl2溶液均匀混合，向混合溶液中逐滴加入naclo溶液，搅拌至溶液中没有棕色物质再生成；将得到的棕色悬浮液超声后，放入离心机中离心，得coooh纳米片，将得到的纳米片用纯净水洗涤2-3次；步骤三，n,s-gqds/coooh 纳米复合物的制备：将步骤二制得的coooh纳米片中加入n,s-gqds溶液混合并用纯净水稀释，将上述混合溶液超声制得n,s-gqds/coooh纳米复合物溶液，得到的纳米复合物溶液经冷冻干燥制备n,s-gqds/coooh纳米复合物固体粉末。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：步骤一中，所述的柠檬酸和l-半胱氨酸反应的质量比为10:3。5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：步骤二中，所述的naoh和cocl2的质量比为164:1；所述的超声时间为5-20 min。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：步骤三中，所述的coooh纳米片水溶液的浓度为10-60 μg/ml；所述的超声时间为5-20 min。7.权利要求1或2所述的n,s-gqds/coooh纳米复合物在检测抗坏血酸含量和生物成像中的应用。8.一种检测抗坏血酸aa含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：将权利要求1或2获得的n,s-gqds/coooh荧光探针固体粉末溶解到缓冲溶液中用作检测液，将其与不同浓度的aa标准溶液混合，测定加入aa前检测液的荧光强度f0以及不同aa浓度下检测体系的荧光强度f，计算相对荧光强度1/(f-f0)，以aa的浓度（1/c）为横坐标，相对荧光强度1/(f-f0)为纵坐标，确定aa浓度和相对荧光恢复强度的关系，绘制标准曲线；步骤二：将检测液和未知浓度的aa待测样品混合，记录荧光强度；步骤三：从标准曲线中得到待测样品中aa的含量。9.一种荧光探针检测细胞内抗坏血酸aa含量的方法，其特征在于，使用权利要求1或2所述的n,s-gqds/coooh纳米复合物，包括如下步骤：步骤一：用培养基将细胞孵育在培养箱中直至细胞达到对数生长期；步骤二：将细胞接种于96孔板中孵育，弃去培养液，用含有不同浓度n,s-gqds/coooh纳米复合物孵育细胞；步骤三：弃去上清，每孔再加入mtt溶液继续孵育细胞；步骤四：加入二甲基亚砜dmso震荡；用酶标仪记录每个孔的吸光度值，测定 n,s-gqds/coooh纳米复合物的细胞毒性；步骤五：将细胞接种于激光共焦皿上孵育用于细胞成像；
步骤六：第一组细胞用培养基孵育作为对照组；第二组细胞用含有n,s-gqds/coooh纳米复合物培养基孵育；第三组细胞先用含有n,s-gqds/coooh纳米复合物培养基孵育，再向皿中加入aa继续孵育；步骤七：上述三组细胞均需先弃去培养液，用pbs缓冲液冲洗，再用多聚甲醛固定，用激光共聚焦显微镜记录荧光图像。10.一种荧光探针检测斑马鱼体内抗坏血酸aa的方法，其特征在于，使用权利要求1或2所述的n,s-gqds/coooh纳米复合物，包括如下步骤：步骤一：孵育斑马鱼的受精卵，用培养液冲洗三次，使用光学显微镜筛选发育良好的胚胎，将其均匀分配到两个6孔板中；步骤二：在第一个6孔板中用含有不同浓度n,s-gqds/coooh纳米复合物孵育斑马鱼胚胎，观察斑马鱼的存活数目，计算存活率；步骤三：第二个6孔板用含有不同浓度n,s-gqds/coooh纳米复合物孵育斑马鱼胚胎，观察斑马鱼的体型，计算畸形率；步骤四：将斑马鱼分成三组，第一组斑马鱼胚胎仅用培养液孵育，作为对照组；第二组斑马鱼胚胎用含有n,s-gqds/coooh纳米复合物的培养液孵育；第三组斑马鱼胚胎先用含有n,s-gqds/coooh纳米复合物的培养液孵育，后用含不同量aa的培养液孵育；用蒸馏水冲洗孔板后使用激光共聚焦记录三组斑马鱼胚胎的荧光图像。

技术总结
本发明涉及N,S-GQDs/CoOOH纳米复合物及其制备方法和应用，所述纳米复合物包括N,S掺杂的石墨相氮化碳量子点N,S-GQDs和具有荧光猝灭作用的氢氧化氧钴CoOOH。制备N,S掺杂的石墨相氮化碳量子点（N,S-GQDs）和具有荧光猝灭作用的氢氧化氧钴（CoOOH），构建N,S-GQDs/CoOOH荧光探针。利用抗坏血酸（AA）可以将CoOOH还原为Co


技术研发人员：王新旭 李晨阳 顼亦琛 段虎斌
受保护的技术使用者：山西医科大学
技术研发日：2022.01.27
技术公布日：2022/5/20