一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法与流程

技术特征：
1.一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)外植体的选择与处理在3月中旬选择生长健壮的猪笼草植株，用75％百菌清可湿性粉剂800倍液喷洒全株消毒，选取顶芽和侧芽的幼嫩茎段作为外植体，并对预选取为外植体的顶芽和侧芽用遮光自封袋套袋避光；套袋后7～10天，于3月下旬揭开所述自封袋，用消毒手术刀切取长度为3～5cm的顶芽和侧芽作为外植体，切除叶片；(2)初始培养将步骤(1)经处理的幼芽茎段于超净台上切除消毒伤口后，从顶端向下以单节位为单位切为3～4段，2分钟内接种到改良wpm 6-ba 1.0～1.2mg/l naa 0.1～0.2mg/l 蔗糖30000mg/l 琼脂6250mg/l，ph为5.8～6.0的培养基中暗培养5～7天，培养温度25℃
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2℃；(3)增殖培养于步骤(1)当年的3月底，将步骤(2)中经初始培养的外植体转接到改良wpm 6-ba 1.5～2.0mg/l naa 0.1mg/l 蔗糖30000mg/l 琼脂6250mg/l，ph为5.8～6.0的培养基中，并在led组合光源i光照条件下培养30～36d，所述led组合光源i光照条件为：led红光:led蓝光:led白光的光照强度比＝5:2:3，led组合光源i下25厘米位置的光照强度为55～57μmol
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m-2
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s-1
，光照时间为12小时/天，光照培养温度28℃
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2℃，无光培养温度为20℃
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2℃；(4)继代培养于步骤(1)当年的5月上旬，将步骤(3)增殖培养的芽丛切成带2～3个芽的小块，再将所有小块转接至继代培养基中，在与步骤(3)相同的led组合光源i光照条件下培养30-40d至小块上的芽体长大至高5～7厘米并继续分化出新的芽体；所述继代培养基为：改良wpm 6-ba 1.0mg/l naa 0.1mg/l 蔗糖30000mg/l 琼脂6250mg/l，ph为5.8～6.0，光照和温度管理同步骤(3)；(5)壮苗培养于步骤(1)当年的6月上旬，将步骤(4)中的芽丛切成单芽再转接至壮苗培养基中，在led组合光源ⅱ光照条件下，培养24～30d，得壮苗；所述led组合光源ⅱ光照条件为：led红光:led蓝光:led白光:led远红光的光照强度比＝5:1:2:2，led组合光源ⅱ下25厘米的位置的光照强度为53～55μmol
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m-2
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；所述壮苗培养基为：改良wpm 6-ba 0.5mg/l naa 0.1mg/l 活性炭0.05g/l 蔗糖30000mg/l 琼脂6250mg/l，ph为5.8～6.0；光照和温度管理同步骤(3)；(6)生根培养于步骤(1)当年的6月底至7月初，将步骤(5)中长度为2cm以上的单芽接种到盛有生根培养基的培养瓶内，盖膜后再将培养瓶移至覆盖有遮光率为70％的遮阳网的棚内苗床上培养21～28d，棚内自然温度为18～28℃；所述生根培养基为：改良wpm iba 1.0mg/l naa0.1mg/l 活性炭0.05g/l 蔗糖30000mg/l 琼脂6250mg/l，ph为5.8～6.0；(7)组培苗移栽与田间管理于步骤(1)当年的7月下旬，将步骤(6)生根的组培苗取出，清水洗净培养基，放入质量浓度为0.1％的多菌灵溶液中消毒1～2min后，移栽至盛有栽培基质的育苗穴盘中，再将育苗穴盘置于棚内并在育苗穴盘上方的拱架上覆盖一层透明无色的塑料薄膜保湿，保持幼苗周围的相对空气湿度在95％以上，再在透明无色的塑料薄膜上方覆盖两层遮阳网，每一层
遮阳网的遮光率为70％；移栽后第5天至第6天，去掉所述透明无色的塑料薄膜，幼苗周围的相对空气湿度控制在80％以上，移栽后第12天至14天，去掉一层遮阳网，幼苗周围的空气相对湿度保持在70％以上，移栽后第21天，去掉另一层遮阳网，幼苗周围的空气相对湿度保持在60％以上，整个养护期间为60～74d，即得猪笼草穴盘苗。2.根据权利要求1所述的滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，其特征在于，步骤(2)至步骤(6)中所述的所述改良wpm的配方如下：k2so4：99g/l；kh2po4：34g/l，mnso4：2.24g/l；znso4：0.86g/l；cuso4：0.025g/l，namoo4：0.025g/l，ca(no3)2：13.9g/l，nh4no3：40g/l，cacl2：9.6g/l，mgso4：37g/l，feso4：2.78g/l，naedta：3.73g/l，肌醇：10g/l，烟酸：0.05g/l，vb6：0.05g/l，vb1：0.01g/l，甘氨酸：0.2g/l。3.根据权利要求1所述的滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，其特征在于，步骤(7)中所述的栽培基质为草炭与树皮按草炭:树皮的体积比为1：1的混合基质。4.根据权利要求1所述的滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，其特征在于，步骤(7)中所述的育苗穴盘规格为长540mm
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宽240mm
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高90mm的50孔，每孔栽培基质用量为57毫升的穴盘。

技术总结
一种滇中地区猪笼草穴盘苗规模化生产方法，该方法通过外植体预处理，初始、增殖、继代、壮苗和生根培养，组培苗移栽及田间管理7个步骤的紧凑衔接及技术措施集成，在同年3月至10月内实现1顶芽外植体繁育出50余株优质穴盘苗，通过外植体预处理、选用盐分含量低的改良WPM培养基解决了初始培养成活率低、后续各组培环节外植体褐化严重和生长缓慢问题；在增殖培养和壮苗培养环节分别采用LED组合光源Ⅰ和LED组合光源Ⅱ，与传统荧光灯相比，在节能43.7％-53％的同时增值倍数和壮苗率分别提升了38.1％和28.0％；在生根培养和组培苗移栽与田间管理环节充分利用了滇中地区夏季相对湿热的有利得气候条件，降低生产了成本。降低生产了成本。


技术研发人员：阮继伟 余蓉培 瞿素萍 吴丽芳 杨春梅 单芹丽 吴旻 卢珍红
受保护的技术使用者：玉溪云星生物科技有限公司
技术研发日：2022.01.10
技术公布日：2022/4/29