护肤组合物的制作方法

1.本发明整体涉及用于处理肤色状况的护肤组合物。更具体地讲，本发明涉及利用有效量的水百合提取物改善肤色外观的方法。甚至更具体地讲，本文所公开的组合物和方法提供出乎意料的胆红素降解有益效果。


背景技术：

2.看起来灰黄或黄色皮肤通常与不良的健康或高龄相关联。已知看起来灰黄皮肤可由被称为胆红素的黄色颜料的积聚引起。当从体内清除老细胞或受损细胞时，由于红细胞中血红素的分解代谢分解而产生胆红素，这为从血液中清除废物的正常过程的一部分。通常，胆红素由肝脏处理，然后作为废物从身体排出。然而，在一些情况下，胆红素可聚集在皮肤组织中，从而导致黄色或灰黄外观。例如，胆红素是与瘀伤或黄疸相关联的皮肤淡黄色着色的原因。因此，希望提供改善与胆红素积聚相关联的看起来黄色或灰黄皮肤外观的方法。
3.一种已知的降低皮肤中胆红素含量的方法是通过光疗(又名光照疗法)。某些波长的光与胆红素反应并且将其转化成更容易被身体处理和去除的形式。实际上，光疗是治疗不期望的新生儿高胆红素含量(即，高胆红素血症)的最常见形式之一。然而，光疗可能需要在离家环境(例如，医院)中在人造光源下花费大量时间(例如，12小时至72小时)，这对于许多患有此类病症的人来说可能是不期望的。因此，希望提供更方便的降解皮肤中胆红素的方法来改善看起来灰黄皮肤的外观。
4.声称改善胆红素降解的化妆品组合物是可商购获得的，但许多(如果不是全部的话)此类产品旨在用于改善眼下黑眼圈的外观。例如，来自利普泰(lipotec)的eyedeline
tm
海洋成分品牌化妆品眼部护理产品旨在通过增强胆红素降解等来改善眼下黑眼圈的外观。truthinaging.com公开了包含n-羟基琥珀酰亚胺的化妆品和美容产品，诸如得自安俏(aq skin solution)的眼部血清产品，这些产品激活血源性色素诸如胆红素的消除，血源性色素造成眼下黑眼圈的外观。又如，得自白色天堂鸟花的植物成分(可以vivillume
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从新泽西州的龙沙公司(lonza,new jersey)商购获得)声称可降解胆红素。由西班牙的avani公司出售的用于治疗眼下黑眼圈的化妆产品被宣传为包含vivillume
tm
。眼部治疗产品被配制成治疗存在于面部眶周区域中的相对小的皮肤区域，并且因此可能不适用于治疗较大的皮肤区域以解决与皮肤中存在胆红素相关联的外观问题(例如，看起来灰黄皮肤和/或不均匀的肤色)。此外，至少一些患有看起来灰黄皮肤的人还希望护肤产品处理其它美容皮肤状况，诸如细纹、皱纹、色素沉着过度的斑点和/或暗淡的皮肤。
5.因此，期望提供改善肤质和/肤色外观的组合物。还期望通过将改善胆红素降解的组合物施用于皮肤来改善看起来灰黄皮肤外观。


技术实现要素：

6.本文描述了改善皮肤外观和/或降解皮肤中胆红素的方法。该方法包括鉴定人身上期望处理(例如，期望降低胆红素)的目标皮肤部分；以及在处理期间将包含有效量的水
百合提取物的组合物施用于所述目标皮肤部分，其中有效量的水百合提取物降低胆红素含量。
附图说明
7.图1是比较地示出合适水百合提取物对胆红素降低的效果的柱状图。
8.图2是示出胆红素含量和b*值之间的直接相关性的线图。
具体实施方式
9.与胆红素在皮肤中的存在和/或积聚相关联的缺点已为人们所熟知，但用于降低皮肤中胆红素含量的常规治疗诸如光疗可能不适用于所有使用者。在本发现之前，通常不知道水百合植物(睡莲(nymphaea)属)的某些提取物可用于降解胆红素。令人惊讶的是，现已发现，仅某些水百合提取物可提供合适的胆红素降解有益效果。此外，本文所述的护肤组合物可通过长期处理其它美容皮肤状况诸如皱纹、粗糙肤质和皮肤暗淡的外观来改善皮肤外观。
10.说明书中对“实施方案”或类似方法的引用意指与该实施方案结合描述的具体材料、特征、结构、和/或特性包括在至少一个实施方案、任选多个实施方案中，但这并不意味所有实施方案包括所描述的材料、特征、结构、和/或特性。此外，材料、特征、结构、和/或特性可以任何合适的方式结合在不同的实施方案中，并且材料、特征、结构、和/或特性可以省略或替换所描述的。因此，除非另外说明或声明不相容性，否则尽管未在组合中明确地例示，本文所述的实施方案和方面可包括其他实施方案和/或方面的元件或组件或者可与其他实施方案和/或方面的元件或组件组合。
11.在所有实施方案中，除非另外特别说明，否则所有成分百分比均基于化妆品组合物的重量计。除非另外特别说明，否则所有比率均为重量比。所有范围是包括端值在内的且可组合的。有效数字的数表示既不表达对所示量的限制，也不表达对测量精确性的限制。所有数值应理解为被词“约”修饰，除非另外特别指明。除非另外指明，否则所有测量均被理解为是在大约25℃和环境条件下进行的，其中“环境条件”是指在约1个大气压和约50％的相对湿度下的条件。所有数值范围是包括端值在内的更窄的范围；所描述的范围上限和下限是可互换的，以进一步形成没有明确描述的范围。
