一种干扰素喷雾剂的制作方法

1.本发明涉及生物药物制剂领域，具体涉及一种干扰素喷雾剂。


背景技术：

2.干扰素是一种存在于人体的非特异性病毒免疫信号蛋白，它是机体对病毒感染最早的免疫反应因子，具有广谱抗病毒活性，主要用于病毒性疾病的预防和治疗。与传统注射剂型相比，干扰素喷雾剂具有用药量少、疗效好的特点。《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案》(试行第八版)中采用干扰素(ifn)雾化吸入进行抗病毒治疗。
3.干扰素喷雾剂通过气流雾化成微粒，可经呼吸道吸收。其中，肺部给药是一种理想的给药方式，通过将药物直接递送到肺部，可避免肝首过效应；同时肺内巨大的吸收面积和广泛的血管系统，可提供与注射剂相比的生物利用度。
4.肺部给药对喷雾剂性能要求严格。一方面需要具有良好的雾化性能，包括喷雾粒径、喷雾时间、喷雾速度、喷雾形态等指标均需控制在适宜范围内；另一方面需要具有较好的稳定性，尤其是相对小分子药物易降解的蛋白质药物。然而制剂中各成分的物理化学因素相互影响，开发一种兼具良好的雾化性能与稳定性的干扰素喷雾剂存在挑战。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种兼具良好的雾化性能与稳定性的干扰素喷雾剂。本发明的目的还在于提供所述干扰素喷雾剂在制备治疗呼吸道感染性疾病的药物中的应用。
6.为了实现本发明的目的，本发明提供了以下技术方案：
7.本发明的第一个方面提供了一种干扰素喷雾剂，所述喷雾剂包含活性成分干扰素、吐温类表面活性剂、依地酸或依地酸盐、渗透压调节剂、ph调节剂和抑菌剂，ph为5.0-7.0。
8.在一个优选的实施方案中，所述吐温类表面活性剂含量为0.001-0.02％(w/v)，依地酸或依地酸盐含量为0.005-0.05％(w/v)，渗透压调节剂含量为0.3-0.87％(w/v)，抑菌剂含量为0.01-0.04％(w/v)，ph调节剂含量为5-40mm，所述喷雾剂表面张力为50-56mn/m(20℃)。
9.在一个优选的实施方案中，所述吐温类表面活性剂选自吐温20、吐温40、吐温60、吐温80；所述依地酸盐选自依地酸二钠、依地酸钙钠。
10.在一个优选的实施方案中，所述抑菌剂为尼泊金酯类抑菌剂；优选的，所述抑菌剂为羟苯甲酯与羟苯丙酯的组合；更优选的，所述抑菌剂为0.01-0.03％(w/v)的羟苯甲酯与0.001-0.01％(w/v)的羟苯丙酯的组合。
11.在一个优选的实施方案中，所述渗透压调节剂选自氯化钠、甘露醇。
12.在一个优选的实施方案中，所述ph调节剂选自枸橼酸盐缓冲液、磷酸盐缓冲液，醋酸盐缓冲液或其组合。
13.在一个优选的实施方案中，所述干扰素为干扰素α2a或干扰素α2b；优选的，所述干
扰素为人重组干扰素α2a；更优选的，上述干扰素含量为100-5000万iu/ml。
14.在一个优选的实施方案中，所述喷雾剂为呼吸道给药；优选的，所述喷雾剂为肺部给药。
15.本发明的第二个方面提供了一种喷雾系统，包括上述的干扰素喷雾剂和喷雾装置；优选的，所述喷雾装置为软雾剂喷雾装置。
16.本发明的第三个方面提供了上述喷雾剂在制备治疗呼吸道感染性疾病的药物中的应用。
17.优选的，所述呼吸道病毒感染性疾病为新型冠状病毒感染性疾病。
18.在一个优选的实施方案中，所述药物为肺部给药药物。
19.本发明的有益效果在于：本发明提供了一种兼具良好的雾化性能与稳定性的干扰素喷雾剂，尤其适用于肺部给药，且制备工艺简单。具体体现在：(1)本发明的干扰素喷雾剂显示出优良的雾化性能，包括合适的喷雾粒径、延长的喷雾时间、降低的喷雾速度等，有利于提高干扰素在肺部的沉积率；(2)本发明的的干扰素喷雾剂30天取样点时仍保持了90％以上的生物学活性，稳定性高。
具体实施方式
20.下面结合具体实施例，进一步详细阐明本发明。
21.实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件以及手册中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。所用的通用设备、材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。以下实施例和对照例中使用的重组人干扰素α2a序列为《中国药典2020年版》公布的重组人干扰素α2a序列，采用中国专利申请cn1876811a(申请号为cn200510046590.2)中公开的方法制备获得。
22.本发明中，术语“干扰素”(interferons，ifns)是一类具有抗病毒、抑制细胞增殖与调节机体免疫作用的细胞因子，按其来源不同，分为α、β、γ等种类。其中干扰素α主要包括干扰素α2b、干扰素α2α、干扰素α1b。所述干扰素包括天然的或基因工程重组的干扰素。
23.本发明中，术语“喷雾剂”是指一种液体制剂，通过喷雾装置将液体制剂以雾化颗粒形态喷释出。所述喷雾装置可为医药领域常规喷雾器。
24.在本发明中，“制剂”和“组合物”可互换使用。
25.实施例1干扰素喷雾剂组合物制备