12.本发明的组合物可包含本文所述的基本组分以及任选的成分，基本上由其组成或由其组成。如本文所用，“基本上由...组成”是指组合物或组分可包含附加成分，只要附加成分不在本质上改变受权利要求书保护的组合物或方法的基本特征和新颖特征。如说明书和所附权利要求书中所用，除非上下文另外清楚地指明，否则单数形式“一个”、“一种”和“该(所述)”旨在也包括复数形式。
13.定义
[0014]“约”通过指代等于加上或减去指定值的百分之二十( /-20％)或更小(例如，小于15％、10％或甚至小于5％)的范围来修饰特定值。
[0015]
如参照组合物所用的“施用(apply或application)”意指将本发明的组合物施用或铺展到人类皮肤表面，诸如表皮上。
[0016]“胆红素”是指标识为cas编号635-65-4并且具有化学式c
33h36
n4o6和下列结构的化
合物：
[0017][0018]“化妆剂”意指旨在被擦涂、倾倒、喷洒、喷涂、引入或以其它方式施用于哺乳动物身体或其任何部位以提供美容效果的任何物质及其任何组分。化妆剂可包含通常被美国食品及药品管理局承认安全(gras)的物质、食品添加剂和用于非化妆消费品(包括非处方药物)的材料。
[0019]“化妆品组合物”是指包含化妆剂(诸如本文所述的水百合提取物)的组合物。化妆品组合物的示例包括有色化妆品(例如粉底、唇膏、遮瑕物和睫毛膏)、护肤组合物(例如保湿剂和防晒剂)、个人护理组合物(例如洗去型和免洗型沐浴剂和皂)、毛发护理组合物(例如洗发剂和调理剂)。
[0020]“有效量”是指足以在治疗期的过程内显著诱导对角质组织的积极有益效果的化合物或组合物的量。积极有益效果可为健康、外观和/或感觉有益效果，其包括独立的或组合的本文所公开的有益效果。在具体示例中，水百合提取物的有效量为足以降低胆红素含量的量。
[0021]“酶促水解物”是指使用包括至少一个酶促水解步骤的方法(例如，从白睡莲(nymphaea alba))获得的提取物。
[0022]“水解物”是指通过使用包括至少一个酶促或化学水解步骤的方法(例如，从白睡莲(nymphaea alba))获得的提取物。
[0023]“改善外观”是指在男性和/或女性肤色外观中提供可测量的、期望的变化或有益效果，其可例如通过皮肤的b*值的降低来量化。用于确定外观改善的示例性方法更详细地描述于下文中。
[0024]“汁液”是指因挤压或其它机械加工而从水百合植物材料中排出的液体。汁液可在含水乳清中包含多种尺寸的水不混溶性液体的固体颗粒、半固体颗粒和/或液滴(统称为“水百合颗粒”)。
[0025]“l*a*b*”是指由国际照明委员会(“cie”)规定的公认的颜色空间。三个坐标代表：(i)色彩的明度(即，l*＝0产生黑色并且l*＝100指示弥散白色)；(ii)在品红和绿色之间的色彩位置(即，负a*值指示绿色而正a*值指示品红)；以及(iii)在黄色和蓝色之间的色彩位置(即，负b*值指示蓝色并且正b*值指示黄色)。
[0026]“安全有效量”是指足够低以避免严重副作用的成分有效量(在合理的医学判断范围内)。
[0027]
当涉及本文的皮肤外观时，“灰黄”是指就特定个体而言通常与不健康状态相关联的异常的黄色或苍白肤色。看起来灰黄的皮肤可以被客观地诊断(例如，利用色值，诸如l*或b*)或者主观地诊断(例如，通过护肤专业人员或经由消费者的自我诊断)。
[0028]“护肤”是指调节和/或改善皮肤状况。一些非限制性示例包括通过提供更光滑、更均匀的外观和/或感觉来改善皮肤外观和/或感觉；增加皮肤的一个或多个层的厚度；改善皮肤的弹性或回弹性；改善皮肤的紧致度；和减少皮肤的油性的、有光泽的、和/或暗淡的外
观、改善皮肤的水合状态或保湿状态、改善细纹和/或皱纹的外观、改善皮肤剥落或脱屑、使皮肤丰满、改善皮肤屏障特性、改善肤色、减少发红或皮肤疹斑的外观、和/或改善皮肤的亮度、光彩、或半透明性。
[0029]“护肤活性物质”是指当施用于皮肤时，向皮肤或通常存在于其中的细胞类型提供即时和/或长久有益效果的化合物或化合物的组合。护肤活性物质可调节和/或改善皮肤或其相关细胞(例如，改善皮肤弹性、水合、皮肤屏障功能、和/或细胞代谢)。
[0030]“护肤组合物”是指包含护肤活性物质并且调节和/或改善皮肤状况的组合物。
[0031]“肤色”是基础皮肤颜色或颜色均匀度的总体外观。肤色通常特征在于较大的皮肤区域，其通常大于100mm2，直至并包括整个面部皮肤或其它身体皮肤表面(例如，臂部、腿部、背部、手部、颈部、胸部和腹部)。肤色可由图像分析测定。肤色的一种量度是亮度，其可通过l*a*b*色彩空间中的l*坐标(国际照明委员会)测量。发色团标测，诸如黑素标测和黑素浓度也可被用作肤色的指示。平均黑素可由发色团标测图数据进行计算。另外，肤色可与也可由发色团标测图数据计算的黑素均匀度(例如，标准偏差)相关。
[0032]
如本文所用，“处理期”是指将材料或组合物施用至目标皮肤表面的时间长度和/或频率。
[0033]
组合物
[0034]
本文的组合物包含有效量的设置在皮肤病学可接受的载体中的水百合提取物，并且旨在局部施用于人类皮肤。水百合提取物的量应足以展示体外胆红素降解有益效果和/或在合适的处理过程(例如，2周、4周或8周)后改善看起来灰黄皮肤的外观。本文的组合物还可处理其它皮肤状况，并且可任选地包含一种或多种附加皮肤活性物质或通常包含于局部用护肤组合物中的其它类型成分。本文的护肤组合物可使用混合皮肤成分的常规方法制备。
[0035]
本文的护肤组合物可为化妆品组合物、药物组合物或药用化妆品组合物，并且可以各种产品形式提供，包括但不限于溶液、悬浮液、乳液、霜膏、凝胶、调色剂、条棒、喷剂、气溶胶剂、软膏剂、清洁液体洗涤剂和固体棒、糊剂、泡沫、摩丝、剃刮膏、擦拭物、条、贴片、电动贴片、水凝胶、成膜产品、面部和皮肤面膜(带有和不带有不溶性片材)、化妆品诸如粉底、眼线和眼影等。在一些情况下，所述组合物形式可符合所选的具体皮肤病学可接受的载体。例如，组合物(和载体)可以乳液(例如，油包水、水包油或水包油包水)或水性分散体的形式提供。
[0036]
水百合提取物
[0037]
本文的组合物包含有效量的从睡莲(nymphaea)属植物获得的水百合提取物。水百合提取物可作为液体(例如，包含水百合植物材料或其水解物的水性溶液)或作为固体(例如，通过干燥液体水百合提取物和/或其麦芽糖糊精载体形成的粉末)提供。在掺入到化妆品组合物中之前，水百合提取物可与合适的载体混合。例如，粉末状水百合提取物可与麦芽糖糊精载体(例如，以1:9的比率)或水性载体(例如，水和/或水溶性/可混溶材料)混合。有效的水百合提取物的量可因提取物的一种特定来源而异(即，供应商变化)。然而，有效量可由技术人员例如通过根据下文更详细描述的胆红素定量测定测量胆红素降解活性水平来确定。与任何提取物一样，活性组分的浓度和/或活性水平将取决于诸如提取物产品的最终稀释体积、所采用的具体提取方法、个体植株之间的天然的变化范围、以及本领域的技术人
员已知的其它常见因素的因素。
[0038]
本发明的水百合提取物可从合适种类的水百合和/或水百合植物的一部分(例如，花、根、叶、茎、种子、汁液、或它们的组合)获得，只要该提取物展示出适当降解胆红素的能力即可。可适用于本文的水百合种类的示例包括白睡莲(nymphaea alba)、澳洲睡莲(nymphaea gigantea)、子午莲(nymphaea tetragona)、齿叶睡莲(nymphaea lotus)、蓝睡莲(nymphaea caerulea)、柔毛睡莲(nymphaea pubescens)、亚马逊睡莲(nymphaea amazonum)、美洲白睡莲(nymphaea ampla)、nymphaea blanda、nymphaea calliantha、雪白睡莲(nymphaea candida)、埃及蓝睡莲(nymphaea capensis)、蓝星睡莲(nymphaea colorata)、康纳迪睡莲(nymphaea conardii)、优雅睡莲(nymphaea elegans)、nymphaea fennica、nymphaea flavovirens、加德纳睡莲(nymphaea gardneriana)、小腺睡莲(nymphaea glandulifera)、厄德洛睡莲(nymphaea heudelotii)、詹姆森睡莲(nymphaea jamesoniana)、莱贝格睡莲(nymphaea leibergii)、小籽睡莲(nymphaea macrosperma)、黄睡莲(nymphaea mexicana)、四色睡莲(nymphaea micrantha)、延药睡莲(nymphaea nouchali)、香睡莲(nymphaea odorata)、红睡莲(nymphaea rubra)、鲁吉娜睡莲(nymphaea rudgeana)、nymphaea stuhlmannii、观音睡莲(nymphaea sulfurea)、侏儒卢旺达睡莲(nymphaea thermarum)和紫色睡莲(nymphaea violacea)。从白睡莲的花获得的提取物可特别适用于本发明的组合物。白睡莲包括castalia alba(l.)greene、castalia minoriflora simonk、castalia speciosa salisb、nymphaea occidentalis moss或nymphaea minoriflora(simonk.)wissjul，但不包括莲花(lotus)或荷花(nelumbo nucifera)的种类。
[0039]
水百合提取物可为黄色无气味水性溶液的形式，其具有介于约10和55g/l之间(例如，介于15和45g/l之间，介于20和40g/l之间，或甚至介于24和35之间)的干物质含量。从水百合提取物获得的一种或多种活性成分可包含碳水化合物、蛋白质或矿物质、这些物质中的一者或多者的水解物、或它们的组合。在一些情况下，水解物可包括酶促水解物，该酶促水解物通过对水百合提取物或其组分(例如，碳水化合物或蛋白质)进行一个或多个酶促水解而获得。当进行另外两个酶促水解时，可使用不同类型的酶(例如，糖酶和蛋白酶、两种不同的糖酶、或两种不同的蛋白酶)。水百合提取物可具有基于干物质的重量计介于20重量％和70重量％之间(例如，23重量％至62重量％或25重量％至55重量％)的碳水化合物级分。碳水化合物含量可根据dubois方法(dubois m等人，analytical chemistry,28,3,350-356,1956)确定，并被表示为水百合提取物的总干物质含量的百分比。在一些情况下，水百合提取物可具有基于干物质的重量计介于20重量％和60重量％之间(例如，25重量％至50重量％或甚至30重量％至45重量％)的矿物质级分。矿物质级分可通过称量由活性成分样品在550℃下在马弗电炉中焚烧所得的粗灰残余物来确定。