26.制备处方：见表1。
27.制备方法：按表1处方将各组分混匀，注射用水补足100ml。
28.表1 100ml的干扰素喷雾剂组合物处方
29.30.实施例2干扰素喷雾剂组合物制备(对照例)
31.制备处方：见表2。
32.制备方法：按表2处方将各组分混匀，注射用水补足100ml。
33.表2 100ml的干扰素喷雾剂组合物处方
[0034][0035]
实施例3表面张力试验
[0036]
采用悬滴法检测实施例1和实施例2(对照例)制备的干扰素喷雾剂组合物的表面张力，试验结果见表3。
[0037]
表3表面张力
[0038]
序号表面张力(mn/m)1-151.821-250.761-353.411-455.451-550.182-165.832-250.932-349.22
[0039]
结果表明，不同处方配制的喷雾剂组合物的表面张力存在差异。
[0040]
实施例4喷雾粒径试验
[0041]
将实施例1和实施例2(对照例)制备的干扰素喷雾剂组合物灭菌后灌装于软雾剂喷雾装置中，进行喷雾粒径试验。
[0042]
检测方法：采用德国sympatec激光粒度仪(helos-sprayer)检测喷雾液滴粒径。检测方式为：弃去前5揿喷雾，对组合物进行10揿喷雾，测定平均喷雾液滴粒径。试验结果见表4。
[0043]
表4喷雾粒径
[0044][0045]
粒径对沉积部位有着直接影响：1-5μm时，沉积于肺泡。为了保证药物能够有效地到达肺部，吸入给药的有效粒径范围通常为1-5μm。结果表明实施例1各处方制剂的粒径范围更适合肺部给药，肺部沉积率提高，有利于增强药效；且喷雾粒径分布范围窄，粒度分布均匀。
[0046]
实施例5喷雾时间试验
[0047]
将实施例1和实施例2(对照例)制备的干扰素喷雾剂组合物灭菌后灌装于软雾剂喷雾装置中，进行喷雾时间试验。
[0048]
检测方法：弃去前5揿喷雾，测定喷雾开始后至结束时的时间，连续测试10次，取平均值，试验结果见表5。
[0049]
表5喷雾时间
[0050][0051]
表5表明，实施例1各处方制剂的平均喷雾时间长于实施例2(对照例2)。更长的喷雾持续时间可以使患者有更好的机会协调药物释放过程的吸入操作，对吸入给药过程协同困难的患者更为有利。
[0052]
实施例6喷雾速度试验
[0053]
将实施例1和实施例2(对照例)制备的干扰素喷雾剂组合物灭菌后灌装于软雾剂喷雾装置中，进行喷雾速度试验。
[0054]
检测方法：测定喷雾开始后中间时间节点喷雾的轴向速度。检测装置采用相位多普勒技术的丹麦dantec dynamics a/s公司的粒子动态分析(pda)(particle dynamic analyzer,pda)。试验结果见表6。
[0055]
表6喷雾速度
[0056][0057]
表6表明，实施例1各处方制剂的喷雾轴向速度均低于实施例2(对照例)。通常，喷雾的轴向速度会在吸入过程中影响药物颗粒的沉积位置，如果速度过高，这会促使颗粒在咽喉部过多撞击而损耗，减少实际到达肺部的药物。临床上药物组合物沉积在咽喉部也可能会让患者感觉到不快的味道。因此较低的轴向速度利于增加肺部沉积并减少口咽部沉积。
[0058]
实施例7喷雾模式和喷雾形态试验
[0059]
将实施例1和实施例2(对照例)制备的干扰素喷雾剂组合物灭菌后灌装于软雾剂喷雾装置中，进行喷雾模式和喷雾形态试验。
[0060]
检测方法：采用美国proveris公司的激光成像系统sprayview检测。喷雾从正面观察为椭圆形，从侧面观察为三角形。软件采用统计学方法绘制椭圆的形状。软件绘制三角形测定喷雾形态，喷雾以喷口为顶端，三角形的顶端角度为形态角度。试验结果见表7。
[0061]
表7喷雾模式和喷雾形态
[0062]
序号喷雾模式喷雾形态样品信息椭圆比形态角度/deg1-11.04333.541-21.06832.321-31.05434.281-41.06235.131-51.01134.112-11.05630.442-21.03133.632-31.09236.97
[0063]
注：椭圆形的长轴和短轴的比值为椭圆比
[0064]
结果表明，实施例1各处方制剂的椭圆比在1.0-1.1范围内，符合美国fda指导原则中建议的1.0-1.2的比例。
[0065]
实施例8稳定性研究试验
[0066]
将实施例1和实施例2(对照例)制备的干扰素喷雾剂组合物灭菌后灌装于西林瓶中置于37
±
2℃条件下进行加速考察，分别于0天、15天、30天检验外观、ph、蛋白含量、干扰素的生物学活性(检测方法依据中国药典通则3523)。试验结果见表8。
[0067]
表8稳定性研究
[0068][0069]
结果表明，实施例1各处方制剂在37
±
2℃条件下，取样点30天时蛋白含量和生物学活性均维持在90％以上，显示出较高的稳定性。
[0070]
以上内容是结合具体的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下做出的简单改变或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。