[0040]
可能期望最小化或消除存在于水百合提取物中的肽/蛋白质和/或多酚的含量，例如，以降低使用者发生变应性应答或其它不良反应的风险。因此，本文的水百合提取物可具有基于干物质的重量计小于20重量％(例如，小于15重量％、10重量％、或甚至小于5重量％)的肽级分，并且可不含或基本上不含多酚化合物(即，基于干物质的重量计小于3重量％、1重量％、0.5重量％、或甚至小于0.2重量％)。水百合提取物的蛋白质级分可通过lowry方法(lowry等人，protein measurement with the folin reagent,j.biol.chem.,
193,265,1951)确定。在某些情况下，还可能期望确定存在的肽化合物的大小，例如经由fplc型色谱。多酚化合物的含量可根据下文更详细提供的方法确定。用于在水百合提取物中提供肽/蛋白质和/或多酚含量的方法可在从植物材料获得水百合提取物的初始过程期间和/或通过使所获得的水百合提取物经受进一步加工而采用。
[0041]
在一些情况下，在掺入到组合物中之前，水百合提取物可与其它合适的材料(例如，水、增稠剂、湿润剂、溶剂、防腐剂和/或增溶剂)混合。例如，可将水百合提取物与水或另一种合适的载体(例如，多元醇诸如甘油)混合以提供包含0.001％至50％(例如，0.01％至40％、0.1％至20％、0.5％至10％、或甚至1％至5％)的水百合提取物的混合物。水百合提取物和/或水百合混合物诸如上述混合物可以基于组合物的重量计0.0001重量％至15重量％、0.0002重量％至10重量％、0.001重量％至15重量％、0.025重量％至10重量％、0.05重量％至10重量％、0.05重量％至5重量％、或甚至0.1重量％至5重量％的量包含于组合物中。
[0042]
皮肤病学可接受的载体
[0043]
本文的胆红素降解组合物包括皮肤病学可接受的载体(其可称为“载体”)。短语“皮肤病学可接受的载体”是指所述载体适于局部施用于角质组织，具有良好的美学性质，与所述组合物中的活性物质相容，并且不引起任何不合理的安全或毒性问题。在一个实施方案中，载体以约50重量％至约99重量％、约60重量％至约98重量％、约70重量％至约98重量％、或另选地约80重量％至约95重量％的含量存在。
[0044]
载体可为多种形式。在一些情况下，组分(例如提取物、防晒活性物质、附加组分)的溶解度或分散度可决定载体的形式和特征。非限制性示例包括简单溶液(例如水性的或无水的)、分散体、乳液和固体形式(例如凝胶、条棒、可流动的固体或无定形材料)。在一些情况下，皮肤病学可接受的载体为乳液的形式。乳液可具有连续水相(例如水包油或水包油包水乳液)或连续油相(例如油包水或油包水包油乳液)。本发明的油相可包含有机硅油、非有机硅油(诸如烃油、酯、醚)以及它们的混合物。水相通常包含水和水溶性成分(例如，水溶性保湿剂、调理剂、抗微生物剂、湿润剂和/或其它皮肤护理活性物质)。然而，在一些情况中，水相可包含不是水的组分，该组分包括但不限于水溶性保湿剂、调理剂、抗微生物剂、湿润剂和/或其它水溶性皮肤护理活性物质。在一些情况下，组合物的非水组分包括湿润剂，诸如甘油和/或一种或多种其它多元醇。
[0045]
在一些情况下，本文的组合物为提供轻度且非油腻的知觉感觉的水包油(“o/w”)乳液的形式。本文的合适o/w乳液可包含按组合物的重量计大于50％的连续水相，并且剩余部分为分散的油相。水相可包含基于水相的重量计1％至99％的水，以及任何水溶性和/或与水混溶的成分。在这些情况下，分散的油相将通常以按组合物的重量计小于30％(例如，1％至20％、2％至15％、3％至12％、4％至10％、或甚至5％至8％)存在，以帮助避免油性组合物的一些不期望的感觉效果。油相可包括一种或多种挥发性油和/或非挥发性油(例如，植物油、有机硅油和/或烃油)。可适用于本发明组合物的油的一些非限制性示例公开于美国专利9,446,265和美国公布2015/0196464中。
[0046]
载体可包含一种或多种皮肤病学可接受的亲水性稀释剂。如本文所用，“稀释剂”包括水百合提取物能够分散、溶解或以其它方式掺入其中的材料。亲水性稀释剂包括水、有机亲水性稀释剂诸如低级一价醇(例如c
1-c4)和低分子量二醇和多元醇，包括丙二醇、聚乙
二醇(例如分子量200g/mol至600g/mol)、聚丙二醇(例如分子量425g/mol至2025g/mol)、甘油、丁二醇、1,2,4-丁三醇、山梨醇酯、1,2,6-己三醇、乙醇、异丙醇、山梨醇酯、丁二醇、醚丙醇、乙氧基化醚、丙氧基化醚以及它们的组合。
[0047]
其它任选的成分
[0048]
本文的组合物可包含已知用于局部用护肤组合物中的一种或多种任选成分，前提条件是任选组分不会不可接受地改变组合物的期望有益效果。附加成分应该适用于与人类皮肤组织接触，而没有不适当的毒性、不相容性、不稳定性、变应性应答等等。当存在时，附加成分可以按组合物的重量计约0.001％至50％(例如，0.01％至40％、0.1％至30％、0.5％至20％、或甚至1％至10％)的量被包含。另外的附加成分的一些非限制性示例包括维生素、矿物质、肽和肽衍生物、糖胺、防晒剂、控油剂、颗粒、类黄酮化合物、毛发生长调节剂、抗氧化剂和/或抗氧化剂前体、防腐剂、蛋白酶抑制剂、酪氨酸酶抑制剂、抗炎剂、保湿剂、剥落剂、亮肤剂、防晒剂、免晒美黑剂、润滑剂、抗痤疮剂、消脂剂、螯合剂、抗皱纹活性物质、抗萎缩活性物质、植物甾醇和/或植物激素、n-酰基氨基酸化合物、抗微生物剂和抗真菌剂。可适用于本文的附加成分和/或护肤活性物质的其它非限制性示例描述于美国公布2002/0022040；2003/0049212；2004/0175347；2006/0275237；2007/0196344；2008/0181956；2008/0206373；2010/00092408；2008/0206373；2010/0239510；2010/0189669；2010/0272667；2011/0262025；2011/0097286；us2012/0197016；2012/0128683；2012/0148515；2012/0156146；和2013/0022557；以及美国专利5,939,082；5,872,112；6,492,326；6,696,049；6,524,598；5,972,359；和6,174,533中。
[0049]
调理剂
[0050]
本文的组合物可包含0.1重量％至50重量％的调理剂(例如，0.5重量％至30重量％、1重量％至20重量％、或甚至2重量％至15重量％)。添加调理剂可有助于为组合物提供期望的感觉特性(例如，施用时丝滑、润滑的感觉)。调理剂的一些非限制性示例包括烃油和蜡、硅氧烷、脂肪酸衍生物、胆固醇、胆固醇衍生物、甘油二酯、甘油三酯、植物油、植物油衍生物、乙酰甘油酯、烷基酯、烯基酯、羊毛脂、蜡酯、蜂蜡衍生物、甾醇和磷脂、它们的盐、异构体和衍生物、以及它们的组合。特别合适的调理剂示例包括挥发性或非挥发性硅氧烷流体，诸如聚二甲基硅氧烷共聚多元醇、二甲基聚硅氧烷、二乙基聚硅氧烷、混合的c1-30烷基聚硅氧烷、苯基聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷醇、聚二甲基硅氧烷、聚二甲基硅氧烷醇、硅氧烷交联聚合物、以及它们的组合。聚二甲基硅氧烷可为尤其合适的，因为一些消费者将由某些聚二甲基硅氧烷流体提供的感觉特性与良好的保湿相关联。可适用作调理剂的硅氧烷流体的其它示例描述于美国专利5,011,681中。
[0051]
流变改性剂
[0052]
本文的组合物可包含0.1％至5％的流变改性剂(例如增稠剂)以向组合物提供合适的流变学和皮肤感觉特性。增稠剂的一些非限制性示例包括交联的聚丙烯酸酯聚合物、聚丙烯酰胺聚合物、多糖、树胶、以及它们的混合物。在一个特别合适的示例中，组合物可包含超吸收聚合物增稠剂，诸如聚丙烯酸钠、淀粉接枝的聚丙烯酸钠、或这些物质的组合。超吸收聚合物增稠剂的一些非限制性示例描述于例如美国专利9,795,552中。
[0053]
一些消费者发现使用硅氧烷流体作为调理剂的组合物具有不期望的油腻感或厚重感。因此，可能期望提供不含或基本上不含硅氧烷流体的组合物。还可能期望定制超吸收
聚合物增稠剂以例如通过调节组合物中水的量、水:油比率(例如，12:1至1:1)、和/或水与增稠剂或油与增稠剂的比率来为组合物提供轻盈的透气感。
[0054]
乳化剂
[0055]
当组合物为乳液形式时，其可包含乳化剂。乳化剂可为非离子型、阴离子型或阳离子型。合适的乳化剂公开于例如美国专利3,755,560、4,421,769、美国公布2006/0275237、以及mccutcheon的detergents and emulsifiers，北美版，第317-324页(1986)中。合适的乳液可具有宽泛的粘度范围，具体取决于期望的产品形式。
[0056]
当在本文组合物中包含任选成分时，可能期望选择不与在低ph的组合物中的其它成分，尤其是对ph敏感的成分如烟酰胺、水杨酸盐和肽形成络合物或以其它方式不期望地相互作用的成分(例如，棕榈酰-赖氨酸-苏氨酸(pal-kt)或棕榈酰-赖氨酸-苏氨酸-苏氨酸-赖氨酸-丝氨酸(pal-kttks))。在一些情况下，可能期望选择经由不同生物学途径起作用的皮肤护理活性物质，使得所述活性物质不相互干扰，这种相互干扰可降低两种试剂的功效。
[0057]
使用方法
[0058]
本发明方法包括鉴定人身上需要处理的目标皮肤部分，以及将包含有效量的水百合提取物和任选地一种或多种附加护肤剂的组合物施用于目标皮肤部分。目标皮肤部分可在面部皮肤表面上(诸如前额、口周、颏、眶周、鼻部和/或面颊)或身体的另一部分(例如手、臂、腿、背、胸)。需要处理的人可以是在其皮肤中表现出不期望的胆红素含量和/或表现出另一种不期望的美容皮肤状况的人。胆红素含量可根据本领域已知的任何合适的方法来测定。例如，胆红素含量可通过血液样本分析来测定。又如，如果皮肤的目标部分具有大于对应于不期望的高胆红素含量的预定阈值水平的b*值，则可指示不期望的胆红素含量。b*值可根据下文更详细描述的色彩成像方法来测定。在一些情况下，当人皮肤表现出黄色或灰黄外观和/或人具有不均匀的肤色时，该人可被鉴定为需要处理。又如，当专家(例如，皮肤科医生或美容师)确定目标皮肤部分中存在不期望的黄度水平时，可鉴定需要处理的人。当存在瘀伤时，需要处理的人也可鉴定目标皮肤部分。在一些情况下，目标皮肤部分可能看起来不受胆红素积聚的困扰，但使用者(例如，患有或容易出现黄疸或瘀伤的人)可能仍然期望处理目标皮肤部分来作为预防性措施(例如，如果该人容易出现导致胆红素积聚的状况，诸如黄疸)。
[0059]
组合物可施用于皮肤的目标部分，并且如果需要，施用于周围皮肤，在治疗期期间每天至少一次、每天两次或以每天更频繁的方式施用。当每天两次地施用时，第一次与第二次施用相隔至少1至12个小时。通常，所述组合物可在早上和/或晚上临睡觉前施用。当根据本文的方法使用时，本发明的组合物通过降低胆红素含量来改善皮肤外观，如根据下文的方法由至少5％(例如，至少10％、15％、20％、25％或更多)的b*降低所展示。在一些情况下，胆红素含量的降低可按如下方式确定：根据常规体内方法(例如，血液分析)测量胆红素含量，并且将所测量的含量与预定阈值或在处理期开始之前测量的胆红素含量进行比较。
[0060]
处理期理想地为存在于组合物中的水百合提取物降低目标皮肤部分的胆红素含量的足够时间。在一些情况下，由水百合提取物提供的胆红素降低有益效果可通过b*值相对于预定b*值(即，在处理期开始之前确定的b*值)的降低来展示。除此之外或另选地，胆红素降低有益效果可通过将所测量的b*值和/或胆红素含量与对照值(例如，载体对照)或其
它参考值(例如，除了具有不同水百合提取物之外相同的组合物)进行比较来展示。治疗期可持续至少1周(例如，约2周、4周、8周或甚至12周)。在一些情况下，治疗期将延长至多个月(即3个月至12个月)。在一些情况下，组合物可在一周中的大多数时间(例如，每周至少4天、5天或6天)施用，在至少2周、4周、8周或12周的处理期间至少每天一次或甚至每天两次。
[0061]
施用组合物的步骤可通过局部施用来实现。关于组合物的施用，术语“局部的”、“局部”、“局部地”意指将组合物递送到目标区域(例如，色素沉着过度的斑点或其部分)而使对不期望治疗的皮肤表面的递送最小化。组合物可施用到并且轻轻揉进皮肤区域中。组合物或皮肤病学可接受的载体的形式应被选择成有利于局部施用。虽然本文的某些实施方案设想将组合物局部施用到某一区域，但应当理解，本文的组合物可更全面地或广泛地施用到一个或多个皮肤表面。在某些实施方案中，本文的组合物可用作多步美容方案的一部分，其中本发明的组合物可在一种或多种其它组合物之前和/或之后施用。
[0062]
方法
[0063]
酚类化合物测定
[0064]
该方法提供合适的手段来确定水百合提取物中多酚化合物的量。在存在铁氰化钾的情况下，多酚化合物形成可在715nm处检测到的有色化合物。着色强度与多酚化合物的量成比例。从范围在40和120mg/l之间的没食子酸标准样品获取读数。针对样品获得的结果允许根据浓度来追踪直线光密度，并且在该直线上直接读取样品的多酚含量。根据本发明的水解物的多酚化合物的含量可被表示为没食子酸当量相对于水百合提取物的干物质含量的百分比。
[0065]
胆红素降解测定
[0066]
该测定提供测量材料降解胆红素的能力的方法。以250μl/孔的总体积在96孔板(例如，falcon品牌96孔组织培养板或等同物)中制备每个测试样品的三个平行测定样。将胆红素粉末(cayman化学品公司(cayman chemicals company)，目录号17161)溶解于dmso(西格玛公司(sigma)，目录号d8414-100ml)中，以产生10倍工作浓度的储备溶液，由此制备250μg/ml间接胆红素(即，血液血清中最常见的未结合形式的胆红素)储备液。除阴性/载体对照孔外，每个孔的胆红素工作浓度被设定为25ug/ml。实验设置通常包括含有25ug/ml胆红素、225ul pbs和10％dmso的阳性对照孔。阳性对照孔可通过将25ul的250ug/ml胆红素储备溶液与225ul pbs(accugene公司，目录号51225)混合来制备。对于阴性/载体对照孔，使用25ul dmso代替胆红素。测试样品孔含有25ul的250ug/ml胆红素储备液、200ul pbs和25ul被制备为10倍浓缩物储备液的每种处理溶液，例如，对于0.1％工作浓度的水百合提取物，将10倍浓缩物储备液制备为1％。
[0067]
胆红素在暴露于环境光时不稳定。为避免因环境光暴露而降解，用铝箔覆盖包含测试样品的一个或多个板。然后将覆盖的板置于微板振荡器(vwr，目录号12620-938)的顶部上。在室温下温育23小时，同时以150rpm恒定振荡。在23小时温育后定量胆红素浓度，以确定作为主动处理的结果的胆红素降解与阳性胆红素对照相比的效果。
[0068]
胆红素定量
[0069]
使用梯度高效液相色谱和串联质谱(hplc-ms/ms)分析胆红素标准物和样品。胆红素可通过反相柱(atlantis t3柱，100埃，3μm，2.1mm
×
50mm，可从waters corporation,milford,ma获得)来良好分离。胆红素和对应的稳定同位素标记的内标物(istd)使用表1中
所示的选定反应监测方案，通过电喷雾电离(esi)以正模式进行监测。用于本发明的istd为具有四个氘标记的d4-胆红素(toronto research chemicals,north york,on,canada)。通过给信号绘图构建标准曲线，本文将其定义为每个标准物与对应于标准物的每个分析物浓度的峰面积比率(峰面积分析物/峰面积istd)。然后使用生成的回归方程反算出校准标准物和样品中的胆红素浓度。
[0070]
表1：分析物和其对应的稳定同位素标记的内标物的多反应监测(mrm)转换
[0071]
分析物mrm内标物mrm胆红素585.2
→
299.2d4-胆红素589.2
→
301.2
[0072]
实施例
[0073]
实施例1：配制品
[0074]
下表2提供了包含水百合提取物的局部用护肤组合物的实施例。通过用合适的搅拌器(例如，tekmar rw20dzm或等同物)共混a相组分并加热至70
–
80℃的温度，并且在搅拌的同时保持温度，来制备示例性组合物。单独地，用合适的搅拌器共混b相组分并加热至70-75℃，同时在混合期间保持温度。将相b添加到相a中，同时充分混合以形成水包油(o/w)乳液。然后使用合适的研磨机(例如，tekmar t-25或等同物)将乳液研磨5分钟。当乳液处于60℃时，添加相c，同时继续混合。处于40℃时，将相d和相e的成分添加到乳液。然后将乳液研磨5分钟以提供均匀的组合物。
[0075]
表2
[0076][0077][0078]
实施例2：液体水百合提取物
[0079]
该实施例描述了用于提供适用于本文化妆品组合物的水百合提取物的方法。在该实施例中，将白睡莲植物的花干燥，然后研磨成粉末。将干粉溶解于水(100g/l)中并用糖酶(例如纤维素酶、葡聚糖酶、果胶酶、木聚糖酶、阿拉伯糖或它们的组合)和蛋白酶(例如内切蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、外肽酶、氨肽酶、金属蛋白酶或它们的组合)进行酶促水解。分离可溶相(即水相)和不溶相，并且可弃去不溶相。对可溶相进行热处理以使可能存在的任何酶失活。然后将溶液净化和纯化。经净化和纯化的溶液的浓度可通过添加或去除水而调节
至所需水平。然后将溶液过滤并灭菌以提供用于掺入到产品中的水百合提取物。下表3列出了所得水百合提取物的物理特性的非限制性示例。表2中所示的多酚、碳水化合物、蛋白质和矿物质的量均为基于干物质重量计的重量百分比。
[0080]
表3
[0081]
特性值干物质含量29g/l多酚含量《0.2％(阈值检测)碳水化合物含量51％蛋白质含量10％矿物质含量39％
[0082]
实施例3：临床研究
[0083]
在该研究中，测试了包含有效量的水百合提取物的护肤组合物，以评估其相对于安慰剂(即，除了没有水百合提取物之外相同的组合物)改善皮肤外观的能力。使用常规方法制备下表4中所示的测试组合物。评估测试组合物改善多种美容皮肤状况(即，皮肤光亮度、肤质、皮肤亮度、以及细纹和皱纹的外观)的能力。对平均年龄为43
±
6岁的年龄在35岁至55岁之间的19名健康女性测试对象进行研究。要求这些对象每天两次将测试组合物施用于其面部的一半上，并且每天两次将安慰剂施用于其面部的另一半上，持续28天。对于皮肤亮度/明度，由专业评级员基于四个类别评估测试对象：皮纹、透明性、光亮度和浅粉色。相对于安慰剂，测试组合物在所有4个类别中提供统计意义上的显著改善。还要求测试对象经由调查问卷自我评估。超过70％的测试对象表明，相对于安慰剂，测试组合物改善了皮肤亮度、光亮度、纹理、甚至面色和皱纹外观。在其它测试中，测试组合物展示出如使用干涉测量技术确定的改善皮肤光滑度的能力。测试组合物还展示出作为抗氧化剂抵抗uv引起的氧化应激的能力。
[0084]
表4
[0085][0086]
实施例4：对比测试
[0087]
该实施例通过将本发明的水百合提取物与可商购获得的水百合提取物进行比较，展示了本发明的水百合提取物的出乎意料的胆红素降解有益效果。用于制备本发明实施例的水百合提取物材料是从silab,s.a.获得的，并且包含白睡莲的花提取物。本发明实施例中使用的水百合提取物材料不可商购获得。比较例a由可以hydralphatine
tm asia从iff/lucas meyer cosmetics,quebec商购获得的水百合提取物材料制成，并且包含白睡莲的根提取物。比较例b由可以sepicalm
tm vg wp从seppic,s.a.,france商购获得的水百合提取物
材料制成，并且包含白睡莲的花提取物。比较例c由可以phyto-g
tm
从gfc life science co.,ltd.,korea商购获得的水百合提取物材料制成，并且包含白睡莲的花提取物。阳性对照组通过将25ug/ml间接胆红素与造成最终反应混合物中dmso为10％的pbs缓冲液混合来提供。使用10％dmso的pbs溶液作为阴性(载体)对照。
[0088]
通过在96孔板中将0.4％v/v(1:250稀释原始材料)的每种水百合提取物材料与25ug/ml间接胆红素于pbs缓冲液中混合来一式三份地进行测试。对于包含10％dmso的每个测试孔，最终反应混合物具有250ul体积。每个板用铝箔覆盖并在室温下在设定为150rpm的定轨振荡器上温育二十三小时。温育后，通过上下吸移3次将最终反应混合物充分混合，然后以1:50将每个样品稀释于0.1％三乙醇胺中。将150ul的每个稀释样品等分到hplc小瓶中并使用多反应监测质谱(mrm)进行定量。将每个样品的定量胆红素含量相对于阳性对照组的平均含量进行归一化。进行相对于胆红素阳性对照组的t检验以确定统计显著性。测试结果汇总于下表5中并示于图1中。表5中提供的胆红素值是对应测试组的一式三份样品的平均值。0.1或更小的p值被认为是显著的。
[0089]
表5
[0090]
样品(n＝3)相对于对照的％胆红素定量p值载体对照00.000阳性对照1001.000比较例a：0.4％(v/v)水百合提取物11000.812比较例b：0.4％(v/v)水百合提取物21400.013比较例c：0.4％(v/v)水百合提取物3850.166本发明实施例：0.4％(v/v)水百合提取物520.005
[0091]
1 hydralphatine
tm asia，可从iff/lucas meyer cosmetics,quebec获得。
[0092]
2 sepicalm
tm vg wp，可从seppic,s.a.,france获得。
[0093]
3 phyto-g
tm
，可从gfc life science co.,ltd.,korea获得。
[0094]
如表5和图1所示，相对于阳性对照，本发明实施例显著降低了胆红素含量。然而，观察到比较例a和c的胆红素含量与阳性对照没有显著差异。比较例c似乎实际提高了胆红素含量。实施例c的明显提高据信是胆红素的天然降解过程的结果。间接胆红素相对不稳定并且随时间自然降解。然而，比较例c(可商购获得的产品)中的其它成分相对于参考组可减慢天然胆红素降解过程，这在测定中表现为较高的胆红素量。
[0095]
从该实施例中可以看出，选择适当的水百合提取物提供出乎意料的胆红素降解有益效果，这继而可改善由胆红素在皮肤组织中积聚引起的看起来灰黄皮肤的外观。
[0096]
实施例5：将胆红素浓度与黄度相关联。
[0097]
不受理论的限制，据信皮肤中的胆红素浓度具有与黄色或灰黄外观的直接相关性。为了确定胆红素浓度与黄度之间的相关性，创建了胆红素标准曲线。将胆红素粉末(cayman chemicals company，目录号17161)溶解于dmso(sigma，目录号d8414-100ml)中以制备500ug/ml胆红素储备液。如上表1所示，将该胆红素储备液在pbs中稀释以得到50μg/ml、25μg/ml、12.5μg/ml、5μg/ml、2.5μg/ml和0μg/ml的胆红素含量。为了测量黄度(b*)，将样品一式三份地上样到96孔板中，并且使用合适的分光光度计以10nm增量从350nm至750nm测量每个样品的吸光度。来自黄度测量的吸收光谱通过使用合适的转换软件的计算机随后
被转换为l*a*b*值。
[0098]
如表6和图2所示，b*评分显示与0ug/ml至50ug/ml胆红素范围内的胆红素浓度的线性相关性。人类生物胆红素浓度落在该浓度范围内。因此，数据显示，皮肤中的胆红素浓度与灰黄外观具有直接相关性。
[0099]
表6
[0100]
胆红素浓度(μg/ml)平均b*值0-0.4172.54.25858.58212.523.8892547.9935090.017
[0101]
本文所公开的量纲和值不应理解为严格限于所引用的精确数值。相反，除非另外指明，否则每个此类量纲旨在表示所述值以及围绕该值功能上等同的范围。例如，公开为“40mm”的量纲旨在表示“约40mm”。
[0102]
除非明确排除或以其它方式限制，本文中引用的每一篇文献，包括任何交叉引用或相关专利或专利申请以及本技术对其要求优先权或其有益效果的任何专利申请或专利，均据此全文以引用方式并入本文。对任何文献的引用不是对其作为与本发明的任何所公开或本文受权利要求书保护的现有技术的认可，或不是对其自身或与任何一个或多个参考文献的组合提出、建议或公开任何此类发明的认可。此外，当本发明中术语的任何含义或定义与以引用方式并入的文献中相同术语的任何含义或定义矛盾时，应当服从在本发明中赋予该术语的含义或定义。
[0103]
虽然已举例说明和描述了本发明的具体实施方案，但是对于本领域技术人员来说显而易见的是，在不脱离本发明的实质和范围的情况下可作出各种其它变化和修改。因此，本文旨在于所附权利要求中涵盖属于本发明范围内的所有此类变化和修改。